大雪兰种子的共生培养研究

 为了促进大雪兰种子的快速萌发,筛选能有效促进大雪兰(Cymbidium mastersii Griff. ex Lindl.)种子共生萌发的菌根真菌,在兰-菌共生培养条件下,开展了共生种子萌发后的生物量、菌株重分离、三维菌丝网光学和电子显微镜观察,以及TTC种子活力等方面的测定.经研究表明:经过150 d兰-菌共生培养,2种春兰和墨兰根部的菌根真菌CLB111、MLX102均对大雪兰种子共生萌发有明显的促进作用,萌发率与对照均达到极显著差异.经共生培养后从种子中重分离获得原接种菌株;共生萌发种子经光镜及电子显微镜观察到大量菌丝侵入并在胚细胞中形成三维菌丝网,胚开始分化,种子表现出明显的活性;而对照组种子经重分离未获得原接种菌株、未发现菌丝侵入种子,且种子活力极低.由此,筛选出促进大雪兰种子萌发的有效菌株为CLB111、MLX102.大雪兰成株的菌根真菌与其种子共生萌发的菌根真菌是一致的,这与天麻不同;同时,能有效促进大雪兰种子萌发的菌根真菌有2种.试验表明,大雪兰的菌根真菌与促进种子共生萌发的菌根真菌不是绝对专一的,在一定条件下,不同的菌株对同一种大雪兰种子有明显的促进萌发作用.对于不同的生态条件下是否存在有差异性的问题,有待进一步研究探讨     

伊贝母根际土壤浸提液对其种子萌发的影响

采用生物测定的方法,研究了伊贝母（Fritillaria pallidiflora Schovek）根际土壤水浸提液对伊贝母种子萌发及胚根胚轴生长的影响。结果表明,4种浓度处理的伊贝母根际土壤提取物对伊贝母种子萌发均起到抑制作用,对胚根、胚轴的生长有一定的促进作用。     

Na2CO3胁迫对生菜种子萌发的影响

以生菜(Lactuca sativa L.)种子为材料,采用纸上萌发法研究了不同浓度的Na2CO3对生菜种子萌发的影响。结果表明,2 mmol/L的Na2CO3处理对生菜种子的发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数等均有显著的促进作用,而对胚芽长度、胚根长度和胚鲜重等的促进作用不显著。Na2CO3显著抑制生菜种子萌发的浓度为5mmol/L,显著抑制胚生长的浓度为10 mmol/L。     

山楂种子休眠与萌发生理研究 Ⅳ.山楂种子内果皮及种皮与种子休眠的关系

通过对１９９４年和１９９５年采收的山楂种子进行层积、发芽、组织培养、生活力测定、ＧＡ３处理等多种方法进行研究认为，层积中山楂种子先解除休眠而后破壳；种子子叶休眠时间短，并可在干藏条件下解除休眠，休眠解除后，种皮抑制其生长；在种子发育过程中，子叶进入休眠前，种皮对子叶生长有一定作用；干藏７个月以内的种子，去除种皮或去除种皮及子叶，胚芽、胚轴、胚根不能萌发     

豇豆种子萌发进程中蛋白质组分的时空变化

以豇豆品种(早翠和矮虎)为材料,通过SDS-PAGE技术获得3个时期(干种子期、吸胀期、发芽期)和2个部位[胚(胚芽、胚根和胚轴)和子叶]的3种蛋白质组分(水溶、盐溶和碱溶)的电泳图谱.结果表明:品种间条带分布差异最大的时期是干种子期,部位是胚,组分为盐溶蛋白质.在萌发进程中,相对分子质量为60.4KD、55.4KD和49.7KD的3个条带没有时空变化,推测其是豇豆的保守性蛋白或结构蛋白.组分中以水溶蛋白所显条带数居多,但品种间多态性不丰富,早翠有两个特异带,而矮虎仅一个;盐溶蛋白组分所显品种间条带多态性丰富,早翠有107.8KD、18.3KD、15.7KD、14.0KD、12.8KD和11.4KD6个特异带,矮虎有41.0KD、27.3KD和14.4KD3个.故在豇豆种子萌发进程中,各蛋白质组分在品种内和品种间的时序和空间表达上,既显示出一致性又显示出差异性.由于对干种子期胚或子叶盐溶蛋白质组分的电泳分析,既显示品种遗传稳定性又能反映品种特异性,故均适宜于豇豆基因型判别,但基因型遗传关系分析宜以胚为材料,品种纯度检测宜用子叶为材料,不能两者混合取材,吸胀后的种子蛋白质组分分析不能反映基因型差异.     

