米邦塔仙人掌胶多糖化学组成的检测

目的研究米邦塔仙人掌胶多糖的物理及化学性质。方法采用水提—醇沉法提取米邦塔仙人掌中的胶多糖,用气相色谱分析其单糖的组成及摩尔比,测定胶多糖的总糖含量及糖醛酸含量,分析其紫外及红外光谱。结果其多糖的单糖组成为:鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、葡萄糖醛酸及半乳糖醛酸,其物质的量比为13.49∶1∶61.83∶26.37∶3.49∶6.70∶66.76∶6.68∶29.81。米邦塔仙人掌的总糖含量为91.10%,糖醛酸含量为18.78%。紫外光谱表明该多糖可能含有糖蛋白,红外光谱表明其具有多糖特征吸收。结论米邦塔仙人掌多糖是一种主要由阿拉伯糖和半乳糖组成,并含有少量的鼠李糖、木糖和半乳糖醛酸以及微量的甘露糖、葡萄糖、岩藻糖和葡萄糖醛酸的胶性多糖,其糖含量测定为91.10%,可能含有少量糖蛋白。     

试述鲍类前合子生殖隔离

生殖隔离是一个最重要的生物过程。虽然有许多机理还是未知的,但已研究清楚了物种之间的生殖隔离有两种方式。即通过配子不成熟、不受精的前合子生殖隔离和杂交后代的不育、不成活的后合子生殖隔离。在动物受精过程中,两个配子的质膜在接触融合之前,精子必须穿透包绕在卵细胞外的物质,为完成这一过程,大多数种类的动物都发展了精子结构,使其带有顶体泡,它通过泡吐作用释放具有溶解作用的蛋白质,由它担任穿透卵细胞外被的作用。成熟的鲍精子具有发达的顶体泡,里面含有多种蛋白质,但其中的两种蛋白质－细胞溶素（16kDa）和18kDa蛋白质与生殖有关,是生殖隔离的主要分子结构。当精子粘附到卵黄外膜上时就诱发了顶体反应,释放的16kDa蛋白质利用非酶解反应,在卵黄膜上穿一个小孔,精细胞便从此处穿过卵黄膜与卵细胞融合。鲍类的卵细胞由一层又厚又复杂的细胞外基质包被,并由胶状物、卵黄膜和细胞表面壳等几种成分组成。超微结构研究发现：胶状物位于卵细胞的最外层,由疏松排列的纤维组成,它在鲍类受精中的作用还没有研究不禁。鲍类的ESC层与海胆的卵黄膜十分相似,含有精子结合受体,它是不分支的糖蛋白,同同细胞溶素结合的惟一成分,它具有种属特异性。每个受体大约同60个细胞溶素结合。所以种间受精的抑制因素也许并不只有卵黄膜与溶解蛋白的反应,还可能有精子对ESC层的粘接作用。     

柱前衍生化高效液相色谱法测定当归酸性多糖单糖组成的新方法

首次建立柱前衍生化高效液相色谱法分析当归酸性多糖中糖醛酸、氨基糖和中性糖的方法。D-甘露糖、D-葡萄糖胺、L-鼠李糖、D-半乳糖胺、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖和D-岩藻糖等10种单糖经柱前衍生化法处理后作为标准品。色谱条件:Hypersil BDS C18色谱柱(4.6 mm i.d.×250 mm,5μm),流动相由乙酸铵水溶液(100mmol/L,p H=5.0)、乙腈和四氢呋喃以81∶17∶2的体积比组成,流动相流速1.0 m L/min,检测波长250 nm,柱温25℃。实验结果表明,当归酸性总多糖是由D-甘露糖、D-葡萄糖胺、L-鼠李糖、D-半乳糖胺、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸和D-葡萄糖以1.5∶14.1∶1.7∶1.6∶2.0∶2.3∶1.0的摩尔比例组成。     

鲍配子识别蛋白的进化

在鲍的繁殖过程中,配子的识别表现出种的特异性,精子顶体泡内的细胞溶素(lysin)可以专一性地在卵黄膜上钻一个孔,精子便从此孔进入与卵细胞相互融合,完成受精.Lysin通过正向选择定律快速进化,而卵膜上的细胞溶素受体(VERL)为lysin的分化提供了选择压力,它是一个自由重复的序列,进行协同进化,这种协同进化可以解释精子lysin的快速适应性进化,并提供了一种可理解的分子机制来解释种特异性的繁殖鲍新种的产生.     

