甘薯毛状根植株再生研究

用发根农杆菌Ｒ１０００菌株感梁甘薯（渝薯３４品种）,获得转化毛状根,从毛状根中选择出了５个无性系,当毛状根培养在含有２ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋１ｍｏｌ／Ｌ玉米素的ＭＳ培养基上诱导出了愈伤组织,当愈伤组织培养在含有１ｍｇ／ＬＫＴ＋１ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０．５ｍｇ／ＬＩＡＡ的培养基上,３周以后获得了再生植株,用随机及增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分子标记检测出了再生植株的多态笥。     

玉米毛状根再生植株根系的植物内源激素动态变化研究

为了解不同时期的玉米毛状根再生植株根系生长发育与内源激素之间的关系,比较玉米毛状根再生植株与野生型材料根系的植物内源激素的含量差异,探析植物内源激素在玉米毛状根再生植株根系生长过程中的生理功能.以玉米毛状根再生植株为供试材料,采用高效液相色谱法(HPLC)分析苗期、拔节期、抽雄期、灌浆期、成熟期的根中的水杨酸(SA)、生长素(IAA)、玉米素(ZT)、赤霉素(GA_3)和脱落酸(ABA)的含量.结果表明,毛状根再生植株的根系的内源激素SA、ZT、IAA显著高于野生型,GA_3与ABA则反之.在玉米根系生长发育不同时期,内源激素间相互作用调控地上部植株及籽粒的形成.     

盐胁迫下玉米毛状根再生植株SnRK2基因的表达

玉米(Zea mays L.)属禾本科玉蜀黍属,是世界第一大粮食作物.本研究以玉米毛状根再生植株为植物材料,通过对盐胁迫下玉米毛状根再生植株SnRK2基因表达量进行半定量PCR分析,探究盐胁迫对玉米毛状根再生植株SnRK2表达的影响.结果发现,不同处理下玉米毛状根再生植株的SnRK2基因表达含量均高于对照,盐胁迫对玉米毛状根再生植株的SnRK2基因表达影响较小,但显著降低对照组玉米SnRK2基因的表达.本研究为后续探究玉米毛状根再生植株的耐盐机制提供理论支持.     

玉米毛状根再生植株灌浆期籽粒淀粉合成关键酶活性动态变化

选用毛状根再生植株及自交系吉单35为材料,研究玉米灌浆期淀粉合成关键酶ADPGPPase、UDPGPPase、SSS、GBSS、SBE的动态变化.结果表明:籽粒生长过程中,毛状根再生植株与吉单35玉米ADPGPPase、UDPGPPase、SSS、GBSS和SBE的活性变化趋势相似,均呈先升高再下降的趋势,但是毛状根再生植株中5种酶的活性均高于吉单35.毛状根再生植株淀粉合成酶的活性增加,从而有效地促进玉米籽粒淀粉的积累.     

温郁金组织培养高效再生及毛状根诱导体系初探

温郁金为浙江省道地药材"浙八味"之一,含有抗癌药用成分β-榄香烯等.从温郁金块根上端0.1—0.2 cm处剪取长1—1.5 cm的芽尖作为外植体,利用0.1%升汞消毒10 min,在丛生芽培养基MS+6-BA 2 mg/L+IAA 1 mg/L+ZT 1 mg/L+Cef 500 mg/L上能高效获得丛生芽,芽的再生率可达100%.丛生芽经切割后置于生根培养基MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.5 mg/L上形成带根的完整植株.此外,利用发根农杆菌K599侵染温郁金组培苗的茎段、块根和根茎段,均成功诱导出毛状根;其中,根茎段毛状根的诱导率可达75%.研究结果为快速大量繁殖和培育脱毒的温郁金以及利用毛状根工厂化生长温郁金药用成分提供了基础.     