肉苁蓉(Cistanche deserticola Ma)种子的萌发及与寄主梭梭(Haloxylon ammodendron Bunge)的关系

在人工栽培条件下研究了专性寄生植物——肉苁蓉种子的形态解剖结构及其在寄主根上的萌发过程。肉苁蓉种子具有典型的列当科寄生植物种子的特征,种皮内仅有球形胚,外包以胚乳。根据观察发现,只有当寄主梭梭的根穿入肉苁蓉种子的种皮内且刺激其球形胚产生“芽管状器官”,并连接于寄主根上后种子才能萌发,与肉苁蓉种子连接的部位主要在根毛区。首先在与寄主根连接的“芽管状器官”的頂部膨大为瘤状物,以后在内部分化形成输导分子并与寄主的维管束相连通,进而在瘤状物远离寄主根的一端分化形成頂芽,由此长成肉苁蓉植株。     

珙桐未成熟胚的萌发及植株再生的研究

为了建立珙桐的再生体系,试验以珙桐未成熟胚为外植体,获得了再生植株。采用正交设计和极差分析法对影响未成熟胚再生植株的四种主要因素α-萘乙酸(α-Naphthaleneacetic acid,NAA)、噻苯隆(Thidiazuron,TDZ)、赤霉素(gibberellic acid,GA)和活性炭(active carbon,AC)进行了研究。结果表明:胚萌发的最佳培养基组合为WPM+0.09mg/L NAA+0.6mg/L TDZ+0.9 mg/L GA+0.8g/LAC,芽诱导率为71.43%;萌发胚芽分化及生根的最佳培养基组合为WPM培养基+0.1mg/L NAA+3mg/L TDZ+6mg/L GA+1.2g/LAC,再生率为50%。AC能促进下胚轴变绿和子叶变绿,NAA、GA对解除胚的形态后熟有重要作用。GA和TDZ在芽分化及生根过程中起主导作用。     

莲种子萌发及幼苗生长过程中抗氧化酶活性的变化

以"寸三莲"种子为例,详细分析了其萌发及幼苗生长过程中,子叶和胚中抗氧化酶活性的变化."寸三莲"种子在正常的萌发条件下,SOD活性变化比较平缓,且子叶和胚中SOD活性变化趋势一致,均为先上升后下降,这可能与萌发过程中氧自由基含量的变化有关;在整个发芽进程中,POD活性远远高于子叶POD活性;CAT活性相对稳定,而胚中CAT活性变化较大.     

芍药种子露地播种和低温贮藏过程中内源激素含量的变化

以芍药种子为试材,通过露地播种和低温(5℃)贮藏,研究芍药种子休眠萌发过程中内源IAA、ABA、GA1 3、ZR含量的变化。结果表明:露地播种条件下,种子下胚轴开始伸长时ABA含量迅速下降,GA1 3含量在上胚轴生长前最高,上胚轴生长后下降。IAA和ZR含量在胚芽生长时均呈上升趋势。芍药种子在5℃低温贮藏条件下不能萌发,低温贮藏过程ABA含量并未降低,GA1 3含量先升后降。冷藏芍药种子中IAA和ZR含量明显低于露地播种的种子。     

祝光苹果受精过程的观察

对祝光苹果受精过程的观察结果如下: 授粉后4-6小时,大量花粉粒在柱头上萌发。授粉后50小时,全部花粉管长至花柱基部。授粉后5-6天,一精核与卵核融合形成合子核;另一精核与次生核融合形成初生胚乳核。合子休眠期约为2天。授粉后7-8天,在胚囊中见到二细胞原胚及数个胚乳游离核。与此同时,胚囊中大颗粒淀粉消失。     

