用植物提取物筛选与酵母甾醇乙酰化循环相关的物质

为了确定酿酒酵母中乙酰/脱乙酰循环是否参与细胞对某些甾体化合物或其类似物的毒性解除过程,将野生型(BY4742)、脱乙酰酶SAY1单突变体(say1Δ)、乙酰基转移酶ATF2 单突变体(atf2Δ)和SAY、ATF2 双突变体(atf2Δsay1Δ)酵母菌分别培养在含21种不同植物提取物的培养基中,比较其生长状况.结果显示,在含80 mg/mL黄芪提取物的培养基中,细胞生长必须依赖一个完整的乙酰化/脱乙酰循环的作用;而在含20 mg/mL生姜提取物的培养基中,其生长则必须依赖ATF2(乙酰化作用)的缺失.可以推测甾醇乙酰化/脱乙酰循环途径很可能间接参与了某些甾族化合物或其类似物的解毒过程.     

线粒体去乙酰化酶SIRT3与衰老疾病

线粒体去乙酰化酶SIRT3是酵母Sir2同源蛋白,通过对线粒体多种蛋白质赖氨酸的去乙酰化修饰,它可以调控多种代谢过程,如脂肪酸的β-氧化作用、TCA循环、氧化磷酸化等.SIRT3可参与氧化应激反应,降低细胞内ROS水平;也可以作为一种肿瘤抑制因子,促进细胞的凋亡.在某些乳腺癌细胞中,SIRT3表达下调.敲除SIRT3或者SIRT3表达降低,可影响与代谢相关的衰老性疾病如心脏疾病、癌症等的发生.论文总结了近年去乙酰化酶SIRT3在代谢调控及癌症细胞凋亡中的分子机制以及SIRT3与心脏疾病、癌症的相互关系,希望为衰老疾病的预防和治疗提供一定的理论基础.     

SIRT1在运动防治糖尿病患者骨骼肌胰岛素抵抗中的作用

沉默交配型信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)是NAD+依赖的组蛋白去乙酰化酶,参与葡萄糖/脂质代谢、线粒体生物合成、炎症、自噬和生理节律等.最近研究表明,SIRT1在糖尿病发病中发挥重要作用,糖尿病发病率升高与饮食结构的改变和久坐的生活方式密切相关,运动可以通过SIRT1介导的调控通路改善糖尿病患者骨骼肌的胰岛素敏感性,降低胰岛素抵抗.概括了近几年腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK),SIRT1,过氧化物酶体增殖物激活受体γ协同刺激因子1α(PGC-1α)在运动防治糖尿病中的研究现状及发展趋势,为通过运动改善骨骼肌代谢功能防治糖尿病提供新的思路.     

SIRT1与糖脂代谢及在运动医学领域的研究展望

SIRT1(silent mating type information regulation 2 homolog1),哺乳动物sir2同系物,一种NAD+依赖的组蛋白脱乙酰化酶。越来越多的证据表明SIRT1通过其脱乙酰化酶活性参与糖脂代谢,其对胰岛β细胞功能和胰岛素信号通路起着正性调节作用,对改善胰岛素的敏感性和维持糖脂代谢稳态具有重要作用。运动疗法是防治2型糖尿病、非酒精性脂肪肝和动脉粥样硬化等慢性疾病主要方法之一,但运动改善慢性疾病的机理还未完全阐明。已有研究表明运动训练能够诱导大鼠骨骼肌和心肌组织中SIRT1表达。运动改善慢性疾病机理是否与SIRT1有关尚不确定。在总结SIRT1与糖脂代谢关系的基础上,结合运动与SIRT1的研究现状,展望SIRT1在运动医学领域的研究前景。     

