功能基化聚丙烯酸甲酯固定青霉素G酰化酶的性质

采用肽键法将青霉素G酰化酶固定在功能化的聚丙烯酸甲酯上得固定化酶 ,其最适pH为8.2,最适反应温度为70℃ ,该固定化酶在pH6～10和40℃以下非常稳定 ,表观米氏常数为1.48×10-2mol/L,最大反应速度为5.09mmol/s.33℃下水解质量分数为5 %的青霉素G,使用63次,酶活力保留79.4 %.在4℃的湿润状态下贮藏25d,酶活力保留97.6 %.     

固定化粪产碱杆菌青霉素G酰化酶的制备

粪产碱杆菌来源的青霉素G酰化酶通过共价结合在环氧型载体EupergitC上,通过对酶质量浓度、固定化反应时间、pH 值以及反应温度等条件的考察,确定了最优固定化条件：375mg比活力5000U/g的重组粪产碱杆菌青霉素G酰化酶蛋白对应1g载体,最适pH8.0,反应温度30 ℃.反应120h后制得固定化青霉素G酰化酶活力达到220U/g,固定化酶效率为10.7%.该固定化酶可在含饱和乙酸丁酯磷酸缓冲液中彻底水解青霉素G钾盐.经过15批连续水解反应,固定化酶仍保持95%的活力,展现出良好的稳定性.     

羟丙基-β-环糊精与青霉素酶的相互作用

应用紫外分光光度法、荧光分析法研究了羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)包合青霉素酶后酶活力的变化;荧光分析法检测不同温度下HP-β-CD对青霉素酶内在荧光的影响;将HP-β-CD与青霉素酶进行分子对接,分析青霉素酶与HP-β-CD相互作用的位点及作用方式;测定青霉素酶被HP-β-CD包合后对青霉素钠的分解速率.结果发现：HP-β-CD作用后的青霉素酶复合物的活力提高了2.12倍.荧光光谱研究发现：HP-β-CD对酶蛋白荧光有增敏作用,HP-β-CD包合青霉素酶的包合比为1∶1,包合反应自发进行.同步荧光结果显示：HP-β-CD与青霉素酶复合物同步荧光比青霉素酶强,酶蛋白荧光主要源于酪氨酸(Tyr)残基.分子对接实验结果显示：HP-β-CD与青霉素酶之间共形成了3对氢键,VAL39、ASN180和ASP183参与了氢键的形成.     

一种β-内酰胺类抗生素的酶热检测方法

组装有青霉素酶酶柱的酶热传感器(以下简称“青霉素酶酶热传感器”)可应用于青霉素类抗生素血药浓度的快速检测及牛奶中外源添加的青霉素酶(解抗剂)的现场快速检测,但由于该传感器对头孢霉素类及碳青霉烯类抗生素检测活性差而限制了其广泛应用.近期出现的一种碳青霉烯酶“新德里金属β-内酰胺酶-1,NDM-1”则具有水解几乎所有β-内...     

铁卟啉材料修饰电极用于吗啡的检测

制备了铁卟啉(PAF-40-Fe)修饰电极,通过差分脉冲伏安法在0.2～0.8 V间对吗啡的电化学信号进行简单快速的检测.实验结果表明,该电极在吗啡的检测过程中表现出了良好的导电性质.在最佳条件下,氧化峰电流与吗啡的浓度在1.5～1 500μmol/L范围内呈现出良好的线性关系,R~2=0.994 5,检出限为0.5μmol/L.该方法的回收率为88.9%～105.3%.方法具有选择性好、传感器制备简单检测快速等优点,具有较好的应用前景.     

流动注射化学发光法检测牛奶中青霉素G

基于在酸性的条件下,青霉素G在线降解的中间产物被高锰酸钾氧化产生弱的化学发光,且甲醛的存在对该化学发光有增敏作用,从而建立了一种KMnO_4-HCHO化学发光体系快速检测青霉素G的新方法。化学发光强度与青霉素G的质量浓度在8.0×10~(-7)~8.0×10~(-5)g/mL范围内呈良好的线性关系,R~2=0.998 8,方法的检出限(3σ)为2.4×10~(-7)g/mL,并对浓度1.0×10~(-5)g/mL的青霉素G平行测定11次,其相对标准偏差(RSD)为2.3%,以注射用青霉素G钠和牛奶样作为基体考察,RSD在0.8%~4.1%之间,用标准加入法考察回收率在98.2%~101.8%之间。结果表明,该方法灵敏、准确、可靠,结果令人满意。     

