5L发酵罐生产鼠李糖的试验研究

采用从铜绿假单孢菌选育出的一菌株进行５Ｌ发酵罐发酵生产鼠李糖的试验,确定了鼠李糖产量与菌体生长状况之间的关系,在菌体生产的稳定期和菌体自溶阶段鼠李糖产量均大幅度上升,最高的鼠李糖含量的１２．５８ｇ／Ｌ,发酵过程中发酵液的ｐＨ值变化范围为６．５～６．０。研究结果表明,搅拌转速对菌体生长和鼠李糖产量有较大的影响,搅拌转速为６００ｒ／ｍｉｎ时鼠李糖产量比搅拌转速为４００ｒ／ｍｉｎ时提高约５０％。     

白蚁伞多糖的发酵生产

对白蚁伞在摇瓶和发酵罐中发酵产生白蚁伞多糖的动力学做了较为详细的研究。比较了几种不同培养基产生白蚁伞多糖的差异，筛选出在２８℃，２００ｒ／ｍｉｎ条件下，摇瓶产生白蚁伞多糖的最适培养基为黄豆粉葡萄糖培养基（以ｇ／Ｌ计）：黄豆粉５，葡萄糖３０，酵母浸膏粉２，ＫＨ２ＰＯ４１，ＭｇＳＯ４７Ｈ２Ｏ０．５，自来水配制，自然ｐＨ值（约５．５）。发酵１２０ｈ，达到最大的多糖产量０．５７３ｇ／Ｌ。在ＮｅｗＢｒｕｎｓｗｉｃｋＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（ＮＢＳ）Ｂｉｏｆｌｏ－Ⅱ６．６Ｌ的发酵罐上设定２８℃，６００ｒ／ｍｉｎ，５～７Ｌ／ｍｉｎ的通气量发酵２７ｈ，达到最大的多糖产量０．５６５ｇ／Ｌ。发酵过程的ｐＨ和氨基氮变化与其它食用菌的不同。对苯酚－硫酸法测定糖含量的方法作了改进，使测定糖含量的标准曲线线性和准确性得到改善     

黑曲霉发酵玉米淀粉生产柠檬酸

用紫外线和亚硝基胍诱变相结合的方法,从野生黑曲霉菌株出发,经多次诱变筛选,得到一株能够较好地利用玉米淀粉生产柠檬酸的黑曲霉菌株Ａ．ｎｉｇｅｒ９５。对Ａ．ｎｉｇｅｒ９５在摇瓶和发酵罐上用玉米淀粉发酵产生柠檬酸的适宜条件作了详细研究。经过比较,认为摇瓶产生柠檬酸的适宜培养基配方及发酵条件为：玉米淀粉２０％（均为质量分数,下同）、（ＮＨ４）ＳＯ４０．２％、ＫＨ２ＰＯ４０．２％、ＭｇＳＯ４７Ｈ２Ｏ０．０５％,甲醇３％,初始ｐＨ３．０。接种液体种子５％,３０℃２００ｒ／ｍｉｎ发酵７ｄ,柠檬酸产量１０．８％。在６．６Ｌ的Ｂｉｏｆｌｏ－Ⅱ型发酵罐上设定３０℃,５００～６００ｒ／ｍｉｎ,ｐＨ４．０,１．２～２．５Ｌ／ｍｉｎ的通气量,发酵１３２ｈ,柠檬酸产量为９．３％。可用价格低廉、来源丰富的玉米淀粉代替传统的薯干,作为发酵生产柠檬酸的原料,为实际生产奠定了基础。     

产核苷磷酸化酶大肠杆菌的培养及2′-脱氧-5-氟尿苷的酶法合成

研究了产核苷磷酸化酶大肠杆菌的摇瓶培养和发酵罐培养特征以及乙酸盐和底物诱导对核苷磷酸化酶活力的影响。结果表明：摇瓶培养时，延长菌体培养时间，菌体部分自溶时酶的转化率最高；发酵培养基中加入１０ｇ／Ｌ乙酸钠可使底物转化率提高７．７％，０．００１ｇ／Ｌ的底物ｄＵ诱导可使酶活力提高１１．０％；流加底物ｄＵ对酶反应转化率无显著影响，表明该酶促反应为非２′－脱氧尿苷底物抑制型；反应过程存在扩散控制，酶反应的最佳摇床转速为１６０ｒ／ｍｉｎ。     

