北冬虫夏草菌丝体液体发酵培养基的优化研究

开展了不同碳源种类和浓度、不同氮源种类和浓度以及不同pH值对北冬虫夏草菌丝体生长量影响的单因素试验和3因素3水平正交试验,最终确定了北冬虫夏草最适菌丝液体培养基的配方如下:最佳碳源是白糖(适宜的质量浓度为23 g/L),氮源以蛋白胨最合适(适宜的质量浓度为7 g/L),最佳pH值为7,2 g磷酸二氢钾,1 g硫酸镁,1 000 mL水。     

不同氮磷浓度对米氏凯伦藻生长的影响

采用f/2培养基,NaNO3和NaH2PO4分别为氮源和磷源,分别研究了不同浓度的氮磷源(NaNO3:30、60、150、750、1 275、3 000 mg/L,NaH2PO4:4.4、8.8、22、44、88、176 mg/L)对米氏凯伦藻(Karenia mikimotoi MACC/,D23)生长的影响.单因子方差分析结果表明,不同的氮、磷浓度对其相对生长率的影响均有显著性差异(P0.05).多重比较结果表明:750 mg/L NaNO3浓度组的相对生长率显著高于其他浓度组,22,mg/L NaH2PO4浓度组的相对生长率显著高于其他浓度组,88,mg/L和176 mg/L NaH2PO4浓度组之间没有显著性差异.其最高细胞密度和相对生长率在NaNO3质量浓度为30～750,mg/L时,随氮浓度的升高而升高,均在NaNO3质量浓度为750,mg/L时达到最大值,分别为4.60×106,mL–1和0.608,d–1,而当NaNO3质量浓度大于750,mg/L时,最高细胞密度和相对生长率随氮浓度的进一步升高而降低.当NaH2PO4质量浓度在4.4～8.8,mg/L之间,最高细胞密度随磷浓度升高而升高,在8.8,mg/L时达到最大值,为2.69×106,mL–1;当NaH2PO4质量浓度在4.4～22,mg/L之间,相对生长率随磷浓度的升高而升高,在22,mg/L时达到最大值,为0.568,d,–1,之后随磷浓度的进一步升高而降低.     

尼古丁诱导人脐带间充质干细胞凋亡的机制

目的:探讨尼古丁作用人脐带间充质干细胞(MSCs)前后,一氧化氮(NO)、细胞内钙离子(Ca2+)的变化及α7 nAchR的表达情况.方法:采用硝酸还原酶法检测不同质量浓度尼古丁作用于MSCs后24、36、48h,MSCs内NO的释放情况;尼古丁作用MSCs 24 h,fluo - 3/AM染色,流式细胞仪检测MSCs内Ca2+变化;用RT - qPCR检测尼古丁作用后α7 nAchR的表达情况.结果:尼古丁作用MSCs 24、36 h后,各实验组NO水平显著高于对照组(P＜0.05),呈时间、质量浓度依赖性,但在48 h,质量浓度0.8与1.0 mg/mL组,NO水平低于对照组.尼古丁作用后,各实验组质量浓度(0.6、0.8、1.0 mg/mL)的Ca2+荧光强度分别为( 141.26±16.01)、(164.90±18.39)、(198.76±17.63),均高于对照组(119.30±14.14),其中质量浓度0.8、1.0 mg/mL组与对照组相比有显著差异(P＜0.05).MSCs可表达α7 nAchR,且尼古丁作用后表达水平增高,呈时间浓度依赖性.结论:尼古丁可上调人脐带MSCs的α7nAchR表达,并通过刺激MSCs释放NO、升高细胞内Ca2+从而致MSCs凋亡.     

不同浓度ET—1引起心肌细胞[Ca^2＋]i升高作用的？…

目的:探讨内皮素-1(ET-1)对心肌细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)的作用以及不同浓度ET-1引起[Ca2+]i升高作用的量效关系.方法:采用分离的Sprague-Dawley大鼠心室肌细胞,以Fura-2/AM荧光指示剂负载,检测不同浓度ET-1引起[Ca2+]i变化.结果:ET-1引起[Ca2+]i升高呈双相反应,即起始的短暂快速相和随后的持续相.在1×10-9～5×10-7mol/L范围内,随着ET-1浓度的增加,其升高[Ca2+]i的作用亦增强;并且这种作用可被ETA的特异性受体阻断剂BQ123(2×10-6mol/L)所阻断.结论:ET-1升高[Ca2+]i呈剂量依赖关系,其作用具有特异性,并且是通过ETA受体介导的.     

