Ha-ras和Ki-ras癌基因转染和细胞对小鼠细小病毒杀伤敏感性的相关性(英文)

为研究Ha－ras和Ki－ras癌基因转染和细胞对小鼠细小病毒（MVM）杀伤敏感性间的关系，两个细胞株，即Ki－ras癌基因转化细胞株DT和Ha－ras癌基因转化细胞株REF4-3，被用来作为研究材料．体外细胞集落形成率和细胞在裸小鼠体内的成瘤能力测定显示，和对照细胞NIH／3T3相比，REF4－3和DT对MVM的杀伤作用更敏感．同时，DNA杂交和蛋白免疫沉淀实验结果也显示，在REF-3和DT细胞中，无论是MVM的DNA增殖能力还是其NS－1蛋白的表达能力，均较在其对照组NIH／3T3细胞中高很多．FACA测定也显示，在感染MVM30h后，S期细胞的比例在REF4－3和DT细胞中都有增加，而在NIH／3T3细胞中却略微减少．通过PCR方法也可发现，在受到MVM抑制的REF-3肿瘤中仍可检测到MVM的DNA．     

亚硒酸钠对人胃腺癌细胞中c—Ha—ras和c—erbB2癌基因及其蛋 …

应用细胞原位杂交和免疫胶体金技术，观察亚硒酸钠处理人胃腺癌细胞前后，ｃ－Ｈａ－ｒａｓ和ｃ－ｅｒｂＢ２癌基因转录水平及其产物Ｐ２１和Ｐ１８５癌蛋白表达的变化。结果表明，两种癌基因在ＭＧｃ８０－３细胞中活跃表达，亚硒酸钠能抑制ｃ－Ｈａ－ｒａｓ和ｃ－ｅｒｂＢ２癌基因的转录水平及Ｐ２１和Ｐ１８５癌蛋白的表达，这对于诱导胃癌细胞向下沉细胞方向逆具有重要意义。     

NKC—1中草药合剂对T24—ras活化癌基因转化细胞的选择性…

根据我国传统中医药理论及现代分子生物学设计并配制了具有抗肿瘤效应的复方中草药合剂ＮＫＣ－１。体外实验表明：ＮＫＣ－１能够选择性杀死ｒａｓ癌基因诱导的转化细胞，在较低浓度条件下对转化细胞的恶性行为有一定的抑制和逆转作用。     

NKC－1中草药合剂对T24－ras活化癌基因转化细胞的选择性杀伤及抗肿瘤作用的研究

根据我国传统中医药理论及现代分子生物学知识，设计并配制了具有抗肿瘤效应的复方中草药合剂ＮＫＣ－１．体外实验表明：ＮＫＣ－１能够选择性杀死ｒａｓ癌基因诱导的转化细胞，在较低浓度条件下对转化细胞的恶性行为有一定的抑制和逆转作用。急性毒性实验结果显示：当注射剂量为０．８ｍｌ／只昆明鼠时，仍无严重毒性。裸鼠体内实验表明：ＮＫＣ－１具有良好的抑制肿瘤效应。     

人肿瘤细胞株中细小病毒H—1的DNA扩增与非结构蛋白NS—1基因…

研究三株人癌细胞和两株对照细胞对细小病毒Ｈ－１杀伤作用第三性的分子机制，表明了感染复ｍｏｉ（ｍｕｌｔｉｐｌｉｃｉｔｙｏｆｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）为５ｐｆｕ（ｐｌａｑｕｅｆｏｒｍｉｎｇｕｎｉｔ）／细胞的情况下，作为Ｈ－１病毒复制受纲细胞的人癌细胞株ＱＧＹ－７７０３和人胃癌细胞株ＳＧＣ－７９０１，能够支持病毒ＤＮＡ扩增和非结构蛋白ＮＳ－１基因的表达，这和作为阳性对照的由ＳＶ４０转化的新生儿肾细胞株ＮＢ－Ｋ     

