肌钙蛋白C-肌钙蛋白Ⅰ亲和层析动力学的模型

肌钙蛋白（Ｔｎ）Ｉ有着极强的心肌特异性,心肌肌钙蛋白是唯一存在于心肌细胞中的异构体,可以通过检测患者血液中的心肌ＴｎＩ含量来确诊急性心肌梗塞。根据在钙离子存在下,ＴｎＣ和ＴｎＩ特异结合的特性,可以利用亲和层析提取纯化ＴｎＩ。根据ＴｎＩ从亲和层析柱的穿透曲线,对Ａｒｎｏｌｄ等人提出的孔内扩散模型进行了分析,证明孔内扩散过程不是此亲和层析过程中的限速步骤。在缓冲液体系（ｐＨ８．０）中,提出了包括以一个正向二级、逆向一级来描述ＴｎＣ—ＴｎＩ反应速率方程,并用实验验证了该模型的正确性,从而首次阐明了ＴｎＣ—ＴｎＩ提取纯化体系的动力学机制,揭示了该过程的限速步骤为ＴｎＣ—ＴｎＩ反应过程。     

一种提取和纯化肌钙蛋白C的新方法

肌钙蛋白Ⅰ是肌钙蛋白的一个亚基，它有３种异构体：快、慢骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ和心肌肌钙蛋白Ⅰ。由于心肌肌钙蛋白Ⅰ具有极强的心脏特异性，因此引起众多学者的兴趣，研究检测患者血清内心肌肌钙蛋白Ⅰ的含量，来诊断急性心肌梗塞。利用肌钙蛋白Ｃ和肌钙蛋白Ⅰ的亲和层析来提取和纯化肌钙蛋白Ⅰ。建立了一种简单的肌钙蛋白Ｃ的提取和纯化方法，从兔肌１００ｇ中可提取肌钙蛋白Ｃ ７５ｍｇ，不仅高于以往研究结果（６０ｍｇ／１００ｇ兔肌），而且使实验周期缩短和实验操作大为简化。     

肌钙蛋白Ⅰ的提取纯化

心肌肌钙蛋白Ⅰ具有极强的心脏特异性，可以通过检测患者血清内心肌肌钙蛋白Ⅰ的含量来诊断急性心肌梗塞。利用肌钙蛋白Ｃ和肌钙蛋白Ⅰ在钙离子存在下具有特异性结合的性质，制成了肌钙蛋白Ｃ亲和凝胶。利用肌钙蛋白Ｃ－肌钙蛋白Ⅰ亲和层析，提取和纯化了人和牛心肌肌钙蛋白Ⅰ，由１００ｇ心肌中可以提取到６０ｍｇ，以后可用来制备抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ的单克隆抗体杂交瘤细胞。     

两种肌丝的互动

当氧气不足时，肌肉就求助于葡萄糖，由这一反应产生的乳酸是造成肌肉酸痛的原因。     

人心肌肌钙蛋白I和C亚基的基因工程表达及两者的结合实验

心肌肌钙蛋白I(cTnI)是检测心肌损伤的理想标志物,具有很高的特异性,在病人体内可停留较长时间．以人心肌cDNA为模板,通过PCR方法克隆了人的cTnI和cTnC基因,将cTnI和cTnC基因插入到原核表达载体pBV220中,转化E．coli DH5α菌株并诱导表达,经SDS-PAGE分析,分别发现分子质量为28ku和18ku的特异性蛋白条带．cTnI经Western blotting检测,结果与天然蛋白一致．将纯化得到的cTnI免疫小鼠后,用人天然标准抗原检测小鼠的抗血清效价在1：16000以上,并且呈高度特异性,与cTnC无交叉反应．而表达的cTnC可以在一定条件下和cTnI结合,证明2种基因工程蛋白是具有天然构象和结合功能的．cTnI和cTnC的表达及2种蛋白结合试验的研究结果为进一步研发免疫诊断试剂奠定了良好的基础．     

肌钙蛋白Ⅰ检测在急性心肌梗死中的应用

目的:探讨肌钙蛋白I检测在急性心肌梗死中的应用价值。方法:检测了11例AMI患者发病时肌钙蛋白I(CTnI)变化,并与CK—MB加以比较。结果:CTnI测定较心肌酶学检测有较宽的诊断时间窗,是对AMI有高敏感、高特异的生化指标。结论:急性心肌梗死(AMI)及早诊断与治疗是降低其死亡率的关键,AMI的早期诊断一直以CK—MB为“金标准”,但在AMI发作6小时内阳性率较低且对心肌特异性并非专一。     