缓冲液条件对水霉细胞壁结合Ca2+的影响

用原子吸收光谱研究了pH值、Tris 马来酸缓冲液浓度对水霉 (Saprolegniaferax)顶端生长菌丝细胞壁与Ca2 结合的影响 .发现在 pH 3.5～ 6 .0范围内 ,细胞壁结合的Ca2 随 pH值升高而增加 ,pH >6 .0时 ,细胞壁结合的Ca2 呈下降趋势 .细胞壁结合的Ca2 随Tris 马来酸缓冲液浓度升高而增加 ,Tris浓度高于 9mmol/L时 ,细胞壁结合的Ca2 则减少 .细胞壁最多可结合Ca2 量>6 0 μmol/L .证明细胞壁Ca2 确实是水霉顶端生长赖以维持的胞外Ca2 库 .     

粉煤灰提铝渣对土壤养分及芹菜生长与品质的影响

为探究高铝粉煤灰提铝副产物硅钙渣对土壤养分及芹菜生长与品质的影响,通过盆栽试验研究了不同施加量(0,0.5,1,2,3 g·kg~(-1))的硅钙渣对华南红壤的pH值和有效Ca,Mg,Si等养分含量及其对芹菜株高、产量和营养品质的影响.结果表明,施加0.5～3 g·kg~(-1)的硅钙渣能显著提高酸性土壤的pH值(4.98～7.15),使土壤趋于中性,增加土壤矿质元素(Ca,Mg,Si)的有效态含量,其中施加量与土壤pH值、有效Ca,Mg,Si含量具有极显著相关关系.施加硅钙渣能促进芹菜生长发育,芹菜叶片叶绿素含量提高7.10%～15.00%,株高增加-11.98%～10.63%,产量增加4.52%～45.92%.同时,促进芹菜营养吸收,提高芹菜营养品质,芹菜中Ca,Mg含量分别增加了2.74%～17.10%和22.80%～57.31%;Ca,Mg吸收量分别增加了14.79%～80.47%和44.82%～114.51%;叶片及茎秆维生素C含量分别提高了1.04～1.81倍和1.41～2.67倍.说明高铝粉煤灰提铝副产物硅钙渣是一种很好的硅钙肥原料,有利于抑制土壤酸化,补充土壤有效矿质养分,促进植物生长发育并提高营养品质.     

基于饱和沉淀Ca（DBS）2及结合 MBFGA1絮凝沉降去除罗丹明b

通过提高溶液中十二烷基苯磺酸钙(Ca(DBS)2)沉淀的析出,结合微生物絮凝剂GA1(MBFGA1)对Ca(DBS)2的絮凝作用,将阳性染料罗丹明b(RB)从溶液中絮凝去除.在整个絮凝过程中,十二烷基苯磺酸钠(SDBS)增溶RB分子,然后在过量Ca~(2+)的影响下,增溶了RB分子的Ca(DBS)2悬浮物充分析出,最后被MBFGA1絮凝沉淀.为了提高RB的去除效率,采用响应面分析法(RSM)对Ca~(2+)、SDBS及MBFGA1初始浓度进行优化.实验结果表明,最优条件下(SDBS:2.67 mmol/L、Ca~(2+):5.61 mmol/L、MBFGA1:4.34 mL/L),RB和SDBS去除率达到99.80%和90.03%,其出水COD值为89.69 mg/L,低于国家工业废水排放标准,无需进行后续处理.同时,采用环境扫描电镜(ESEM)来探讨RB的絮凝去除机理以及SDBS和Ca~(2+)之间的相互作用.当Ca~(2+)初始浓度相对SDBS初始浓度过量时,增溶RB分子的SDBS胶团(SDBSRB胶团)会与Ca~(2+)反应生成被RB分子附着的Ca(DBS)2颗粒(Ca(DBS)2-RB颗粒),最后Ca(DBS)2颗粒被MBFGA1絮凝沉降;而当SDBS初始浓度相对Ca~(2+)初始浓度过量时,Ca(DBS)2颗粒会逐渐复溶并生成大量的附着Ca~(2+)的SDBS胶团.     

