松树体内寄生线虫种类及其致病性

松树是我国重要的造林先锋树种与景观绿化树种,然而,近年来在许多地方发现有不明原因、不同症状的枯萎松树,不同种类的寄生线虫在枯萎松树中被发现.笔者对松树体内的寄生线虫以及这些寄生线虫的致病性进行了综述.到目前为止,在我国松树上已经发现寄生线虫有11属42种以及11个未定种.除松材线虫外,一些线虫如拟松材线虫、Bursaphelenchus sexdentati等也能够引起某些松树的死亡.     

云南西部地区松树根际捕食线虫真菌资源研究

植物寄生线虫造成的危害极大,开展捕食线虫真菌资源的研究是线虫生物防治的前提和基础.2006年至2007年间对云南西部云南松、华山松松树根际土中的捕食线虫真菌进行了调查,通过对分离到捕食线虫真菌土壤的地理位置、海拔的分析,结果表明:捕食线虫真菌在云南西部松树根际中广泛分布,从1000份样品中共分离、鉴定出捕食线虫真菌3个属(Arthrobotrys,Drechslerella,Dactylellina)21种和5个未产生捕食器的相关属Dactylella以及菌丝不分隔的捕食线虫真Stylopage属的1个种和Tridentaria属的1个种,其中2个为待定种.优势种为Arthrobotrys oligospora,Arthrobotrys musiformis,Arthrobotrys thaumasia,Dactylellina ellipsospora.在所分离到的捕食线虫真菌中,产生粘性菌网的菌种占优势.     

越南枯死松树症状特征和体内寄生线虫种类调查

为确定造成越南松林的枯死是否为松材线虫所为,对越南南部的林同省、中部的承天-顺化省、北部的广宁省的思茅松(Pinus kesiya Royle)、马尾松(P. massoniana Lamb.)和南亚松(P. merkusii jungh et de Vries)松树枯死现象及症状特点进行了调查,分别从52株枯死、濒死、健康松树木质部中抽取木质部样品,进行线虫分离,根据形态学特点确定这些松树体内寄生线虫的种类。调查发现松树在枯死过程中,树冠部分针叶失去光泽,逐渐褪绿变黄,进而褐红干枯,最后整个树冠变为褐色或红褐色,全株枯死,针叶下垂且当年不落; 随着病程的发展,松脂分泌逐渐减少,直至停止; 树干上有天牛产卵刻槽,死亡的松树上有天牛的羽化孔。在抽取的松树样品中分离鉴定到了泰国伞滑刃线虫(Bursaphelenchus thailandae)、悬臂伞滑刃线虫(B. gerberae)、中华伞滑刃线虫(B. sinensis)、树木伞滑刃线虫(B. silvestris)、托斯卡纳伞滑刃线虫(B. tusciae)、莱奴尔夫伞滑刃线虫(B. rainulfi)、云杉小蠹伞滑刃线虫(B. rufipennis)和伞滑刃属线虫未定种(B. sp.),调查中未发现重要检疫性病原松材线虫(B. xylophilus)。     

我国松树寄生线虫分类检索

到目前为止,在我国松树体内已经发现有寄生线虫46个已知种和一些未定种。分属于3目9科17属。其中,滑刃目(Aphelenchida)线虫数量最多,包括滑刃科（Aphelenchidae）滑刃线虫属(Aphelenchus)、伞滑刃线虫属(Bursaphelenchus),外滑刃科(Ektaphelenchidae)外滑刃线虫属（Ektaphelenchoides）、外真滑刃线虫属(Ektaphelenchus)、隐滑刃线虫属（Crytaphelenchus）,长尾科(Seinuridae)长尾线虫属(Seinura)等,总共40个已知种。垫刃目(Tylenchida)包括粒科(Anguinidae)茎线虫属（Ditylenchus）,伪垫刃科(Nothotylenchidae)柱形垫刃线虫属（Cylindrotylenchus）,纽带科(Hoplolaimidae)拟盘旋线虫属(Pararotylenchus),环科(Criconematidae)小环线虫属（Criconemella）、鞘线虫属（Hemicycliophora）等,共6个已知种。矛线目（Dorylaimida）仅有1个未定种。根据不同目、科、属、种的线虫主要形态鉴定特征,编制了46种松树寄生线虫分类检索表,从而有利于人们方便地鉴定和区分松树寄生线虫.     

