穿膜肽Tat以脂筏介导的巨胞饮方式进入骨髓间充质干细胞

艾滋病病毒的一个富含精氨酸的Tat多肽具有穿膜转导蛋白功能并能介导多种外源性物质进入细胞甚至细胞核.本研究的目的是探讨Tat多肽进入骨髓间充质干细胞的机制.将FITC标记的Tat分别和Alexa Fluor 546-标记的转铁蛋白(笼形蛋白介导的受体内吞方式入胞)、Alexa Fluor 594-标记的霍乱毒素B(脂筏介导的巨胞饮内化方式入胞)同兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)共孵育.用激光共聚焦扫描显微镜可观察到在BMSCs中穿膜肽Tat和霍乱毒素B呈点状叠加而与转铁蛋白几乎无叠加,同时在细胞核部位观察到有绿色荧光的Tat,初步表明穿膜肽Tat以脂筏介导的内化方式进入BMSCs而非受体介导的内吞方式.另外,低温(4℃),破坏ATP、β-环式糊精和诺考达唑内吞抑制剂的使用均可观察到BMSCs内吞Tat的量降低,也间接验证Tat以脂筏介导的内化方式进入BMSCs.     

基于玉米醇溶蛋白-透明质酸载体的结肠靶向口服纳米药物研究

设计基于玉米醇溶蛋白(Zein)-透明质酸(HA)的口服纳米载体用于结肠靶向的药物递送.使用超声透析法制备玉米醇溶蛋白-透明质酸-羟基喜树碱(HCPT)纳米药物(Zein-HA@HCPT),利用渴望函数分析法优化纳米药物制备条件,考察纳米药物的微结构、药物释放行为、细胞毒性和靶向摄取能力.Zein-HA@HCPT具有95%以上的药物包封率,有优异的生物学稳定性、生物相容性和独特的抗胃酸分解特性,结肠环境下的药物累积释放显著提升.Zein-HA@HCPT通过CD44受体介导的内吞作用被结肠癌细胞靶向摄取,可提高药物抗肿瘤疗效.     

聚酰胺-胺型树枝状大分子的应用研究

聚酰胺-胺(PAMAM)型树枝状大分子聚合物是一类高度支化的聚合物,其不但内部具有空腔,而且表面有大量可供修饰的官能团,可以通过聚乙二醇化、乙酰化、糖基化和氨基酸等官能团化的表面修饰,来中和其表面的阳离子电荷并改善其树枝状大分子的生物相容性,也可与药物、质粒DNA、寡核苷酸和抗体等形成稳定的复合物.与传统的线性高分子相比,PAMAM树枝状聚合物具有生物降解性、非免疫原性和多功能性等优点,是促进其在药物递送、转染、肿瘤治疗以及具有高度精确度和选择性的诊断应用中的关键因素.PAMAM树枝状聚合物在医学领域、膜材料、纳米复合材料等方面有广阔的应用前景,对该聚合物在药物递送、基因治疗、诊断成像、光动力学治疗和增加难溶性药物溶解度等方面的应用加以综述.     

超声介导药物递送研究进展

如何实现药物靶向高效递送是目前的研究热点。超声具有无创、无辐射、操作简单、价格低廉等优点,临床诊断利用了超声波的反射、折射和衍射原理。由于具有机械效应和热效应,超声也是一种高效的药物控释外源性刺激方法,可以提高病变组织和细胞膜的通透性,促进细胞对药物的摄取,在此基础上发展的超声介导药物递送系统,已经成为一种高效、无创的递送技术。通过超声辐照肿瘤区域,实现药物的定点定量释放,提高局部药物浓度,改善疗效。超声联合各类载体,诸如超声微泡、脂质体等在药物靶向递送方面具有极大的临床转化价值。本文从超声增强药物递送机制、超声响应载体、超声增强药物递送效果及其临床应用前景等方面进行综述。     

蛋白变性因子对牛血清白蛋白(BSA)与1,8-苯胺基萘磺酸(ANS)复合体荧光特性的影响

1,8-苯胺基萘磺酸(1,8-ANS,下面简称ANS)是一种非极性荧光探针。当它溶解在不同极性溶剂中时,有不同的荧光特点,溶剂极性愈强,荧光效率愈低,其λ_(max)向长波方向移动(红移)。在水溶液中荧光效率近于零。它能与某些生物大分子和生物膜以非极性作用相结合,在生物大分子和生物膜研究中是一种应用广泛的荧光探针。白蛋白对许多种物质如自由脂肪酸、甾类化合物等具有很强的结合本领,是动物体内转运这类物质的主要载体。已经知道,这种蛋白质具有一种很强的带正电的疏水结合位。它由数个肽段组成,而在此肽段内含有一个色氨酸残基。在BSA分子内的另一     