旱芹人工种子内培养物的形态发生和生理生化的研究

本文讨论有关旱芹人工种子内部培养物由体细胞脱分化产生胚性细胞、胚状体,直到成株的过程中形态发生的问题,对胚性细胞所处的状态、胚状体筛选和畸形胚、胚性细胞(团)或子叶胚包裹人工种子及其萌发特点、播种基质等等方面进行了分析比较,并提出一些有关旱芹人工种子研制的基本结论。 实验对培养物的叶绿素含量和过氧化物同工酶谱进行了测定,并得到了水溶性蛋白和过氧化物酶的培养时间曲线,以期从生化指标探讨人工种子这一特定条件下培养物的生理生化变化。     

攀枝花苏铁（Cycas Panzhihuaensis L．Zhou et S．Y．Yang）受精作用及胚胎发生的研究

报道了C .panzhihuaensis的受精作用 ,胚胎发生和分化 .人工授粉 15d后 ,颈卵器开始发育 ,7月底到 8月中旬受精作用发生 ,受精过程有三种情况 :即球形精细胞或蠕虫状精子从卵顶部进入卵细胞内 ,纤毛带遗弃在颈卵器室中 ,或具纤毛带的精细胞进入卵中 ,纤毛带遗弃在卵细胞质内 ,精卵核融合 .胚胎发生经历较长的游离核原胚阶段 ,游离核原胚形成细胞后 ,幼胚开始分化 .受精后的雌配子体发育成胚乳 .成熟的胚由子叶 (二片 )、胚芽、胚根、胚根鞘及螺旋折叠的胚柄组成     

华北驼绒藜胚胎发育过程及多糖变化的组织化学研究

采用常规石蜡切片法、PAS法和铁矾苏木精染色,观察华北驼绒藜胚胎发育过程.结果显示胚胎发生的类型属于藜型;合子发育为直线型四细胞原胚和近似T型的四细胞原胚;胚乳发育为核型;在胚发育过程中出现异常现象,球形原胚后期不进行子叶的分化,胚体呈椭圆形生长.胚发育过程的营养来源于珠心组织积累的可溶性多糖、胚乳组织等;从胚发育过程中的营养供应分析,出现异常发育不是营养缺乏所导致的.胚后期的异常发育可能是驼绒藜种子败育的一个原因.     

水杨酸对盐胁迫下西瓜种子萌发特性的影响

采用培养皿发芽法,研究了水杨酸浸种对盐胁迫下西瓜种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,300mmol/L NaCl溶液浸种显著降低了西瓜种子的发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数及胚根长和胚芽鲜重;1.0mmol/L以下浓度水杨酸浸种使盐胁迫下西瓜种子萌发和幼苗生长量随水杨酸浓度提高而显著增加;2.0 mmol/L水杨酸浸种对盐胁迫下西瓜种子萌发和幼苗生长无明显影响,3.0 mmol/L水杨酸浸种进一步降低了盐胁迫下西瓜种子萌发和幼苗生长量。结果说明,较低浓度水杨酸浸种可缓解盐胁迫对西瓜种子萌发和幼苗生长的抑制作用,减轻西瓜种子萌发期盐胁迫伤害的最适水杨酸浓度为1.0 mmol/L。     

甘蓝型油菜胚柄多胚突变体(Brassica napus twn-119)的细胞胚胎学研究

多胚突变体B.napus twn-119是从甘蓝型油菜品种中油119中发现的.经过连续套袋自交选育,目前已使多胚频率提高到34%.所获得的多胚种子萌发后,92%的种子中萌发出各自独立的双苗,6%种子中萌发出独立三苗,2%的种子中得到3个以上独立苗.偶尔可观察到生长的幼苗具有三片、四片子叶、幼苗的茎发生部分结合及子叶上具轴状附属物等异常现象.对多胚突变体的胚胎学研究表明,由顶细胞发育而来的初生胚体正常发育成胚,部分胚柄细胞转变成为具有强烈分裂能力的细胞而不是进入程序性死亡.这些特殊的胚柄细胞具有胚胎发生能力,胚柄中可以观察到多个球形原胚形成,多个原胚由宿存的胚柄细胞连接成一串.如果两原胚之间连接的胚柄细胞很少或没有,两个胚体在发育过程中会发生部分融合.幼苗根尖染色体数目的检查也证明多胚幼苗都具有正常油菜的染色体数目(2n=38).     