松树寄生线虫的收集与保存

枯死松树体内寄生线虫种类较多,笔者共收集了线虫资源212个株系.按线虫种类分,包括松材线虫171个株系,拟松材线虫22个株系、霍夫曼尼伞滑刃线虫5个株系、薄荷滑刃线虫1个株系、大核滑刃线虫8个株系、长尾属线虫3个株系以及外滑刃科线虫2个株系,松材线虫收集率为80.7%.按线虫来源分,包括中国线虫198个株系、日本线虫10个株系、美国线虫2个株系、加拿大和韩国线虫各1个株系,中国线虫收集率为93.4%.将212个线虫株系用灰葡萄孢菌培养保存,其中173个株系松材线虫、5个株系拟松材线虫及其他线虫5个株系还采用了DNA-20℃和-80℃保存.这是我国首次大规模保存松树线虫资源.     

应用电子探针技术进行松树菌根与根际粘胶层关系的研究

火炬松和湿地松菌根根际的粘胶层空间范围均大于其普通根根际，前者为５０μｍ×５５μｍ和９０μｍ×７０μｍ，后者力２０μｍ×（３０～４０）μｍ和５０μｍ。粘胶层范围的增大，既有真菌菌丝产生的粘胶物质，也含真菌菌丝本身。     

福建省松树线虫的研究I.松干伞真滑刃线虫的种类

自2001年7月至2002年12月在福建省各地共采集松树木质部样品256份，分离发现88份（34％）样品中含有伞真滑刃属Bursa phelenchus的线虫8种，本文先报道其中的4种：拟松材线虫Bursnphelenchus mucronatus Mamiya ＆ Enda,1979、赫列尼克斯伞真滑刃线虫B.hellenicus Skarmoutsos G.et al.，1998、霍夫曼尼伞真滑刃线虫B.hofmanni Braasch,H.1998、奇异伞真滑刃线虫B.aberrans Fang,et al.,2002．     

大理花甸坝几种栽培药物根际土中捕食线虫真菌的种类及分布

调查了大理花甸坝地区几种栽培药物根际土中捕食线虫真菌,发现大黄、木香、半夏、川芎、草乌根际土中捕食线虫真菌的种类在各种植物中有一定变化,以大黄根际土中种类最多,最低的是半夏和木香。在5种植物中共发现捕食线虫真菌10种,其中以Arthrotrysoligospora和Arthrobotrysmusiformis,出现的频率最高,其次是Moncrosporumellipsosporum。     

福建省松树线虫的研究Ⅱ.松干伞真滑刃线虫的种类续述

本文为福建省松树线虫调查的第二部分,报道3种伞真滑刃线虫,即瑞氏伞真滑刃线虫Bursaphelenchus rainulfi Braasch,2002、泰国伞真滑刃线虫Bursaphelenchus thailandae Braasch,2002和伞真滑刃线虫未定种Bursaphe-lenchussp.瑞氏伞真滑刃线虫在形态描述上与原始文献相同,a值和b值与原始数据略有差别;泰国伞真滑刃线虫各项测量数据与原始文献均接近;伞真滑刃线虫未定种与小松伞真滑刃线虫(Bursaphelenchus.pinasteri)相似,但未定种热杀死后尾部弯成钩状,末端钝圆无尾尖突,口针基部有膨大,且a值和c值与小松伞真滑刃线虫有较大差别.     

