菘蓝离体培养过程中愈伤组织和再生芽发生的细胞组织学观察

对菘蓝子叶和下胚轴在离体培养过程中的细胞分裂、分化以及器官发生进行了细胞组织学观察.研究结果 表明:培养2～5d,切口处及维管束薄壁细胞均开始脱分化,恢复分裂能力形成愈伤组织,愈伤组织表层细胞启 动分化形成芽原基.2种外植体不定芽的起源方式均为外起源.     

番茄离体培养的形态发生

对番茄下胚轴、子叶、叶柄不同类型外植体离体培养中有关细胞启动、分裂、分化以及器官发生作了细胞组织学观察,结果表明：番茄不同类型外植体在不同样的培养条件下,愈伤组织生长表现明显差异：下胚轴、子叶诱导产生愈伤组织时,细胞启动早,生长快,分裂方式基本为无丝分裂;下胚轴诱导愈伤组织形成时,细胞不规划的无丝分裂少于子叶,故下胚轴离体培养得到正常芽的比例高于子叶;番茄离体培养中不定芽通常发生在愈伤组织的周边区,也可起源于维管组织结节周围,形成层状细胞。不定根则由茎中柱鞘处发生。     

甘农四号紫花苜蓿愈伤组织诱导研究

以甘农四号紫花苜蓿的下胚轴、叶柄、子叶、叶片为外植体,研究了不同质量浓度的2,4-D对愈伤组织诱导的影响.结果表明:不同外植体的愈伤组织发生能力存在显著差异,外植体愈伤率下胚轴>叶柄>子叶>叶片.下胚轴在接种后16d的愈伤率高达100%,显著高于其他外植体.叶柄、子叶、叶片的愈伤率分别为:95.65%,88.06%,79.37%.其中叶柄的愈伤率显著高于子叶和叶片,子叶和叶片之间差异不显著.在附加3个不同质量浓度2,4-D的MS培养基上外植体的愈伤诱导率差异不显著,愈伤率均达到了90%以上.     

不同外植体和激素对银杏愈伤组织诱导和生长的影响

以银杏胚的不同部位子叶、胚芽、胚轴、胚根为外植体,比较不同外源激素和培养条件对银杏愈伤组织诱导和继代培养的影响,结果表明子叶最易诱导愈伤组织,且在暗条件下诱导效果最好,2,4-D和队影响子叶的愈伤诱导能力;以茎段为外植体,发现生长素为茎段愈伤组织诱导所必需,且NAA诱导效果好于2,4-D;以叶片为外植体,发现生长素中的NAA诱导愈伤效果最好,雌雄叶的诱导能力相同.在愈伤组织生长过程中,NAA是子叶和茎段愈伤组织继代培养必需的,BA对茎段愈伤组织生长速.度无显著影响,但可使愈伤组织敛密,并有利于分化.MS 1 mg/LNAA 0.005 mg/LKT(或BA)的培养基对叶片愈伤组织生长最理想,雄叶愈伤生长较快,光照培养促进愈伤组织生长.     

正交设计在欧洲菘蓝组织培养中的应用

以欧洲菘蓝下胚轴和子叶为外植体,应用正交设计方法,对愈伤组织的诱导和分化培养基进行了优化筛选.分析结果表明,6-BA和2,4-D的交互作用对下胚轴愈伤组织的诱导有显著影响,结合直观分析确定下胚轴的愈伤组织最佳诱导培养基为MS 6-BA 0.5 mg.L-1(后同) 2,4-D 0.5;6-BA和NAA的交互作用对子叶愈伤组织诱导有极显著影响,结合直观分析确定子叶最佳诱导培养基为MS 6-BA 0.5 NAA 0.2.在不同培养基对欧洲菘蓝愈伤组织分化能力的影响试验中,各种因子在所试浓度范围内的作用均不显著,有待进一步试验.根据直观分析我们认为MS 6-BA 2 NAA 1诱导的愈伤组织更有利于分化.不定芽在转移到MS NAA 0.5一个月后80%以上都能长出很好的根系.生根后的组培苗经过3天炼苗后移栽至花盆后80%以上可以存活.     

