肌钙蛋白I对小儿心肌炎诊断及与酶学对比研究

目的 评估血清心肌肌钙蛋白I (cTnI) 对小儿心肌炎的诊断价值,并与肌酸激酶(CK)及其同功酶MB(CK-MB)进行对比研究.方法 全自动生化分析仪对cTnI,CK及CK-MB进行定量检测.结果 1)心肌炎组cTnI,CK及CK-MB均明显高于正常对照组(P<0.001).cTnI升高38例,占76%;CK升高21例,占42%;CK-MB升高25例,占50%.cTnI与CK,CK-MB呈正相关关系.2)治疗2周后,cTnI与对照组比较有显著性差异(P<0.001),CK及CK-MB与对照组无显著性差异(P>0.05).3)心肌炎组22例ST-T改变患儿测cTnI升高20例(91%),CK升高8例(37%),CK-MB升高6例(27%).结论 cTnI及CK,CK-MB对小儿心肌炎的诊断均较敏感,其中cTnT对心肌损害的敏感性及特异性均高于CK和CK-MB.cTnI诊断时间窗宽于CK,CK-MB,特异性也高于心肌酶学检查.     

血清肌钙蛋白Ⅰ检测在病毒性心肌炎诊断中的应用

目的　研究肌钙蛋白Ⅰ(CTnⅠ)在病毒性心肌炎诊断中的应用价值.方法　应用定量ELISA法检测血清CTnI,应用生化自动分析仪检测血清肌酸激酶(CK).对40例病毒性心肌炎和30例健康对照组进行对比研究.结果　病例组CTnI检测值显著高于对照组(P<0.01);CTnI在血清中存在时间较长,在不同病程中,CTnI异常率高于CK异常率.结论　CTnI可作为病毒性心肌炎的实验室诊断指标,特别是在亚急性期和恢复期有助于病毒性心肌炎的诊断.     

血清cTnI变化对小儿病毒性心肌炎诊断价值的探讨

目的探讨病毒性心肌炎患儿血清肌钙蛋白I（cTnI）水平的动态变化及诊断价值。方法对近5年来收治的病毒性心肌炎患儿60例分别于入院后2h、24h、72h、7d抽取肘静脉血对其血清中cTnI和肌酸肌酶一肌酸肌酶同工酶（ck-MB）浓度进行测定，同时观察其动态水平变化。结果血清中cTnI和ck-MB均升高。但cTnI较ck-MB有出现时间早，诊断时间窗更宽等特点，在评价心肌损伤敏感度方面：cTnI优于ck-MB（P＜0.01）。结论血清cTnI水平可反映病毒性心肌炎患儿心肌损伤程度，是一个较理想的反映心肌损伤的标志物，可作为诊断小儿病毒性心肌炎的主要诊断指标。     

大强度运动对心肌肌钙蛋白Ⅰ及其降解酶μCalpain的影响

目的:观察急性、慢性大强度运动对血清心肌肌钙蛋白I及其降解酶μCaplpain的影响.方法:慢性运动组大鼠每天进行120min负重8%的游泳训练,每周6d共6周,第6周末进行一次性负重8%的力竭运动,急性运动组饲养到第6周末进行一次性负重8%的力竭运动,安静组常规饲养.各组均24h后取材,检测血清cTnI和心肌组织SOD、CAT活性、MDA含量和μCalpain mRNA表达.结果:急、慢性大强度运动后血清cTnI浓度显著上升,伴随μCalpain mRNA表达增加(P＜0.001),血清cTnI与μCalpain存在显著相关性(P＜0.001),但两个运动组之间血清cTnI水平、μCalpain mRNA表达没有显著差异,血清cTnI与抗氧化酶SOD活性呈显著负相关性.血清cTnI与MDA含量呈正相关,存在显著相关性(P＜0.05).结论:大强度运动可以导致cTnI降解、抗氧化酶活性下降和过氧化物堆积.大强度运动引起氧化应激反应和μCalpain mRNA表达增加,可能是激活μCalpain引起cTnI降解的原因.     

大强度运动对心肌肌钙蛋白I及其降解酶μCalpain的影响

目的:观察急性、慢性大强度运动对血清心肌肌钙蛋白I及其降解酶μCalpain的影响。方法:慢性运动组大鼠每天进行120m in负重8%的游泳训练,每周6d共6周,第6周末进行一次性负重8%的力竭运动,急性运动组饲养到第6周末进行一次性负重8%的力竭运动,安静组常规饲养。各组均24h后取材,检测血清cTnI和心肌组织SOD、CAT活性、MDA含量和μCalpain mRNA表达。结果:急、慢性大强度运动后血清cTnI浓度显著上升,伴随μCalpain mRNA表达增加(P<0.001),血清cTnI与μCalpain存在显著相关性(P<0.001),但两个运动组之间血清cTnI水平、μCalpain mRNA表达没有显著差异,血清cTnI与抗氧化酶SOD活性呈显著负相关性。血清cTnI与MDA含量呈正相关,存在显著相关性(P<0.05)。结论:大强度运动可以导致cTnI降解、抗氧化酶活性下降和过氧化物堆积。大强度运动引起氧化应激反应和μCalpain mRNA表达增加,可能是激活μCalpain引起cTnI降解的原因。     