新疆辣椒寄生线虫鉴定初报

1990～1991年,我们从伊犁、昌吉、阿勒泰、阜康、奎屯、石河子等地共采集了辣椒根及根围土共96个线虫标样,并进行了室内形态鉴定,归属于10个属14个种。     

汉中蔬菜根结线虫种类的同工酶酶谱鉴定

在形态学鉴定的基础上,运用同工酶电泳技术,对采自汉中市11县区的23个为害蔬菜的根结线虫种群进行了鉴定。结果表明：在所鉴定的种群中,20个种群为南方根结线虫（Meloidogyne incognita）,1个种群为花生根结线虫（M.arenaria）,1个种群为南方根结线虫和花生根结线虫的混合群体,1个种群为南方根结线虫和北方根结线虫（M.hapla）的混合群体;其中南方根结线虫是汉中市为害蔬菜的主要根结线虫。     

松苗根际生防菌的研究

采用平皿稀释分离法,通过对320株湿地松根际细菌分离物的筛选,获得1株拮抗性强的细菌菌株;运用16S rDNA序列分析方法,对菌株进行了分子鉴定,结果为洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)。以镰刀菌属(Fusarium)、丝核菌属(Rhizoctonia)、链格孢菌属(Alternaria)的真菌为病原菌,该菌株和生防菌株Pseudomonas fluorescens Q287、279、1M196、Pf5、HT51、Q3787、MVP14、FFL1R8共同对病原菌的平皿对峙试验,该菌株对立枯丝核菌、链格孢菌都有较强的拮抗作用,120 d盆栽测试得知,菌株P.fluorescens Q287最高保存率为77%,该菌株的最高保存率为62%,其拮抗效果和菌株Q287一样,均高于其他7个生防菌株,试验证明该菌株具有防治松苗猝倒病的潜力。     

细菌JK JS3对松树线虫的杀线活性及菌种的分子鉴定

分离自马尾松的细菌JK JS3是对松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)具有较高杀线活性的拮抗细菌,为了解该菌株对松树体内其他植物线虫的杀线活性并验证经形态学和Biolog方法得到的菌种鉴定结果,笔者测定了该细菌培养滤液对大核滑刃线虫(Aphelenchoides macronucleatus)等7种松树体内植物线虫的杀线活性,并对该菌株的16SrDNA基因进行了扩增测序和比对分析。结果表明：该菌株培养液原滤液对测试线虫24h的杀线率均达到了100%,说明该细菌的杀线谱较广,但培养滤液的不同倍数稀释液对不同种线虫的杀线活性有显著差异,10倍稀释液对霍夫曼尼伞滑刃线虫(B.hofmanni)的杀线活性最高,杀死率为96.9%;其次对李氏长尾线虫(Seinura lii),杀死率为73.7%;再次对松材线虫和拟松材线虫(B.mucronatus),杀死率分别为48.7%和39.0%。而对大核滑刃线虫、吴氏长尾线虫(S.wuae)和外滑刃科线虫(Ektaphelenchidae sp.)的杀死率较低,分别为15%、1.5%和0;该菌株的16SrDNA基因序列BLAST比对结果表明,该菌株与菌株Bacillus amyloliquefaciens FZB42最为接近,相似性为99.86%,处于系统发育树的同一分支,进一步验证了其形态学和Biolog细菌鉴定仪的鉴定结果,确定该菌株的分类地位为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。     

松属植物的松塔、松子壳药用开发

目的:为了对云南省的松树资源进行药用开发,就松塔国内外研究进展作一综述.方法:查阅国内外有关文献资料加以综合归纳.结果:日本白松松塔提取物是有效免疫促进剂;还发现松塔提取物的抗癌抗艾滋病作用很强.预示松塔提取物可能成为艾滋病的理想治疗剂.结论:进一步研究开发利用该植物具有广阔前景.     

江苏南京雨花石的矿物学特征

为了研究南京雨花石的物性、矿物成分和结构,采用显微观察、X射线粉晶衍射方法、电子探针分析和物性测试,对南京雨花石的进行分析.结果表明:雨花石化学成分为SiO2,主要组成矿物是石英,呈粒状、短纤维状结构.通过X射线粉晶衍射方法测量了雨花石中石英在68o衍射峰,计算得出雨花石中石英的结晶度指数(CI)较低,一般在2.5～4.9之间,而理想完整结构石英的结晶度指数应为10,说明雨花石是二氧化硅物质在低温条件下快速冷凝形成的.     

