不同血清型禽霍乱巴氏杆菌免疫的研究Ⅰ.不同方法制备免疫原的免疫保护试验

应用禽多杀性巴氏杆菌C48- 1菌株 (血清型为A∶1 ) ,分别通过接种人工培养基、含动物血液人工培养基、发育禽胚、感染易感鸡等途径 ,获得相应菌培养物后 ,分别制备成灭活免疫原 ,进行了对鸡免疫接种后的感染保护试验。结果初步表明 ,应用接种发育禽胚及感染鸡制备的相应菌培养物 ,其菌体发育及制备免疫原后免疫接种鸡的感染保护效果 ,均优于人工培养基的相应培养物 ,为免疫原的有效制备提供了技术资料及方法     

Daxx-C抗血清的制备与纯化及初步应用

将含有Daxx-C端的融合蛋白6His-DM626-740纯化物免疫小鼠,分析抗血清效价并将其纯化,为进一步分析Daxx在人乳头瘤病毒16型(HPV16)阳性宫颈癌组织中的分布奠定基础。将6His-DM626-740纯化物以皮下多点注射和腹腔注射方式免疫接种4只8周龄雌性BALB/c小鼠,初次免疫3周后,加强免疫1次,以后每周加强免疫1次;共免疫4次。每次免疫前及末次免疫后7天取血,ELISA测定抗体效价。饱和硫酸铵盐析沉淀法初步纯化抗血清,并用Western blot检测之。培养Caski细胞,利用间接免疫荧光试验观察Daxx在细胞中的分布与定位。纯化物免疫小鼠后,制备的Daxx-C多克隆抗体效价为1:6400。纯化的抗血清能够与IPTG诱导表达的6His-DM626-740及其纯化物发生结合反应。在Caski细胞,显绿色信号的Daxx主要分布于胞浆,少数分布于胞核且在核膜附近荧光较强,呈区域性聚集。6His-DM626-740纯化物具有良好的免疫原性;纯化的抗血清可用来检测细胞中的Daxx。     

双链核糖核酸免疫化学研究——Ⅰ.双链核糖核酸多聚[I]: 多聚[C]的抗原性

Schwartz和Stollar(1969)报道用多聚[A]:多聚[U]和甲基化牛血清蛋白(MBSA)混合,制备成抗血清,能和多聚单核苷酸的双链结构发生特异性反应。用补体结合试验证明这种抗血清的高稀释度,便可以和双链RNA反应,包括人工合成的多聚物或自然存在于呼肠孤病毒或其他病毒中的双链核糖核酸,但和单链RNA,自然或变性的DNA均不发生反应,而且,这些核酸的存在也不抑制抗体和ds-RNA反应。因此有可能在其他核酸存在的情况下,用抗血清检出少量双链RNA。曾经用双链RNA抗血清测定单链RNA病毒在侵     

混合菌群诱变及诱变菌群对闪锌矿浸出的影响

将采自不同地区的混合菌分别培养于以黄铜矿和黄铁矿为能源的9 K培养基中,并以该培养物作为出发菌群,用亚硝酸钠(NaNO2)、硫酸二乙酯(DES)、紫外线(UV)及其组合为诱变剂,对混合菌群进行诱变。诱变后,经过连续浸矿筛选,得到对闪锌矿浸矿效果最好的诱变菌群E。浸矿试验结果表明:在9 K和Leathen培养基中,用诱变菌群E浸出闪锌矿40 d后,Zn2 的浸出率分别比对照组提高68%和84%;离心收集Leathen培养基中的菌体和矿样浸渣,弃除液体,加入新的Leathen培养基,在30℃和200 r/min条件下,恒温摇床培养20 d后,诱变菌群E对闪锌矿中Zn2 的二次浸出率比对照组高92%。     

利用微生物混合培养物生产甜菜渣单细胞蛋白

利用半连续培养的方法组建了一个由７种微生物组成的能以甜菜渣作原料生产单细胞蛋白的混合培养物，在最佳条件下，甜菜被转化为含粗蛋白为４５％的单细胞蛋白，其氨基酸组成基本符合联合国粮农组织推荐的最佳蛋白质的组成，此咱微生物的混合培养物在营养方面是自我满足的，外来的微生物不能作为污染物存在于发酵系统中，因此，发酵过程可以在不灭菌的条件下进行，本研究还对混合培养物中各种微生物在降解甜菜渣过程中的作用进行了初     

