慢性乙肝病毒感染者外周血单个核细胞染色体遭受病毒损害的见证

用Ｓｏｕｔｈｅｍ　ｂｌｏｔ分子杂交技术，检测９９例ＨＢＶＭ阳性的慢性ＨＢＶ感染者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）内ＨＢＶＤＮＡ的存在状态，其中７１例同时用ＢｒｄＵ标记法检测细胞中姊妹染色体交换（ＳＣＥ）率，观察ＨＢＶ对宿主单个核细胞染色体的损害情况。结果发现４２例被检者（４２．４２％）的ＰＢＭＣｓ中存在ＨＢＶＤＮＡ（游离型或整合型，有的还见到游离的复制中间体），正常对照组则无１例检出ＨＢＶＤＮＡ。被检者ＰＢＭＣｓ的平均ＳＣＥ率明显高于对照组，其中ＨＢＶＤＮＡ（＋）组又显著高于ＨＢＶＤＮＡ（－）组。证明ＨＢＶ的入侵与ＳＣＥ率升高之间有密切关系，提示ＨＢＶ对单个核细胞染色体形成了损害。这一现象可能是慢性乙肝病毒感染者免疫功能紊乱和ＨＢＶ长期不能清除等系列表现的原因之一。     

乙型肝炎病毒(HBV)DNA免疫的初步研究

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增了编码ＨＢＶｓＡｇ的基因序列,将其插入到ｐｃＤＮＡ３载体中,位于人巨细胞病毒（ＣＭＶ）早期启动子下游．重组质粒ｐｃＤＮＡ３－ｓＡｇ转染细胞后检测到ＨＢｓＡｇ表达．用纯化后的重组质粒直接注射到ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠骨骼肌内,诱发实验小鼠产生了抗ＨＢｓＡｇ特异性抗体．ＰＣＲ扩增未检测到注射部位及肝脏细胞染色体中有外源ＨＢＶＤＮＡ整合     

乙型肝为病毒（HBV）DNA免疫的初步研究

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增了编码ＨＢＶｓＡｇ的基因序列,将其插入到ｐｃＤＮＡ３载体中,位于人巨细胞病毒（ＣＭＶ）早期启动子下游,重组质粒ｐｃＤＮＡ３－ｓＡｇ转染细胞后检测到ＨＢｓＡｇ表达,用纯化后的重组质粒直接注射用ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠骨骼细内,诱发实验小鼠产生了抗ＨＢｓＡｇ特异性抗体,ＰＣＲ扩增未检测到注射部位及肝脏细胞染色体中有外源ＨＢＶＤＮＡ整合。     

用聚合酶链反应检测HBVDNA敏感性的探讨

本实验用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对５６例受检者进行乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ检测，并将结果与血清标志物检测结果比较，结果表明，在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃＡｇ同时阳性的受检者中，１００％可检测出ＨＢＶＤＮＡ。在血清标志物全阴性受检者中，也有４５％可测出ＨＢＶＤＮＡ。结合其他血清标志物的检测结果，说明用ＰＣＲ技术检测ＨＢＶＤＮＡ是敏感的，在临床应用上也是可行的。     

乙肝患者血清HBVDNA与e系统相关性的研究

用聚合酶链反应检测１３２例ｅ系统阳性慢性乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ．结果表明，ＨＢｅＡｇ阳性组，ＨＢＶＤＮＡ阳性率达８９．９％；抗－ＨＢｅ阳性组，ＨＢＶＤＮＡ阳性率为６８．３％．ＨＢＶＤＮＡ阳性患者的丙氨酸水平显著高于ＨＢＡＤＮＡ阳性患者，结果表明大部分抗－ＨＢｅ阳性患者体内仍存在ＨＢＶ复制及病情进展．     

