西兰花中异硫氰酸盐诱导HepG-2凋亡的研究

探讨西兰花中异硫氰酸盐(isoth iocyanates,ITCS)诱导HepG-2细胞凋亡作用及其可能机制.用不同质量浓度ITCS处理肝癌HepG-2细胞,通过SRB法、细胞形态学观察、流式细胞仪和激光共聚焦显微镜实验,观察ITCS对HepG-2细胞的抑制率和细胞凋亡的影响.结果:1、10、50和150μg/mL的ITCS作用于HepG-2细胞72 h后,ITCS可抑制HepG-2细胞的增殖,其IC50为15.824μg/mL;120μg/mL的ITCS作用HepG-2细胞24 h后,细胞出现早期凋亡细胞的形态;60、120、240μg/mL的ITCS作用于HepG-2细胞48 h后,可见细胞凋亡率分别为(16.6±2.8)%、(21.9±4.4)%和(70.2±5.3)%;15、30、60μg/mL的ITCS作用于HepG-2细胞24 h后,细胞内的Ca2 质量浓度升高,且随着ITCS给药剂量的增加而升高(P<0.05).ITCS能够促进人肝癌细胞系HepG-2细胞的凋亡,其作用机制可能与ITCS升高细胞内Ca2 质量浓度有关.     

水鬼蕉总生物碱对人肝癌细胞HepG-2凋亡作用

研究水鬼蕉生物碱(AHL)对人肝癌细胞HepG-2的凋亡作用.采用四甲基偶氮噻唑蓝比色法(MTT法)检测水鬼蕉生物碱对人肝癌HepG-2细胞的生长抑制作用,荧光显微镜观察水鬼蕉生物碱对人肝癌HepG-2细胞形态学的影响,流式细胞仪检测水鬼蕉生物碱诱导人肝癌HepG-2细胞的凋亡率.MTT结果显示水鬼蕉生物碱对HepG-2细胞具有一定的细胞毒作用,且随着质量浓度的增大而增强;Hoechst33258染色以后,荧光显微镜下观察,正常细胞的细胞核呈现均匀的蓝色荧光,而凋亡细胞的细胞核则现出致密强荧光及凋亡小体;利用碘化丙啶(PI)单染通过流式细胞仪检测分析表明不同质量浓度的水鬼蕉生物碱作用HepG-2细胞72 h后,有明显凋亡峰出现.通过体外实验表明水鬼蕉生物碱可以诱导人肝癌细胞HepG-2的凋亡,为新药研发提供科学依据.     

牛耳枫生物碱2-hydroxyyunnandaphnine D体外抗肿瘤活性及作用机制

为了研究牛耳枫生物碱2-hydroxyyunnandaphnine D体外抗肿瘤活性及作用机制,用MTT法检测6.25～100 mg/L 2-hydroxyyunnandaphnine D分别作用于人肝癌细胞(HepG-2)、人乳腺癌细胞(MCF-7)及人宫颈癌细胞(HeLa)后不同时间点的细胞存活并计算细胞增殖抑制率和IC50;FDA/PI双染色荧光显微镜观察细胞死亡情况;分光光度法检测Caspase-3酶活性变化;MTT法检测凋亡抑制剂Z-VAD-FMK对2-hydroxyyunnandaphnine D抑瘤活性的影响.结果显示:2-hydroxyyunnandaphnine D对3种瘤株均有明显的抑制作用,且具有明显的时效量效关系,其48h的IC50值分别为(1.30±0.09),(7.32±0.10)和(8.41±0.11)mg/L.FDA/PI双染色荧光显微镜观察显示2-hydroxyyunnandaphnine D组中死亡细胞数较正常对照组细胞死亡数量增加,且随着剂量的加大细胞死亡数量增加.MTT法显示凋亡抑制剂Z-VAD-FMK不能阻断2个浓度的2-hydroxyyunnandaphnine D对HepG-2细胞的增殖抑制作用.Caspase-3酶活性测定显示l0,30mg/L 2-hydroxyyunnandaphnine D作用后肿瘤细胞的Caspase-3酶活力单位与正常对照组比较无统计学意义.结果表明:牛耳枫生物碱2-hydroxyyunnandaphnine D在体外具有明显的抑制肿瘤细胞增殖的作用,其作用机制并非通过激活Caspase-3途径.     