基于Ni-MOF@RGO修饰玻碳电极的电化学法无酶检测血液中的葡萄糖

选用一种水热法制备的金属有机骨架材料Ni-MOF,将其与还原氧化石墨烯(RGO)复合,修饰在玻碳电极(GCE)表面,构建了用于葡萄糖检测的无酶传感器.以Ni-MOF@RGO/GCE为工作电极,Ag/AgCl为参比电极,铂丝为对电极,将该三电极系统置于含有葡萄糖的标准碱性溶液中,于0.3～0.7 V内进行扫描,记录葡萄糖的响应氧化还原电流.结果显示,葡萄糖的浓度在1～80μM以内与其对应的峰电流呈良好线性关系,检出限为0.36μM(S/N=3).基于Ni-MOF@RGO修饰电极对50μM葡萄糖标准溶液平行测定5次,测定值的相对标准偏差为4.3%.对血清进行加标回收试验,葡萄糖的回收率为96.4%～104.6%.     

基于银纳米颗粒/铜纳米线复合材料的电化学无酶葡萄糖传感器

以抗坏血酸为还原剂在均匀的铜纳米线(CuNWs)表面将硝酸银还原，成功制备出不同负载量的Ag纳米颗粒均匀生长在铜纳米线(AgNPs/CuNWs)上的复合材料.利用循环伏安法检测AgNPs/CuNWs修饰电极对葡萄糖的电催化性能，发现Ag颗粒负载量质量分数为5.57%时具有最佳的电流响应，同时对葡萄糖分子表现出良好的电催化活性，灵敏度高达693.1μA (mmol/L)^-1 cm^-2,宽线性范围0.01～4.18 mmol/L,低检测限为3.4μmol/L(S/N>3),对血液中的一些干扰物具有出色的抗干扰性，并具有超过两周的高稳定性.此无酶葡萄糖传感器表现出良好的稳定性和高选择性，在电化学无酶葡萄糖检测中具有良好的应用前景.     

吸附溶出伏安法检测吸毒人员尿液中吗啡

吗啡既是临床用镇痛剂，也是公认的毒品.为实现对尿液中吗啡的快速、简单、高灵敏度与高选择性检测，将多壁碳纳米管羧基化处理后，直接滴涂于打磨并表征过的玻碳电极表面，制备得到了羧基化多壁碳纳米管修饰玻碳电极(MWNTs-COOH/GCE)，并采用差分脉冲吸附溶出伏安法(ASDPV)对吗啡(MOP)进行检测.结果表明，在优化了传感器的制备及检测条件(包括MWNTs-COOH的滴涂量以及富集时间、富集电位、缓冲溶液的pH等)后，得到的MWNTs-COOH/GCE检测吗啡的工作曲线回归方程为lg(I/μA)=0.687lg[c/(μmol·L^-1)]-0.068 (r~2=0.992 0)，线性范围为1.0×10^-7～1.0×10^-4 mol/L，检出限为8.0×10^-8 mol/L.在使用尿酸酶除去尿液中的干扰物尿酸后，用该传感器检测实际吸毒人员尿液中吗啡的质量分数，得到的检测结果与高效液相色谱检出结果的相对误差绝对值在4.24%以内.通过t检验法发现在置信度为95%时，两种方法并无显著性差异.     

碱性蛋白酶水解海洋鱼鳞工艺改进

鱼鳞中含有丰富的蛋白质资源,如何充分利用该资源越来越受到关注.利用碱性蛋白酶水解海洋鱼鳞蛋白制备鱼鳞蛋白多肽.通过考察温度、时间、酶量、底物浓度等单一因素对水解鱼鳞蛋白的影响,确定并设计了L9(34)正交试验因素和水平,最终获得了碱性蛋白酶水解海洋鱼鳞蛋白优化工艺条件,即温度60℃,时间1.5h,酶量3%(质量分数),底物质量分数10%.在此条件下,酶解所得水解度为32.38%.与其他方法比较,该工艺条件下水解时间大大缩短.检测了该条件所得蛋白肽段的分子质量分布,结果表明酶解产物主要集中在1～6ku.由此可见,该优化条件适合规模化生产,所得蛋白肽可以满足食品、化妆品行业的需求.     