牛磺酸修饰巯基化壳聚糖季铵盐载体的合成及其体外shTNF-α pDNA递送效果

本研究合成了牛磺酸修饰壳聚糖季铵盐(TT)和牛磺酸修饰巯基化壳聚糖季铵盐(TTC)聚合物,再利用TT和TTC包载沉默肿瘤坏死因子-α表达的质粒编码短发夹RNA(shTNF-αpDNA),形成TT-shTNF-αpDNA和TTC-shTNF-αpDNA纳米粒,研究了两种纳米粒理化性质、体外摄取和体外基因沉默效果.结果表明:TT-shTNF-αpDNA和TTC-shTNF-αpDNA粒径在180～305nm之间,电势在12～20mV之间,分散性良好;TTC-shTNF-αpDNA pH稳定性能优于TT-shTNF-αpDNA;TT-shTNF-αpDNA和TTC-shTNF-αpDNA均先突释后缓释;TT-shTNF-αpDNA和TTC-shTNF-αpDNA均可显著提高pDNA细胞摄取,TTC-shTNF-αpDNA细胞摄取量显著高于TT-shTNF-αpDNA;TT-shTNF-αpDNA和TTC-shTNF-αpDNA均以能量依赖方式入胞,通过巨胞饮和小窝蛋白介导的途径入胞,TTC-shTNF-αpDNA会通过网格蛋白介导的内吞途径入胞,TT-shTNF-αpDNA则不通过此途径入胞;TT-shTNF-αpDNA和TTC-shTNF-αpDNA均可有效递送shTNF-αpDNA入胞,从而抑制TNF-α蛋白表达,TTC-shTNF-αpDNA组基因沉默效果优于TT-shTNF-αpDNA组.因此,TTC有望作为合适的口服基因递送载体.     

高等动植物网格蛋白介导的内吞

主要阐述了网格蛋白、接头蛋白AP2复合体的组成及其功能、动物网格蛋白介导内吞的分子机制和植物网格蛋白介导内吞的一些最新进展;阐述了植物网格蛋白介导的内吞在生长素极性运输、胚胎发育及逆境响应等中的作用,总结了植物网格蛋白介导内吞的生物学意义及展望．     

二氢嘧啶-2-酮衍生物与DNA相互作用研究

DNA是遗传信息的携带者和基因表达的物质基础,药物分子与DNA的结合能够阻碍DNA的复制,使癌细胞的生长得到有效抑制.研究药物小分子与生物大分子的相互作用,有助于从分子水平上理解某些抗癌药物的作用机理,对设计临床上更为有效、毒副作用更低的新药具有十分重要的意义[1,2].     

蛋白质组学研究中磷酸化蛋白质(肽)富集策略及展望

蛋白质磷酸化是细胞信号转导途径中重要的调控过程,但磷酸化蛋白质(肽)丰度低、化学计量低、易降解等限制了磷酸化蛋白质(肽)的研究.磷酸化蛋白质(肽)的制备是蛋白质磷酸化研究成功的关键步骤.笔者综述了磷酸化蛋白质(肽)的一些富集策略:基于抗体技术、亲和性标签磷酸化蛋白质富集策略,基于固相金属亲和层析、金属氧化亲和层析、IMAC连续洗脱、离子交换层析、亲水相互作用层析的磷酸化肽富集策略,熟练掌握及综合应用这些磷酸化蛋白质(肽)的富集策略,对于研究细胞信号转导途径中的调控因子具有重要作用.     