心肌肌钙蛋白Ⅰ在心血管疾病诊断中的应用

心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)为近年发展起来的心肌组织所特有的酶学标志物.由于cTnI的结构和组织特异性,使其在诊断心肌损伤时具有高度敏感性及特异性,并且明显优于心肌酶谱分析,具有广阔的应用前景.因此对cTnI的生化特性、检测方法及临床意义作一概述.     

心肌肌钙蛋白I-C复合物酶联免疫检测方法的建立

为了制备抗人心肌肌钙蛋白I(cTnI)单克隆抗体、建立检测人cTnI链酶亲和素-生物素双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,用基因工程表达的人cTnI免疫雌性BALB/c小鼠,以杂交瘤技术制备得到三株特异性抗人cTnI的单克隆抗体记为6G3,6A6,3G9.三株杂交瘤细胞中6G3和6A6为IgG1,3G9为IgG2b,腹水效价分别为4×10-5,4×10-5和10-5.亲和常数为5.0×109,6.4×109和3.8×109mol-1.Westernblotting结果表明6G3和6A6能够识别cTnI-C复合物.把6G3抗体生物素化并制备抗cTnI、cTnC和cTnI-C的大鼠多克隆抗体.以多抗作为固相捕捉抗体,生物素化6G3抗体作为检测抗体,建立检测cTnI的双抗体夹心ELISA方法并初步应用于临床病人标本检测.以cTnI-C复合物多抗捕捉检测方法具有良好的灵敏度、特异性和准确性,灵敏度为0.9ng/mL,较包被其他抗体捕捉方法提高1~2倍.批内变异系数为5.03%,回收率为94.56%.测定17例AMI病人和18例血清样本临床诊断结果符合率为100%.     

重组人心肌肌钙蛋白Ⅰ基因工程菌的构建与表达

人心肌肌钙蛋白Ⅰ(hcTnI)是临床检测心肌损伤及预后提供诊断的生物学指标,由于来源有限,采用基因重组技术,以期获得高表达量的人心肌肌钙蛋白Ⅰ.人工合成hcTnI基因,将其插入pET-11a载体中,通过酶切鉴定正确后转入表达宿主菌BL21(DE3)中,诱导表达目的蛋白.采用蛋白免疫印迹反应(Western Blot,WB)鉴定表达目的蛋白的免疫特异性.经SDS-PAGE证实重组蛋白的相对分子质量约为2.6×104,凝胶密度扫描软件检测到目的蛋白占总蛋白比例为30.1%,WB实验验证诱导后目的蛋白特异性良好.成功构建了重组hcTnI基因在大肠杆菌表达的工程菌株,并获得表达,为制备高特异性的抗体及临床检测应用和测定标准化奠定了基础.     

人心肌肌钙蛋白I和C亚基的基因工程表达及两者的结合实验

心肌肌钙蛋白I(cTnI)是检测心肌损伤的理想标志物,具有很高的特异性,在病人体内可停留较长时间．以人心肌cDNA为模板,通过PCR方法克隆了人的cTnI和cTnC基因,将cTnI和cTnC基因插入到原核表达载体pBV220中,转化E．coli DH5α菌株并诱导表达,经SDS-PAGE分析,分别发现分子质量为28ku和18ku的特异性蛋白条带．cTnI经Western blotting检测,结果与天然蛋白一致．将纯化得到的cTnI免疫小鼠后,用人天然标准抗原检测小鼠的抗血清效价在1：16000以上,并且呈高度特异性,与cTnC无交叉反应．而表达的cTnC可以在一定条件下和cTnI结合,证明2种基因工程蛋白是具有天然构象和结合功能的．cTnI和cTnC的表达及2种蛋白结合试验的研究结果为进一步研发免疫诊断试剂奠定了良好的基础．     

肌钙蛋白(TNI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)质量浓度在心脏病诊断中的比较

目的:通过对急性心梗(AMI)、冠心病(CHD)、心率失常患者血清中的TNI、CK-MBM质量浓度及肌酸激酶同工酶(CK-MB)的测定,探讨其对临床心脏病诊断的意义.方法:利用荧光免疫方法,对急性心梗(AMI)、冠心病(CHD)、心率失常的患者血清中的TNI、CK-MBM质量浓度及肌酸激酶同工酶(CK-MB)进行定量测定,并对结果进行统计学比较.结果:通过比较发现在检测的0~4 h结果中,冠心病组CK-MBM检出率为69%,TNI检出率为22%,有显著性差异;急性心梗组TNI检出率达58%,CK-MBM检出率59%,无显著性差异.结论:在冠心病和心律失常患者的早期诊断中,CK-MBM的敏感度优于TNI;而对于急性心梗患者的早期诊断,CK-MBM与TNI并无显著性的差异,但TNI持续时间相对CK-MBM较长,表明TNI在对于急性心梗的诊断中更有优势.     