心肌肌钙蛋白I-C复合物酶联免疫检测方法的建立

为了制备抗人心肌肌钙蛋白I(cTnI)单克隆抗体、建立检测人cTnI链酶亲和素-生物素双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,用基因工程表达的人cTnI免疫雌性BALB/c小鼠,以杂交瘤技术制备得到三株特异性抗人cTnI的单克隆抗体记为6G3,6A6,3G9.三株杂交瘤细胞中6G3和6A6为IgG1,3G9为IgG2b,腹水效价分别为4×10-5,4×10-5和10-5.亲和常数为5.0×109,6.4×109和3.8×109mol-1.Westernblotting结果表明6G3和6A6能够识别cTnI-C复合物.把6G3抗体生物素化并制备抗cTnI、cTnC和cTnI-C的大鼠多克隆抗体.以多抗作为固相捕捉抗体,生物素化6G3抗体作为检测抗体,建立检测cTnI的双抗体夹心ELISA方法并初步应用于临床病人标本检测.以cTnI-C复合物多抗捕捉检测方法具有良好的灵敏度、特异性和准确性,灵敏度为0.9ng/mL,较包被其他抗体捕捉方法提高1~2倍.批内变异系数为5.03%,回收率为94.56%.测定17例AMI病人和18例血清样本临床诊断结果符合率为100%.     

心肌肌钙蛋白Ⅰ在心血管疾病诊断中的应用

心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)为近年发展起来的心肌组织所特有的酶学标志物.由于cTnI的结构和组织特异性,使其在诊断心肌损伤时具有高度敏感性及特异性,并且明显优于心肌酶谱分析,具有广阔的应用前景.因此对cTnI的生化特性、检测方法及临床意义作一概述.     

脑钠素和心脏肌钙蛋白T在超长时运动负荷后血清浓度的变化及评价

目的:通过联合测试血清中BNP和cTnT浓度变化来评价超长时运动负荷对心脏的影响。方法:在10名运动员完成50km超长马拉松前后,分别检测其血清中BNP和cTnT浓度。结果:完成该运动后所有运动员血清BNP和cTnT浓度均发生显著升高(p<0.01),BNP和cTnT明显正相关,BNP和cTnT与运动强度呈正向关系。结论:超长时运动负荷能明显增加血清中BNP和cTnT含量,两者的增加是由于心肌受损和心功能失调造成,但对心脏机能的评价与临床分析方法有所不同。     

论肌钙蛋白对快速检测心肌梗塞的作用机制

心肌中Ⅰ亚型心肌肌钙蛋白是一种能快速诊断急性心肌梗塞的特异蛋白质,同时它也是小面积心梗及不稳定心梗患者的灵敏早期诊断物质．肌红蛋白长期以来也被人们认为是心梗的早期诊断物质,但其缺点是缺乏足够的特异性．血清肌酸激酶亦为诊断心梗的物质,这是由于它对心肌梗塞特异性强,在心梗发生后2-8h内在血中浓度急剧上升．目前美国已将上述3种物质取长补短结合研制成一种全新的灵敏诊断试剂,是目前全球最简捷快速诊断早期急性心梗的可靠产品．     

ATP与生命活动中能量的供应

在ATP中,活跃的化学能以高能磷酸键的形式储存,在生物有机体中,肌肉的收缩,主动运输,生物发光都需要ATP,ATP与物质代谢关系密切.     

人原肌球蛋白结合蛋白3(TMOD3)cDNA的克隆及功能初步分析

从人的胎脑cDNA文库到中克隆到1条人原肌球蛋白结合蛋白3（TMOD3）基因,该基因cDNA序列长1402bp,可以编码352个氨基酸残基组成的蛋白,与大鼠,果蝇和线虫的原肌球结合蛋白同源性分别为82％,41％和35％,TMOD3基因定位在人15q21.1-q21.2,位于遗传位标D15S146和D15S117之间,采用基因芯片杂交的方法研究其表达谱概况,发现该基因在多种,组织和细胞中均表达。     

分子马达模型综述

对国内外分子马达的研究现状进行综述,以作直线运动的肌动蛋白和肌球蛋白为例,对其运动特点做描述,介绍三类分子马达的结构、功能及其性质,重点概述肌球蛋白的理论模型,展望分子马达的发展前景和应用.     