苜蓿不同品种愈伤组织诱导、分化和再生能力的比较研究

以新疆大叶、甘农1号、甘农3号和陇东4个苜蓿品种的下胚轴、子叶和子叶节为外植体,比较了不同苜蓿品种及外植体愈伤组织诱导、分化及再生能力的差异,研究了不同浓度及配比的植物生长调节物质对愈伤组织诱导和芽分化再生的影响。结果表明,4个苜蓿品种再生能力依次为新疆大叶>甘农3号>甘农1号>陇东苜蓿,下胚轴外植体在愈伤诱导培养基(MS 2mg/L2,4-D 0.2mg/LZT)上出愈率分别为94%,83%,71%和58%,胚性愈伤组织在分化培养基(MS 0.2mg/LZT 50mg/L谷氨酰胺)上分化率分别为15.8%,9.2%,7.1%和4.5%;下胚轴再生能力优于子叶节和子叶;丛生芽在生根培养基(1/2MS)上生成完整的根;各品种的再生苜蓿植株均成功移栽到土壤中,成活率100%。上述4个苜蓿品种分化再生能力的阶段性研究结果为今后通过基因工程方法改良苜蓿奠定了基础。     

特种工业用油料作物Lesquerella fendleri的愈伤组织诱导和植株再生

以Lesquerella fendleri下胚轴和子叶作为外植体,研究了不同的激素浓度和组合对于愈伤组织诱导和植株再生的影响．研究表明,L．fendleri下胚轴和子叶在许多激素组合的培养基上都能诱导出愈伤组织．当6-BA的浓度从0提高到1．0mg．L^-1,下胚轴的愈伤组织诱导频率也从35．14％提高到97．30％,进一步提高6-BA浓度会降低下胚轴的愈伤组织诱导频率;将NAA浓度从0提高到0．2mg．L^-1,下胚轴的愈伤组织诱导频率从70％提高到76．76％,进一步提高NAA浓度则降低下胚轴的愈伤组织诱导频率;将2,4-D的浓度从0提高到0．5mg．L^-1,下胚轴的愈伤组织诱导频率从64．29％提高到85．00％,进一步提高2,4-D浓度会降低下胚轴的愈伤组织诱导频率．当6-BA的浓度为0．5mg．L-时子叶的愈伤组织诱导频率最高,达到80．00％;提高NAA浓度可以提高子叶愈伤组织诱导频率,提高2,4-D浓度则会降低子叶的愈伤组织诱导频率．绝大多数愈伤组织在含有6-BA和NAA的MS培养基上都能够分化出许多不定芽．不定芽在MS基本培养基能够诱导生根,生根率在80％以上．     

激素对大豆悬浮细胞系愈伤组织诱导的影响

以大豆无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,通过比较筛选2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和6-苄基腺嘌呤(6-BA)的浓度及培养条件.诱导出相应的愈伤组织,并成功建立大豆悬浮细胞培养体系.结果表明:单独使用2,4-D即可诱导出适于建立大豆悬浮细胞系的愈伤组织;加入6-BA导致子叶和下胚轴外植体剧烈膨大,出愈率低,形成的愈伤组织量明显减少且局部组织坚硬,难以建立悬浮细胞系.组织切片观察结果显示加入6-BA致使外植体和愈伤组织之间的部分组织细胞核消失、细胞壁显著增厚,是悬浮细胞体系难以建立的主要原因.     

蒙古黄芪的组织培养研究

对蒙古黄芪无菌苗的不同外植体(叶片、子叶、下胚轴)进行组织培养研究.结果表明:该三种外植体分别在MS BA2.0mg/L NAA2.0mg/L、LS BA2.0mg/L NAA0.1mg/L、MS BA2.0mg/L NAA2.0mg/L 培养基上的愈伤组织诱导率很高;在这三种外植体中,子叶和下胚轴所诱导的愈伤组织在继代培养基上能分化出芽;试管苗在1/2MS NAA5.0mg/L培养基上生根效果好.     