高效液相色谱法测定青霉素V亚砜酸的含量

研究了用反相高效液相色谱法测定青霉素V亚砜酸含量的新方法，所用色谱柱为HypersilODS-2柱，以磷酸盐缓冲液（pH=5．8）－乙腈（体积比为80：20）为流动相，流速为1．0mL/min，检测波长为268nm，并对副产物青霉素V砜酸进行了液相色谱的定性检测，表明表明，实验方法简便、快速、结构准确，可以用于青霉素V亚砜酸生产的质量控制。     

青霉素过敏反应及皮试判定

青霉素系疗效高、毒性低、抗菌谱广，应用广泛的抗菌素、但其过敏及过敏性休克反应却给患者带来极大的危害、故用药前的皮试尤为重要．为了杜绝皮试判定误差，皮试中必须排除各种干扰，正规技术操作，才能使青霉素正确而安全地运用于临床。     

青霉素V亚砜酸的制备

以青霉素V钾为原料,采用过氧乙酸作催化剂合成青霉素V亚砜酸,收率可达96.1%。实验证实,将青霉素V钾干粉加入8%过氧乙酸溶液可得最佳收率。反应结束后,用稀硫酸调pH值至1.5时,青霉素V亚砜酸就从反应液中直接结晶析出。     

薄层色谱法分离测定青霉素V亚砜酸

建立了测定青霉素V亚砜酸含量的薄层色谱扫描方法，以V（醋酸丁酯）：V（冰醋酸）：V（5％磷酸氢二钠）：V（正丁醇）＝12：4：2：1为展开剂，检测波长285nm,线性范围5－60mg，最低检测限0.5mg。方法简便、快速、灵敏、重现性好、可用于青霉素V亚砜酸生产的质量控制。     

青霉素分光光度法测定微量铁的研究

本文研究了青霉素和盐酸羟胺的反应产物与铁的显色反应.在pH8.0的NH_3·H_2O-NH_4C l缓冲介质中,铁与青霉素和羟胺的反应产物生成亮黄色配合物,其配合物的最大吸收波长位于435nm处,摩尔吸光系数为3.2×10~3L·mol~(-1)·cm~(-1),Fe(Ⅲ)浓度在0-5.5μg/ml范围内符合比尔定律.该法用于碳酸钙中微量铁的测定,结果满意.     

青霉素酰化酶研究——Ⅱ.酶的修饰和修饰酶的性质

本文介绍用β-硫酸酯乙砜基苯胺(SESA)活化右旋糖酐T2000以修饰大肠杆菌5852青霉素酰化酶。活化时500mg右旋糖酐需SESA 20mg。制备对氨基苯磺酰乙基葡聚糖(ABSE)-右旋糖酐的反应温度为80℃,与500mg活化右旋糖酐偶联的酰化酶酶量为100u,修饰率达88.3%。用琼脂糖(Sepharose 4B)或交联葡聚糖(Sephadex G150)柱层析分离得高分子量的修饰酶。修饰酶对热和pH的稳定性均优于自由酶,最适温度提高,但最适pH和高浓度青霉素G底物抑制现象没有改变。     

青霉素皮试的研究进展

目的 :阐述青霉素皮试的研究进展。方法 :检索有关文献进行综合分析。结果 :掌握好青霉素的皮试方法 ,可有效地减低病人的疼痛和降低假阳性率的发生。结论 :总结归纳目前青霉素皮试研究中新的观点、方法和技术 ,对临床工作和教学有一定的指导意义。     

青霉素药物鉴测卡的制备及应用研究

文章报道了一种青霉素药物鉴测卡的实验室制备方法,研究了所制备的鉴测卡的响应特性,该活性电极响应快速,选择性、稳定性、重现性均较好。电极检测下限可达2.37×10-4mol/L,线性范围为4.68×10-4～1.0×10-1mol/L,斜率为59.3mV/pC。     

亚砜类萃取剂萃取青霉素G的工艺研究

系统研究了亚砜类萃取剂石油亚砜和二异辛基亚砜萃取青霉素Ｇ的性能。在平衡研究的基础上确定了适宜的革萃和反萃条件，以此为基础进行了萃取串级和工艺台架试验。结果表明，分别由石油亚砜、二异辛基亚砜与稀释剂磺化煤油组成的萃取体系对青霉素Ｇ的革取性能均优于现有的醋酸丁酯体系，且二异辛基亚砜体系比石油亚砜体系更好。由于它们的低水溶性，因此不必从废酸水中回收革取剂，使操作简化、能耗降低。实验中还发现，当亚砜、胺组合使用时，有明显的协萃效应。     

青霉素配伍的合理选择

用青霉素与溶煤０．９％生理盐水和５％－１０％Ｇ．Ｓ配伍,治疗２９例患者并对结果作一对比。结果表明,不同配伍的治疗结果有差异。