心肌肌钙蛋白I胶体金免疫层析快速检测法的建立

为建立一种快速、简单实用的检测心肌肌钙蛋白I的胶体金免疫层析法(GICA),用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,用鼠源抗cTnI单克隆抗体进行胶体金标记,采用胶体金免疫层析技术及双抗体夹心法原理检测心肌肌钙蛋白I,并对该方法进行敏感性、特异性和稳定性分析.结果:该方法能在10 min内完成检测;该试纸条仅与心肌肌钙蛋白I阳性样品发生特异性反应;检测心肌肌钙蛋白I的最低检出质量浓度为1.0 ng/mL;与化学发光免疫分析法(CLIA)对比检测63份临床标本,阳性符合率97.0%,阴性符合率100%,总符合率98%,试纸条性能稳定.     

重组人心肌肌钙蛋白Ⅰ基因工程菌的构建与表达

人心肌肌钙蛋白Ⅰ(hcTnI)是临床检测心肌损伤及预后提供诊断的生物学指标,由于来源有限,采用基因重组技术,以期获得高表达量的人心肌肌钙蛋白Ⅰ.人工合成hcTnI基因,将其插入pET-11a载体中,通过酶切鉴定正确后转入表达宿主菌BL21(DE3)中,诱导表达目的蛋白.采用蛋白免疫印迹反应(Western Blot,WB)鉴定表达目的蛋白的免疫特异性.经SDS-PAGE证实重组蛋白的相对分子质量约为2.6×104,凝胶密度扫描软件检测到目的蛋白占总蛋白比例为30.1%,WB实验验证诱导后目的蛋白特异性良好.成功构建了重组hcTnI基因在大肠杆菌表达的工程菌株,并获得表达,为制备高特异性的抗体及临床检测应用和测定标准化奠定了基础.     

浅述离体肌向心收缩的生物力学特性

肌肉是人体运动系统重要的组成部分,是人体运动的动力来源。可以说肌肉是生物学研究中最具吸引力和挑战性的研究领域。文章叙述了肌肉的工作原理、肌肉的三元素模型及其在向心收缩时的生物力学特性。     

慢性阻塞性肺疾病患者低氧血症对血清肌钙蛋白I的影响

目的　探讨慢性阻塞性肺疾病 (COPD)患者低氧血症对血清肌钙蛋白I(CTnI)的影响 .方法　对 137例急性发作期的COPD患者的血氧分压p(O2 )和血清CTnI及心肌酶谱进行检测 ,按氧分压的水平分成 3组 ,观察CTnI及心肌酶谱的变化 ,并分析COPD患者 p(O2 )与CTnI及各种心肌酶的相关关系 .结果　轻、中、重度低氧血症组的CTnI分别为 (0 .15± 0 .0 8) μg/L ,(0 .87± 0 .92 ) μg/L和 (2 .2 4± 0 .97) μg/L ,3组间均有显著差异 (P <0 .0 5 ) .而 3组 p(O2 )水平与相对应的CTnI水平呈显著的负相关关系 (r =0 .96 81,P <0 .0 5 ) .死亡患者 8例 ,平均CTnI为 (3.6 2± 1.0 8) μg/L ,与存活病例比较显著升高 (P <0 .0 5 ) .结论　低氧血症可导致COPD患者血清CTnI显著升高 ,且与氧分压p(O2 )呈显著负相关关系 .当CTnI明显升高时 ,提示患者病情危重     

中草药有效成分对于抗运动疲劳价值的初探

自由基的产生是肌肉疲劳的主要原因之一．利用分光光度法测定了30种中药抗羟自由基的能力．然后利用蛙类的腓肠肌观测其中6种抗羟自由基能力较强的中药对肌肉连续单收缩维持能力的影响,结果表明这6种抗羟自由基能力较强的中药均有一定的延长肌肉收缩时间的作用．此结果提示测定体外抗羟自由基的能力有可能作为筛选抗疲劳中药的一种手段．     

太平洋牡蛎肌肉蛋白的模拟胃肠液消化研究

采用美国药典提供的模拟胃液、肠液配方,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法(Western blot),分析了太平洋牡蛎肌肉过敏蛋白和非过敏蛋白在体外模拟胃液、肠液消化稳定性的差异.结果表明:在模拟胃液中,非过敏蛋白均能被胃蛋白酶快速降解,而主要过敏蛋白原肌球蛋白在60 min时仍未被...