吴茱萸碱调控微管蛋白聚集阻滞HepG -2细胞周期

研究吴茱萸碱对人肝癌细胞HepG-2的细胞周期阻滞作用及其机制.MTT法检测吴茱萸碱(Evodiamine)对人肝癌HepG-2细胞的细胞毒作用;流式细胞仪分析吴茱萸碱对HepG-2细胞周期的影响;免疫荧光染色法,经激光共聚焦显微镜( CLSM)观察检测吴茱萸碱对HepG-2细胞内微管蛋白α-tubulin聚合形态的影...     

荔枝核提取物对HepG-2细胞生长抑制及凋亡诱导机制的探讨

目的:探讨荔枝核提取物成分L2.3对人肝癌细胞HepG-2的生长抑制作用及其分子机制.方法:MTT法测定样品对HepG-2细胞的增殖抑制,荧光染色观察细胞凋亡;比色法检测样品对HepG-2中caspase-3、caspase-8和caspase-9活性的影响,流式细胞仪检测并分析Fas蛋白表达的变化.结果:L2.3对HepG-2细胞表现出时间及剂量依赖性增殖抑制活性(P<0.05),其半数抑制质量浓度为43.0 μg/mL;处理组细胞中出现致密浓染亮蓝色凋亡小体.较高质量浓度的L2.3处理细胞后,caspase-3、8、9的活性均呈时间依赖性增高(P<0.01),且Fas蛋白的表达也明显上调(P<0.05).结论:荔枝核提取物L2.3对HepG-2细胞有体外增殖抑制活性,并介导 caspase-3、caspase-8、caspase-9活性改变及Fas蛋白表达的上调,以此诱导细胞凋亡的发生.     

爪哇黄芩二氢黄酮对HepG-2细胞增殖的影响

为研究爪哇黄芩二氢黄酮活性成分的抗肿瘤作用,筛选了爪哇黄芩活性部位和敏感细胞株,并研究了爪哇黄芩活性二氢黄酮对敏感细胞株HepG-2细胞增殖的影响,为开发天然药物奠定了实验基础.选取体外培养的人肝癌细胞HepG-2、胃癌细胞SGC-7901、肺癌细胞A549、乳腺癌细胞MCF-7及神经胶质瘤细胞C6为模型,以半数抑制浓度(IC50)为指标,采用MTT法测定爪哇黄芩石油醚、二氯甲烷、正丁醇提取部位对5种肿瘤细胞的增殖抑制作用,结果表明,爪哇黄芩二氯甲烷部位为其活性部位,人肝癌细胞HepG-2为其敏感细胞株.然后,采用MTT法测定活性部位分离的二氢黄酮单体对HepG-2的抑制作用,进行活性单体的筛选.结果显示,爪哇黄芩5,6,2'-三羟基-7-甲氧基二氢黄酮IC_(50)为110.3μmol/L,爪哇黄芩5-羟基-6,7,2',6'-四甲氧基二氢黄酮IC_(50)为747.21μmol/L.实验数据表明,爪哇黄芩5,6,2'-三羟基-7-甲氧基二氢黄酮为爪哇黄芩活性二氢黄酮单体成分.     

隐丹参酮诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡作用研究

目的:探讨隐丹参酮诱导人肝癌细胞HepG-2细胞凋亡作用及机制。方法:采用MTT法测定隐丹参酮对人肝癌HepG-2细胞生长率的影响,流式细胞仪测定隐丹参酮诱导人肝癌细胞HepG-2细胞DNA的影响,蛋白印记测定隐丹参酮对人肝癌细胞HepG-2、caspase-3、PARP、bcl-2以及bax蛋白表达的影响。结果:隐丹参酮12.0μM-100μM对HepG-2细胞生长率的抑制与对照组比较具有显著性差异;隐丹参酮作用12h、24h和48h后,细胞凋亡率分别为1.95%、5.84%和9.05%;隐丹参酮(12μM)孵育24h和48h可显著促进caspse-3和PARP的裂解;隐丹参酮(12μM)孵育24h和48h可显著抑制bcl-2促进bax的蛋白表达。结论:隐丹参酮诱导人肝癌细胞HepG-2细胞凋亡,机制可能是通过抑制bcl-2,促进bax表达,通过调控bcl-2/bax比值,最终激活下游效应因子cas-pase-3,从而诱导细胞凋亡。     