春剑种子无菌萌发过程的显微观察

【目的】春剑(Cymbidium tortisepalum var. longibracteatum)种子在自然环境下难以萌发,大约只有百万分之一的萌发率。分析春剑种子萌发机制,可为春剑种子的高效萌发和共生萌发提供参考。【方法】通过无菌播种技术对春剑种子进行萌发试验,并用体式显微镜和扫描电镜对各发育阶段春剑种子形态变化进行观察。【结果】Hyponex(花宝1号)3 g/L + 6-BA 0.50 mg/L + NAA 0.50 mg/L培养基上种子萌发效果最佳,种子萌发率为30.33%;从播种到形成幼苗需400 d。观察发现,春剑种子萌发的主要途径为种胚膨大并从种子一侧突破种皮但未从种皮中脱落,种胚突破种皮后经光合作用变绿并分化成原球茎,原球茎伸长生长形成根状茎最后形成幼苗。【结论】添加适宜浓度的6-BA和NAA能有效促进春剑种子的萌发;春剑种子的发育阶段分为:未萌发、种胚吸水膨大、种皮破裂露出种胚、形成原球茎、形成根状茎、形成幼苗6个阶段。     

层积和激素处理对大旺山楂种子的生理生化影响

对栽培品种大旺山楂种子进行层积处理,并分别用200 mg/L GA3和ABA处理层积后的种子,测定层积不同阶段和激素处理种子的生理生化变化。结果表明,大旺山楂种子休眠期长,正常采收的成熟种子层积一个冬天难以解除休眠。层积处理使山楂种子的细胞膜透性增加,呼吸加强,SOD和CAT活性增加,POD,G6PDH和PAL活性降低,总糖、还原糖、可溶性蛋白质和游离氨基酸含量降低。GA3处理促进种子萌发,并使种子CAT,SOD,POD,G6PDH和PAL活性降低,而ABA处理抑制种子萌发,除了使SOD活性降低外,对其余各酶的影响与GA3的作用相反。     

山楂种子休眠、萌发与内源激素含量的变化

应用高效液相色谱法测定、研究了山楂种子各部位中ＧＡ３、ＩＡＡ、ＡＢＡ含量在不同采收期、室温干藏和层积过程中的变化。结果表明,提早于８月２５日采收的种子ＩＡＡ高于、ＡＢＡ低于９月１０日采收的种子。变温层积过程中,前期ＧＡ３、ＩＡＡ含量均呈上升趋势,３～４个月后有所下降,到１５４ｄ左右时,均以８月２５日采收种子较９月２５日采收种子含量高,ＡＢＡ含量总的趋势是层积前期上升,后期有所下降,比较种子萌发情况,可以认为ＧＡ３、ＩＡＡ对打破休眠、促进萌发有一定作用,而ＡＢＡ则是抑制萌发的重要因素。     

诺丹冰草（Agropyron desertorum CV．nordan）的胚和胚乳发育

观察了诺丹冰草胚和胚乳的发育过程．一般合子第一次分裂为横分裂，但偶见有斜分裂，形成顶细胞和基细胞．顶细胞纵分裂，基细胞横分裂，胚胎发生属紫宛型．一个助细胞于受精前解体，宿存助细胞生存到椭圆形胚期．丝状器具强的ＰＡＳ正反应．反足细胞于受精后增殖并保留到多细胞原胚时消失且无多糖反应．核型胚乳，胚乳细胞化开始于多细胞原胚期．成熟胚乳细胞中具许多大的淀粉粒．种子有胚乳．发现有原胚的移位及胚囊中缺少胚的现象．     

伊贝母组织培养中体细胞胚的形成及细胞学观察

伊贝母是百合科贝母属多年生草本植物,是常用名贵稀有中药材之一,用种子繁殖约需5—6年,用鳞茎繁殖,系数也只有1.5—1.6。为加速伊贝母的繁殖,贾廷耀、郝玉蓉等已用组织培养方法获得了再生植株,但体细胞胚形成的研究在国内外至今尚未见