用合成多肽免疫制备抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体的研究

介绍一种用合成的多抗原肽免疫动物来制备与天然人心肌肌钙蛋白Ⅰ特异反应的单克隆抗体新方法。从人心肌肌钙蛋白ⅠＮ端，根据多肽分子氨基酸的亲水性值选出了ＰＡＰＡＰＩＡＡＡＳＳ１１个氨基酸片段。将它用有八位点的赖氨酸核连接成多抗原肽后，以它为抗原用Ｒｉｂｉ佐剂进行免疫。将小鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，获１１株抗此多肽的杂交瘤细胞株。对其中７株属于ＩｇＧ亚类的细胞进行了ＥＬＩＳＡ分析，发现这７株细胞均与天然的人心肌肌钙蛋白Ⅰ呈特异性反应，而不与人骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ发生交叉反应。利用３Ａ２细胞株所分泌的单克隆抗体对急性心肌梗塞患者、手术患者和正常人的血样进行了ＥＬＩＳＡ检测，证明它只对心肌梗塞患者血清发生阳性反应。获得了较为满意的结果。此细胞株所分泌的抗体有望用于心肌梗塞临床检测。     

慢性阻塞性肺疾病患者低氧血症对血清肌钙蛋白Ⅰ的影响

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者低氧血症对血清肌钙蛋白I(CTnI)的影响.方法对137例急性发作期的COPD患者的血氧分压p(O2)和血清CTnI及心肌酶谱进行检测,按氧分压的水平分成3组,观察CTnI及心肌酶谱的变化,并分析COPD患者p(O2)与CTnI及各种心肌酶的相关关系.结果轻、中、重度低氧血症组的CTnI分别为(0.15±0.08)μg/L,(0.87±0.92)μg/L和(2.24±0.97)μg/L,3组间均有显著差异(P＜0.05).而3组p(O2)水平与相对应的CTnI水平呈显著的负相关关系(r=0.968 1,P＜0.05).死亡患者8例,平均CTnI为(3.62±1.08)μg/L,与存活病例比较显著升高(P＜0.05).结论低氧血症可导致COPD患者血清CTnI显著升高,且与氧分压p(O2)呈显著负相关关系.当CTnI明显升高时,提示患者病情危重.     

心肌肌钙蛋白I胶体金免疫层析快速检测法的建立

为建立一种快速、简单实用的检测心肌肌钙蛋白I的胶体金免疫层析法(GICA),用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,用鼠源抗cTnI单克隆抗体进行胶体金标记,采用胶体金免疫层析技术及双抗体夹心法原理检测心肌肌钙蛋白I,并对该方法进行敏感性、特异性和稳定性分析.结果:该方法能在10 min内完成检测;该试纸条仅与心肌肌钙蛋白I阳性样品发生特异性反应;检测心肌肌钙蛋白I的最低检出质量浓度为1.0 ng/mL;与化学发光免疫分析法(CLIA)对比检测63份临床标本,阳性符合率97.0%,阴性符合率100%,总符合率98%,试纸条性能稳定.     

论肌钙蛋白对快速检测心肌梗塞的作用机制

心肌中Ⅰ亚型心肌肌钙蛋白是一种能快速诊断急性心肌梗塞的特异蛋白质,同时它也是小面积心梗及不稳定心梗患者的灵敏早期诊断物质．肌红蛋白长期以来也被人们认为是心梗的早期诊断物质,但其缺点是缺乏足够的特异性．血清肌酸激酶亦为诊断心梗的物质,这是由于它对心肌梗塞特异性强,在心梗发生后2-8h内在血中浓度急剧上升．目前美国已将上述3种物质取长补短结合研制成一种全新的灵敏诊断试剂,是目前全球最简捷快速诊断早期急性心梗的可靠产品．     

