高迁移组染色体蛋白-17的分离提取及其抗体ELISA测定方法的建立

纯化高迁移组染色体蛋白－１７（ＨＭＧ－１７）,建立检测抗ＨＭＧ－１７自身抗体的ＥＬＩＳＡ方法,探讨抗ＨＭＧ－１７抗体与临床疾病的关系。用水煮沸法提取,甲酸－吡啶缓冲液酸化和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０凝胶过滤技术,自小牛胸腺组织中分离ＨＭＧ－１７,用此纯化物包被,方阵滴定,建立测定抗ＨＭＧ－１７抗体的间接ＥＬＩＳＡ方法,并进行方法学考核和临床标本检测。纯化的ＨＭＧ－１７抗原经十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分析,呈现一条分子量约９２００的蛋白带;建立的ＥＬＩＳＡ方法批内平均变异系数（ＣＶ）为５．８％,批间ＣＶ值为９．６％,ＥＬＩＳＡ抑制试验最高抑制率达８７．２％;临床检测结果表明,在系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）、混合性结缔组织病（ＭＣＴＤ）和干燥综合征（ＳＳ）患者中分别有１７．４％～３７．３％的抗ＨＭＧ－１７抗体的阳性检出率（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）,而在其他自身免疫病和内科疾病者中,抗ＨＭＧ－１７抗体均为低水平。抗ＨＭＧ－１７抗体ＥＬＩＳＡ测定法具有较好的特异性和重复性,便于常规检测,该类抗体的存在似与某些自身免疫病（尤其是ＳＬＥ）的关系较为密切     

高迁移组染色体蛋白-17的分离提取及其抗体ELISA测定方法的建立

纯化高迁移组染色体蛋白－１７（ＨＭＧ－１７）,建立检测抗ＨＭＧ－１７,自身抗体的ＥＬＩＳＡ方法,探讨抗ＨＭＧ－１７抗体与临床疾病的关系,用水煮沸法提取,甲酸－吡啶缓冲液酸化和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０凝胶过滤技术,自小牛胸腺组织中分离ＨＭＧ－１７,用此纯化物包被,方阵滴定,建立测定抗ＨＭＧ－１７抗体的间接ＥＬＩＳＡ方法,并进行方法学考核和临床标本检测,纯化的ＨＭＧ－１７抗原经十二烷基硫酸钠－聚丙烯     

试论科技期刊青年编辑知识结构重建

试论科技期刊青年编辑知识结构重建ＯＮＲＥＥＳＴＡＢＬＩＳＨＭＥＮＴＯＦＫＮＯＷＬＥＤＧＥＳＴＲＵＣＴＵＲＥＦＯＲＴＨＥＥＤＩＴＯＲＩＡＬＹＯＵＮＧＥＲＳＯＦＴＨＥＳＣＩＥＮＣＥ－ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹＰＥＲＩＯＤＩＣＡＬ黄品全ＨｕａｎｇＰｉｎｑｕａｎ（...     

一种用于土拦库湾鱼种捕捞的新型渔具─—升导喇叭口张网的研制

一种用于土拦库湾鱼种捕捞的新型渔具─—升导喇叭口张网的研制孙燕生　　　　（浙江省淳安县新安江开发公司淳安３１１７００）　　　ＡＮＥＷＳＥＴ－ＮＥＴ　ＷＩＴＨ　ＬＩＦＴ　ＥＮＴＲＡＮＣＥＦＯＲ　ＦＩＳＨＩＮＧ　ＩＮ　ＤＡＭＳｕｎＹａｎｓｈｅｎｇ（Ｚｈｅ...     

红细胞生成素单克隆抗体制备及初步鉴定

为获取高效价的红细胞生成素（ＥＰ）单抗,以建立重组人红细胞生成素（ｈＥＰＯ）测定方法。用基因重组ｈＥＰＯ与小鼠血清白蛋白经Ｎ－羟基琥珀酰亚胺基－３（２－吡啶基二硫）丙酸酯胞;用间接ＥＬＩＳＡ和免疫印迹技术将ｈＥＰＯＭｃＡｂ与白色念珠菌胞质抗原的ＭｃＡｂ,嗜肺性军团病杆菌ＭｃＡｂ,ＨＣＶ核心肽ＭｃＡｂ,人μ链ＭｃＡｂ,ＩＦＮ－γＭｃＡｂ的间接ＥＬＩＳＡ同时进行特异性鉴定。经融合后检测获取一株分泌ｈＥ     

海洋渔业导航通信技术的现状和展望

海洋渔业导航通信技术的现状和展望＊ＴＨＥＳＴＡＴＵＳＡＮＤＰＲＯＳＰＥＣＴＯＦＮＡＶＩＧＡＴＩＯＮＣＯＭＭＵＮＩＣＡＴＩＯＮＴＥＣＨＮＯＬＩＧＹＩＮＳＥＡＦＩＳＨＩＮＧ刘国平ＬｉｕＧｕｏｐｉｎｇ（舟山师范专科学校，舟山３１６００４）（Ｚｈｏｕｓｈａｎ...     