15 － KETE 对大鼠肺动脉平滑肌细胞钙离子浓度的影响

摘要: 目的探讨15-KETE 对大鼠肺动脉平滑肌细胞内Ca2 + 的作用及其来源。方法以酶法( 胶原酶Ⅰ型和弹性 酶) 分离培养原代大鼠肺动脉平滑肌细胞,将细胞稀释所需密度( 2 × 105 个/mL) ,加样于6 孔板中的盖玻片上,放 入37℃孵箱中培养12 h,细胞贴壁后,取出6 孔板中的盖玻片,放入特制的小槽内,D-Hanks 液冲洗细胞3 次,加入 1 × 10 － 5mol /L 的Flou-3 /AM,置37℃孵箱中避光孵育约30 min,用D-Hanks 液洗去细胞外残留染料,应用激光扫描 共聚焦显微镜技术,测定了15-KETE 对大鼠肺动脉平滑肌细胞游离钙离子浓度的影响。结果1) 15-KETE ( 1 × 10 － 8-1 × 10 － 6 ) mol /L 可依赖性引起肺动脉平滑肌细胞内钙离子浓度( ［Ca2 +］i) 增加; 2) 1 × 10 － 6 mol /L 维拉米( L-型钙离子通道阻断剂) 和无钙离子细胞外液显著阻抑了1 × 10 － 6 mol /L 15-KETE 引起肺动脉平滑肌［Ca2 +］i 增 加。结论15-KETE 可引起大鼠肺动脉平滑肌［Ca2 +］i 增加,并且此钙来源于细胞外液钙离子。     

新型Ca2+指示剂STDIn双波长比率法测定血清钙

采用自行设计合成的新型Ca2 指示剂STDIn,建立了一种可在生理条件下测定血清中Ca2 的新方法.指示剂STDIn在pH值为7.2的中性缓冲介质中,可与Ca2 络合形成稳定的络合物,试剂自身的吸收峰位于543nm,与Ca2 络合后紫移至423nm,Δλ=120nm,对比明显.在指示剂浓度为10μmol/L时,采用双波长比率法求得测定Ca2 的线性范围分别为2×10-5～2×10-3mol/L(相关系数r=0.9977)和5×10-3～1×10-1mol/L(相关系数r=0.9968),检出限为6×10-6.该法已用于血清中Ca2 的测定.     

利用曲霉sp.HX-1发酵稻草秸秆制备纤维素酶

以稻草秸秆原料,利用曲霉sp.HX-1固态发酵生产纤维素酶,研究了不同发酵时间、不同氮源和氮源浓度对曲霉sp.HX-1纤维素酶系的影响,并最终用硫酸铵分级沉淀和低温冷冻干燥的方法得到混合纤维素酶干品.结果表明,发酵6 d后稻草秸秆产生的纤维素酶活力单位最大,分别为CMC酶307 U/mL,C1酶841 U/mL、β-葡萄糖苷酶205 U/mL.以不同氮源优化发酵条件时发现,NH4NO3质量浓度为1 g/L时CMC酶活力达到1 652 U/mL,且失重率也到达最大值17.42%;NH4Cl质量浓度为0.5 g/L时,C1酶活力达到1 807 U/mL;尿素（UREA）质量浓度为2.0 g/L时,β-葡萄糖苷酶活力为2 033 U/mL,这表明氮源对曲霉sp.HX-1纤维素酶系的影响很大.最后在NH4NO3质量浓度为1.0 g/L的条件下,将120 g稻草秸秆发酵6 d,从发酵液中提取得到8.851 7 g混合纤维素酶的干品.此实验为以后探讨碳源或者其他因素的影响提供方法借鉴,也可以为获得纤维素酶混合酶干品的获得提供参考方法.     

活性氧化铝负载铁、钴催化过硫酸盐降解苋菜红的研究

制备活性氧化铝负载铁、钴作为催化剂,并用XRD和SEM对该催化剂进行表征。考察了负载物初始浓度配比,Na2S2O8浓度,催化剂用量,苋菜红初始浓度,紫外光光照时间,pH值以及无机离子对降解苋菜红的影响。实验结果表明:当催化剂中的Fe:Co=1:2时,其降解能力最强。在苋菜红初始浓度为40 mg/L时,过硫酸钠浓度为1.5 g/L,催化剂用量为1.0 g/L,pH值为5,紫外光照射30 min的条件下,苋菜红的脱色率最高可达97.91%。且不同无机离子对反应体系有一定的抑制作用。     