玉米毛状根再生植株干旱胁迫与复水条件下膜质过氧化水平变化

选用毛状根再生植株及自交系P131为材料,研究玉米毛状根再生植株在干旱胁迫及复水处理条件下活性氧(ROS)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的变化,探究玉米毛状根再生植株的膜脂过氧化水平.结果表明:干旱胁迫8 d,和正常供水水平比,玉米毛状根再生植株和对照组植株ROS含量分别增加14.3%和35.4%.CAT和GSH-PX的含量不断增加,和ROS的变化趋势相似,对照组植株均高于玉米毛状根再生植株.复水后,两种植株CAT和GSH-PX以及ROS都迅速下降,干旱胁迫4 d、6 d处理的玉米毛状根再生植株迅速恢复到接近正常供水水平,干旱胁迫8 d含量略高于正常水平,且不同干旱胁迫处理之间的含量差异较小;但对照组植株不同干旱胁迫处理之间的含量差异较大.     

利用薄层细胞培养技术建立所罗门姜黄高效植株再生体系

以所罗门姜黄试管苗为外植体,从其茎基部依次横向切成05~08 mm的薄层,研究不同激素组合、不同薄层部位和不同培养条件对不定芽诱导的影响.结果表明,从试管苗茎基部所切取的薄层以第1条生根部位所切薄层出芽能力最强;在MS+3 mg/L 6-BA+02 mg/L NAA的芽诱导培养基中,光照培养45 d后,一棵试管苗所切薄层中最高可获得15个不定芽.不定芽在1/2 MS+1 g/L活性炭的成苗培养基中长成完整植株.再生植株经过驯化,移栽室外存活率达95%以上.     

百脉根植株高频再生体系的建立

以百脉根的下胚轴为外植体材料,探究不同激素种类和不同浓度对百脉根愈伤组织的诱导、分化增殖及生根的影响.结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基为:MS+2,4—D 2.0 mg/L+KT 2.0 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂;诱导愈伤组织分化最佳培养基为:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂;诱导不定芽生根的最佳生根培养基为:MS+NAA 0.01 mg/L+2%蔗糖+0.7%琼脂,生根率达100%;实验建立了一个高频的百脉根再生体系,为百脉根基因工程操作奠定了基础.     

玉米再生植株的性状和染色体变异

继代培养6～8个月的玉米自交系黄早4愈伤组织产生的植株,其形态特征和生长发育出现多种变异。平均株高、叶片数和茎粗低于对照(实生苗).多数植株生育期变短,生殖器官发育异常,结实率低,单株结籽数少.一些植株的株型、叶序或花丝颜色等性状也发生变化.根尖细胞染色体分析表明,再生植株中,二倍体、混倍体和非整倍体的频率分别为84.25％、9.45％和6.36％,有25.2％的植株出现明显的染色体结构变异。     

成单玉米悬浮细胞系的建立及植株再生

作者利用成单玉米１５,１８号的幼胚诱导的愈伤组织,系统地研究了愈伤组织的改良、悬浮细胞系的建立及植株再生。结果表明,通过调节２,４－Ｄ的浓度、调节盐离子浓度、加入一定浓度的ＮａＣｌ、添加一定量的ＫＴ、ＧＡ３、ＮＨ４ＮＯ３以及采用液体适应培养等改良措施,选择得到了颜色鲜黄、小颗粒状结构、不分泌粘液、生长较迅速和易于悬浮的松脆愈伤组织;在悬浮培养初期,经过高浓度２,４－Ｄ的启动,先后建立了５个悬浮细胞     

百脉根的体细胞胚胎发生与高频率植株再生

百脉根的子叶，下胚轴，根在含ＢＡ，ＫＴ，ＺＴ或ＴＤＫ的ＭＳ培养基上均可直接成苗。芽分化频率与添加在培养基里的激素种类密切相关激素浓度对芽的分化和苗的形态影响极大。再生植株经不定芽和体细胞胚胎发生途径形成。体细胞起源于单细胞，其发育过程与合子胚相似。     