基底刚度对基于纳米颗粒的阿霉素内吞影响的研究

通过探究阿霉素内吞调控的细胞活性以及内吞作用相关联的重要蛋白表达的变化，分析基底刚度对于基于纳米载药颗粒技术的阿霉素内吞行为的影响。通过调控PDMS基料和固化剂的比例实现基底刚度的调控。实验结果表明，具有适当刚度(杨氏模量为0.578 MPa, 0.815 MPa和1.986 MPa)基底上的细胞活性差，说明阿霉素的输运在该段基底刚度范围内效率较高。为了探究阿霉素内吞作用受基底刚度调控的内在机理，探索了与内吞过程紧密相关的αVβ5和NUMB的表达情况。从免疫荧光蛋白和Western blot实验结果来看，杨氏模量为1.986 MPa的基底上负责锚定网格蛋白的αVβ5蛋白荧光强度最高；在适当刚度范围内，NUMB蛋白荧光强度显著提高，表明受基底刚度调控的NUMB和αVβ5表达的提高介导了阿霉素的输运，从而影响细胞活性。此研究为进一步提高化疗药物治疗肿瘤的效果提供参考。     

基于海洋生物多聚物的功能因子递送系统

基于海洋多聚物的纳米材料是一种新型的功能因子负载体系,临床应用中药物与功能因子的递送方式主要有3种,分别是口服、经皮和注射,但由于体感差、药物递送量低、副作用和有效成分活性丧失等诸多问题的困扰,人们更加希望选择既能提高医疗效果和健康水准,又能满足良好舒适性的传输递送方式。研究发现基于海洋多聚物的纳米材料与传统口服递送体系的系统结合可以实现抗癌药物、营养物质、益生菌、疫苗等功能成分的高效递送,大大提高了上述成分的整体生物利用度。通过阐述纳米载体的制备、功能因子的负载及其吸收机制为基于海洋多聚物功能因子递送体系的发展提供参考和借鉴。     

微纳米马达在药物递送的应用进展

 微纳米马达药物递送技术是一种基于药物载体自身可发生自主运动的新型体内药物递送模式,可以在无损模式下促进治疗药物在病变部位的有效富集、滞留与渗透。简述了微纳米马达药物递送技术的研究进展,阐述了微纳米马达的给药方式、药物负载方式、微纳米马达药物递送体系的靶向能力、微纳米马达在生理环境下的药物递送运动、微纳米马达自主运动在提高细胞摄取和组织渗透性方面的促进作用,以及微纳米马达药物递送体系的具体应用案例等,展望了该领域的未来发展趋势。     

磷酸化壳聚糖-季铵化壳聚糖载体提高体内外基因转染功效

本研究通过磷酸化壳聚糖(PC)包被季铵化壳聚糖(TMC)/质粒(pDNA)纳米复合物,制备PC/TMC/pDNA三元复合物(PTC),用于提高体内外基因转染功效.PTC粒径为100~200nm,Zeta电势为-16~-34mV,可有效缩合pDNA,保护pDNA免遭核酶降解.PC降低PTC中pDNA结合力,增加体外释放量.表面荷负电的PTC抗非特异性蛋白吸附能力强,经小窝蛋白介导的细胞内吞途径入胞后逃避溶酶体降解,细胞核内分布比例高.HEK293细胞体外转染试验结果显示,PTC体外转染效率是TMC/pDNA纳米复合物(TC)的1.5~3.1倍;小鼠胫前肌注射给药试验结果表明,PTC可显著提高基因体内转染效率.因此,合适质量比的PTC有望作为功能性基因药物的递送载体,用于基因治疗.     

DNA纳米机器药物递送研究进展

 天然分子机器是细胞正常功能（包括DNA复制、细胞内物质运输、离子平衡和细胞运动等）的重要执行者。受天然分子机器的启发,人工分子机器的概念被提出并逐步实践。DNA分子独特的理化性质使得其可作为自组装基元用于构建分子机器类纳米结构。DNA纳米结构具有形状可设计性、精确的可寻址性、结构动态响应性及良好的生物相容性,可以作为一种良好的药物递送载体材料。通过可寻址的负载特定功能元件从而构建DNA纳米载体和治疗型DNA纳米机器,可以靶向性地将药物传递到病变组织和细胞,响应性地释放药物,提高药物的细胞摄取率并降低其毒副作用,有望成为优秀的药物递送系统。基于DNA纳米结构的药物载体已经被用于递送小分子药物、寡核苷酸类药物和蛋白药物。以每类药物分子中的典型药物为例,介绍了DNA纳米载体和DNA纳米机器药物递送系统的研究进展,并讨论了其所面临的挑战及可能的发展趋势。     

PNA介导的多肽二聚体形成研究（英文）

介绍了一种由PNA介导的非共价键结合的多肽2聚体形成的新方法.将多肽分别与互补的2条PNA链相连,互补的PNA链在杂交后将使其相连的多肽相互靠近从形成2聚体行驶功能,而使用的平行互补PNA-多肽链很容易通过化学连接方法获得.这项工作指出,PNA作为模板介导生物大分子组装和生物化学反应的潜力.     