Cyclobacterium qasimii脱乙酰酶的异源表达及酶学性质

氨基葡萄糖因具有丰富的生物活性而被广泛应用,但目前其工业化生产均需利用浓酸在高温条件下进行脱乙酰反应;因此,需要寻找一种环境友好的生物催化法来取代酸水解法脱乙酰基。筛选并得到了来源于卡西氏菌Cyclobacterium qasimii的脱乙酰酶(CqCBDA),并将其成功地在大肠杆菌表达系统中进行了异源表达,且其具有较高水平的可溶性蛋白表达量。纯化后重组的CqCBDA具有N-乙酰氨基葡萄糖脱乙酰酶活性,比酶活力为11.5U/mg,最适温度为40℃,最适pH值为7.6,在低于40℃的条件下展现出较高的热稳定性。CqCBDA在酶解法生产氨基葡萄糖过程中具有较大的应用潜力,研究结果可为酶法绿色制备氨基葡萄糖提供理论参考。     

阿司匹林乙酰化修饰HDAC1抑制人结肠癌细胞HCT116增殖

大量研究表明阿司匹林具有重要的抗肿瘤作用。阿司匹林的乙酰基可以乙酰化大量蛋白质，从而影响体内的乙酰化水平，但其乙酰化作用在抗肿瘤上的具体机制还不清楚。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)已用于肿瘤治疗或处于临床研究，通过抑制组蛋白去乙酰化酶(Histone Deacetylases, HDACs)的去乙酰化酶活发挥抗癌作用。组蛋白去乙酰化酶1(Histone Deacetylase1, HDAC1)是Zn²⁺依赖的Ⅰ类HDAC家族成员，在多种癌症中表达上调，是组蛋白去乙酰化酶抑制剂(Histone Deacetylase Inhibitors, HDACi)发挥抗癌作用最关键的靶点之一。在抗肿瘤的过程中，阿司匹林是否乙酰化调控HDAC1尚未见报道。在本文中，我们发现阿司匹林可以乙酰化HDAC1并抑制其去乙酰化酶活，赖氨酸(K)200位点是阿司匹林乙酰化HDAC1的关键位点。有趣的是，HDAC1可以对自身去乙酰化，但不能发生在K200上。沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1),而不是HDAC1,可以对HDAC1的K200位点去乙酰化。进一步细胞学实验发现，在敲除H...     

α-氧代膦酸酯类衍生物的CoMFA研究

丙酮酸脱氢酶系是生物体有氧代谢关键酶之一,它催化植物体中由丙酮酸氧化脱羧转化为乙酰辅酶A的代谢过程．在这一代谢过程的第一步反应中,由于丙酮酸脱氢酶系的催化,丙酮酸的酮羰基与脱质子化硫胺素焦磷酸酯（TTP）加成结合,形成中间体,然后脱羧产生烃乙基TPP,之后进一步转化为乙酰辅酶A．     

细胞代谢调控网络

代谢是细胞及机体获取营养物质及能量的重要生命过程,其稳态平衡是机体应对内外环境变化进行正常生命活动的根本保障.代谢稳态平衡的破坏会导致各种疾病.细胞代谢稳态的维持有赖于机体和细胞之间及细胞内部多层次的调节网络.本文总结了内分泌系统部分激素调控细胞代谢及细胞内各代谢通路之间相互调节共同维持代谢稳态的机制,重点阐述了单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase, AMPK)及雷帕霉素机制性靶蛋白(mechanistic target of rapamycin, mTOR)信号通路对合成代谢及分解代谢的综合调控.     

制备脱乙酰甲壳素的研究

从虾蟹壳中提取甲壳素,利用甲壳素脱乙酰基制取壳聚糖并对甲壳素和壳聚糖粉末的制备条件进行优选.实验结果表明,先用4%的稀盐酸脱去钙质,反应时间8h,反应温度80℃,后用浓度为50%的浓氢氧化钠脱去乙酰基,反应时间4h,反应温度90℃,可以制得平均脱乙酰度为90.05%的高脱乙酰度的可溶性粉末状壳聚糖.     