不同结构PEG-PCL共聚物纳米粒的制备及质量评价

为了比较聚乙二醇-聚己内酯(PEG-PCL)不同结构共聚物纳米粒的性质,采用开环聚合反应制备PCL-PEG-PCL和mPEG-b-PCL共聚物,通过FT-IR,~1H-NMR和GPC进行结构确证,利用分子自组装技术分别形成了"蘑菇"结构和"刷"结构载姜黄素(CUR)纳米粒共聚物,对其性质进行了研究。结果表明:CUR以无定型态存在于纳米粒中,纳米粒形貌为球形核壳结构且分布均匀;受共聚物结构的影响,"蘑菇"结构纳米粒具有较小的平均粒径(105.71±3.20)nm、较高的载药量和包封率;PCL-PEG-PCL纳米粒表面形成了致密的PEG层,能有效防止蛋白质吸附,在体内具有良好的稳定性;"刷"结构纳米粒具有较低的临界胶束浓度(CMC)和良好的缓释性能,对HepG-2细胞增殖有较高的抑制作用。因此,研究载药纳米粒可为药物递送系统的选择以及不同结构纳米粒的临床应用提供参考。     

矢车菊素与矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对H2O2诱导HepG-2细胞氧化应激保护作用的比较

以人肝癌细胞HepG-2为模型,以细胞抗氧化水平为指标,比较研究一种花色苷元矢车菊素(Cy)和其对应的花色苷矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)对H_2O_2诱导的细胞氧化应激的保护作用。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的存活率,采用总抗氧化能力(T-AOC)和细胞中的超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)的含量评价样品的抗氧化保护作用。结果表明:两种花青素在0~0.5 mmol/L范围内对HepG-2细胞无明显的毒性;与H_2O_2氧化应激模型组相比,在高(400μmol/L)、中(200μmol/L)、低(50μmol/L)3种浓度下两种结构的花青素处理均可显著提高细胞总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活力和还原型谷胱甘肽含量,降低细胞内丙二醛含量,抗氧化能力与花青素浓度呈正相关性;而Cy的细胞抗氧化作用显著高于C3G。该研究结果为阐明花青素的构效关系提供了体外研究的新证据。     

亚砷酸钠对NIT-1细胞增殖及胰岛素基因表达的影响

为了观察亚砷酸钠(NaAsO2)对胰岛β细胞NIT-1增殖及胰岛素(Insulin)基因表达的影响,本实验使用不同浓度的NaAsO2(1,2,4,8,16和32μmol/L)分别不同时间(24h和48h)作用于NIT-1细胞,以MTT法检测细胞的增殖活性,RT-PCR方法检测Insulin mRNA的表达。结果显示:1)NaAsO2对NIT-1细胞增殖活性的影响:当NaAsO2浓度小于2μmol/L的时候轻度促进NIT-1细胞增殖(P0.05)。当NaAsO2浓度大于4μmol/L时抑制细胞增殖(P0.01),细胞增殖抑制率随NaAsO2浓度的增加及作用时间的延长而增加(P0.01)。2)NaAsO2(1,4和8μmol/L)对NIT-1细胞Insulin mRNA的表达的影响:作用24h,各剂量组InsulinmRNA表达降低,其中8μmol/L组与对照组比差异有统计学意义;作用48h,各剂量组Insulin mRNA表达降低,其中4μmol/L组和8μmol/L组与对照组比差异有统计学意义。由此可得出砷对NIT-1细胞增殖及Insulin基因表达的影响与作用时间、剂量有关,Insulin mRNA表达水平的改变可能是砷影响胰岛β细胞功能进而引发糖尿病的机制之一。     

白英抗肿瘤作用的实验研究

探讨白英(solanum lyratum thunb)的抗肿瘤作用,采用MTT法观察白英含药血清对人癌A2780、Hela、SGC-7901细胞的体外抑制作用.采用体内试验以荷瘤小鼠实体瘤重、抑瘤率为实验指标评价白英对S180移植性肉瘤的抑制作用;以荷瘤小鼠存活时间为实验指标评价白英对H22移植性腹水癌的抑制作用.白英含药血清均能明显抑制体外培养的A2780、Hela、SGC-7901细胞的生长;白英能明显抑制实体瘤重和延长荷瘤小鼠存活时间.说明白英对体外培养的A2780、Hela、SGC-7901细胞有明显的抑制作用;具有一定抑制S180、H22诱发的移植性肿瘤作用.     