肌钙蛋白I与心电图改变对不稳定型心绞痛远期预后评价

目的 探讨心脏肌钙蛋白I(cTnI)与心电图改变的关系及对不稳定型心纹痛远期预后评价价值．方法 对119例UAP患者及148例健康对照者分别进行血清cTnI和心电图测定，并观察1个月和2a内的心脏事件发生情况．结果 血清cTnI升高组的UAP患者2a内与心电图相关的心脏事件发生率为40．7％，显著高于血清cTnI正常组的14．3％(P＜0．005)．RR为2．43，95％可信限1．04—5．67，血清cTnI＞0．16μg/L时，预测与心电图改变相关的2a心脏事件发生率的敏感性69％，特异性53％，阳性预测值41％，阴性预测值78％，均高于ST段下移组和T波倒置组．而ST段升高、ST段下移和T波例置3种心电图改变在cTnI升高组和cTnI正常组两组间2a的心脏事件发生率却无显著差异(P＞0．05)．结论 血清cTnI检测对判断UAP悉者2a内发生心脏事件的危险性明显优于心电图．     

浅谈病毒性心肌炎的诊断及治疗

病毒性心肌炎诊断和治疗,虽然国内、国际屡拟诊断标准和治疗原则,但目前仍存有广泛的争议。本文将从诊断和治疗两方面谈一些看法,供同行参考。     

猪病毒性脑心肌炎的诊断与防制

对一猪场的病猪进行了临床检查、免疫学检测、病理解剖及组织学观察,结果表明：经ELISA脑心肌炎病毒抗原检测,抗原阳性;临床检查显示急性出血性热性败血症、不典型神经症状;组织学检查显示急性心肌炎、非化脓性脑炎、急性出血性淋巴结炎;结论为猪病毒性脑心肌炎。     

基于硫化钼量子点的心肌肌钙蛋白Ⅰ无标记型电化学发光免疫传感检测

基于硫化钼量子点(MoS_2 QDs)/过二硫酸钾(K_2S_2O_8)电化学发光(ECL)体系,构建了灵敏检测心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)无标记型免疫传感器新方法.将发光材料MoS_2 QDs与还原氧化石墨烯(rGO)复合形成MoS_2 QDs-rGO纳米复合物,然后组装构建传感器.在优化条件下,对cTnI检测的线性范围为1.0×10~(-9)～1.0×10~(-4) g/L(R=0.998),检出限为4.9×10~(-10) g/L(R_(SN)=3).将提出的方法应用于实际人血清样品中cTnⅠ含量的测定,RSD在1.0%～2.6%范围,加标回收率在98.0%～110.0%之间.讨论了反应机理.     

慢性阻塞性肺疾病患者低氧血症对血清肌钙蛋白I的影响

目的　探讨慢性阻塞性肺疾病 (COPD)患者低氧血症对血清肌钙蛋白I(CTnI)的影响 .方法　对 137例急性发作期的COPD患者的血氧分压p(O2 )和血清CTnI及心肌酶谱进行检测 ,按氧分压的水平分成 3组 ,观察CTnI及心肌酶谱的变化 ,并分析COPD患者 p(O2 )与CTnI及各种心肌酶的相关关系 .结果　轻、中、重度低氧血症组的CTnI分别为 (0 .15± 0 .0 8) μg/L ,(0 .87± 0 .92 ) μg/L和 (2 .2 4± 0 .97) μg/L ,3组间均有显著差异 (P <0 .0 5 ) .而 3组 p(O2 )水平与相对应的CTnI水平呈显著的负相关关系 (r =0 .96 81,P <0 .0 5 ) .死亡患者 8例 ,平均CTnI为 (3.6 2± 1.0 8) μg/L ,与存活病例比较显著升高 (P <0 .0 5 ) .结论　低氧血症可导致COPD患者血清CTnI显著升高 ,且与氧分压p(O2 )呈显著负相关关系 .当CTnI明显升高时 ,提示患者病情危重     

门控心肌显像相位分析技术评价病毒性心肌炎患者左室非同步性及心功能

目的:探讨门控心肌显像相位分析技术在评价病毒性心肌炎（virus myocarditis,VMC）患者左室非同步性及心功能中的应用价值。方法:对21例临床确诊VMC患者和21例正常对照者（healthy control,HC）,进行^99mTc-甲氧基异丁基异腈（MIBI）静息门控心肌灌注显像,图像经常规处理重建后应用专用软件（cedars quantitative gated SPECT,QGS）分析,获得相位标准差（phase standard deviation,PSD）、相位直方图带宽（phase histogram bandwidth,PHB）、舒张末期容积（end diastolic volume,EDV）、收缩末期容积（end systolic volume,ESV）及左室射血分数（left ventricular ejection fraction,LVEF）。结果:VMC组与HC组相比,PSD、PHB、EDV和ESV显著升高（P<0.05）;LVEF显著降低（P<0.05）;PSD或PHB异常的心肌炎患者左室功能明显低于PSD或PHB正常的患者（P<0.05）。结论:门控心肌显像相位分析技术能有效地评价VMC患者左室非同步性,并为可能发生心功能受损的VMC患者提供筛选依据。