微小毛霉凝乳酶摇瓶发酵的基本条件初探

对利用微小毛霉摇瓶发酵合成凝乳酶的基本条件进行了初步研究，在质量分数为２％的麸皮水解液中，起始ｐＨ６．０，装液量３０ｍｌ／２５０ｍｌ三角瓶，３５℃，振荡速度１２０ｒ／ｍｉｎ条件下摇瓶发酵７２ｈ可达产酶高峰。可得凝乳酶５０００ｕ／ｇ麸皮。同时对微生物凝乳酶的工业生产可能性作了简要分析。     

灵芝深层培养工艺的研究

为了提高发酵终了时灵芝菌丝浓度以获取高等真菌多糖，对灵芝ＡＳ．５．６５的深层培养工艺进行了研究。确定了最适发酵条件为：５％玉米淀粉、０．３％玉米浆、１％豆饼粉、０．６％糖蜜、０．１５％ＫＨ２ＰＯ４、０．０７５％ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ，ｐＨ５．５～６．０，温度２８℃，摇床转速１５０ｒ／ｍｉｎ，摇瓶种子培养３ｄ接种。接种量５％、装液量５０ｍＬ，培养５～６ｄ可终止发酵。最终菌体干重可达２７．５ｇ／Ｌ、含粗多糖２．６ｇ／Ｌ。     

碱性脂肪酶的发酵及提取工艺

对圆弧青霉ＰＧ３７发酵产酶工艺及脂肪酶提取工艺等进行了系统的研究。实验结果表明,２０ｍ３发酵罐在通风量为０．３～０．８Ｖ／Ｖ／ｍｉｎ、搅拌转速为１８０ｒ／ｍｉｎ、发酵温度为２８℃、培养过程中流加棉籽油以控制发酵醪ｐＨ值为６．５～７．０的条件下,发酵８４ｈ左右,成熟发酵醪酶活为４５２０Ｕ／ｍＬ。发酵液经过滤、超滤浓缩、硫铵沉淀、造粒等过程制得颗粒碱性脂肪酶成品,酶的提取总收率在７０％以上,颗粒酶活力单位为５．０×１０４Ｕ／ｇ。     

L─苏氨酸发酵中试研究

以ＢｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍＬａｃｔｏｆｅｒｍｅｎｔｕｍＬ─苏氨产生菌ＺＴ─１菌株为试验菌种，用５００升标准发酵罐进行Ｌ─苏氨酸中试发酵试验，连续四缺罐Ｌ─苏氨酸产量达到或超过了摇瓶发酵的水平，平均产量为１２．５６ｇ／Ｌ，平均转化率为１１．２６％，罐上发酵所积累的氨基酸谱相与常规摇瓶发酵的谱相十分相似。试验中采用了安排与罐上发酵同步（并行）的摇瓶发酵作对照的方法，从中找出了致使罐上发酵异常（失败）的原因，以试剂级碳酸钙（Ａ．Ｒ）取代了含有杂质（ＭｇＣＯ＿３）的工业碳酸钙，使罐上发酵获得了成功，文中对工业碳酸钙如何导致发酵异常的机制进行了讨论。     

三孢布拉霉发酵生产β—胡萝卜素

论述了几种不同型式的搅拌对三孢布拉霉发酵生产胡萝卜的影响，在最佳搅拌型式下获得了较高的发酵水平；经发酵培养的可获得胡萝卜素１５４７ｍｇ／Ｌ，菌体湿重３５４ｇ／Ｌ。     

高核酸高蛋白酵母选育及发酵生态学研究

通过紫外线嘧啶复合处理选育到一株高核酸高蛋白酵母，并进行了营子及其它培养条件的选择性试验，确定了优化的培养条件，摇瓶培养核酸１４．７５％，蛋白质含量达６３．６７％。１．５Ｌ发酵罐发酵试验能很好地重现摇瓶效果及冰箱保存活试验证明该菌株有好的遗传稳定性。     

谷氨酸棒状杆菌发酵色氨酸的工艺研究

为了优化发酵工艺,提高色氨酸产量,本文对发酵培养基的碳氮源、发酵条件、及小试发酵过程控制进行了实验研究。结果表明,最佳发酵培养基为葡萄糖4g/L、胰蛋白胨20g/L,色氨酸产量达0.43g/L;在摇瓶发酵的基础上,进一步在50L发酵罐中进行小试表明,在发酵温度36℃、pH7.0、搅拌速率700r/min的条件下,色氨酸产量达0.45g/L。     