3Rs原则的应用实例——用鸡胚肝细胞替代鸡肾细胞培养禽腺病毒

在动物实验中利用减少 (reduction)、替代 (replacement)和优化 (refinement)的 3Rs原则 ,是执行实验动物福利的重要体现。利用SPF鸡胚肝细胞培养禽腺病毒 ,用于制备诊断抗原和病毒研究 ,取代用SPF鸡肾细胞培养禽腺病毒 ,通过观察细胞病变和测定抗原滴度分析比较 ,前者完全可以替代后者制备禽腺病毒诊断抗原 ,是利用 3Rs原则的具体实践。尽可能利用可替代实验动物的替代物 ,通过细胞组织培养的方法取代活体动物进行实验 ,将动物的痛苦减至最低     

玉米渣多微发酵生产蛋白饲料的研究

采用固态多微混合发酵方式，进行以玉米淀粉渣为原料生产蛋白饲料的研究。通过从自然界分离的多株菌种进行诱变，筛选出能够很好降解玉米渣中纤维素物质的黑曲霉菌株Ｈ１和酵母菌Ａ、Ｂ。经研究发现，Ｈ１和Ａ、Ｂ酵母菌混合培养后，培养物中粗蛋白含量达２１．９％，纤维素转化率为４３．２１％，氨基酸组成齐全，并富含多各酶类。     

纤维素降解混合培养物的16S rRNA基因序列分析

以牦牛瘤胃内容物为接种物,以滤纸为唯一碳源富集到一个降解纤维素的混合培养物.构建混合培养物的16S rRNA基因文库,共获得49个序列,分为7个OTU.其中19个序列与已培养细菌的16S rRNA基因相似性97%,占总序列的38.8%;2个古菌的序列与甲烷菌的16S rRNA基因相似性分别为99%和98%,占总序列的4.1%;28个序列属于未培养细菌,占总序列的57.1%.未培养的序列形成4个独立的系统发育分支,其中3个未培养分支与在其他环境中的黏附在纤维素上的瘤胃细菌的16S rRNA基因序列相似性97%,推测这3类微生物可能与纤维素降解相关.     

嗜水气单胞菌与其拮抗菌R-15的生长曲线研究

嗜水气单胞菌的拮抗菌R-15经鉴定为粘质沙雷氏(Serratia marcescens Bizic).研究嗜水气单胞菌及其拮抗菌的生长曲线以及R-15菌与嗜水气单胞菌混合培养的生长曲线,分析拮抗菌R-15培养时间与其产拮抗活性物的关系,并对发酵液中拮抗活性物作初步分离.结果表明,拮抗菌R-15液体培养在20 h时菌体数量达最高,抑菌作用在36 h时最强;当两种菌混合培养至24 h后,嗜水气单胞菌数量从4.5×1017/mL开始快速下降至62 h的2.6×107/mL,而拮抗菌R-15仍维持较高水平.拮抗活性物质初步确定不是蛋白类物质.     

实验犬布鲁杆菌诊断试剂的制备和应用

目的　制备犬布鲁杆菌试管凝集菌液和抗血清。方法　苯酚生理盐水冲洗在肝浸液中培养的布鲁杆菌菌苔 ,参照标准比浊管制成所需浓度菌液。采用人工接种比格犬和家兔的方法 ,试管凝集试验测定所得抗血清效价。结果　家兔抗S型血清效价达 1∶32 0 0以上 ,R型抗血清效价达 1∶2 5 6 0以上。比格犬抗血清效价较低 ,最高为1∶6 4 0。结论　S型布鲁杆菌通过静脉免疫即可获得效价较高的抗血清 ,而犬R型布鲁杆菌需采用加佐剂肌肉注射的方法 ,血清效价才能达到较高水平     

