柔嫩艾美尔球虫厦门株(Eimeria tenella)生物学研究

采用单卵囊分离方法从厦门地区饲养的鸡盲肠中获得艾美尔球虫,经显微观察、测量和感染实验,从寄生部位、卵囊形态、孢子化时间和潜伏期等指标测定,实验结果:采用琼脂板方法分离和挑选单卵囊方法进行感染效果理想,单卵囊感染小鸡成功率为60%.该球虫寄生在鸡盲肠部位,其余部位未发现,卵囊形态长卵圆形,长25.80(23.5～28.5),宽20.86(18.5～23.5),长/宽:1.23(1.21～1.27),27℃条件下孢子化时间为20 h.,潜伏期为146 h.与国内一些株进行比较存在差别,确定该艾美尔球虫为柔嫩艾美尔球虫(Eimeriatenella),并定名为柔嫩艾美尔球虫厦门株.     

柔嫩艾美尔球虫厦门株感染宿主艾维因雏鸡引起血清生理生化变化

为研究柔嫩艾美尔球虫厦门株(Eimeri tenella,Xiamen strain)感染宿主后造成的血清生化指标的变化,选择14日龄艾维因雏鸡(Avian chicken)80只,随机分为两组,一组(n=40只)感染柔嫩艾美尔球虫厦门株,另一组为对照(n=40只),分别于感染后的第2～8天从颈静脉取血,通过检测血清中的生化指标,探讨鸡感染柔嫩艾美尔球虫厦门株后对血清生化指标的影响,检测结果显示,感染球虫后引起升高的指标有ALT、血清葡萄糖、肌酐和尿酸.而降低的指标包括AST、Na 、Ca 、K .其中ALT、AST、Ca 、血清葡萄糖和尿酸等指标在感染后第7天逐渐向正常指标回归,Na 、K 和肌酐等指标在第7天仍然沿着原先的趋势升高或降低.说明宿主感染柔嫩艾美尔球虫厦门株后,多数指标与球虫致病作用强弱相一致,而有些指标却由于宿主生理功能的严重损害,在短期内无法恢复.实验结果表明柔嫩艾美尔球虫厦门株可以引起宿主肝功能,肾功能及离子水平的改变,尤其是肾功能的损害可能是造成鸡死亡的一个重要因素.     

柔嫩艾美耳球虫早熟株的选育及其免疫原性研究

运用Jeffers(1975)法进行了柔嫩艾美耳球虫早熟株的选育，经过连续13代的选育，获得了柔嫩艾美耳球虫早熟株，该虫株的潜隐期为121h，比柔嫩艾美耳球虫亲本毒株的潜隐期提前了22h以上，免疫攻毒试验的结果表明柔嫩艾美耳球虫早熟株和其亲本毒株一样也具有免疫原性。     

柔嫩艾美耳球虫Serpin基因在293T细胞中的表达

为了检测柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella,Et)丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serine protease inhibitor,Serpin)基因(EtSerpin)在真核细胞293T中的表达情况,以Et孢子化卵囊cDNA为模板,经PCR扩增含完整Serpin开放阅读框的序列,将其克隆至pGEM-Teasy载体,构建pGEM-Teasy-EtSerpin质粒,双酶切回收目的片段后与相应酶切的真核表达载体pCAGGS连接,构建真核重组表达质粒pCAGGS-EtSerpin.该重组质粒经酶切和测序鉴定正确后转染293T细胞,用间接免疫荧光法和Western blot鉴定EtSerpin基因的表达情况,间接免疫荧光实验可以检测到红色荧光,Western blot结果显示出大小约45.5kDa的目的蛋白条带,结果表明构建的EtSerpin可以在293T细胞中获得表达.     

柔嫩艾美耳球虫感染对雏鸡肾脏病理损伤的探讨

14日龄海兰褐雏鸡80只,分为对照组和感染组。感染组每只鸡口服接种8.0×104个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,分别于接种后第0,3,6,9,12天,每组随机取鸡5只,心脏采血,测定血清尿酸和肌酐含量,同时取感染后第6天鸡的肾脏,观察其病理组织学变化。结果表明:感染组鸡的血清尿酸含量于感染后第3,6,9天显著升高了267.41%(p<0.01),81.41%(p<0.01)和52.09%(p<0.05),肌酐含量在感染后第3,6天也显著增加了63.61%(p<0.05)和81.80%(p<0.05);肾脏的实质细胞呈轻度的颗粒变性或水泡变性。提示:球虫感染导致雏鸡肾脏病理损伤。     