野花生豆(Crotalaria mucronata)凝集素的细胞表面受体的研究

研究了异硫氰基荧光素和~(125)I标记的野花生豆凝集素,对A型细胞和牛精细胞表面的凝集素受体的定位、分布和数量。结果表明这些细胞表面的凝集素受体比较复杂,难以用一般动力学方法加以说明。D-葡萄糖、D-甘露糖、D-半乳糖和N-乙酰半乳糖胺等糖类和Con A、PHA、BSA对标记凝集素与A型细胞结合的影响各不相同。通过饱和曲线计算出A型细胞和牛精细胞表面的凝集素受体数目,分别为1.29×10~7和3.09×10~6个/细胞.     

金顶侧耳多糖同Con A相互作用的研究

从金顶侧耳子实体中分离纯化三种水溶性多糖．Ｇ·Ｃ分析表明ＰＣ－２由葡萄糖、半乳糖、岩藻糖组成；ＰＣ－３由半乳糖、甘露糖组成；ＰＣ－４是单一的葡聚糖．经琼脂糖双扩散，ＰＣ－３同ＣｏｎＡ间可产生沉淀线．定量沉淀反应与ＣＤ谱分析均表明ＰＣ－３通过非还原末端的α－Ｍａｎ与ＣｏｎＡ形成了多糖—蛋白质复合物．部分酸水解实验表明，ＰＣ－３同ＣｏｎＡ的作用与糖链的分支程度有关．高碘酸氧化与硫酸化修饰则使ＰＣ－３同ＣｏｎＡ的结合能力降低或丧失．     

荧光法在对-二苯氨基苯基硼酸(DPBA)对单糖的识别作用中的应用

采用荧光光谱法研究了具有分子内电荷转移性质的一种新型硼酸衍生物,对-二苯氨基苯基硼酸(DPBA)与羧甲基-β-环糊精(CM-β-CD)的包合行为,并考察了包合物DPBA在CM-β-CD存在下与四种单糖分子的识别作用,实验结果表明,DPBA与果糖,葡萄糖,半乳糖,甘露糖分子的结合计量比均为1∶1,结合常数从大到小的顺序为:D-果糖>>D-甘露糖>D-半乳糖≈D-葡萄糖.CM-β-CD对DPBA具有增溶增敏性,从而能够在水溶液中更好地对糖分子进行识别.     

小球藻和球等鞭金藻胶体中多糖的醛糖组成

采用切向超滤技术从微藻培养液浓缩得到胶体,分析其多糖的醛糖组成.结果表明,小球藻与球等鞭金藻胶体的多糖由鼠李糖、L 岩藻糖、D 阿拉伯糖、D( )木糖、D 甘露糖、葡萄糖和D 半乳糖等7种醛糖组成.D 阿拉伯糖和D 半乳糖占绝对优势,鼠李糖丰度很低.小球藻胶体的L 岩藻糖和葡萄糖是球等鞭金藻胶体的2～3倍,而D( )木糖和D 甘露糖比球等鞭金藻低27%～32%.本文的结果印证了浮游植物是海洋胶体的生物来源之一.     

不同癌细胞系中gp96的唾液酸化程度研究

以自行合成的叠氮标记的甘露糖进行细胞代谢,代谢后以叠氮化的唾液酸替代天然的唾液酸于细胞糖蛋白的糖链中呈现,依赖于点击化学方法,建立分离唾液酸化糖蛋白的方法,并研究gp96蛋白在不同癌细胞系中的唾液酸化程度.经酶联免疫吸附反应检测各细胞系均含有gp96蛋白,且含量无显著差异.而分析gp96的生物素化和唾液酸修饰程度,发现...     

甘薯糖蛋白的分离、纯化和结构分析

采用二乙基氨基乙基52和葡聚糖凝胶G100柱层析法,从甘薯中分离纯化甘薯糖蛋白,并对其进行结构分析．用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检验纯度和分子质量;根据β-消除反应判断糖肽键的连接方式;利用气相色谱法分析单糖组成;通过红外光谱推断糖苷键类型．研究结果表明,甘薯糖蛋白是以共价键连接而成的结合蛋白,呈白色粉末状,易溶于水,分子质量约为62ku,属O-连接方式,含有β-糖苷键和典型酰胺羰基结构,蛋白质含量为12．01％,糖链部分含有岩藻糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖．     