多变小冠花组织培养中器官分化与植物生长物质关系的研究

多变小冠花下胚轴外植体在含有NAA、IAA、2,4-D、KT和BA组合的培养基上,可脱分化形成愈伤组织,并由愈伤组织分化出苗和根而形成完整再生植株。在含有NAA+KT的培养基上,外植体可不经愈伤组织而直接分化出苗。 NAA和2,4-D比IAA诱导愈伤组织的效果好。NAA与细胞分裂素组合对根分化有利,IAA与细胞分裂素组合则有利于苗的形成。     

红松成熟胚愈伤组织诱导外植体选择及培养条件优化

【目的】通过培养条件的优化和适宜外植体类型的筛选,解决红松成熟胚愈伤组织诱导中存在的愈伤组织诱导率低、生长状态差、褐化率较高等问题,为建立红松成熟胚体胚发生体系奠定基础。【方法】用5种培养基类型、3种蔗糖浓度和9种植物生长调节剂组合,选择8种来源于成熟种子不同部位的外植体,对愈伤组织诱导的培养条件和适宜外植体类型进行优化和筛选。【结果】① 在5种培养基中,DCR培养基上愈伤组织诱导率高于其他培养基、生长状态好于其他培养基; ② 添加在DCR中的3种蔗糖浓度中,35 g/L时的愈伤组织诱导率最高(92.01%)、褐化率最低(17.01%); ③ DCR添加35 g/L蔗糖情况下,9种植物生长调节剂组合中NAA 2.0 mg/L + 6-BA 1.5 mg/L组合的愈伤组织诱导率最高、褐化率最低、生长状态最佳; ④ 在选出的优化培养条件下,8种来源外植体中,从裸胚上切离的下胚轴的愈伤组织诱导率高、褐化率低,且增殖能力强,具备胚性愈伤组织的形态解剖特征。【结论】红松成熟胚愈伤组织诱导的优化培养条件为DCR +蔗糖35 g/L + NAA 2.0 mg/L+ 6-BA 1.5 mg/L,适宜外植体裸胚上切离的下胚轴。     

用均匀设计法优化瓜尔豆愈伤组织诱导的研究

以瓜尔豆子叶和下胚轴为外植体，采用均匀设计法，研究了基本培养基、激素水平、蔗糖浓度和活性炭对愈伤组织形成的影响。通过建立模型表明，瓜尔豆子叶形成愈伤组织的能力高于下胚轴；2，4-D和蔗糖浓度在一定范围内对愈伤组织的形成呈正相关性作用，且外植体、2，4-D和KT浓度三者之间存在很强的交互作用；而活性炭对愈伤组织形成未表现出明显作用。     

玛丽安万年青的茎尖培养与快速繁殖

以玛丽这万年青（Ｄｉｅｆｆｅｎｂａｃｈｉｓ Ｔｒｏｐｉｃ Ｍａｒｉｎｎｅ）的顶芽或侧芽茎尖作外植体,通过二次表面灭菌,得到茎尖无菌培养物。根据茎尖愈伤组织诱导率和生长速度２项指标,筛选出码丽安万年青茎尖离体培养的培养基。ＭＳ＋ＢＡ４．０ｎｇ／Ｌ的固体培养基适宜于诱导茎尖形成愈伤组织和愈伤组织生长。愈伤组织转入ＭＳ＋ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ的固体培养基分化形成丛生芽,从愈伤组织上切取１ｃｍ以上的牙转入ＭＳ     

黑芝麻下胚轴离体培养的研究

以晋芝3号黑芝麻(Sesamum indicumDC)无菌苗的下胚轴作为外植体,诱导培养基以MS为基本培养基,添加2.0mg/L6-BA与(0.1mg/L,0.2 mg/L,0.3 mg/L,0.4 mg/L,0.5 mg/L)以及NAA(0.5 mg/L,1.0 mg/L,1.5 mg/L,2.0 mg/L),共9种组合;生根培养基以1/2MS为基本培养基,添加NAA(0.1 mg/L,0.3 mg/L,0.5 mg/L)以及0.1 mg/LNAA和0.1 mg/LIAA,共4种组合,旨在此培养基上诱导黑芝麻下胚轴产生愈伤组织并分化出再生植株。结果表明:在MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IAA培养基上的再生诱导率最高,可达81.8%,并且可使部分下胚轴切段形态学上端形成芽;在1/2MS+0.1mg/L NAA培养基上,再生苗的生根率达100%。     

