高生物产量川芎细胞悬浮培养条件优化

在基本培养基为MS的基础上,研究激素浓度、接种量等因素对川芎悬浮细胞生长的影响,建立川芎细胞悬浮培养体系.实验结果表明:川芎悬浮细胞同步化继代培养液生长16 d左右,对数生长中后期时,按照1∶4(V/V)悬浮液,新鲜培养液,以MS+6-BA 0.5 mg·L-1+2,4-D 2 mg·L-1+30 g·L-1蔗糖培养基可获得较高产量的川芎悬浮细胞,湿重达到182.6 g·L-1,干重达到39.2 g·L-1.     

培养条件对银杏悬浮培养细胞黄酮合成影响研究

对12个不同品种的银杏树幼叶及其诱导的愈伤组织进行了银杏黄酮含量测定，发现其存在较大差异．梅核品种幼叶黄酮含量最高，为3．32％，大白果品种幼叶黄酮含量最低，为0.84％；梅核品种幼叶愈伤组织黄酮含量最高，达1．26％，岭南品种幼叶愈伤组织黄酮含量最低，为0.22％．选取生长旺盛、银杏黄酮含量高的愈伤组织在B5液体培养基中进行了银杏细胞悬浮培养，研究了多种条件对银杏细胞生长和银杏黄酮含量的影响．结果表明，在150mL培养瓶中装有50mL培养液，接种量为鲜质量30—40g/L，对培养细胞给予3000—40001x的光照、以蔗糖为碳源最有利于黄酮的合成，以葡萄糖为碳源则最有利于细胞生长．HPLC检测结果显示，银杏悬浮培养细胞中银杏黄酮含量可达细胞干质量的2．82％．     

杜仲细胞的悬浮培养

杜仲外植体在ＭＳ＋２，４－Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ的培养基上可诱导出生长速度快、离散性好、适合于悬浮培养的愈伤组织；愈伤组织在ＭＳ＋２，４－Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＣＨ３００ｍｇ／Ｌ的液体培养基上进行振荡培养，经３～４次继代，即可建立起悬浮细胞系；悬浮细胞的形状为长形、椭圆形、圆形和“月牙”形。     

蒜头果细胞悬浮培养的研究

采用蒜头果(Malania oleifera Chun et．K Lee)新鲜种子的胚乳在4种含不同激素浓度组合的培养基上诱导产生愈伤组织并建立起细胞悬浮培养体系。结果表明：愈伤组织诱导率为66．7％～86．6％，其中以MS 6-BA0.5mg／L 2，4-D 2．0mg／L 蔗糖3％的培养基最佳，其诱导出的愈伤组织具有较强的增殖能力和较好的脆散结构；最佳继代培养基为MS 6-BA0．2mg／L 2，4-D2．0mg／L 蔗糖3％；将继代后的愈伤组织转入6种含不同激素浓度组合的MS液体培养基中进行振荡培养，在综合分析各培养基的单细胞密度，细胞团块密度。细胞生物量增长率等指标后，初步筛选出MS 6-BA0．2mg／L 2，4-D 2．5mg／L 蔗糖3％培养基为较好的液体培养基。     

东北红豆杉细胞悬浮培养研究

东北红豆杉（Taxus cuspidata sieb et zucc)幼茎诱导的愈伤组织经多次继代培养，选择生长旺盛，紫杉醇含量高的愈伤组织进行细胞悬浮培养，建立了东北红豆杉细胞悬浮系，同时，对影响愈伤组织进行细胞悬浮培养，建立了东北红豆杉细胞悬浮系，同时，对影响愈伤组织继代培养及细胞悬浮培养的条件进行了研究，确定了适合愈伤组织生长的条件以及影响细胞悬浮培养的主要因素。     

胀果甘草细胞的悬浮培养

切取胀果甘草(Glycyrrhiza inflate)无菌苗的子叶、下胚轴和根段外植体进行愈伤组织的诱导和悬浮细胞培养,建立了胀果甘草细胞悬浮培养体系,测定了悬浮培养细胞的生长曲线,并且研究了接种量、条件培养和激素组合对胀果甘草悬浮细胞生长的影响.结果表明子叶来源的愈伤组织最适合作为胀果甘草细胞悬浮培养的起始培养物;悬浮培养的最佳接种量为 35 g/L;条件培养基的最佳用量为总培养体积的1/3;最适合胀果甘草悬浮细胞生长的培养基是附加了 NAA 1.0 mg/L + KT 0.5 mg/L 激素组合的 MS 培养基.     