运用HSV－tk／ACV系统进行肿瘤基因治疗研究

构建了含ｐｇｋ启动子驱动的ＨＳＶ－ｔｋ基因的反转录病毒载体ｐＬＮＴＫ，将ＨＳＶ－ｔｋ基因转移至人脑胶质瘤ＳＨＧ４４细胞（命名为ＳＨＧＬＮＴＫ）及小鼠黑色素瘤细胞Ｂ１６（命名为Ｂ１６ＬＮＴＫ）．体外实验证实核着类似物ＡＣＶ对ＳＨＧＬＮＴＫ细胞和Ｂ１６ＬＮＴＫ细胞的杀伤敏感性分别高于亲本细胞１０００和４００倍．转ＨＳＶ－ｔｋ基因细胞与亲本细胞按不同比例共培养时，亲本细胞对ＡＣＶ的敏感性明显增高，存在旁观者效应．首次应用人脑胶质瘤细胞株进行裸鼠体内实验，结果表明：ＡＣＶ能完全抑制ＳＨＧＬＮＴＫ细胞在裸小鼠体内肿瘤的形成，对裸小鼠体内已形成的ＳＨＧＬＮＴＫ肿瘤的治疗效果与对照ＳＨＧ４４肿瘤相比，肿瘤体积缩小８０％；用Ｂ１６ＬＮＴＫ细胞接种同系Ｃ５７／ＢＬ小鼠，经ＡＣＶ治疗后，Ｂ１６ＬＮＴＫ组小鼠的肿瘤较对照组Ｂ１６肿瘤小９５％．ＨＳＶ－ＴＫ／ＡＣＶ系统原位基因转移治疗ＳＨＧ荷瘤裸小鼠、Ｂ１６荷瘤小鼠，原位注射病毒悬液／ＡＣＶ治疗组的ＳＨＧ肿瘤、Ｂ１６肿瘤分别较对照组肿瘤小５０％，４３％，原位注射ＰＡ３１７／ＬＮＴＫ细胞，ＡＣＶ治疗的ＳＨＧ肿瘤较对照组肿瘤小９０％，以上实验结果，统计学上差异极显著，Ｐ＜０．０１．实验     

CHO细胞胞质分裂阻断微核技术的研究

使用胞质分裂断微核（ＣＢＭＮ）法，采用ＣＨＯ细胞评价一些环境因子造成的染色体损伤和细胞毒性，当细胞松驰素Ｂ（ＣＢ）的剂量为６ｍｇ．Ｌ＾－１，作用时间４０ｈ时，不能获得一个含有适宜数量又核细胞和多核细胞的ＣＨＯ细胞体系，利用这一体系，研究了这一种标准的实验室致突变剂丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）对ＣＨＯ细胞的影响，在实验剂量范围内，得到了可重复诱导微核形成的效果，并与其它实验室的研究结果一致，此外还检测了另外     

直接法提 取血清DNA后套式聚合酶链反应扩增乙肝病毒DNA

为进一步提高ＨＢＶＤＮＡ检测水平，改良了直接法提取血清ＤＮＡ技术，并用套式聚合酶链反应扩增ＨＢＶＤＮＡ。即以裂解液直接提取血清ＨＢＶＤＮＡ，用内外两对引物分别进行连续两次扩增。     

广州地区1995—1997年HIV抗体检测情况分析

为了解献血员人群ＨＩＶ感染情况，我们对１９９５～１９９７年献血员ＨＩＶ抗体检测情况进行了分析。方法：献血员ＨＩＶ抗体的初筛试验采用抗－ＨＩＶ抗体ＥＬＩＳＡ法，ＨＩＶ抗体初筛试验阳性者用蛋白印迹法（ＷＢ）进行确认。结果：３年内共检测１４００２８人次，初筛ＨＩＶ抗体阳性１８例献血员，并全部经ＷＢ法确认为ＨＩＶ抗体阳性。其中１５例为男性，３例女性，均为来自外省的流动人口。１８例ＨＩＶ抗体阳性献血员中，ＨＣＶ抗体阳性检出率为８３３％（１５／１８），ＨＢｓＡｇ阳性检出率为６１１％（１１／１８），ＨＢｓＡｇ和ＨＣＶ抗体阳性检出率为３３３％（６／８）。结论：在献血员人群中ＨＩＶ抗体阳性检出率呈上升趋势，为此献血员ＨＩＶ抗体筛查对预防和控制输血传播ＨＩＶ具有重要意义。ＨＩＶ与ＨＢＶ和ＨＣＶ具有较高的重叠感染率     

