温度和时间对鲍鱼消化的影响及产物的ACE抑制活性

以皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)为研究对象,采用3种冻藏温度(-18,-30,-80℃)和3个冻藏时间(3,6,12个月)对鲍鱼肌肉进行冷冻处理,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE),分析比较了不同冻藏方式下鲍鱼肌肉模拟胃肠液消化的产物特性,利用扫描电镜观察了鲍鱼冷藏过程中肌肉微观结构的变化,研究了各种冻藏鲍鱼消化终产物对血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)的抑制活性。结果表明:胃蛋白酶、胰蛋白酶及胰凝乳蛋白酶对冻藏鲍鱼肌肉蛋白均能分解,但冻藏时间越长,鲍鱼肌肉越难被降解,其消化速率为:3个月6个月12个月。但是,不同温度下冻藏相同时间对鲍鱼的消化速率无显著差异。扫描电镜观察发现,冻藏时间对鲍鱼肌肉组织结构影响较大,冻藏3个月的鲍鱼肌肉纤维间隙比新鲜鲍鱼的大,但继续延长冻藏时间至6,12个月,肌肉蛋白凝集,间隙减小。不同冻藏温度和时间的鲍鱼肌肉胃肠液消化产物的ACE抑制活性顺序为:3个月6个月12个月,且不同冻藏温度下贮藏鲍鱼消化产物的ACE抑制活性无显著差异。     

大豆活性多肽口服液的研制及其功能研究

以大豆分离蛋白 ( SPI)和麦芽为主原料 ,采用复合蛋白酶水解制备活性肽口服液 ,并以大、小鼠为实验对象对产品进行了急性毒性和功能性研究 .实验结果表明 ,本产品外观及口感良好 ,质量稳定 ,食用安全 .与高脂对照组比较 ,给予多肽口服液的中剂量组血清总胆固醇 ( TC)下降极显著 ( P<0 .0 1 ) ,高、低剂量组 TC下降显著 ( P<0 .0 5 ) ,高、中、低三个剂量组的血清低密度脂蛋白胆固醇 ( L DL- C)显著降低 ( P<0 .0 5 ) ,其中 TC分别下降35 .0 %、 5 1 .5 %和 47.0 %;L DL - C降低 37.6%、 5 4 .7%和 5 0 .2 %;同时对血清甘油三脂( TG)也有一定降低作用 ,对血清高密度脂蛋白胆固醇 ( HDL- C)无影响 .提示活性肽口服液具有调节血脂的功能     

紫贻贝酶解多肽体外抗肿瘤活性研究

确定了紫贻贝胰蛋白酶水解时的最佳条件,研究了紫贻贝酶解多肽的体外抗肿瘤活性.采用正交实验方法, 以料液比、pH、加酶量、酶解温度和酶解时间为因素,以酶解液的氨基氮含量和肿瘤细胞增殖抑制率为指标进行L16(45)正 交实验,MTT法检测酶解多肽对DU-145、PC-3、H1299和MGCS0-3等肿瘤细胞的抑制活性;HE染色法观察酶解多肽对 肿瘤细胞形态的影响;免疫组化法检测酶解多肽对细胞中Bel-2表达的影响.结果表明:当料液比为1:4、pH为8.5、加酶 量为1 000 U/g、温度为45℃、酶解时间为5h时酶解多肽的水解度最大;当料液比为1:4、pH为8.0、加酶量为1 500 U/g、温 度为40℃、酶解时间为2h时酶解多肽的抗肿瘤活性最强,该肽可以下调肿瘤细胞中Bc1-2的表达.紫贻贝酶解多肽具有 抗肿瘤活性,可能是通过诱导细胞凋亡来实现的.     