3株细菌降解木质素的条件调控研究

采用苯胺蓝和RB亮蓝平板对从三国吴简腐蚀斑中分离得到的3株细菌Acinetobacter sp.B-2,Pandoraea sp.B-6和Novosphingobium sp.B-7进行脱色试验,考察这3株细菌在液体培养条件下的木质素降解性能,并对其木质素降解条件的调控进行研究,初步确定这3株菌适宜的降解条件。研究结果表明:这3株细菌具有使苯胺蓝和RB亮蓝染料脱色的能力,能够产木质素降解酶;这3株细菌的木质素降解速率较快,第5天木质素的降解基本趋于稳定;菌株适宜的降解条件如下:对Acinetobacter sp.B-2,氮源为硝酸铵,氮源浓度为0.01 mol/L,培养温度为30℃,初始pH=7.0,摇床转速为120 r/min;对Pandoraea sp.B-6,氮源为磷酸氢二铵,氮源浓度为0.03 mol/L,培养温度为30℃,初始pH=7.0,摇床转速为120 r/min;对Novosphingobium sp.B-7,氮源为硝酸铵,氮源浓度为0.01 mol/L,培养温度为30℃,初始pH为5.0,摇床转速为120 r/min。在适宜的降解条件下,这3株细菌第3天的木质素降解率均可达到30%～35%。     

Hydrogen production by mixed culture of several facultative bacteria and anaerobic bacteria

The characteristic of hydrogen production by facultative anaerobic bacteria, obligate anaerobic bacteria and their mixed culture was studied by the batch culture method. The results showed that, due to the synergistic effect between facultative bacteria and anaerobic bacteria, the ability of hydrogen production in the mixed culture was much better than that in the pure culture. Especially, the culture Scheme No.7 mixed up with three strains ( Bacterium.E: Bacterium.B: Bacterium.P = 1:1:1) not only had the best hydrogen production capacity (1.885 mol H2/mol glucose) and maximum average hydrogen production rate (212.2mL/(L·h)), but also had stable hydrogen production under continuous culture conditions, which was 1.968 mol H2/mol glucose.     

大理苍山花甸坝饮用水源细菌总数和大肠菌群的检测

目的：检测苍山花甸坝龙潭、西坡、农场总部3个饮用水源中的细菌总数和大肠菌群。方法：采用平板菌落计数法和多管发酵法分别对水样中的细菌总数和大肠菌群进行检测。结果：龙潭水源中未检到细菌和大肠菌群,而农场总部水源和西坡水源中检出大量细菌和大肠菌群,其中西坡水源中细菌总数〉300／mL,大肠菌群数〉230/L;农场总部水源细菌总=189／mL,大肠菌群数：230／L。结论：苍山花甸坝农场总部水源和西坡水源中的细菌总数和大肠菌群均不符合我国生活饮用水卫生标准（GB5749—2006）,不适于直接饮用,而龙潭水源则符合该标准。     

Hydrogen production by mixed culture of several facultative bacteria and anaerobic bacteria

The characteristic of hydrogen production by facultative anaerobic bacteria, obligate anaerobic bacteria and their mixed culture was studied by the batch culture method. The results showed that, due to the synergistic effect between facultative bacteria and anaerobic bacteria, the ability of hydrogen production in the mixed culture was much better than that in the pure culture. Especially, the culture Scheme No.7 mixed up with three strains (Bacterium. E: Bacterium. B: Bacterium. P = 1:1:1) not only had the best hydrogen production capacity (1.885 mol H₂/mol glucose) and maximum average hydrogen production rate (212.2 mL/(L·h)), but also had stable hydrogen production under continuous culture conditions, which was 1.968 mol H₂/mol glucose.     

3种常用抗生素应用于海洋微藻无菌化培养的研究

采用青霉素、硫酸庆大霉素、头孢他啶3种常用抗生素处理海洋微藻,以确定分离、纯化微藻时对藻细胞无害并能抑制伴生杂菌生长的抗生素浓度和培养时间.结果表明：青霉素的性质比较温和,能广泛地用于微藻的除菌;低剂量的硫酸庆大霉素也可起到类似作用;头孢他啶对各种微藻表现出来的作用并不相同,应慎用.对特征点进行方差分析也证实了以上结果,故建议海洋微藻的除菌以加入300 mg/L的青霉素或100 mg/L的硫酸庆大霉素作为一般用藻的除菌,培养6 d继代.     