机器人自动装配线监控系统的通信与动态监测

本文系对我院１０７８名职工进行ＨＢＶＭ的检测，男性３５７人，占３３．１１％，女性７２１人，占６６．８９％。发现ＨＢＶ感染者２８３例，感染率为２６．２５％。其中ＨＢｅＡｇ阳性者１６例（１．４８％，ＨＢｓＡｇ阳性者５１例，ＨＢｃＡｂ阳性者６６例。     

乙型肝炎病毒感染与原发性肝癌关系的临床分析

分析了福建省的莆田、厦门两市１８２例原发性肝癌（ＰＨＣ）病案的临床特点，探讨与ＨＢＶ感染、ＨＢ之间关系，以及观察其中部分病例。采集其血清作ＨＢＶ标志物检测，ＰＨＣ患者１２９例ＨＢｓＡｇ阳性７７例，阳性率５９．６９％（Ｒ－ＰＨＡ），比当地自然人群调经４．２９％高出１２．９１倍，６１例ＰＨＣ血清作ＨＢＶ标志物检查（ＥＩＡ），有９１．８０％病例感染ＨＢＶ，比配对对照组感染率８．２０％高出１０．２０倍（Ｐ     

935例HBsAg阳性血清检测PHSAR的临床意义

采用ＥＬＩＳＡ法检测９３５例乙肝病毒（ＨＢＶ）患者血清ＰＨＳＡＲ，并对其与有关ＨＢＶ标志物的关系进行了探讨．结果表明，ＰＨＳＡＲ检出率分别与ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及抗－ＨＢｃ有密切关系，尤以ＨＢｅＡｇ的存在更为相关，是乙肝病毒复制，具有高度传染性的指标之一．     

赛若金对HepG2.2.15细胞株HBV复制的抑制作用

以转染有ＨＢＶ的ＨｅｐＧ２．２．１５细胞株为实验模型,用ＭＴＴ法测定赛若金对２．２．１５细胞的生长抑制作用,流式细胞仪测定药物对２．２．１５细胞周期时相的改变,通过ＥＬＩＳＡ方法观察赛若金对２．２．１５细胞分泌ＨＢｅＡｇ及ＨＢｓＡｇ的影响,ＰＣＲ－Ｈｙｂ杂交法检测赛若金对２．２．１５细胞ＨＢＶ ＤＮＡ复制的抑制作用。结果显示,赛若金对转染乙肝病毒的２．２．１５细胞有生长抑制作用,抑制率随药物浓度呈     

乙型肝炎病毒母婴传播问题探讨

探讨乙型肝炎病毒宫内感染及乳汁感染的母婴传播问题,用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对７５例ＨＢｓＡｇ阳性产妇初乳及其新生儿外周血进行ＨＢＶ ＤＮＡ的检测;同时应用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）测定产妇初乳中乙肝病毒５项标志物（ＨＢＶＭ）。结果为１）１７５例初乳中ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率为６８％,高于同组新生儿外周血ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率３４．６７％,有显性差（Ｐ〈０．０１）;ＨＢＶＭ三项阳性各组二埂有显性差异（Ｐ〈０．０５）．２）ＨＢｅＡｇ阳性初乳及新生儿外周血ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率均量高,与ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｃ比较,有显性差异（Ｐ〈０．０１,Ｐ〈０．０５）。表明初乳排毒率高于内传染率,母婴传播率与母血中ＨＢＶＭ传染性呈正相关。     

PCR检测伪狂犬病病毒的研究

用ＰＣＲ的方法，扩增了伪狂犬病病毒ｇｐ５０基因的一段较为保守区。检测了不同ＰＲＶ毒株感染的ＢＨＫ细胞以及接种的家兔，并对ＰＣＲ检测的灵敏性作了初步研究。结果表明，ＰＣＲ法扩增ｇｐ５０基因具有较高特异怀和灵敏性，是检测ＰＲＶ的有效方法。     