不同种类的氮肥对籽粒苋富集镉的影响

施肥对超富集植物的重金属累积效果产生影响,分析这种影响对于超富集植物的大田应用具有一定的意义。本文以籽粒苋为研究对象,根据土壤环境质量标准设置镉浓度梯度0、2.4、4.8、9.6mg/kg,再施以铵态氮和硝态氮两种肥料。研究结果表明：(1)各处理下,籽粒苋叶Cd含量最高,范围为1.45-27mg/kg;茎次之。范围为0.90-17.15mg/kg。肥料类型对籽粒苋Cd的累积量未产生显著影响,但肥料浓度对籽粒苋Cd的累积具有显著差异(F=12.993,p<0.01);当铵态氮肥施用浓度为0.115、0.460mg/kg时,籽粒苋茎、叶Cd含量最大,分别为17.15mg/kg、27.00mg/kg。(2)土壤Cd含量受Cd添加浓度的影响,但是氮肥施用浓度和Cd添加浓度对其具有显著的交互作用(F=3.382,P<0.01);(3)籽粒苋茎和叶对Cd的累积系数具有显著差异(F=19.679,p<0.01),Cd的处理浓度对籽粒苋地上部累计系数有显著影响(F=12.362,p<0.01)。综上表明,施用适量浓度的铵态氮肥有助于籽粒苋Cd的富集,可用于土壤Cd污染的修复。     

碳酸钠在嫩化型风干牛肉中的应用效果研究

为了探究碳酸钠注射对风干牛肉嫩化效果及品质的影响,实验分别测定了不同浓度碳酸钠(0、0.25、0.30、0.35、0.40mol/L)注射处理风干牛肉的pH值、剪切力、水分含量、水分活度、出品率和感官品质。结果表明,随着碳酸钠浓度的升高,风干牛肉的pH值、水分含量、水分活度和出品率显著增加(p<0.05),剪切力下降,嫩度增加;但是,当碳酸钠浓度超过0.35mol/L,风干牛肉的感观品质会明显变差,咀嚼性降低,且有一定程度的碱味。结合相关性分析可得,pH值与风干牛肉的嫩度、水分含量、水分活度、出品率等呈现极显著的正相关关系(P<0.01),说明碳酸钠注射对牛肉嫩度的影响主要与肉中pH值变化有关。实验证明,碳酸钠注射处理可以有效改善风干牛肉食用品质,浓度为0.35mol/L时,效果最好,在此条件下,风干牛肉的剪切力可降低33.67%,出品率提高12.05%,为45.12%;pH值的改变是碳酸钠注射对牛肉嫩度及品质改善的主要原因。     

化学降酸量对杨凌贵人香干白葡萄酒感官品质的影响

以陕西杨凌刚发酵生成的贵人香干白葡萄酒为样本,对其进行不同剂量碳酸钙降酸处理,然后检测分析供试酒样的CIELab颜色参数,由受过培训的感官品评员分析降酸酒样的香气特征和感官质量。通过主成分分析讨论降酸量对葡萄酒颜色参数和香气特征的影响。结果表明,降酸0.5 g/L的酒样最大程度保留了对照酒样的香气,整体感官质量得分最高;降酸1.0 g/L和1.5 g/L酒样的甜香气味增加,葡萄酒果香降低,整体感官质量得分降低;降酸2.0 g/L酒样香气特征最弱,整体感官质量得分最低。因此,采用质量浓度为0.5 g/L的碳酸钙对杨凌地区贵人香葡萄酒降酸是较佳方案。     

乙烯利在绿岛3号旱黄瓜上的应用效果

对不同浓度的乙烯利及不同使用次数在绿岛3号黄瓜上的应用进行了研究,结果表明：用80～100 mg/kg的乙烯利处理黄瓜幼苗2次（二叶一芯和三叶一芯）,可有效地提高早期产量和总产量,改善品质,植株生长势较好,应用效果最好,适合在绿岛3号黄瓜冬春茬日光温室生产中推广应用。乙烯利浓度过高或使用次数过多会导致植株生长受抑,雌花...     

