同核双卟啉金属配合物的合成及其对细胞色素P450模拟

合成了Ｆｅ（Ⅲ）－Ｆｅ（Ⅲ），Ｍｎ（Ⅲ）－Ｍｎ（Ⅲ），Ｃｏ（Ⅱ）－Ｃｏ（Ⅱ）３种同核双卟啉金属配合物，用元素分析、紫外可见光谱、红外光谱、１Ｈ－核磁共振谱和顺磁共振谱等进行表征．研究了这些同核双卟啉金属配合物模拟细胞色素Ｐ４５０催化环己烷羟化作用，实验结果表明，同核双卟啉金属配合物具有较高的催化活性，其催化活性顺序为：Ｆｅ（Ⅲ）－Ｆｅ（Ⅲ）＞Ｍｎ（Ⅲ）－Ｍｎ（Ⅲ）＞Ｃｏ（Ⅱ）－Ｃｏ（Ⅱ）     

锰卟啉模拟细胞色素P-450催化环己烷单充氧的研究

合成了Mn(Ⅲ)-Mn(Ⅲ)单核和双核金属卟啉配合物，用元素分析、紫外可见光谱进行表征．研究了这些双核金属卟啉模拟细胞色素P-450催化环己烷单充氧作用及金属卟啉在2种反应体系中催化性能．对于催化活性随着2个金属卟啉之间碳链增长而增长，反应体系的改变引起催化活性的改变的规律与前面铁卟啉是一致的．但锰卟啉催化活性普遍高于其相应的铁卟啉，而选择性普遍低于铁卟啉．     

铁(Ⅲ)卟啉丙烯酸酯-苯乙烯共聚物的合成及其催化环己烷羟化作用

合成了铁(Ⅲ)卟啉丙烯酸酯-苯乙烯共聚物并以UV-V IS,IR,ICP和相对分子质量测定进行了表征。研究了共聚物模拟细胞色素P450催化环己烷羟化作用,发现该共聚物具有比未以高分子负载的铁(Ⅲ)卟啉高很多的催化活性,循环使用多次后其催化活性基本不变,以铁(Ⅲ)卟啉周围微环境的观点讨论了实验结果。     

双核金属卟啉模拟细胞色素P-450催化环己烷单充氧反应的研究

合成了Fe(Ⅲ)-Fe(Ⅲ)3种双核金属卟啉配合物，用元素分析、紫外可见光谱进行表征，另外还有单核金属卟啉配合物和6个中间体．研究了这些双核金属卟啉模拟细胞色素P-450催化环己烷单充氧作用及金属卟啉在两种反应体系中催化性能的研究．同时还与单核金属卟啉的催化性能进行比较．实验结果表明，双核金属卟啉的催化活性随着两个金属卟啉之间碳链的增长而增长，反应体系的改变会引起金属卟啉催化活性的变化，总体上，双核金属卟啉的催化活性要高于单核金属卟啉．     

细胞色素P450表达在植物防御反应中的作用

细胞色素P450是广泛存在植物体中的一种多功能氧化酶,它在植物对病原侵袭的防御反应中起着重要的作用.本文从植物P450的多样性,及在寄主-病原物不亲和互作中的特异表达,证明了P450参与植物的抗病反应;同时,分析P450在植物抗病反应的作用途径,说明P450在植物抗病基因工程中存在巨大的应用潜力.     

尾式金属卟啉配合物的研究(Ⅶ)邻-苯并唑类杂环基尾式铁(Ⅲ)卟啉的合成及催化性质

合成并表征了氯化｛５－（邻－（４－（２－巯基苯并咪唑基）正丁氧基）苯基－１０，１５，２０－三（对－甲基）苯基卟啉铁（Ⅲ）｝（ｏ－ＢｚＩｍＴＭＰＰＦｅ（Ⅲ）Ｃｌ），氯化｛５－（邻－（４－（２－巯基苯并噻唑基）正丁氧基）苯基－１０，１５，２０－三（对－甲基）苯基卟啉铁（Ⅲ）｝（ｏ－ＢｚＴａＴＭＰＰＦｅ（Ⅲ）Ｃｌ），氯化｛５－（邻－（４－（２－巯基苯并口恶唑基）正丁氧基）苯基－１０，１５，２０－三（对－甲基）苯基卟啉铁（Ⅲ）｝（ｏ－ＢｚＡ－ｚＴＭＰＰＦｅ（Ⅲ）Ｃｌ）等配合物，详细研究了丙酮／水介质中，在分子氧和抗坏血酸存在下，这些配合物对环己烷羟化反应的催化性质．结果表明，在无外加轴向配体时，由于尾端基团的分子内轴向配位作用，这些配合物具有较高的催化活性；还原剂的用量对催化效率也有直接的影响     