脱乙酰几丁的制备及性能研究

几丁是由β（１，４）甙键连接的聚－２－乙酰氨基－２－脱氧Ｄ－吡喃葡糖，经浓碱水解脱乙酰基可制得脱乙酰几丁。本文采用分步水解法在１１０℃，４０％ＮａＯＨ中制得了脱乙酰度在９０％以上的高脱乙酰几丁，并分析探讨了几丁及脱乙酰几丁的热稳定性及热裂解行为。     

不同脱乙酰度壳聚糖对植物病原细菌的抑制作用研究

通过测定最小抑制浓度和相对抑制率，观察了脱乙酰度对壳聚糖抑制植物病原细菌(胡萝卜软腐欧文氏菌、油菜黄单孢菌绒毛草致病菌、丁香假单孢菌黍致病变种)效果的影响。结果表明3种不同脱乙酰度的壳聚糖在浓度为0．0005，0．00l，0．005g/L时，对病原细菌都有明显的抑制作用，抑制强度因壳聚糖的理化性质以及病原细菌的不同而有较大差异。在一定范围内，随脱乙酰度的增大(乙酰基含量降低)，壳聚糖的抑菌效果相应降低，提示乙酰基可能在壳聚糖的抑菌作用中起着重要作用。     

脱乙酰几丁质的制备及其对细胞透性和脱乙酰几丁酶活性…

虾壳经盐酸和氢氧化钠处理，高锰酸钾漂白，制得几丁质，几丁质经５０％ＮａＯＨ处理，获得脱乙酰几丁质，制得的脱乙酰几丁质能溶于３％醋酸中。植物离体叶片经不同浓度脱乙酰几个质处理，用电导法和染料结合法，分别测定细胞中电解质和蛋白质的外渗量，用分光光度法测定脱乙酰几丁酶的活性。结果表明，脱乙酰几丁质能使多种植物电解质的外渗量增加，脱乙酰几丁质的浓度愈大，处理的时间愈长，则外渗量增加愈显著。易染赤霉病的小麦     

SIRT1与乙酰化底物、NAD+或烟酰胺的相互作用

沉默信息调节因子2相关酶1 (SIRT1)是一类腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖性去乙酰化酶.烟酰胺是SIRT1催化的去乙酰化反应的产物,也是SIRT1的一种非竞争性抑制剂.利用蛋白同源模建和分子对接方法构建了“SIRT1/NAD+/p53乙酰化多肽”和“SIRT1/ADPR(二磷酸腺苷核糖)/烟酰胺”的两种复合物结构模型.根据“SIRT1/NAD+/p53乙酰化多肽”的复合物模型,发现SIRT1的265位丝氨酸(S265)和346位天冬酰胺(N346)与NAD+有相互作用,275位丝氨酸(S275)位于NAD+结合口袋的入口处.通过酶动力学实验证明:将S265、N346和S275突变之后会降低甚至消除NAD+与SIRT1的相互作用.另外,根据“SIRT1/ADPR/烟酰胺”的复合物模型,烟酰胺的酰胺基团与347位异亮氨酸(I347)、348位天冬氨酸(D348)形成了氢键,同时其嘧啶环埋在由262位丙氨酸(A262)、270位异亮氨酸(I270)、273位苯丙氨酸(F273)、316位异亮氨酸(I316)和347位异亮氨酸(I347)所包围的疏水环境中.将I316突变成丙氨酸,提高了酶与烟酰胺的结合能力,也显著提高了烟酰胺的抑制活性,这一现象表明烟酰胺结合在SIRT1的C口袋处.     

木瓜蛋白酶对壳聚糖的降解特性

研究木瓜蛋白酶催化壳聚糖降解过程中，温度、pH值、酶量、底物质量浓度以及脱乙酰度等条件对降解速率的影响，并通过计算机随机模拟试验，求出壳聚糖的脱乙酰度与GlcNAc-G1cN糖苷键相对含量的关系．结果表明，木瓜蛋白酶只选择性地降解GlcNAc-G1cN糖苷键，反应最适pH值和温度分别为4．5和45℃．     

SIRT5通过去琥珀酰化SHMT2促进肿瘤细胞增殖

一碳代谢通路中多种代谢酶与肿瘤的发生、发展都有密切关系,它们都可以作为肿瘤治疗的潜在靶点.丝氨酸羟甲基转移酶2(SHMT2)作为其中的关键代谢酶之一,对于肿瘤细胞的生长增殖具有非常重要的意义.然而SHMT2参与调解肿瘤细胞代谢的具体作用机制目前尚不明确.本研究发现SIRT5能去琥珀酰化SHMT2,提升其酶活,并鉴定到第181位赖氨酸是SHMT2的主要琥珀酰化位点.同时,本文还发现高浓度的甲氨蝶呤(MTX)能通过抑制SIRT5的表达,提升SHMT2琥珀酰化水平,达到抑制肿瘤细胞增殖的目的,这也为通过抑制SIRT5阻断肿瘤生长提供了新的理论支撑.     