马齿苋对果蝇寿命和繁殖力的影响

以黑腹果蝇为材料,探究1％、2．5％、5％、7．5％和10％（mL/100mL）浓度组马齿苋对果蝇寿命和繁殖力的影响．结果显示,各剂量组的马齿苋均能不同程度延长果蝇寿命、增强果蝇繁殖力,且对果蝇后代的雌雄比例无显著影响,其中2．5％浓度组与对照组相比差异极显著（P〈0．01）,最高延寿率和增殖率分别高达67．07％和42．98％．表明马齿苋具有延缓衰老和促进果蝇繁殖力的功效．     

Methoprene对SpltNPV增殖及其LC50的影响

 通过对斜纹夜蛾核多角体病毒(SpltNPV)在其不同龄期宿主体内增殖情况的研究,探索保幼激素类似物(JHA)methoprene促进SpltNPV在其宿主体内增殖的途径,为今后广泛利用methoprene进行高效率、低成本增殖昆虫杆状病毒杀虫剂提供理论依据和方法.运用正交组合的方法筛选3种主要因子(病毒感染浓度、methoprene用量和methoprene施用时间)对提高病毒增殖产量进行最佳组合实验.实验确立了以1×10⁷PIBs/mL感染6龄刚蜕皮的斜纹夜蛾幼虫,并于感染第1天滴加10μL methoprene的最佳组合方法,病毒总产量和平均病毒产量分别可达1 856.0×10⁸PIBs和62.2×10⁸PIBs.并测定了methoprene处理对SpltNPV病毒LC₅₀的影响.经methoprene处理后,病毒的LC₅₀由1.578×10⁷PIBs/mL增加至9.151×10⁷PIBs/mL.     

反枝苋营养器官水浸提液对紫花苜蓿种子萌发的影响

采用纸培法研究反枝苋营养器官水浸提液对苜蓿种子萌发及幼苗生长的影响,以探明反枝苋对紫花苜蓿种子萌发的影响.结果表明:反枝苋营养器官水浸提液在浓度0.001和0.002 g/mL时,紫花苜蓿种子发芽率和发芽势均有所提高,浓度≥0.020 g/mL时,发芽率和发芽势明显下降,浓度达到0.100 g/mL完全受到抑制,种子不能萌发.水浸提液浓度为0.001/mL和0.002/mL时,对苜蓿根、芽的生长有一定的促进作用,浓度≥0.020 g/mL时均表现为抑制作用.反枝苋根水浸提液对幼苗根生长的抑制作用明显大于芽,根/芽显著降低,茎水浸提液对根芽生长在浓度达到0.050 g/mL时表现出抑制作用,根/芽与对照差异不显著(P>0.05),叶水浸提液浓度≥0.020 g/mL时,对根、芽生长均表现为抑制作用(P<0.01),对胚芽生长的抑制作用大于胚根,根/芽比明显上升,与对照和低浓度差异极显著(P<0.01).     

肿瘤细胞ECA109对甲醇等4种有机溶剂耐受剂量分析

目的通过分析一定浓度下甲醇、乙醇、丙酮和甘油作用后肿瘤细胞ECA109细胞株形态和生长状态的变化,确定上述溶剂对该细胞株的相对安全剂量。方法按照10个浓度梯度（V/V）将甲醇等4种有机溶剂加入细胞培养基,作用后的12、24、36、48 h进行细胞形态观察和生存率检测。结果 4种有机溶剂作用于ECA109细胞后都表现出不同程度的细胞毒性作用,其中,乙醇的作用最为明显,20 mL/L作用12 h就出现明显的细胞毒性,细胞形态变化明显,生存率下降显著,10 mL/L时对细胞生长基本没有影响;甲醇和丙酮也有明显作用,30 mL/L以内甲醇的作用相对缓和,而20 mL/L以后丙酮的作用则增加明显,生存率下降的同时细胞形态也出现明显改变;甘油的作用最为缓和,并且仅抑制细胞生长而对细胞形态基本没有影响。结论 ECA109细胞对4种有机溶剂的耐受性有所不同,对乙醇的耐受剂量最低,其次为丙酮和甲醇,3种溶剂不仅抑制细胞的生长,还对细胞形态产生明显影响;甘油作用较为缓和,且仅对细胞株的生长产生抑制,并不导致细胞形态改变。     

运用均匀设计法优化pST1-K99在原核系统中的表达

运用均匀设计法,对影响pST1-K99在大肠杆菌中表达的因素进行了优化,摸索出了对周质蛋白进行诱导表达的最佳条件,即pH=6．0,装液量30mL,IPTG终浓度0．484mmol／L,IPTG诱导时间6h,诱导温度34℃．在此条件下,所表达的目的蛋白的平均密度从0．14提高到0．20,比优化前提高了43％．