运用HSV—tk／ACV系统进行肿瘤基因治疗研究

构建了含ｐｇｋ启动子驱动的ＨＳＶ－ｔｋ基因的反转录病毒载体ｐＬＮＴＫ，将ＨＳＶ－ｔｋ基因转移至人脑胶质瘤ＳＨＧ４４细胞及小鼠黑色素瘤细胞Ｂ１６。体外实验证实核苷类似物ＡＣＶ对ＳＨＧＬＮＴＫ细胞和Ｂ１６ＬＮＴＫ细胞的杀伤敏感性分别高于亲本高于１０００和４００倍。转ＨＳＶ－display status     

树鼩对人乙型肝炎病毒易感性的验证

为验证树Ｑｕ对人乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的易感性,用含ＨＢＶ的人血清接种给１０只成年树Ｑｕ（雌雄各半）。然后每周抽血１次,每只动物共抽血１１次。用不同公司生产的ＥＬＩＳＡ试剂检测接种后的动物血清感染指标。实验观察至１３周,结果分别有９只和８只动物出现ＨＢｓＡｇ阳性,持续最短１周,最长７周。用ＰＣＲ检测,结果有１只动物连续４周在血清中检测出ＨＢＶ ＤＮＡ。表明树Ｑｕ能感染人ＨＢＶ,但实验有待改进以延长感染持续时间。     

慢性丙型和乙型肝炎基因产物表达形态比较

比较慢性丙型和乙型肝炎基因产物表达形态。方法：７６例经ＥＬＩＳＡ和ＨＣＶＲＮＡ检测证实的ＨＣＶ肝炎活检标本，用ＮＳ３区基因克隆产物ＣＰ２２和Ｃ３３ｃ标记，并与１７６例标记ＨＢｃＡｇ的乙型肝炎比较。结果；３６例丙型肝炎的ＣＰ２２１５例胞质阳性，Ｃ３３ｃ１９例胞质阳性。     

甜菜坏死黄脉病毒新疆分离物外壳蛋白基因的原核表达载体和植物表达载体的构建

将克隆入ｐＧＥＭ７ｚｆ（＋）的甜菜坏死黄脉病毒（ＢＮＹＶＶ）新疆分离物外壳蛋白（ＣＰ）基因的ｃＤＮＡ的ｐＧＥＢ３，用ＸｂａＩ切下，Ｋｌｅｎｏｗ补平，再用ＢａｍＨＩ切下ｃＤＮＡ片段。用ＮｄｅＩ切开原核表达载体ｐＪＷ２，用Ｋｌｅｎｏｗ补平，再用ＢａｍＨＩ切去小片段。将该ｃＤＮＡ与ｐＪＷ２大片段用Ｔ４连接酶连接，构建了ＢＮＹＶＶＣＰ基因的表达载体ｐＪＷＢ４，转化到大肠杆菌ＤＨ５α。经培养和高温诱导，ｐＪＷＢ４成功地表达出了ＢＮＹＶＶ的外壳蛋白。将ｐＧＥＢ３和ｐＢＩ１２１用Ｘｂａｌ和ＢａｍＨＩ酶切Ｔ４连接酶连接，构建了ＢＹＶＶＣＰ基因的植物表达载体，转化到ＤＨ５α，筛选出正向连结的阳性克隆ｐＢＩＢ３，转化入农杆菌ＬＢＡ４４０４（ｐＡＬ４４０４），经用ＰＣＲ扩增和γ３２Ｐ标记的探针杂交约证实为阳性克隆。往甜菜植株中转化工作正在进行中。     

甲型肝炎病毒(H2株)在三种细胞中的感染性滴度比较

本文用恒河猴胚肾传代细胞（ＭＥＫ）、人胚肺成纤维二倍体细胞（ＫＭＢ１７和２ＢＳ）对ＨＡＶ－Ｈ２株感染性滴度进行了初步研究,结果显示Ｈ２株在ＭＥＫ上感染性滴度（ＣＣＩＤ５０／ｍＬ）最高,ＣＣＩＤ５０／ｍＬ比ＫＭＢ１７,２ＢＳ平均ＣＣＩＤ５０／ｍＬ高１．２８ｌｏｇ和１．５９ｌｏｇ．经统计学分析,Ｐ＜０．０５,有显著性差异,证实ＭＥＫ对Ｈ２株最敏感．ＭＥＫ可能是测定ＨＡＶ感染性滴度和繁殖ＨＡＶ较理想的细胞