鳗鲡鳃肾炎的初步研究

鳗鲡鳃肾炎的初步研究王国良，路正（水产养殖系）ＰＲＥＬＩＭＩＮＡＲＹＳＴＵＤＹＯＮＴＨＥＤＩＳＥＡＳＥＯＦＧＩＬＬＳ－ＫＩＤＮＥＹＩＮＥＥＬＳＷａｎｇＧｕｏｌｉａｎｇＬｕＺｈｅｎｇ（ＡｑｕａｃｕｌｔｕｒｅＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ）鳗鲡养殖业近年来得到迅速...     

外源GA对垂柳茎部次生木质部和次生韧皮部发生的影响(简报)

外源ＧＡ对垂柳茎部次生木质部和次生韧皮部发生的影响（简报）张凤娟（河北农业技术师范学院基础部，昌黎，０６６６００ＥＦＦＥＣＴＳＯＦＥＸＴＥＲＮＡＬＧＡＯＮＳＥＣＯＮＤ－ＸＹＬＥＭＡＮＤＳＥＣＯＮＤ－ＰＨＬＯＥＭＯＦＷＥＥＰＩＮＧＷＩＬＬＯＷＳＴＥＭＳ...     

浅论高校教师业务档案的建立与管理

浅论高校教师业务档案的建立与管理童晓风（浙江水产学院院长办公室，舟山３１６１０１）ＯＮＥＳＴＡＢＬＩＳＨＭＥＮＴＡＮＤＭＡＮＡＧＥＭＥＮＴＯＦＥＤＵＣＡＴＩＯＮＡＬＤＯＣＵＭＥＮＴＳＦＯＲＣＯＬＬＥＧＥＴＥＡＣＨＥＲＳＴｏｎｇＸｉａｏｆｅｎｇ（ＺｈＥ...     

REGULARIZING OPERATOR ALGORITHM FOR INVERSION OF PARTICLE SIZEDISTRIBUTION FROM LIGHT SCATTERING SPECTRUM

ＲＥＧＵＬＡＲＩＺＩＮＧＯＰＥＲＡＴＯＲＡＬＧＯＲＩＴＨＭＦＯＲＩＮＶＥＲＳＩＯＮＯＦＰＡＲＴＩＣＬＥＳＩＺＥＤＩＳＴＲＩＢＵＴＩＯＮＦＲＯＭＬＩＧＨＴＳＣＡＴＴＥＲＩＮＧＳＰＥＣＴＲＵＭ￥ＨｅＪｉｎｇ；ＷａｎｇＳｈｉｍｉｎ；ＣｈｅｎｇＪｉａｎｃｈｕ...     

神经生长因子抗体亲和柱的制备与应用

利用已分离纯化的神经生长因子为抗原,制备兔抗ＮＧＦ抗血谱,用饱和（ＮＨ４）２ＳＯ４盐析和Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ亲和层析的方法,纯化其中的ＩｇＧ组分,再将其偶联到ＣＮＢｒ活化的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ上,制备抗ＮＧＦ ＩｇＧ免疫亲和性,应用此亲和柱可一步纯化蛇毒中的ＮＧＦ,大大简化了ＮＧＦ纯化工艺。     

血清抗Sm抗体ELISA检测方法的建立

目的：建立血清抗Sm抗体的ELISA检测方法。方法：应用纯化的Sm抗原,采用棋盘滴定等方法确立ELISA方法检测血清抗Sm抗体的最适实验条件。结果：建立了血清抗Sm抗体的ELISA检测方法。SLE患者血清抗Sm抗体的阳性率为29．2％,正常人和其它自身免疫病患者未查到此抗体。结论：本文建立的血清抗Sm抗体检测方法敏感性达到国外进口试剂盒的水平,且操作简便,重复性好,因此临床很有实用价值。     

抗伊氏锥虫单克隆抗体的研究——三、应用酶标单抗ELlSA竞争法检测抗T.e.抗体的实验研究

应用酶标单抗(HRP-MCAbⅡG_6)ELISA竞争法对7只感染伊氏锥虫的家兔血清进行了检测,结果表明该法具有特异、敏感、快速等优点.与间接ELISA检测结果相比呈现明显的正相关,两种方法检测相符合,因此本法可作为流行病学调查和血清学诊断的工具.     