江苏省星级酒店空间布局研究

依据江苏省旅游统计数据,运用ArcGIS 9.3工具,从点和面2个层面对江苏省各星级酒店及其整体的空间布局特征进行了分析,具体采用核密度指数、莫兰I指数、吉瑞C指数和Gi指数指标.结果表明:星级酒店在江苏省内空间分布极不均衡,且各星级酒店分布差异较大;总体呈现出以苏州、南京为2个核心,由苏北到苏南逐渐集聚的态势;苏南大部分发达县市及苏中、苏北各市的市区均为星级酒店分布热点区,苏北大部分县市尤其是省界边缘及沿海地带多为冷点区.最后,分析了旅游资源和区域经济及旅游业发展水平、重要交通基础设施、政府决策行为等因素对星级酒店空间布局的影响.     

拟松材线虫个体发育研究

【目的】探索拟松材线虫(Bursaphelenchus mucronatus)的繁殖能力,并对其胚胎发育过程中经历的重要阶段和卵的形态变化进行研究,了解胚胎发育和完成整个生活史所需时间,为进一步研究其生长发育并进行有效防控提供参考。【方法】分别挑取3组180条拟松材线虫雌成虫,观察记录雌虫在25 ℃条件下的产卵情况,每隔2 h统计每组线虫的累积产卵量,直至卵的数量基本不再增加。挑取尚未产卵的拟松材线虫雌虫于载玻片上,待其产卵后,将卵置于蔡司体视显微镜下观察。连续观察胚胎的发育过程并使用照片记录不同发育阶段胚胎的形态变化,记录卵发育至不同阶段所需时间。挑取约200个刚产下的拟松材线虫卵,在25 ℃条件下发育24 h后每隔4 h统计其总孵化率,直至孵化数不再增加,设置3组重复。将刚孵化的2龄幼虫接种于灰葡萄孢(Botrytis cinerea)上,分为3组,每组设置3个重复,分别在接种1、2、3 d后使用贝尔曼漏斗法收集线虫,计算混合龄线虫中每龄期线虫所占比例,计算拟松材线虫胚后发育及完成整个生活史所需时间。【结果】① 在拟松材线虫产卵能力方面,0~10 h拟松材线虫产卵总量增长较快,16 h后产卵量逐渐趋于稳定,28 h内雌虫平均累积产卵12粒/条。② 拟松材线虫的胚胎发育过程主要经历以下几个关键阶段:单胞期、双胞期、3胞期、4胞期、5胞期、8胞期、16胞期、囊胚期、利马豆期、蝌蚪期、蠕虫期、1龄幼虫(J1),至孵化为2龄幼虫(J2)时结束。③ 在胚胎发育前期,第1次卵裂发生的位置存在两种情况,即卵的1/2和1/3处。双胞发育至5胞时也存在两种不同的发育方式,一种是双胞不移动直接分裂成3胞并列排列,另外一种是细胞进行移动,3胞呈三角形排列。通过观察30个卵的第1次卵裂和100个卵双胞的发育过程发现,这些不同的发育方式均是普遍存在的。④ 在25 ℃条件下,拟松材线虫卵的累积孵化率随时间增加而增加,在32 h时达到最高(93.31%),随后逐渐趋于稳定。⑤ 在25 ℃条件下记录了拟松材线虫卵从单胞发育至各个阶段的时间,完成整个胚胎发育过程需要约28 h。2龄幼虫接种于灰葡萄孢3 d后即可获得新的2龄幼虫,因此拟松材线虫完成整个生活史只需要3 d。【结论】对拟松材线虫卵从单胞阶段直至孵化的整个胚胎发育过程进行观察发现,拟松材线虫完成胚胎发育大约需要28 h,完成整个生活史需要3 d。对拟松材线虫产卵能力和卵的孵化率进行统计,收集拟松材线虫卵和2龄幼虫的最佳时间分别为16 h和36 h。拟松材线虫胚胎发育前期,在第1次卵裂期以及由双胞期发育至5胞期的两个过程中均存在两种与同属线虫不同的发育方式。这种现象还有待进一步研究。