高效脱酚菌的筛选及微生物多样性分析

为了揭示不同培养基分离的细菌种群的多样性差异及获得高效脱酚菌,采用单链构象多态性技术,以16S rRNA基因的V3区为靶对象,对3种不同培养基SJ(自制培养基)、LB(牛肉膏蛋白胨培养基)、YEB(酵母牛肉膏培养基)分离细菌的种群多样性进行了比较研究.结果表明:SJ培养基比LB和YEB培养基有更高的种群多样性,更适于细菌的分离筛选.利用SJ培养基筛选出的3株高效脱酚菌降解废水中总酚的能力均在99%以上,经过生理生化鉴定和16S rDNA测序,建立了系统发育树,鉴定出这3株菌分别属于气单胞菌属(Aeromonas)、芽孢杆菌属(Bacillus)和不动细菌属(Acinetobacter).     

土壤水分与通气性对硅酸盐细菌生长的影响

将同量的硅酸盐细菌分别接种到不同水分的土壤(10%、15%、25%、35%)和不同通气性条件的土壤(1.0、1.2、1.4、1.6 g/cm3)中,分别在恒温培养后的第3天和第10天时取样,用平板法记数硅酸盐细菌的生长情况,并对结果进行方差分析。结果显示:在土壤水分(绝对含水量)为15%左右,土壤容重为1.2 g/cm3时,硅酸盐细菌生长更好,同时对不同处理间硅酸盐细菌的生长结果进行方差分析,差异极为显著。     

硝酸银与传统抗生素对常见细菌和真菌的杀菌能力比较

摘要: 目的 比较硝酸银与传统抗生素对常见细菌和真菌的杀菌能力。方法 实验采用平板稀释法,即用 3 种药 物分别制成含不同梯度浓度药物的培养基,然后在其上涂布相应的细菌、真菌,根据菌落生长被抑制的状态,判断 最小抑菌浓度。结果 硝酸银对细菌和真菌都有抑菌作用,且无显著差异( P ＞ 0. 05) ,最小抑菌浓度 3—7 μg /mL; 金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌对新霉素较敏感,最小抑菌浓度在 0. 1—1 μg /mL 之间; 庆大霉素对金黄色葡萄球 菌和大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为 0. 1 μg /mL 和 1. 25 μg /mL; 庆大霉素对绿脓杆菌无抑菌作用,而新霉素对绿 脓杆菌的抑菌作用较差,其最小抑菌浓度为 16 μg /mL。结论 硝酸银对细菌和真菌的抑菌作用无选择性,而抗生 素却表现出了抑菌的高度选择性。随着银粒子及银离子在医疗上的作用被重新认识,我们认为,在临床上可以复 合使用硝酸银和抗生素以达到更好的杀菌和抑菌效果。     

用电阻抗法进行细菌耐药性试验

用自制的微生物电阻抗传感器和电阻抗测量装置,测量接种细菌的培养基电阻抗值,并将细菌在培养期间内取得的所有电阻抗值描记成阻抗曲线图谱.因正常细菌培养基所产生的阻抗曲线图谱与在细菌培养基中滴加了抗菌药物所形成的阻抗曲线图谱形态有明显差别,利用这种阻抗曲线图谱的形态差别来判断细菌的耐药性.该研究对实现医学临床快速耐药性试验,药敏检测自动化、智能化有一定的实际意义.     

过碳酸钠和微波对食用菌种植常见3种杂菌消毒试验

试验选用在食用菌培养基中最常见的、不易被杀死的3种菌(大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉菌)作为消毒灭菌试验对象,对过碳酸钠和微波的消毒灭菌效果进行测试。过碳酸钠采用20 000、10 000、1 000、100、50、10mg/L 6种浓度梯度进行试验。试验表明随着过碳酸钠浓度升高3种菌的数量均在减少。大肠埃希菌与黑曲霉菌在浓度为10 000 mg/L时全部被杀死,枯草芽孢杆菌在浓度为20 000 mg/L时全部被杀死。随着微波时间的增加菌的数量逐渐减少,在微波时间为210 s时黑曲霉菌全部被杀死,240 s时大肠埃希菌全部被杀死,300 s时枯草芽孢杆菌全部被杀死,达到了彻底灭菌的效果。