吡咯喹啉醌生产菌的发酵条件优化

对一株产吡咯喹啉醌(PQQ)假单胞杆菌Pseudomonas 0813的发酵条件进行了优化,通过单因素试验确定碳源、氮源及无机盐成分,之后用正交试验法优化各成分配比,考察了发酵温度、初始pH值和转速对该菌产PQQ的影响。结果表明,最优的培养基配方为：酵母粉5g/mL、蛋白胨1g/mL、KH₂PO₄ 0.5g/mL;最适的发酵条件为：发酵温度30℃、初始pH 6.5、发酵转速150r/min。在此条件下,Pseudomonas0813菌株在250mL体系摇瓶发酵中的PQQ产量为448mg/L,在1.5L体系发酵罐扩大培养后的最高产量可达 695.mg/L,这是目前报道未经优化或基因改造菌株的较高产量。     

Sr18菌杀线虫代谢产物30L罐发酵放大条件的优化

在原有摇瓶及5L罐发酵的基础上,对线虫生防菌株Sr18杀线虫代谢产物30L罐发酵放大的工艺条件进行了优化,确定了30L罐发酵的工艺参数为：一级种子静置培养24h,接种体积分数为4％,通气量1：0．35～1．0,溶氧量20％～30％,发酵周期48h左右．在优化的发酵工艺条件下,经30L罐发酵放大培养所得发酵滤液1／2浓度的杀线率可达95％．     

补料分批培养海洋红酵母的研究

在摇瓶培养条件研究的基础上，进行了反应器补料分批培养海洋红酵母的实验，在10L气升式环流式发酵罐中，间歇和连续补料分批培养时干细胞浓度分别为23．08g／L和25．25g／L。     

D-核糖产生菌的选育及发酵

以枯草芽孢杆菌Ｄ－２为出发菌株,经紫外诱变,得到一株莽草酸缺陷型突变株Ｄ－２０２,摇瓶发酵Ｄ－核糖产量可达到５２．６ｇ／Ｌ。该菌遗传稳定性良好。通过发酵条件的优化,最高产量可达６５ｇ／Ｌ。经２ｔ发酵罐中试,发酵单位达到５０ｇ／Ｌ。     

玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63的发酵工艺改良

对链霉菌Men-myco-93-63的发酵条件进行了单因子实验研究.结果表明,其最佳摇瓶发酵条件为:接种量1%,初始pH值6,添加5个玻璃珠,500 mL三角瓶中装液40 mL,在25℃,180 r/min摇床培养.在综合分析这些因素对菌体生长和抑菌活性产物产生的影响后,选择影响较大的通气量在20 L发酵罐上进行放大实验,通气量与发酵罐的体积比由原来的1.2∶1变为1.4∶1.在发酵过程中抑菌活性产物产量得到一定程度的提高.     

Enhanced production of elastase by Bacillus licheniformis ZJUEL31410: optimization of cultivation conditions using response surface methodology

Sequential methodology based on the application of three types of experimental designs was used to optimize the fermentation conditions for elastase production from mutant strain ZJUEL31410 of Bacillus licheniformis in shaking flask cultures. The optimal cultivation conditions stimulating the maximal elastase production consist of 220 r/min shaking speed, 25 h fermentation time, 5% (v/v) inoculums volume, 25 ml medium volume in 250 ml Erlenmeyer flask and 18 h seed age. Under the optimized conditions, the predicted maximal elastase activity was 495 U/ml. The application of response surface methodology resulted in a significant enhancement in elastase production. The effects of other factors such as elastin and the growth factor (corn steep flour) on elastase production and cell growth were also investigated in the current study. The elastin had no significant effect on enzyme-improved production. It is still not clear whether the elastin plays a role as a nitrogen source or not. Corn steep flour was verified to be the best and required factor for elastase production and cell growth by Bacillus licheniformis ZJUEL31410.     

白阿魏菇深层发酵工艺的研究

用单因子实验、正交实验,检测白阿魏菇深层发酵指数,结果为:摇瓶发酵的最佳条件为温度25℃,装液量为三角瓶体积的1/5,培养基起始pH值5.5,接种量10%,大号玻璃珠12个/瓶 通过单因子和正交实验可知,菌丝体生长的最佳碳源为土豆汁;发酵罐最佳培养基配方为葡萄糖0.5%,蔗糖0.5%,玉米粉5%,麸皮4%,蛋白胨0.2%,KH2PO40.1%,MgSO4·7H2O0.05%,羧甲基纤维素钠0.5%,VB1微量;发酵罐发酵时间为48h     

生产L-精氨酸的脯氨酸营养缺陷型菌株的选育

以谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum）BC001为出发菌株,经紫外单因子诱变、紫外与硫酸二乙酯复合诱变处理,获得一株脯氨酸营养缺陷型菌株BC3071584（D- Arg^r; Pro^-）,菌株的结构类似物抗性为6 g/L,在含葡萄糖质量浓度为40 g/L的培养基中摇瓶发酵96 h,L-精氨酸产量为5.76 g/L,相比出发菌株提高了10倍。