诺氟沙星对水生生物细胞色素P450作用机制研究进展

环境中的抗生素主要来源于生活污水、医疗废水以及水产养殖废水等.2013年中国抗生素总使用量约为1.62×10⁵ t,其中48%为人用抗生素,其余为兽用抗生素.大量具有活性的抗生素经地表径流和城市排污管道最终积聚到河流湖泊中.这些活性物质会对水生生物产生危害,尤其是在较长的时间跨度上,这种危害会进一步扩大.文章概述了近几年基于细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)作为检测指标,诺氟沙星(norfloxacin,NFLX)对一些水生生物的生态毒理效应.同时介绍了NFLX对于选取的指标CYP450的影响机制,以及检测这些指标的可行性方法.     

细胞色素P450与农药相互作用及其机理研究

综述了细胞色素P450的种类和功能多样性,介绍了细胞色素P450参与除草剂代谢及其作用机理．同时,简述了细胞色素P450 14DM与杀菌剂特异性作用的机制．报道了我们从抗除草剂的瑞士黑麦草中克隆CYP8181同源基因及其功能的研究,以及柑橘绿霉菌细胞色素P450 14DM基因的克隆表达．为深入研究杀菌剂作用细胞色素P450 14DM的机理从而设计以P450 14DM为特异性靶标的新型农药、以及进一步研究细胞色素P450酶系与除草剂代谢的关系打下了良好的基础．     

川丁特罗对大鼠细胞色素P450酶的影响

研究新型抗哮喘药川丁特罗（trantinterol）对大鼠细胞色素P450酶的影响. 大鼠连续7 d灌胃给予川丁特罗后, 测定肝微粒体中CYP450的质量摩
尔浓度和主要3种亚型CYP1A2,CYP2D6和CYP3A4活性的变化. 实验结果表明, 与对照组相比,  川丁特罗给药组的大鼠肝微粒体中CYP450的总质量摩尔浓度未受影响(P>0.05), 对主要亚型CYP1A2,CYP2D6和CYP3A4的活性也无影响(P>0.05), 表明该药物对肝微粒体中的主要代谢酶无抑制或诱导作用.     

Cytochrome P450 Monooxygenase Immobilization as a Model of Herbicide Metabolism in vitro

To investigate herbicide metabolism in vitro by cytochrome P450 with stable enzymatic activity, cy-tochrome P450 is immobilized in silk fibroin. The enzymatic activity of immobilized cytochrome P450 is maintained above 80% after repeated batch experiments for 10 times. Moreover, the enzymatic activity of immobilized cytochrome P450 is kept as relatively high as 73.8% after storage for two months at 4℃. In addition, immobilization can improve the temperature and pH stability of cytochrome P450. Immobilized cytochrome P450 has the similar affinity Km values for herbicide chlorsulfuron and triasulfuron as the free cytochrome P450. In the case of chlorosulfuron, affinity Km value is 53μmol/L for free cytochrome P450,and 63μmol/L for immobilized cytochrome P450, respectively. In the case of triasulfuron affinity, Km value is 36μmol/L for free cytochrome P450, and 44μmol/L for immobilized cytochrome P450, respec-tivily. Immobilized cytochrome P450 will be convenient, rapid, stable and continuous for herbicide metabolism in micro-bioreactor in vitro.     

细胞色素P450酶生物转化及新催化反应的最新进展

细胞色素P450酶(P450s或CYPs)是一类广泛存在于生命体中,依赖于亚铁血红素催化多种底物的单加氧酶。一方面,它涉及许多高活性天然产物生物合成的关键步骤,对其生物转化研究有助于提高活性分子的产率和活性;另一方面,其催化涉及金属元素以及辅助因子,其蛋白质改造和新催化反应的研发也不断取得新突破。本文就细胞色素P450酶这两方面的最近研究进展进行了总结与论述。     