柠檬黄的ELISA检测方法的建立

利用免疫学基本原理，获取抗柠檬黄的单克隆抗体，以此建立了从食品中检测柠檬黄的间接竞争ELISA．试验表明：OVA—TE最适包被浓度为1μg／mL；酶标抗体最适工作浓度为1：3000；酶标抗体的作用温度和时间分别为37℃，lh；封闭液为1％明胶；底物显色时间为15min；对柠檬黄的最低检出量为26．34ng／mL；抗体的最适稀释倍数为1：12000倍；对该方法进行交叉性试验和重复性试验，结果表明此法是一种特异、灵敏、快速的检测方法，并适合大批量样品检测．     

脑内移植NGF诱导的PC-12细胞治疗大鼠帕金森病的研究

实验利用SD大鼠复制6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)完全损伤型帕金森动物模型,将神经生长因子(nerve growth factor,NGF)处理后的肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(plleoclxromocytoma cells,PC-12)移植人模型大鼠纹状体内,观察模型动物行为改善和移植PC-12细胞的存活情况.经行为学检测,6-OHDA动物模型复制成功率达55.1%.免疫组织化学、蛋白印迹检测结果显示模型动物黑质多巴胺能神经元数目减少,黑质酪氨酸羟化酶含量降低证明模型动物稳定、可靠.PC-12细胞经NGF(50 μg/L)连续诱导7 d,细胞逐渐平展、细胞膜变皱褶等神经元形态学特征出现后,于纹状体内行细胞移植术,经阿普吗啡(apomorphine,APO)诱导旋转行为有明显改善,蛋白印迹检测也发现移植侧具有显著的酪氨酸羟化酶免疫阳性信号.因此,NGF诱导后的PC-12细胞可以作为治疗帕金森的一种细胞供体.     

检测CyPA自身抗体滴金免疫测定法的建立

建立一更快速、简便的检测人血清抗ＣｙＰＡ自身抗体的方法．用重组人ＣｙＰＡ和胶体金标记的蛋白Ａ建立了检测抗ＣｙＰＡ自身抗体的滴金免疫测定法．将ｒｈＣｙＰＡ点样包被于硝酸纤维素膜,抗体在血清渗滤过程中与膜上抗原反应而固定,通过胶体金标记的蛋白Ａ直接显色,阳性结果在膜中央出现一红色斑点．整个测定过程在５ｍｉｎ内完成．与ＥＬＩＳＡ法对比检测了４５份ＳＬＥ病人血清,两法均阳性２０份,均阴性２３份,总符合率为９５．６％．本法简便易行,耗时短,试剂安全、灵敏、特异,便于常规应用     

花椰菜天然钙调素抗体的特性及其ELISA定量法的建立

钙调素是一种具有多种调节功能的钙结合蛋白质，其免疫原性很弱，本文采用两次基础免疫和多次加强免疫的方法，获得了免疫花椰菜天然钙调素抗血清，用免疫双扩散法鉴定，其效价为１：３２钙调节不易与固相载体结合，我们先用０．２％戊二醛处理聚苯乙烯板载体，再用于包被钙调素，在上述基础上建立了定量测定植物钙调素的竞争性酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）技术及检测动物血清中抗钙调素抗体的间接ＥＬＩＳＡ技术。     

NGF诱导PC12细胞神经元样细胞分化

目的:建立PC12细胞的神经元样细胞分化模型,并探讨ERK蛋白在PC12细胞神经元样细胞分化中的可能机制.方法:以10、20、50 g/L的NGF(NGF溶于PBS,培养基中PBS的终浓度不超过2%)培养PC12细胞,应用倒置相差显微镜、显微镜测微尺及流式细胞仪鉴定PC12细胞的分化,以确定NGF使用剂量.运用免疫印迹检测不同浓度、不同作用时间时ERK蛋白在PC12细胞中的表达,并进行统计学分析.结果:随NGF剂量的升高,PC12细胞的体积、最长突起长度和突起数目均会增大或增多。统计学分析证明50 g/L的NFG作用48 h足以诱导PC12细胞的交感神经样改变。尽管ERK总蛋白水平在NFG作用前后无明显改变,但在NFG作用5 min后磷酸化的ERK蛋白水平即显著升高,达到峰值,并持续约1 h.50 g/L的NFG作用于PC12细胞48 h可使细胞发生明显的G1期阻滞.结论:PC12细胞可在NGF作用下出现交感神经样改变,并且细胞的分化程度依赖于NGF的使用剂量和作用时间.在NGF诱导的PC12细胞神经元样分化中ERK蛋白的磷酸化对NGF呈现剂量和时间依赖性,提示ERK蛋白在分化的早期发挥重要作用.     

酶可逆抑制作用中线性混合型抑制的动力学

除竞争性抑制,非竞争性抑制和反竞争性抑制外,线性混合型抑制也是一种酶的可逆抑制作用,本文推导了线性混合型抑制的动力学方程并分析了它的动力学曲线的特点。     

自制和进口试剂盒在犬细小病毒检测中的应用

用本研究室研制的犬细小病毒单克隆抗体和多克隆抗体，采用夹心ＥＬＩＳＡ原理，研制成功犬细小病毒快速诊断试剂盒。对８７份犬粪便样品进行检测，并与ＨＡ法和美国ＩＤＥＸＸ公司研制的ＥＬＩＳＡ试剂盒进行比较。结果表明，与ＨＡ法相比，自制试剂盒的敏感性为９３．３％，特异性为１００％，总符合率为９５．４％；与美国试剂盒相比，自制试剂盒的敏感性为１００％，特异性为８４．６％，总符合率为９５．０％，达到国外同类产品