不同产地佛手水溶性多糖的分离纯化及初步分析

醇提后的佛手经热水提取并除去蛋白质,乙醇沉淀得到粗多糖．用DEAE葡聚糖A-50离子交换色谱分离得到不同的多糖：金佛手和建佛手各分离得到3种多糖,川佛手分离得到4种多糖．将佛手多糖经酸水解后用硅胶G薄层色谱分析,金佛手多糖和建佛手多糖各检测到3种单糖成分：甘露糖、葡萄糖和半乳糖,川佛手多糖检测到5种单糖成分：鼠李糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖．红外光谱分析表明,3种产地佛手多糖的吸收光谱均具有典型的吡喃糖特征吸收峰;同时,金佛手多糖还具有较强的呋喃环特征吸收峰．     

黄蜀葵多糖的分子质量测定及单糖组成分析

采用凝胶渗透色谱法测定了4种黄蜀葵多糖的相对分子质量;选用糖分离柱(CarboPacPA200,3×250 mm),以10 mmol.L-1NaOH溶液为流动相、Au为工作电极、Ag/AgCl为参比电极的脉冲积分安培离子色谱法分离测定了4种多糖水解产生的单糖成分及相对含量.结果表明:凝胶渗透色谱法测定4种黄蜀葵多糖的重均分子量分别为4.23×103、6.11×105、4.47×103、6.01×105Da;离子色谱法检出4种多糖均含有半乳糖、葡萄糖、甘露糖以及极少量的阿拉伯糖,其中半乳糖、葡萄糖和甘露糖的物质量之比分别为0.29∶1.00∶0.41、0.56∶0.13∶1.00、0.10∶1.00∶0.11和0.55∶0.17∶1.00;检出限在1.63～2.80μg.L-1范围,相对标准偏差在2.55%～4.67%之间,样品加标回收率为95.8%～107.9%.     

Novel mannosidase inhibitor blocking conversion of high mannose to complex oligosaccharides

Many secretory and membrane proteins are glycoproteins carrying asparagine-linked (N-linked) oligosaccharides. There are two types of N-linked glycans, referred to as high-mannose and complex type, respectively. Biosynthesis of N-linked glycans of the complex type proceeds via a high-mannose intermediate. After the initial transfer of a high-mannose oligosaccharide with the composition (Glc)3(Man)9(GlcNAc)2 from a lipid carrier to the nascent polypeptide chain, trimming reactions take place. Trimming glucosidases remove the glucose residues quantitatively and mannosidases IA/B and II can remove all but three mannose residues. After trimming, terminal sugars such as N-acetylglucosamine, galactose, sialic acid and fucose may be added and result in the conversion to a glycan of the complex type. Because suitable inhibitors were lacking, it was difficult to assess the importance of the trimming reactions for proper intracellular traffic, modification reactions other than the addition of terminal sugars, or as regulatory steps in glycoprotein processing. Here we describe the action of 1-deoxymannojirimycin (1,5-dideoxy-1,5-imino-D-mannitol, dMM; Fig. 1) on the biosynthesis of IgM and IgD. dMM is the mannose analogue of 1-deoxynojirimycin (dNM; Fig. 1), itself a glucosidase inhibitor. We present evidence that dMM is a mannosidase inhibitor. In vivo dMM inhibits the equivalent of the mannosidase IA/B activities and blocks conversion of high-mannose to complex oligosaccharides. It is the first such inhibitor to be reported. Interference with the biosynthetic pathway of N-linked glycans could prove to be a powerful way to manipulate carbohydrate structure in vivo.     

Isolation, chemical characteristics and immunity activity of an extracellular polysaccharide EPSⅠ isolated from Antarctic bacterium Pseudoalteromonas sp. S-15-13

A new extracelluar polysaccharide (EPS) was isolated and purified from Antarctic bacterium S-15-13, identified as Pseudoalteromonas sp. After being separated and purified by DEAE-Sephadex A-50 ionexchange and Sephadex G-100 gel chromatography, two mains fractions (EPSⅠ and EPSⅡ ) were obtained. EPSⅠ was composed of mannose, glucose and galactose with a molecular weight of 23kDa and EPSⅡ was composed of mannose only with a molecular weight of 62kDa. The effect of the polysaccharide EPSⅠ on the cellular immune response of mice was investigated. Results demonstrated that EPSⅠ could markedly facilitate lymphocyte proliferation, and might be a strong immunomodulator.     

高效液相色谱测定麦糟水解液中单糖和有机酸

建立在麦糟水解液中,单糖、有机酸和糖醛酸等的高效液相色谱测定法.在确定的色谱条件下,葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李糖、甲酸、乙酸、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸的分离状况良好,其峰面积与质量浓度的线性关系良好,相关系数R2值为0.991 2~0.999 7,回收率为99.40%~105.90%.木糖、半乳糖、甘露糖在AminexHPX-87H柱上不能分离,但可用ZORBAX Carbohydrate Analysis柱分离.采用示差折光检测器检测,柱温为30℃,流动相中乙腈和水的体积比为80∶20,流速为1.0 mL.min-1,进样量为0.02 mL,外标法定量,结果表明,其峰面积与浓度线性关系良好,相关系数R2值为0.995 9~0.999 1,回收率为99.99%~102.70%.     