预处理对大豆秸秆纤维素性质影响的研究

对大豆秸秆纤维素预处理过程的影响因素进行了探索,对预处理前后大豆秸秆的物理结构变化、化学成分变化及预处理条件对酶解产糖的影响进行了研究．研究结果表明,粉碎结合氨处理对大豆秸秆酶解产糖影响较大,较适宜的预处理条件为大豆秸秆粉碎至140目,10％氨处理24h．     

蛋白酶解大豆多肽的理化特性

以大豆蛋白为原料,利用微波加热和碱性蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶水解大豆蛋白,制备单酶、双酶、三酶联合水解的大豆多肽,用葡聚糖G-50排阻色谱法进行分离检测,确定各级分的分子量分布范围.凝胶层析分析结果表明,三酶联合水解得到的大豆肽相对分子质量分布主要在1 100 u以下,而双酶联合水解则在2 000 u以下,可见三酶联合水解效果优于双酶,更优于单酶.此外,物化特性研究表明,蛋白酶水解使得大豆蛋白溶解性、起泡性及起泡稳定性等大大改变.大豆多肽具有良好的溶解性,在蛋白质的等电点附近,不受pH值的影响,且具有高浓度、低粘度的特点,以及良好的吸湿性、保湿性和热稳定性和强起泡能力.     

CPP生产副产物--CNPP酶膜耦合法 制备ACE抑制肽研究

采用酶解与膜分离耦合的方法,以酶膜耦合法生产酪蛋白非磷酸肽(CPP)得到的副产物——酪蛋白非磷酸肽(CNPP)为原料制备高活性ACE抑制肽.用Protease N、胰蛋白酶、Fla-vourzyme、AS1398、酸性蛋白酶等几种蛋白酶对经过酶膜耦合制备的酪蛋白非磷酸肽进行二次酶解,同时与1 K膜分离耦合,然后对二次酶膜耦合所得产物的ACE抑制活性进行比较.结果表明,Protease N比其他几种蛋白酶更适合用于酪蛋白非磷酸肽制备高活性的ACE抑制肽,其产物的蛋白质量浓度为1 g/L时的ACE抑制率达到55.60%.     

双酶法水解对大豆寡肽苦味的影响

大豆寡肽具有多种生理功能,但大豆分离蛋白在酶水解过程中生成的苦味限制了大豆寡肽在食品中的应用．文中利用单一酶Promatex和双酶Promatex／Flavourzyme对大豆分离蛋白进行水解,在相同的水解度和肽链长度下,比较水解方法对大豆寡肽溶液苦味的影响．结果表明,采用双酶Promatex／Flavourzyme分步水解大豆分离蛋白生产大豆寡肽,不但水解液的苦味值大大降低,而且生产周期明显缩短．     

重组Bowman-Birk型大豆胰蛋白酶抑制剂的性质及抑制机理

利用大肠杆菌表达系统,成功表达并纯化获得了重组Bowman-Birk型大豆胰蛋白酶抑制剂(rBBTI).对比研究了天然Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制剂(BBTI)和rBBTI的酶学性质和稳定性,以及分别抑制胰蛋白酶和糜蛋白酶的抑制动力学.结果表明:rBBTI和BBTI都有较好的热稳定性,pH对rBBTI的活性影响...     

响应面法优化酶解鱼鳞制备ACE抑制肽的研究

鱼鳞是鱼类加工的下脚料之一,含有丰富的蛋白质和矿质元素等营养物质,是非常好的可利用生物资源. 文中研究了碱性蛋白酶酶解鱼鳞制备ACE抑制肽的优化工艺. 以ACE抑制率为指标,在酶解温度、酶解pH、加酶量、底物质量浓度等条件下先进行单因素实验,在此基础上运用响应面法优化碱性蛋白酶酶解鱼鳞制备ACE抑制肽的工艺条件. 结果表明：在加酶量61%(约12 000 U/g)、pH 89、温度547 ℃的条件下酶解2 h,ACE抑制率理论值为8536%,实际酶解物的ACE抑制率为862%,相对误差为091%.     