日光节能温室茄果类蔬菜病虫害防治规程

介绍了茄果类蔬菜的主要病虫害种类和主要病虫害发生情况及重点防治对象,论述了日光节能温室茄果类蔬菜病虫害防治规程主要有播种前各种病虫害的防治、幼苗期各种病虫害的防治、定植至开花期各种病虫害的防治、开花结果期各种病虫害的防治等。     

鳖“黑斑病”病原的初步研究

对鳖黑斑病的病原分离、人工感染、生理生化、药物敏感试验等进行了研究和探讨,确定该病的致病菌为嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）,该病的治疗宜采用环丙沙星、庆大霉素、氟嗪酸等。     

支气管动脉灌注化疗治疗中晚期肺癌效果评价

目的：探讨支气管动脉内化疗物灌注（BAI）治疗中晚期肺癌的临床效果,方法：对临床确诊的中晚期肺癌88例病人进行支气管动脉内化疗药物灌注（BAI）,化疗药物组合依据不同的病理类型选择不同的化疗药物,结果：本组病例完全缓解（CR）17例,部分缓解（PR）52例,稳定（S）15例,进展4例,病例显效（CR＋PR）69例（69／88）,有效（CR＋PR＋S）84例（84／88）,结论,支气管动脉内灌注化疗药物（BAI）治疗中晚期肺癌疗效确切,近期疗效显著。     

根类中药材的电泳分析

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),对根类中药丹参、黄芪、桔梗、远志、板蓝根、前胡、欧当归、花土当归、防风、北沙参进行了蛋白电泳分析。实验结果表明,不同种药材的蛋白谱带明显不同,鉴别效果良好,为根类中药的鉴定和质量控制提出了一个分辩率高、专属性强的鉴别方法。     

阿斯匹林的热稳定性及其热解动力学

目的研究了阿斯匹林的热稳定性及热解动力学.方法采用TG热重仪测定药物的热解曲线,用多条升温速率法Freeman-Carrollde 法和 Ozawa 法处理热重数据并比较热解活化能和热解温度.结果计算出阿斯匹林的热解动力学参数活化能、指前因子、反应级数;热解动力学方程为dα/dt=1.15×108e-96.04/RT (1-α)1.91.结论阿斯匹林片剂的热稳定性大于原药.由于阿斯匹林对温度敏感,应低温储存.阿斯匹林在室温下分解10 %约需2.08 a.     

血清中43种滥用药物的固相萃取法研究

 使用CLEANSCREEN^? 固相萃取柱分别对血清中43种滥用药物进行提取方法的研究,其提取物分别采用GC-MS和UV方法测定.结果表明:在43种滥用药物中,回收率超过90%的药物有26种,居80%～90%的药物有8种,居60%～80%的药物有另外8种,小于60%的药物仅有1种.因此CLEANSCREEN^? 固相萃取柱可用于血清中该43种滥用药物的提取或筛选分析,且是一种快速、简便及具有较高回收率的提取方法.     

诺氟沙星与氧氟沙星同时与牛血清白蛋白分子作用的荧光光谱

氧氟沙星(OFX)、诺氟沙星(NOR)皆能使牛血清白蛋白(BSA)的荧光猝灭.当2种药物共存时可进一步使BSA荧光猝灭,借此利用荧光光谱法研究了诺氟沙星、氧氟沙星药物间的相互作用.研究结果表明2种药物间存在相互作用,使药物与蛋白的结合稳定性减小;BSA的荧光猝灭属于静态猝灭,药物与BSA结合位点数n近似为1.依据F(o...     

氯丙嗪和异丙嗪抗红细胞膜脂过氧化机理初探

对具有显著抗辐照膜脂过氧化作用的两种药物氯丙嗪和异丙嗪进行了作用方式的研究。结果表明：随浓度增高,药物对辐照膜脂过氧化能达到完全抑制;药物对丙二醛产生的抑制作用大于其对脂氢过氧化物产生的抑制作用;药物不直接与丙二醛和脂氢过氧化物反应;药物能吸附在膜上,且主要在照射引发时通过清除自由基而起作用。     

浅析小说《儿子与情人》、《虹》中的象征手法

D·H·劳伦斯是英国 2 0世纪杰出的心理小说家。在《儿子与情人》、《虹》这两部小说中象征手法的应用在展示人物复杂心理状态 (包括意识、无意识精神活动 )方面起了重要作用。劳伦斯的小说在象征手法的应用上主要有三类 :细节性场景象征、意象象征、神话象征