凹土玉米芯垫料对大鼠肝微粒体细胞色素P450 酶系的影响

摘要: 目的观察凹土玉米芯垫料对大鼠肝脏细胞色素P450( CytP450) 、细胞色素b5( Cytb5) 含量及大鼠肝微粒 体CYP1A2 和CYP2E1 活性的影响。方法将SD 大鼠随机分为普通刨花组、玉米秸组、凹土玉米芯组和对照组,饲 养30 d、60 d、90 d 时测定大鼠肝脏微粒体CytP450、Cytb5 的含量和CYP1A2,CYP2E1 活性。结果60-90 d 时普 通刨花组、玉米秸组与空白对照组之间CytP450 含量有显著性差异( P ＜ 0. 05) ,凹土玉米芯组与对照组之间没有显 著性差异( P ＞ 0. 05) ; 肝微粒体Cytb5 含量、CYP1A2、CYP2E1 活性各组均没有明显差异( P ＞ 0. 05) 。结论凹土玉 米芯对大鼠肝脏细胞微粒体CytP450、Cytb5、CYP1A2 和CYP2E1 没有诱导或抑制作用,普通刨花组对大鼠肝 CytP450 有较强的诱导作用,玉米秸也有不同程度的诱导作用,但低于普通刨花的诱导作用。     

铁卟啉的空间效应对其催化羟基化反应性能的影响

研究了ＴＰＰＦｅＣｌ和６种具有不同空间结构的氯合、中位四（邻烷基苯基）卟吩合铁（Ⅲ）［Ｔ（ｏ－Ｒ）ＰＰＦｅＣｌ，Ｒ＝Ｍｅ、ＥＴ、ｎ－Ｐｒ、ｎ－Ｂｕ、ｉ－Ｐｒ和ｔ－Ｂｕ］催化亚碘酰苯使环己烷羟基化反应。发现邻位烷基取代的铁卟啉的催化速率和催化产率都比ＴＰＰＦｅＣｌ的大，这７种铁卟啉的催化速率和催化产率（％）大小顺序分别为［Ｔ（ｏ－Ｒ）ＰＰＦｅＣｌ，Ｒ＝］ｉ－ｐｒ＞Ｅｔ＞ｔ－Ｂｕ＞ｎ－ｐｒ＞Ｍｅ＞ｎ－Ｂｕ＞ＴＰＰＦｅＣｌ和ｉ－Ｐｒ（５８）＞Ｅｔ（５７）＞ｎ－Ｐｒ（５２）＞Ｍｅ（５０）＞ｎ－Ｂｕ（４８）＞ｔ－Ｂｕ（４６）＞ＴＰＰＦｅＣｌ（３５），根据研究结果，认为邻位烷基的空间作用可能加速了铁卟啉与亚碘酰苯加成中间体中碘—氧键断裂，助进了高价铁氧酰活性中间体形成，提高了催化速率和催化产率。     

细胞色素P450酶系的异源表达研究

传统的药物代谢主要以实验动物为对象进行药物早期及临床研究,近几年来,结合生物化学与分子生物学的发展,药物早期代谢研究进入到药物体外代谢的研究阶段,主要围绕人肝内参与代谢的细胞色素P450家族展开.本文就近年来对此家族酶的异源表达及其在药物代谢中的应用进行了综述.     

重组家蝇细胞色素P450 6A1的大肠杆菌对艾氏剂的生物降解作用

以大肠杆菌为宿主表达家蝇细胞色素P450 6A1(CYP6A1)酶,在CYP6A1基因后面加入人细胞色素P450还原酶CPR基因,验证了CPR酶对CYP6A1酶催化功能的影响,和CYP6A1酶、重组大肠杆菌对艾氏剂的代谢能力.结果表明:CYP6A1蛋白对艾氏剂有环氧化作用,在CYP6A1对艾氏剂催化中起关键作用.将5μmol/L艾氏剂加入重组大肠杆菌菌液8 h可检测到163.36nmol/L艾氏剂环氧化产物狄氏剂,说明CYP6A1-CPR宿主菌对艾氏剂具有代谢能力,可用于艾氏剂污染的土壤的生物降解.     

尖镰孢菌细胞色素P45055A1与NO相互作用的荧光光谱法研究

以大肠杆菌为宿主表达了尖镰孢菌细胞色素P450 55A1(CYP450 55A1),并采用荧光光谱法研究了其与NO的相互作用.结果表明:在大肠杆菌(DE3)中成功表达了具有酶活性的CYP55A1.在280 nm波长激发下,NO的加入使CYP55A1的荧光逐渐降低,但随温度的变化差异较小;在413 nm波长激发下,NO的加入使CYP55A1的荧光逐渐升高,但加入NADH后其荧光又恢复到原来的值.