植物激素对烟草表皮薄细胞层离体培养中器官诱导及过氧化物酶和脂酶同工酶的变化

烟草表皮,亚表皮薄细胞层(3-6层细胞)培养在MS培养基内,加入不同浓度的IAA/BA,IBA/BA和2.4D/BA,可较专一性地诱导根,芽及愈伤组织的形成,但未能形成花芽,试验结果表明,在合适的植物激素相组合和蔗糖浓度的作用下,以烟草表皮亚表皮薄细胞层进行离体培养是研究形态发生,调节控制器官形成的一个比较理想的试验系统。实验分析了分化和未分化的组织中过氧化物同工酶和脂酶同工酶的变化,在分化的组织中,过氧化物同工酶谱带略有增加,脂酶同工酶谱带无显著变化。     

铁线莲‘朱卡’组织培养技术及再生体系的建立

【目的】以铁线莲‘朱卡’(Clematis ‘Julka’)的带芽茎段为起始材料,通过组织培养方法建立再生体系。【方法】利用腋芽诱导—不定芽增殖—生根和愈伤组织诱导—增殖—分化—生根两种途径,建立该品种的组织培养再生体系,形成铁线莲‘朱卡’完整植株。【结果】铁线莲‘朱卡’组织培养最适宜灭菌条件为质量分数10%次氯酸钠溶液灭菌12min;带芽茎段诱导腋芽最适培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,不定芽增殖最适培养基为MS+IBA 0.20 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+GA₃ 0.2 mg/L;带芽茎段诱导愈伤组织最适培养基为MS+NAA 0.05 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织增殖最适培养基为MS+NAA 0.20 mg/L +6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织分化最适培养基为MS+NAA 0.03 mg/L+6-BA 3.0 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.3 mg/L。【结论】首次用两种器官发生方法建立了稳定高效的铁线莲‘朱卡’再生体系。直接形成不定芽时增殖倍数可达5.52。诱导愈伤组织途径的器官发生中,愈伤组织分化率可达76.7%,分化不定芽平均数超过3。两种途径诱导生根率都在90%以上。     

甘薯愈伤组织诱导的多因子正交试验研究

通过多因子正交试验,筛选出了甘薯（IpomoeabatatasL.Lam）愈伤组织的最佳诱导培养基为MS＋1．0mg/LNAA＋0.5mg/LBA,愈伤组织的最适生长培养基为MS＋0.5mg/LBA．叶柄诱导产生的愈伤组织出愈快、生长迅速,是甘薯愈伤组织诱导和生长的最适外谊作．试验结果表明：BA对甘薯愈伤组织的诱导和生长影响最大,其次是外植作,而NAA影响最弱．     

番茄高效再生体系的建立

以砧木1号番茄的子叶和下胚轴为外植体进行离体组织培养,研究了IAA和6-BA及NAA和6-BA不同激素配比对外植体诱导不定芽及生根的影响。结果表明:培养基MS+0.2mg/L IAA+1.0mg/L 6-BA为诱导子叶外植体愈伤组织和不定芽的最适培养基,而MS+0.5mg/L IAA+1.0mg/L 6-BA为诱导下胚轴外植体愈伤组织和不定芽的最适培养基;诱导不定芽生根的最佳培养基为MS+0.1mg/L IAA。     

小麦幼茎组织培养中的植株再生

我们对小麦不同品种的幼穗幼茎在不同发育期,不同培养基上进行了2年的愈伤组织诱导及分化实验,并将幼茎与幼穗作了比较。二棱末期至小花分化期是幼穗及幼茎诱导愈伤组织的最适时期。不同品种对培养基的反应不一。不同时期的幼茎愈伤组织只有来源于二棱末期者能够在分化培养基上分化,其它时期者则不分化。品种间分化率差异较大。幼穗的一块愈伤组织可以分化多个苗,而幼茎的一块愈伤组织只发生一个苗。植株再生是通过器官发生的途径。