胡萝卜愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养研究

分别以胡萝卜子叶、下胚轴和直根形成层为外植体诱导出愈伤组织,并建立细胞悬浮系.实验结果表明:胡萝卜下胚轴是诱导愈伤组织和进行细胞悬浮培养的理想外植体;诱导松散型愈伤组织的最佳激素浓度配比是1.0mg/L2,4 D+0.5mg/LKT;细胞悬浮培养细胞最佳起始密度为1.125×104个/mL～2.325×104个/50mL时,7d～9d为对数生长期;继代培养4代～5代时,可得到稳定的悬浮细胞系.     

悬浮培养及培养条件对灵菊七细胞中可溶性多糖合成的影响

以灵菊七叶片诱导的愈伤组织为材料进行悬浮培养,研究培养条件对愈伤细胞、细胞内可溶性多糖合成的影响。结果表明,在培养基MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA中悬浮细胞表现出对数生长期最长、可溶性多糖含量最高的特点;离子交换层析纯化结果显示,悬浮细胞中可溶性多糖分了与植株中含有相同的3种主要多糖。培养基MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA,促进可溶性多糖的生物合成,最适于灵菊七愈伤细胞的悬浮培养。本研究初步建立了灵菊七愈伤细胞悬浮培养快速获取可溶多糖的方法,为深入研究灵菊七多糖药理活性奠定了基础。     

水解酪蛋白对烟草愈伤组织和悬浮培养细胞生长的促进作用

报道了水解酪蛋白对烟草愈伤组织和悬浮细胞生长的促进作用，并确定了水解酪蛋白的适宜用量。     

雷公藤愈伤细胞悬浮培养生产雷公藤甲素的研究

对雷公藤叶愈伤组织进行悬浮培养,研究不同营养条件对雷公藤愈伤细胞生长及其雷公藤甲素质量分数的影响.结果表明：悬浮细胞在White培养基上增殖最快,而在MS培养基上生长最慢;White和MS培养基中悬浮细胞在第6天时雷公藤甲素质量分数最高,分别为7.14 mg/g和4.77 mg/g,而N6培养基中雷公藤甲素最大产量为6...     

药用植物大戟悬浮细胞的培养

比较了激素促进大戟叶、茎及腋芽形成的愈伤组织,得出 MS培养基 2.0 mg/L 6 BA 0.4 mg/LNAA最有利于形成愈伤,腋芽是获得愈伤的最佳材料。经过多代转接,获得大戟悬浮细胞系,培养21天生物量达到最大,为10.82 g/L。加入大戟内生菌(镰刀菌)的菌丝提取液,可以获得比对照高 34.13%的细胞产量;比较组织培养细胞HPLC指纹成分表明,悬浮培养细胞含有野生大戟药材的主要成分;加入内生菌提取物,其指纹组分含量及产量发生改变。     

西红花愈伤组织的诱导与花柱愈伤组织的继代、悬浮培养

以西红花的球茎,叶片和花柱为外植体诱导愈伤组织,叶片诱导培养形成白色膨大组织,球茎培养得到松散型白色愈伤组织,诱导球茎愈伤的培养基为5mg/L 6-BA 8mg/L NAA,在球茎愈伤组织中的紫外部分没有检测到西红花甙,西红花醛和西红花苦甙,在花柱愈伤组织中检测到西红花醛,适合于继代和悬浮培养,经悬浮培养后,在培养液中可检测到西红花醛和西红花苦甙,悬浮培养有利于次和一代谢的积。     