喉鳞状细胞癌中人类乳头瘤病毒（HPV）与癌基因C—myc的相关性 …

本文从分子水平对喉鳞癌的病毒病因学进行研究。旨在探索肿瘤病毒病因学机制，试图揭示喉鳞癌的发生发展过程，为该病的预防、早期发现及治疗提供必要的参数。     

小鼠细小病毒VP2蛋白在昆虫细胞-杆状病毒系统中的表达和免疫原性分析

目的 利用杆状病毒表达系统合成重组小鼠细小病毒(MVM)VP2蛋白,并对其免疫原性分析。方法 将优化后的MVM VP2序列克隆至表达载体pFastBac1,命名为pFastBac1-MVM VP2,再将其转化至DH10Bac感受态大肠杆菌中形成重组杆粒,提取重组杆粒经PCR鉴定正确后转染昆虫细胞Sf9,镜下观察到细胞明显病变后收获重组杆状病毒rBac-MVM VP2。Sf9细胞接重组病毒48和72 h后,用间接免疫荧光(IFA)和蛋白免疫印迹(Western blot)法验证重组蛋白的免疫原性。结果 构建的rBac-MVM VP2重组杆状病毒感染Sf9细胞后,可成功表达MVM VP2重组蛋白,经Western blot和IFA检测分析,重组蛋白具有较好的免疫原性且在病毒感染72 h时表达量较高。经蛋白纯化后可得到纯度较高的VP2重组蛋白。结论 本研究利用昆虫细胞-杆状病毒系统成功表达MVM VP2蛋白并具有良好的免疫原性,为VP2相关功能的研究和临床诊断方法的建立奠定基础。     

自主性细小病毒非结构蛋白NS1对转化细胞的毒性及其调控DN …

自主性细小平素具有对转化细胞专一的毒性，它的非结构蛋白ＮＳ１在其中起着重要的作用。在病毒生活周期中ＮＳ１有着多种功能，包括调控ＤＮＡ的复制和转录。其机制包括ＮＳ１对ＤＮＡ复制的反式抑制，对基因表达的反式抑制和对转录的反式激活。     

抗氧化剂Isoverbascoside对MGC80—3细胞抗氧化活性和癌？…

以苔酚蓝拒染法,核黄素－ＮＢＴ还原法、ＤＴＮＢ还原法及ＲＮＡ斑点杂交分析法分别对经不同浓度Ｉｓｏｖｅｒｂａｓｃｏｓｉｄｅ（Ｉｓｏｖ）处理的ＭＧＣ８０－３细胞的Ⅱ期抗氧化酶（超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶）生和Ｎ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ及ｐ５３基因表达作了检测,结果显示：经Ｉｓｏｖ处理后,细胞生长明显受抑;Ⅱ期抗氧化酶活性较处理前明显上升,癌基因Ｎ－ｒａｓ、Ｃ－ｍｙｃ的表达较处理前下降,     

细小病毒H-1NS1基因在荷人肝癌裸小鼠几种组织及移植瘤中的转录和表达

为了解细小病毒H－1 NS1基因在移植瘤与荷瘤裸小鼠部分正常组织中转录和表达的差异性，采用RT－PCR和免疫组织化学的方法，对细小病毒H－1的NS1基因在NB－324K和QGY－7703细胞以及荷人肝癌裸小鼠的移植瘤及部分正常组织中的转录和表达进行了检测，NS1选择性地在人肝癌移植瘤中的高表达结果与细小病毒H－1的复制情况一致，这为细小病毒在活体内抑瘤作用提供了证据。     

自主性细小病毒非结构蛋白NS1对转化细胞的毒性及其调控DNA复制和转录的机制

自主性细小病毒具有对转化细胞专一的毒性,它的非结构蛋白ＮＳ１在其中起着重要的作用．在病毒生活周期中ＮＳ１有着多种功能,包括调控ＤＮＡ 的复制和转录．其机制包括ＮＳ１对ＤＮＡ 复制的反式抑制、对基因表达的反式抑制和对转录的反式激活     

慢病毒介导的GFP转染对小鼠骨髓间充质干细胞表型、增殖和分化能力的影响

运用慢病毒(Lentivirus)载体构建绿色荧光蛋白(GFP)在小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)中的转染体系,检测转染后MSCs的表型和增殖能力,并诱导其向成肌细胞分化,检测此转染体系对MSCs细胞表型、增殖和分化能力的影响.骨髓细胞悬液破红后贴壁法培养MSCs,采用流式细胞术鉴定细胞表面标记,鉴定MSCs纯度;Lentivirus-GFP以1、10、50和100的感染复数(MOI)转染MSCs,作用48h后流式细胞术及免疫荧光法检测转染效率和表达的荧光强度;MTT法检测转染后MSCs的细胞活力.诱导MSCs-GFP向成肌细胞分化,蛋白印记法(WB)检测成肌细胞特异性蛋白desmin和α-SMA的表达.流式细胞术检测结果显示,培养的MSCs表达CD44、CD90和CD105,不表达CD34、CD45和CD188,符合干细胞特性.MOI为1、10、50和100的转染效率分别为23.45%、93.51%、95.44%和95.55%,MOI为10时,转染效率较高,且对MSCs活力无明显影响.MSCs-GFP体外经成肌细胞诱导分化后,表达特异性抗原desmin和α-SMA.表明本研究成功构建了小鼠骨髓来源MSCs的Lentivirus-GFP转染体系,有效标记了MSCs细胞,且此标记对MSCs的表型、增殖和分化能力等细胞生物学特性无明显影响.