地黄功能因子提取物体外抗氧化活性及α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

通过体外试验,探讨了DHTW抗氧化活性及α-葡萄糖苷酶的抑制活性,为地黄降糖功能因子的开发利用提供理论依据.采用紫外分光光度法(UV)测定DHTW清除DPPH、ABTS等自由基的能力,利用酶标仪测定DHTW抑制α-葡萄糖苷酶的活性.结果表明：(1)DHTW均具有抗氧化活性,质量浓度在0～6 mg/mL内,随着浓度的增加,抗氧化活性也不断增加,当溶液达到一定浓度后,抗氧化性趋于稳定.(2)DHTW的DPPH自由基清除能力IC₅₀值分别为：醇洗脱物DHY(0.087 mg/mL)、粗提物DHC(2.987 mg/mL)、水洗脱物DHS(3.024 mg/mL),故自由基清除能力表现为：DHY>DHC>DHS.(3)DHTW的ABTS自由基清除能力IC₅₀值分别为：DHY(0.137 mg/mL)、DHC(1.463 mg/mL)、DHS(2.168 mg/mL),ABTS自由基清除率表现为：DHY>DHC>DHS.(4)DHTW对α-葡萄糖苷酶均有明显的抑制作用,其中,DHY有较明显的抑制能力,α-葡萄糖苷酶抑制活性明显优...     

不同厂家豆豉理化指标及降血压ACE抑制活性的测定与评价简

对3个厂家(Y1,Y2,Y3)生产的永川豆豉的理化指标、水提物血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性等指标进行测定与评价,分别用直接干燥法、灼烧重量法、半微量凯氏定氮法、索氏抽提法对其水分、灰分、总蛋白、脂肪等营养指标进行测定,还原糖和总糖百分比通过DNS比色法测定,褐变度和ACE抑制活性分别采用分光光度法和HPLC法测定.结果显示,样品Y2的ACE抑制率和脂肪百分比均最高,分别为83.74%,12.92%;Y1中蛋白质百分比和褐变程度最高,其余指标为Y3最高,说明不同厂家生产的豆豉产品,其营养、感官及功能活性等指标均存在一定差异,工艺过程对豆豉相关品质的影响需要进一步研究.     

血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的酶法制备

以扇贝裙边的酶解产物——蛋白多肽对ACE活性的抑制率作为控制水解程度的指标,确定制备ACE活性抑制肽的最佳酶种及酶解工艺技术条件.通过胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合风味酶、枯草杆菌蛋白酶5种酶酶解扇贝裙边得到的蛋白多肽对ACE抑制能力的比较发现,5种酶在不同酶解时间所得到的酶解蛋白多肽都具有一定的ACE抑制能力,其中胃蛋白酶酶解蛋白多肽的ACE抑制率最高,为91.33%;再经L9(3)4正交实验对胃蛋白酶酶解工艺条件进行优化,确定酶解反应最佳条件是酶量400 U.g-底1物,pH 2.5,温度32℃,底物浓度(原料∶水)1∶2,酶解时间3 h;试验结果还表明,单酶(胃蛋白酶)的酶解蛋白多肽比复合酶(复合风味酶)和双酶(胃蛋白酶 木瓜蛋白酶)的酶解蛋白多肽对ACE活性的抑制能力都强.     

鲷鱼鳞多肽的酶法制备及抗氧化活性研究

以鲷鱼鳞为原料,经物理方式处理后,采用单因素实验考察液料比、pH值、温度、酶底比及酶解时间对鲷鱼鳞酶解液水解度和DPPH自由基清除率的影响.结合响应面优化设计对酶解条件进行优化,结果在液料比为28∶1、酶底比7.0%、pH值7.3、50℃、酶解6 h条件下,所得酶解液水解度为10.35%,DPPH自由基清除率为82.33%.DPPH自由基清除、羟基自由基清除、还原力、金属螯合测试表明,酶解产物的抗氧化活性与浓度呈现剂量依赖性,具有抗氧化活性.分子量测定及氨基酸组成分析表明,酶解产物含有大量的寡肽,相对分子质量分布区间为180~1 000 u,其富含甘氨酸、丙氨酸、羟脯氨酸,且含有多种人体必需的氨基酸.     

