SDS-PAGE电泳法测定蒜头果蛋白的相对分子质量

蒜头果蛋白(malanin)是从广西、云南特有植物蒜头果中分离、纯化出的一种新的、具有抗肿瘤活性的植物蛋白质.采用变性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定malanin的相对分子质量.结果表明,malanin是一种双链蛋白质,由A、B 2条肽链通过二硫键连接而成,其相对分子质量约为65.94×103.方法具有简单、快速、直观的特点.     

荧光法测定蒜头果蛋白中Trp的含量

蒜头果蛋白(malanin)是从蒜头果种仁中分离、纯化出的一种新的植物蛋白质.以Na OH为水解液水解malanin,在激发波长225 nm,发射波长350 nm处测定色氨酸(Trp)的相对荧光强度.结果表明,malanin中Trp的含量为5.116 mg·g-1,即每分子malanin中含Trp约为4个.此结果将为酸水解测定malanin氨基酸的组成作为补充,同时也为malanin全序列的测定提供较好的参考数据.     

云南广西蒜头果适生区预测及环境影响因子

【目的】蒜头果(Malania oleifera)是一种兼有很高经济和生态价值的濒危植物。本研究旨在揭示云南、广西蒜头果的潜在适生区的空间分布格局,并且明确其主要环境影响因子,为蒜头果的保护与开发利用提供理论基础。【方法】通过野外调查、数字标本植物馆、全球生物多样性信息网络等方式获取了蒜头果样本136个。选取常见的20个主要环境因子作为参数,基于最大熵模型(MaxEnt)和ArcGIS地理信息系统平台构建了蒜头果潜在适生区预测模型,模拟蒜头果在云南和广西壮族自治区的潜在适生区。【结果】笔者构建的MaxEnt模型预测得到蒜头果的潜在适生区分布范围为104°~107°E及22°~26°N,预测适生区验证结果的受试者工作特征曲线下方的面积(AUC)均超过0.9。MaxEnt预测的蒜头果潜在适生区前4个环境影响因子及贡献率依次为:气温季节性变动系数因子(39.6%)、等温性因子(16.7%)、平均气温因子(13.7%)、气温年较差因子(11.5%)。【结论】云南文山州东南部以及广西西部是蒜头果的集中分布区,温度是影响蒜头果分布的主要因素,MaxEnt模型在蒜头果适生区预测中表现出极高的精度和可靠性。该研究将为蒜头果资源保护利用和人工繁育选址提供重要依据。     

蒜头果蛋白对HeLa细胞体外抗肿瘤活性及稳定性研究

蒜头果是一种单种属稀有植物,仅分布在云南、广西部分地区.将蒜头果种仁捣碎,采用离心、(NH4)2SO4沉淀及色谱层析等方法得到蒜头果蛋白(Malanin).MTT法测定Malanin对人宫颈癌HeLa细胞体外抗肿瘤活性并测定其与广谱抗癌药物顺铂(DDP)联合用药的效果,再测定Malanin的稳定性及贮存方式.结果表明,...     

稀有植物蒜头果基因组DNA提取方法的研究

 分别用改进的CTAB法、SDS法和高盐低pH法从蒜头果种仁中提取基因组DNA,通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法检测所提取基因组DNA的纯度.结果表明:用改进的CTAB法、SDS法和高盐低pH法所提取的蒜头果基因组DNA的OD₂₆₀/OD₂₈₀值在1.8~2.0之间,带型清晰无拖尾,说明所提取的DNA保持完好.其中改进的CTAB法所提取的基因组DNA质量最好、纯度也最高,为蒜头果分子生物学研究及下游操作奠定了基础.     

结晶法分离蒜头果油中神经酸溶剂选择研究

经过对蒜头果油的初步处理得到粗品神经酸．而后对粗品神经酸在三种单组分溶剂中的结晶分离提纯进行了研究.同时考察了混合溶剂对结晶分离的影响,通过GC～MS对结晶成分的分析,结果表明,石油醚、无水乙醇结晶分离较为理想。而汽油较差;混合溶剂能改善结晶分离效果,并且以石油醚和无水乙醇混合溶剂为最佳．     

蒜头果油臭氧化物的裂解方法研究

开展了蒜头果油臭氧化物的安全裂解方法的研究,考察了用O2和H2O2两种氧化剂裂解臭氧化物生成ω-羧基长链脂肪酸三甘油酯的反应条件.实验结果表明:蒜头果油臭氧化物用H202进行裂解比用Q反应条件温和,1,15.十五二酸二甲酯的得率更高.在55℃下用H2O2作为氧化剂,裂解反应2 h,1,15-十五二酸二甲酯的得率达到80.51%.     

蒜头果生殖生物学特性研究

对蒜头果Malania oeifera的开花传粉习性、花粉活力、种子活力和幼苗生长特性等进行研究.结果表明,蒜头果为虫媒传粉,主要访花昆虫有12种;花粉萌发率较低,花粉管生长速度慢且易弯曲,结实率低.种子萌发有一定障碍,幼苗生长受多种病虫害感染,成活率低.     

蒜头果种仁的化学成分分析

对产自广西巴马县25个植株的蒜头果的种仁进行破碎、提油及皂化,用硫酸-甲醇法酯化,并用气相色谱-质谱法对种仁油中的化合物成分进行分析.结果表明,不同植株蒜头果油的化学成分含量有一定的区别,而油酸、二十二碳烯酸和二十四碳烯酸的相对含量变化不大,变动系数仅分别为7.32%,7.44%和8.30%.表明二十四碳烯酸的相对含量在蒜头果的种仁中的稳定性,为下一步蒜头果利用提供依据.     