柔嫩艾美耳球虫对氯嗪苯乙菁和常山酮抗性快速诱导

诱导了柔嫩艾美耳球虫(Eimeriatenella)甘肃株对两种药物-氯嗪苯乙氰和常山酮的抗药性.增加实验动物数和球虫的接种剂量可加快柔嫩艾美耳球虫对氯嗪苯乙氰和常山酮抗药性的产生.每组动物用100只2～3周龄AA肉鸡,每只鸡接种2×10     

地克珠利对藏马鸡柔嫩艾美耳球虫病的疗效

在人工感染柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）的藏马鸡中进行了地克珠利预混剂、地克珠利饮水剂、氯苯胍的抗球虫试验,以卵囊减少率作为主要试验指标,观察其抗球虫效果。结果表明：地克珠利预混剂、地克珠利饮水剂卵囊减少率均为99．5％,相对增重率分别为84．9％和92．9％,而氯苯胍的卵囊减少率为95％,相对增重率为59．1％。表明地克珠利是一种高效的抗球虫药,能有效的控制藏马鸡柔嫩艾美耳球虫病。     

so7在大肠杆菌中的表达及表达蛋白和活菌对Eimeria tenella的免疫保护

so7为来源于E.tenella的折光体基因，将T－vector-so7克隆质粒酶切，构建表达载体pThioHis-so7，通过酶切和SDS－page检验，筛选阳性克隆。用表达蛋白或活菌免疫鸡，3周后用柔嫩艾美耳球虫攻毒。结果显示，鸡的相对增重率为71.45%-80.50%，相对卵囊产量为59.27%-92.00%。以口服活菌200μg菌体蛋白组最佳，鸡的相对增重率为80.50%，盲肠相对卵囊数为58.85%。说明so7表达产物能诱导鸡对E.tenella的保护作用。因此，该基因编码抗原可作为基因工程苗的候选之一。     

柔嫩艾美耳球虫早熟株选育及相关生物学特性

为了研究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)早熟株与母株之间基本生物学特性的差异,运用Jeffers创立的艾美耳属球虫早熟株选育方法对E.tenella进行了连续26代的早熟选育,并通过对早熟株与母株的孢子化卵囊大小、繁殖能力以及致病性等指标进行测定,分析E.tenella早熟株与母株之间基本生物学特性的差异.经过早熟选育后,其潜在期由母株的141 h缩短至118 h;早熟株的孢子化卵囊大小比母株的明显减小(P<0.05);繁殖能力与母株的相当(P>0.05);在致病性方面,4个剂量组的早熟株平均增重与对照组相比差异不显著(P>0.05),而母株组与对照组相比平均增重显著下降(P<0.05或P<0.01);4个剂量的早熟株组死亡率均为0,而母株组分别为0,25%,25%及31.3%;感染剂量越大,早熟株与母株间病变记分差异越显著.经选育的E.tenella早熟株具有潜在期缩短,致病性较母株弱以及繁殖力与母株相当等特点.     

格氏线虫中国厦门品系(XM strain)

报道从我国厦门岛菜地华南大黑锶金龟（Ｈｏｌｏｔｒｉｃｈｉａ ｓａｕｔｅｒｉ ｍｏｓｅｒ）幼虫－脐螬体内采集到的格氏线虫中国品系，经研究观察与广东格氏线虫中国品系（Ｃ８５０１１）接近，但存在以下区别：前者第一代雌虫体长度只有广东格氏线虫８５０１１的一半，前才成虫的神经环均在排泄孔之后，后者则神经环多在排泄孔之前或平齐。详细描述了此线虫的形态，与相挝品系作了比较并指出鉴别特征，确定为格氏线虫中国厦门品     

雏鸡感染堆型艾美耳球虫早熟株外周血T淋巴细胞的动态变化

8日龄雏鸡(免疫组)每只接种3×103个堆型艾美尔球虫(Eimeria.acervulina)早熟株孢子化卵囊,在第16日龄免疫组和不免疫攻毒组每只攻毒堆型艾美尔球虫强毒株孢子代卵囊5×104个,用а 醋酸萘酯染色法计数T淋巴细胞数量,得T淋巴细胞所占淋巴细胞的百分率。t检验结果表明,免疫攻毒组T淋巴细胞的百分率与不免疫攻毒组和空白对照组的T淋巴细胞的百分率差异极显著,显示该早熟株具有较好的免疫保护效果。