大豆多肽对酵母细胞增殖及耐冻性的影响

酵母细胞的活性和耐冻融性对于发酵制品和冷冻面团技术具有十分重要的影响。将大豆多肽、酪蛋白胨、酵母氮源三种不同的氮源加入培养基培养酵母细胞,通过对生长曲线、细胞湿重、面团发酵和冷冻后面团发酵及细胞存活率的比较,评价大豆多肽对酵母细胞活性及耐冻能力的影响。结果表明,随着培养基中大豆多肽量的增加,所得的酵母细胞生物量增加,添加量超过25g/L以后,酵母细胞生物量不再有明显增加,25g/L是大豆多肽的最适添加量。与相同量的其他氮源相比,大豆多肽作为培养基氮源得到的酵母细胞在冷冻后存活率更高,其发酵面团仍能够保持较好的发酵力。大豆多肽能够促进酵母细胞增殖、增强酵母细胞的耐冻性、提高面团的发酵效果。     

分光光度法测定盐源山蛭素对凝血酶的抑制活性

报告了一实用的凝血酶抑制剂抑制活性的测定方法——发色底物分光光度法；以发色底物S—2238与标准凝血酶反应，测定未抑制的吸光度Ao，同时以发色底物S—2238与凝血酶抑制剂盐源山蛭素和标准凝血酶反应测定抑制吸光度As，然后以As／Ao计算盐源山蛭素的抑制活性a1．实验证明，这种对盐源山蛭素抑制活性的测定方法简便易行、重复性高、偶然误差小、可信度高．     

模拟口腔加工对馒头体外淀粉消化特性的影响

为探究不同口腔加工方法对体外淀粉消化特性的影响,以青稞馒头和小麦馒头为实验材料,研究了5种模拟口腔加工方法(切块、切块加涡旋、切块加研磨、切块加涡旋并与人工唾液混合、切块加研磨并与人工唾液混合)对淀粉消化特性的影响,并以体内口腔加工为对照,以期优化馒头类产品的体外模拟淀粉消化方法。结果表明:体外模拟口腔加工后的食团粒径(155~350μm)和含水量(62%~64%)均高于体内口腔咀嚼(110~300μm、57%~59%);而模拟口腔加工的食团硬度(0.73~3.77N)低于体内口腔咀嚼(2.44~4.39N)。与未添加人工唾液组相比,添加人工唾液后得到的模拟口腔加工食团在物理特性和消化特性方面均更接近于体内口腔咀嚼。所有的体外方法中,切块加涡旋并与人工唾液混合的方法最能够模拟体内咀嚼,可作为馒头类制品体外模拟淀粉消化过程中的前处理方法。机械破坏的方式和水平以及固体颗粒与唾液混合的方式都会影响团块的形成,进而影响馒头的消化动力学。相关性分析结果显示,馒头类制品在消化后期的最终水解率与粒径呈显著负相关(r=-0.93494,P＜0.05)。考量各指标,切块加涡旋并与人工唾液混合的体外模拟口腔处理方式最适合馒头类制品的体外模拟淀粉消化。     

9种中草药对鳗鲡病原菌体外抑菌活性的影响

对3株染病的日本鳗鲡肾脏中分离的致病菌进行活化,同时采用二倍稀释法以黄连、大黄、穿心莲、大青叶、黄岑、黄柏、鱼腥草、虎杖、苦参9种单味煎剂对3株分离菌和爱德华氏菌及嗜水气单胞菌的标准株进行最小抑菌浓度和最小杀菌浓度的测定。结果显示大黄及虎杖体外抑菌活性最为理想。     

大球盖菇多糖的体外模拟消化研究

文章从大球盖菇子实体中提取分离得到均一组分多糖(SP-1a),采用体外模拟唾液、胃液和肠液模型,并结合理化性质与体外抗氧化活性,研究SP-1a在体外模拟消化体系中的变化。结果表明：唾液对SP-1a无显著影响;而在模拟胃液和肠液中,随着还原糖质量浓度的不断增加,SP-1a的分子量逐渐减小,其表面形态由大块片状变为网状聚集体,并且在高温下显现出不同的热解反应。此外体外抗氧化实验结果表明,SP-1a胃消化产物对·OH具有较强的清除能力,肠消化产物对DDPH自由基具有较强的清除能力及还原力。因此,SP-1a可在模拟胃肠体系中被消化降解,且其胃肠消化产物具有较强的抗氧化活性。