骆驼刺高效离体植株再生体系的建立

通过对络驼刺（Ａｌｈａｇｉ ｐｓｅｕｄａｌｈａｇｉ Ｄｅｓｖ）不同外植体来源、不同培养基及激素配比的比较,建立骆驼刺培养高效再生植株实验体系。表明骆驼刺下胚轴切段在含１．５￣２．０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ和０．５￣１．０ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ的ＭＳ培养基中１００％诱导愈伤组织,在含１．５ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ和１．０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的ＭＳ培养基上愈伤组织分化成苗,转至含２．０ｍｇ／Ｌ ＩＢＡ和０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的ＭＳ培养基上成根得到完整再生植株,组织学观察表明植株再生主要为器官发生途径,染色体稳定遗传。     

地黄毛状根的培养研究

发根农杆菌是一种革兰氏阴性菌,能侵染大多数的双子叶植物,诱发被感染植物的受伤部位长出毛状根.本实验用发根农杆菌感染地黄外植体诱导其产生毛状根,并加以培养,为今后选择合适的培养方式,大规模培养毛状根来生产地黄的次生物质奠定基础.     

龙胆毛状根的诱导培养

发根农杆菌（Ａ．ｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）Ｒ１５００感染龙胆茎段、叶片外植体，１５ｄ后可诱导出毛状根。茎段诱导率高于叶片，可达４２．３％。毛状根的诱导与温度和光照有关。转化根具有抗卡那霉素的特征，在不含激素的ＭＳ培养基上培养，筛选出了生长正常的毛状根系。     

玉米幼胚的组织培养及其植株再生的研究

以成单１４,１５,１８三种基因型玉米为材料,对幼胚愈伤组织的诱导和继代培养,植株再生,再生苗的培养和移栽等方面进行了系统的研究,三种基因型玉米幼胚经诱导均可产生愈伤组织,但只有成单１５,１８两种基因型玉米幼胚产生的愈伤组织可继代培养下去。     

水稻的光能利用

一、光能利用是水稻生产的核心在本世纪六十年代,国外培育出耐肥、矮秆的水稻、小麦新品种,着眼点是在“肥”字,他们吹嘘为第一次“绿色革命”。到七十年代,从植物生理角度,认为要改变株型,提高作物对太阳光能利用率,才能较大幅度地提高产量,着眼点放在“光”字,外国资产阶级吹嘘为第二次“绿色革命”。我们对这些提法有两点要说明的。第一,资产阶级学者提出“绿色革命”的目的,是要掩盖阶级矛盾,麻醉人民不起来革命,与被压迫人民“红色革命”相到抗,对其政治上的反动性必须加以揭露批判。第二,全世界首先培育出矮秆品种的,不是他们,而是我国的贫下中农。一九五六年我省揭阳县农民育种家已培育出“矮脚南特”水稻品种,以后广东省农业科学院及其他地区有关单位相继育成“广场矮”、“珍珠矮”等大量矮秆籼稻品种。这些都比国外培育的稻、麦矮种早好几年。然而,上述提法也说明一个问题:通过改变株型来改善光合作用,提高光能利用效率,在增产上起较大的作用。     

玉米幼胚愈伤组织再生植株的变异

玉米受粉7—10天的幼胚,在含激素的MS培养基上诱导生成愈伤组织,并分化出胚状体,成苗后移栽于温室内,至成熟结实。这些试管苗植株在整个生长发育过程中,出现了雌穗顶生,顶生雌雄同穗,植株矮,叶片少,雌穗着生部位低及轮生叶序和对生叶序等多种显著的差异和变异。     

普通小麦与玉米的体细胞杂交再生完整植株

从小麦济南177制备得到两种原生质体，一种来源于具有一定分化能力的愈伤组织但其分裂能力较低；一种来源于生长迅速的悬浮细胞但不能分化，将二种原生质体混合，共同作为受体与经过紫外线（UV）照射的玉米（Zea mays L)原生质体在PEG诱导下融合，培养后获得再生克隆并进一步分化为植株，而它们单独与玉米原生质体融合均不能再生植株，通过染色体、同工酶及5SrDNA分析及生长习性分析证明再生植株均为体细胞杂种。