枸杞花药愈伤组织细胞悬浮培养与植株再生

采用枸杞花药进行离体培养,建立细胞系,诱导植株再生,结果在含不同激素的４种培养基上都诱导出愈伤组织,诱导率在１．７％￣１６．９％,愈伤组织在ＭＳ＋２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ的固体培养基上获得大量单细胞,在液体培养基中获得含有大量胚状体的愈伤组织块,收集悬浮培养物转移到ＭＳ＋６ＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ的固体培养基上,胚状体能够萌发形成大量绿色小芽,转入生根培养基（ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ）中,２０ｄ后得到     

甘薯胚性悬浮系的建立及其细胞生长特性研究

徐薯18叶片接种在附加2mg/L,4-D的MS固体培养基上，形成了质地松散的胚性愈伤组织，胚性愈伤组织在附加1mg/L,2,4-D的MS液体培养基中进行悬浮培养，建立了增殖迅速、分散度良好的具有较高体胚分化能力的细胞悬浮系。小型细胞团（直径小于350μm）以2％－4％的接种量转移到无激素MS液体培养基中，可分化出大量体胚。在继代初期，悬浮系pH值呈下降趋势，细胞处于旺盛分裂时期，导致悬浮系鲜质量、干质量、细胞紧实体积（PVC）的显著升值；4d以后，pH值逐渐回升，细胞分裂缓慢而体积增长迅速，导致鲜质量、PVC增加而干质量少有变化；6d以后pH值继续回升而细胞分裂和生长受到明显抑制。     

水稻悬浮系细胞的建立及植株再生

水稻（辽盐9）种子在LS＋2,4－D（2,4-二氯苯氧乙酸）2．0～3．0mg/L的培养基上进行诱导培养,经3～4次继代后,即可得到淡黄色颗粒性愈伤组织;将该种愈伤组织在LS＋2,4－D2．0～3．0mg／L＋LH（水解乳蛋白）300mg/L的液体培养基上进行振荡培养,经4～5次继代后,即可建立起良好的细胞悬浮系;培养基中附加2．0～2．5mg／LKT,使愈伤组织和悬浮细胞均可再生,其再生率分别为15．9％～17．9％和18．1％～20．8％。     

玉米单细胞培养的研究

将类型Ⅱ愈伤组织从固体培养基转入悬浮培养,发现在改良1/2MN培养基,1.0-2.0mg/L的2,4-D浓度及1000mg/L肌醇存在下,适合所有不同基因型玉米自交悬浮细胞的生长和细胞成活率的提高,悬浮培养5-6代继代1次是适宜的,大量元素减半和0.5-1.0mg/L的2,4-D浓度用于玉米单细胞培养,能获得良好的细胞分裂和生长,细胞悬浮培养获得了愈伤组织。     

西洋参悬浮细胞系的建立及其生长特性的研究

通过对西洋参根外植体愈伤组织诱导和培养,筛选出了质地疏松、生长快的愈伤组织无性系;将该愈伤组织接种在液体培养基中进行振荡培养,经多次传代、筛选获得了分散程度好的高产西洋参悬浮细胞系12-1。在此基础上,建立并优化了西洋参悬浮细胞培养工艺体系:温度(24±1)℃,pH值6.0,生长周期是25d,培养4d后再换液继代一次,培养20d后补料。细胞悬浮培养结束后,细胞的生长量及人参皂甙含量分别达到23.65g/L和677.25mg/L。     

非洲凤仙花细胞悬浮培养条件的优化

探讨了非洲风仙花培养基的类型、培养基激素水平和愈伤组织初始接入量对非洲凤仙花细胞悬浮培养生长的影响.结果表明:MS培养基最适于非洲凤仙花悬浮培养细胞的生长,在初始接入量为10 g/L时细胞增殖最快,附加有1.0 mg/L NAA和2.0 mg/L 6-BA的MS培养基中细胞的增殖率最高.     

柴胡细胞悬浮培养

柴胡愈伤组织的诱导以适当浓度的２，４－Ｄ和细胞分裂素的配合使用效果较好。在细胞悬浮培养过程中，细胞生长的情况是接种后的９￣１８天迅速生长，１８天后基本停止生长；ｐＨ值随培养的进程由开始时的５．８逐渐降至４．９（第９天），然后又出现回升。对培养液的检测表明：未分化出根的柴胡培养细胞也能生成柴胡皂甙。