蒜头果果仁中7种金属元素含量的测定

采用湿法硝酸—高氯酸对蒜头果果仁进行了消解前处理,用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)测定了蒜头果果仁中Al、Ca、Fe、K、Mg、Mn、Zn 7种金属元素的含量。结果表明,7种元素含量分别为18.65μg/g,192.6μg/g,9.946μg/g,12.12 mg/g,2.259 mg/g,25.55μg/g和23.46μg/g。元素的检出限为0.001 2～0.169 8μg/mL,RSD=1.04%～7.58%(n=5),回收率为97.49%～109.6%。建立了蒜头果果仁中7种金属元素含量测定方法。该方法简便、快速,测定结果准确可靠。     

蒜头果种腐病研究初报

于2000年10月至2001年5月做蒜头果（Malana oleifera Chun et S.Lee）种子沙藏试验,沙藏2个月后随机抽样100粒种子解剖检查,发现种子感病率64%,其中全部腐烂变质率高达50%,局部感病率14%,沙藏5个月发病率达72%,从蒜头果树病腐组织分离、纯化得到4个属的6个菌株病原真菌,镜检到一种线虫。分别用这6个菌株的菌丝与分子孢子的混合液体进行人工接种试验,结果表明,茄类镰刀菌（Fusarium solani）和黄萎轮枝菌（Verticllum albo-atrum Reinke et Berthold.）表现出较强的致病力,认为它们是蒜头果种腐病的致病菌,并对它们的形态特征及引致的症状特点作了描述,线虫的危害状尚未明确。     

cDNA sequence and chromosomal localization of human platelet-derived growth factor A-chain and its expression in tumour cell lines

The amino-acid sequence of the precursor of the human tumour cell line-derived platelet-derived growth factor (PDGF) A-chain has been deduced from complementary DNA clones and the gene localized to chromosome 7. The protein shows extensive homology to the PDGF B-chain precursor. Expression of the PDGF A-chain gene is independent of that of the PDGF B-chain in a number of human tumour cell lines, and secretion of a PDGF-like growth factor of relative molecular mass 31,000 correlates with expression of A- but not B-chain messenger RNA.     

不同氮素形态肥料对油茶春梢生长的影响

为了给油茶林合理施肥管理提供科学依据,本研究以13 a生"岑软3号"油茶(Camellia oleifera)树为研究对象,以不施肥作为空白对照,以不加氮肥作为无氮对照,研究相同施氮量下硝态氮肥、铵态氮肥、酰胺态氮肥以及3种形态氮素1:1:1混合态氮肥对油茶春梢形态及生理的影响.结果显示,与空白对照相比,混合态氮对春梢...     

Receptor binding redefined by a structural switch in a mutant human insulin

Crystal structures of insulin have been determined in various distinct forms, the relevance of which to receptor recognition has long been the subject of speculation. Recently the crystal structure of an inactive insulin analogue has been determined and, surprisingly, found to have a conformation identical to native insulin. On this basis Dodson and colleagues have suggested that the known insulin crystal structures reflect an inactive conformation, and that a change in conformation is required for activity--specifically, the carboxy terminal residues of the B-chain are proposed to separate from the amino terminal residues of the A-chain. Here we report the solution structure of an active insulin mutant, determined by two-dimensional NMR, which supports this hypothesis. In the mutant, the carboxy terminal beta-turn and beta-strand of the B-chain are destabilized and do not pack across the rest of the molecule. We suggest that analogous detachment of the carboxy terminal region of the B-chain occurs in native insulin on binding to its receptor. Our finding that partial unfolding of the B-chain exposes an alternative protein surface rationalizes the receptor-binding properties of a series of anomalous insulin analogues, including a mutant insulin associated with diabetes mellitus in man.     

长针科线虫2种传毒种类和3种非传毒种类分子鉴定和亲缘分析

 裂尾剑线虫Xiphinema diversicaudatum和逸去长针线虫Longidorus elongatus是植物病毒的重要传毒线虫,具有重要的经济意义,被我国列入进境植物检疫性有害生物名单.通过对上述2种检疫性线虫和中国云南不同地区3种长针科线虫共7个种群rDNA的内转录间隔区(ITS)进行PCR扩增和测序,分别获得1 400～2 100 bp PCR产物片段,通过与Genbank上5种8种群的ITS区序列进行分析,结果发现裂尾剑线虫与包括逸去长针线虫等在内的其他4种线虫的同源性仅有55%,逸去长针线虫与3种长针科非传毒线虫的同源性仅为56%.同种不同种群间的rDNA-ITS的基因变异分别从0～10%不等.     

滇藏地区8种鹅膏菌的ITS序列分析

 对滇藏地区8种鹅膏菌的核糖体DNA(rDNA)内转录间隔区(ITS)进行PCR扩增和测序,用ClustalX(version 1.81)软件对所测的ITS序列进行比对分析.结果表明,除5.8S rDNA(其长度为160 bp)比较保守外,8个不同种的ITS序列在长度和碱基位点上都存在较大差异,其中ITS1区间的片段长度为206～297 bp,ITS2区间的片段长度为191～238 bp.这说明鹅膏属的种间具有较高的遗传多样性.利用MEGA(version 3.1)软件进行聚类,8个鹅膏菌在D=0.14处分成3组,与传统分类有出入.这为鹅膏菌的进一步分类及研究提供了分子依据.