半知菌曲霉族真菌胞外多糖的研究Ⅱ:爪哇正青霉胞外多糖化学结构的研究

 经形态鉴定和18srRNA基因组序列分析,编号Ym31794菌株的分类学地位属于半知菌类丛梗孢科曲霉族青霉属丝状真菌,种名爪哇正青霉(Eupenicillium javanicum).该菌发酵液经离心弃菌体,除脂类及乙醇分级提取,分离、纯化的胞外多糖相对分子量为2.6×10⁴,糖的质量分数为89%.真菌胞外多糖经红外光谱(IR),簿层层析(TLC),色质联用(GC-MS),核磁共振(¹³C-NMR,¹H-NMR)等分析可知爪哇正青霉菌胞外多糖为1-6连接的葡萄糖和1-2连接半乳糖构成主干,侧链由1-3连接的甘露糖和1-2连接的葡萄糖构成,结构应为吡喃糖.     

高效液相色谱法测定龙眼肉多糖的单糖组成

为了研究分析龙眼肉多糖的单糖组成,采用水提醇沉法提取龙眼肉多糖,用三氟乙酸水解多糖成单糖,经衍生化试剂1-苯基-3-甲基-吡唑啉酮(PMP)衍生化后,利用高效液相色谱法(HPLC)分析单糖的PMP衍生物。结果表明,龙眼肉多糖由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖7种单糖组成。龙眼肉多糖是一种酸性杂多糖,其中以葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、半乳糖醛酸为主。     

木枣多糖的理化特性研究

木枣经超声波辅助酸性缓冲液浸提、醇沉、脱蛋白和脱色工艺制得木枣多糖,测定其溶解性与单糖组成,采用Q2000型差示扫描量热仪和ZX7M-AR1000型流变仪研究木枣多糖的稳定性和流变性,为其在食品工业中的应用提供理论数据支持。实验结果表明,木枣多糖溶于热水,难溶于冷水,不溶于有机试剂；是由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成的杂多糖。热学特征分析表明木枣多糖具有较好的热稳定性；木枣多糖溶液为非牛顿假塑性流体,表现出剪切变稀的特性；因此木枣多糖适用于在食品生产工业中做稳定剂。     

一种新型荧光传感器用于果糖的识别与检测

以间氨基苯硼酸和间苯二胺为功能单体,过硫酸铵为引发剂,在水溶液中通过自由基聚合反应得到(间氨基苯硼酸–间苯二胺)聚合物.通过荧光光度计检测该聚合物激发波长为297,nm,发射波长为375,nm.实验证明糖类可以淬灭聚合物的荧光,其荧光猝灭程度具有果糖甘露糖葡萄糖蔗糖的规律.在pH 10.0条件下,聚合物的相对荧光强度随果糖浓度的增加而降低,线性范围为10-7~10-2,mol/L,最低检测限为10-8,mol/L,可用于饮料中果糖含量的测定,具有一定的应用价值.     

水杉木材半纤维素中各种高聚糖的分离和提纯

<正> 半纤维素是木材的主要组成之一。国外较早就开始了分离半纤维素各种成份的工作,到本世纪六十年代,研究已渐趋成熟。我国自五十年代以来也开始这方面的研究工作,但尚停留在综纤维素阶段。探讨半纤维素抽提以及其中各种高聚糖的分离和提纯,不仅是研究木材半纤维素中各种成分的性质和结构的前提,而且直接关系到木材的综合利用。 水杉(Metasequoia glyptostroboides Hu et Chung)是我国特有的古老珍贵针叶树种,它不仅适应性强、生长快,而且树形优美、主干通直,为绿化祖国山河的优良树种之一。各地均有栽植。水杉的化学组成和物理力学性质,国内外已进行了一些研究;半纤维素方面,则尚未见有专文论及。一些研究者认为:“水杉的纵向抗压强度、抗剪强度较小,材质软而脆,不宜作结构用材,但可能作制浆用材。”“水杉纤维长,长宽比大,壁腔比小,为优良的纤维原料,适于造纸”。鉴于目前我国造纸工业长纤维原料短缺的情况,作者认为,选择水杉进行半纤维素中各种高聚糖分离和提纯的研究,有其现实意义。 一、试 验