壳聚糖-mPEG温敏水凝胶载药系统的制备及释药行为

壳聚糖-mPEG亲水性好,可制成适合生物大分子药物递送的反向温敏水凝胶给药系统。为改善壳聚糖(CS)在中性条件下水溶性和亲水性,用单甲氧基聚乙二醇(mPEG)修饰壳聚糖,得到带有mPEG支链的改性材料——CS-mPEG)。通过修饰方法优化,得到聚乙二醇(PEG)取代率为21%～25%的CS-mPEG。该CS-mPEG水溶性好,37℃溶胶-凝胶转变时间小于10 min。体外释药结果显示:该CS-mPEG水凝胶对生物大分子溶菌酶及小分子纳曲酮均有较好控释作用,且mPEG支链的亲水作用能保护蛋白活性,显著提高了活性蛋白的累积释放率。     

生物大分子纯化系统的应用与管理

生物大分子纯化系统是一类利用色谱技术,对各种生物大分子进行分离纯化的自动化运行系统。该文阐述了凝胶色谱柱的种类、生物大分子的分离纯化方法、纯化工艺中不同色谱技术的衔接及如何依据蛋白质等生物大分子的理化性质合理设计色谱方案、生物大分子纯化系统的维护与保养,并简要概述了生物大分子纯化系统在生命科学研究中的应用。     

体外透皮递送SPE的CMC/CS/Ca2+复合水凝胶及其抗氧化活性研究

像大豆肽(SPE)这样的肽类物质在药物靶向治疗和诊断等方面有着重要作用，但它们难以抵抗胃部极低的pH环境以及离子障碍，因此难以通过口服的方式进行递送。透皮递送系统可避免胃液的障碍，将药物递送到血液中。文中通过冻融循环成功制备了负载SPE的羧甲基纤维素/阳离子淀粉/Ca²⁺(CMC/CS/Ca²⁺)复合水凝胶，以克服透皮递送过程中皮肤角质层对水溶性SPE渗透的障碍。颗粒电荷分析(PCD)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)以及流变结果表明，CMC、CS及Ca²⁺之间产生了化学和物理交联作用，形成了稳定的复合水凝胶，且SPE与CS、Ca²⁺间产生的相互作用使其力学性能可满足透皮递送的要求；扫描电子显微镜(SEM)和比表面积测试(BET)结果表明，这些复合水凝胶内部具有多孔洞的三维网络结构。复合水凝胶的含水率均高于95.63%，在25℃下持续25 min后其保湿率仍在97.34%以上，所有复合水凝胶均在120 min内快速溶胀，在720 min时平衡溶胀分数可达636.23%，说明该复合水凝胶对水具有高度的...     

锌基MOFs材料在肿瘤治疗领域的应用进展

金属-有机框架（MOFs）是由含氧或氮的有机配体与过渡金属通过自组装连接而形成的具有周期性网状结构的晶体材料。该类材料因具有尺寸结构可调、高孔隙率、比表面积大、低晶体密度等一系列优点,而受到多个学科研究人员的重视。其中,锌（Zn）基MOFs材料因其优越的生物相容性和易功能化修饰等特点,受到了广泛的关注。文章主要从药物递送和协同抗癌等方面总结了Zn基MOFs材料的生物应用.     

纳米技术在抗肿瘤药物靶向递释系统中的应用研究进展

 纳米载药技术已经在抗肿瘤药物递送领域受到广泛关注。纳米技术可以显著增加难溶性药物的生物利用度,改善药物释放与摄取行为,提高药物对肿瘤组织的靶向性,增加药物在肿瘤组织的分布与蓄积,降低药物对正常组织和细胞毒副作用,实现减毒增效。尽管如此,如何有效克服肿瘤生理屏障,进一步提高化疗药物的肿瘤特异性,实现肿瘤组织深度渗透和肿瘤细胞内可控释药仍然是开发抗肿瘤纳米药物亟需解决的重大挑战。从被动靶向、物理靶向、主动靶向和仿生靶向4个方面概述了纳米载药系统抗肿瘤药物在克服肿瘤屏障实现肿瘤靶向药物递送方面的研究进展。