脱乙酰几丁质的制备及其对细胞透性和脱乙酰几丁酶活性的影响

虾壳经盐酸和氢氧化钠处理，高锰酸钾漂白，制得几丁质，几丁质经５０％ＮａＯＨ处理，获得脱乙酰几丁质，制得的脱乙酰几丁质能溶于３％醋酸中。植物离体叶片经不同浓度脱乙酰几丁质处理，用电导法和染料结合法，分别测定细胞中电解质和蛋白质的外渗量，用分光光度法测定脱乙酰几丁酶的活性。结果表明，脱乙酰几丁质能使多种植物电解质的外渗量增加，脱乙酰几丁质的浓度愈大，处理的时间愈长，则外渗量增加愈显著。易染赤霉病的小麦品种比抗赤霉病的小麦品种，叶片电解质的外渗量增加。外渗量的增加与脱乙酰几丁质的浓度及处理的时间有关。叶片中蛋白质的外渗与电解质的外渗情况相似，易染病的品种比抗病的品种，蛋白质的外渗量增加７０％－８０％。脱乙酰几丁质处理，使抗病品种叶片中脱乙酰几丁酶的活性增加４０％－６０％。在同样条件下，不抗病品种酶的活性变化不大。文中对所得结果与植物抗病性之间的关系进行了讨论。     

壳低聚糖开发市场前景诱人

本刊讯壳低聚糖是2～10个脱乙酰葡萄糖组成的低聚糖,在调节人体和动植物生命代谢中起着重要作用,在医药及保健食品、饲料及农药等领域有广阔的应用前景.……     

活性氧双向生物学效应和机制

指出了活性氧（ROS）是普遍存在于有氧代谢中的产物,其化学性质极为活跃,有关ROS对人体的危害已逐渐得到公认.然而,越来越多的研究提示,一直被认为是人类疾病元凶的ROS对机体和细胞也有有益的一面.综述了ROS的研究进展,揭示了ROS通过调节离子通道、受体、酶以及转录因子的活性和改变细胞氧化还原状态,进而参与细胞的正常生理过程（细胞的增殖、分化和凋亡）,从而讨论了ROS的双向生物学效应和机制.     

凋亡与脑缺血损伤(综述)

细胞凋亡（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）是由Ｋｅｒｒ等［１］在１９７２年提出的，又称程序性死亡（ＰＣＤ），它是在细胞内外各种信号刺激下，激活细胞本身自杀程序而引起的。在这个过程中，细胞自身代谢机制被激活，主要为内源性ＤＮＡ内切酶激活，是在严格基因控制下需要特定蛋白质合成和能量的主动过程。它是一种重要的生理性调节机制，参与调节机体发育、细胞更新和分化等过程。脊柱动物的神经系统在生长发育过程中，多种类型的神经元在和它们的靶细胞形成突触联系后不久，有半数以上的神经元由于在竞争中无法获取足够的其存活所必须的特异性…     

熊果酸的4-氯半乳糖衍生物的合成

以a-D-三乙酰基-1-溴-4-氯半乳糖为原料,经Koenigs-Knorr反应、酯化反应,得到3-O-β-D-三乙酰基-4'-氯半乳糖熊果酸乙酯(UA2)、3-羟基-28-O-β-D-三乙酰基-4"-氯半乳糖熊果酸酯(UA5)和3-O-β-D-三乙酰基-4'-氯半乳糖熊果酸-28-O-β-D-三乙酰基-4"-氯半乳糖酯(UA8);研究了熊果酸衍生物脱乙酰基的条件,实验表明.在稀盐酸条件下得到4-氯半乳糖的2位保留乙酰摹的产物,在固体氢氧化钠条件下得到全脱乙酰基的产物;共合成了9个熊果酸的4-氯半乳糖衍生物,所有目标化合物均为新化合物,其结构经NMR得以确认.