浅议发酵乳生产中噬菌体的污染与防治

噬菌体污染是发酵工业普遍存在的问题。分析了发酵乳生产中噬菌体的类型,污染途径和表现症状,针对其特性提出了检查办法和防治措施,从而保证生产的安全。     

中性蛋白酶生产菌枯草芽孢杆菌抗噬菌体菌株的选育和应用

近年来,由于我国微生物发酵工业的蓬勃发展,但随之而来的,噬菌体危害也日益严重。如我省发酵工业中,丙酮丁醇生产曾遭受噬菌体感染。近两年来,昆明市味精厂也不断受到噬菌体侵害,经常不能正常生产,又如陆良酶制剂厂从1987年9月开始,一年多来蛋白酶生产一直遭受噬菌体危害,造成经济损失达数10万元,直到1988年8月我们决定帮助解决,经过电镜检查,确系噬菌体感染,于是我们除结合综合防治外,着重从筛选抗噬菌体菌株和诱变育种等方面进行工作。经过半年左右工作,分离出菌株564株,进行33批次筛选发酵试验,已经筛选出抗性较好、酶活较高的菌株4株。如KRP406抗株从1989年1月在陆良酶制剂厂使用以来,根据已有结果,在10t和20t大罐进行18     

红霉素链霉菌噬菌体的研究

关于红霉素链霉菌的噬菌体曾有过一些报导。国内,张筱玉等从被感染的发酵自溶液中分离出八株噬菌体,对其中三株噬菌体做了电镜观察,并筛选出了相应的抗性菌株。我们对大连制药厂近年来在红霉素生产过程中所出现的异常发酵现象进行了分析。通过涂带试验,确证了异常发酵的原因是由于噬菌体侵染所致。     

中草药对北京棒状杆菌AS1.299噬菌体的影响

前言我国味精生产正在迅速发展,规模越来越大,产量日益增加。但在发酵过程中容易被噬菌体感染,给生产造成很大的损失。国内外在研究和探讨噬菌体污染途径及防治方面都取得一定成绩,但效果不太显著。我们吸收了国内外防治噬菌体经验基础上,利用中草药防治噬菌体,试图探索出一条防治噬菌体的新路,以减少谷氨酸生产损失。材料和方法一、菌种及培养条件菌种由辽源味精厂提供北京棒状杆菌 AS1.299。     

谷氨酸发酵噬菌体研究初报

噬菌体污染,常给谷氨酸发酵造成严重危害,所以查明系外源噬菌体的污染或溶原菌诱导出的噬菌体污染,就成了人们关注的首要问题。我们从谷氨酸生产菌北京棒状杆菌突变株——FM820-7紫外线、丝裂霉素C诱导分离到二株噬菌体526,528,从FM820-7菌株生产环境样品中分离到一株噬菌体530,对分离的噬菌体形态及生物学特性进行了初步研究。并就溶原菌株诱导方式、噬菌体的检测实验条件进行了探讨,为迅速澄清污染源,提供了直接有效的手段。     

葡萄球菌A蛋白(SPA)协同凝集作用用于谷氨酸发酵菌噬菌体污染的快速检测探讨

本文应用SPA法,对谷氨酸发酵菌T_(613)的噬菌体感染进行了快速检测研究,获理想结果。应用此法,可在玻片上几分钟内查出发酵液中噬菌体的感染程度,为微生物发酵生产谷氨酸提供了一种省时、简便、灵敏的快速检测噬菌体污染的方法。     

温度对苏云金杆菌溶源化效率的影响

实验表明，在寄主菌苏云金杆菌生长良好的２５～３７℃的温度范围内，温和噬菌体ＴＰ的存活率及吸附效率与温度变化关系不大，但使寄主溶源化的效率则随温度的上升有明显提高．这一结果为解决发酵工业中噬菌体污染问题提供了新思路     

卡那霉素链霉菌(Streptomyces kanamyceticus)抗噬菌体菌株的筛选

安徽朝阳化工厂在卡那霉素发酵生产中曾多次出现噬菌体感染。1977年春,我们从卡那霉素链霉菌的异常发酵液中分离出了噬菌体。电子显微镜研究说明,这是一种蝌蚪状的噬菌体。应用亚硝基胍或紫外光诱变并结合噬菌体处理,筛选得若干对噬菌体具有抗性的菌株,其中某些抗性菌株的卡那霉素产量在摇瓶发酵中大约比对照高百分之十六。     

谷氨酸发酵中噬菌体的防治及生化检查方法的探索

本文较全面地对谷氨酸发酵中噬菌体的防治进行了探讨:在空气系统中加进了一个碱净化塔;对噬茵体的防治采用了草酸及柠檬酸;还提出了以胞外核酸定量法做为噬菌体侵染的指标,该方法能在30分钟内定量地检查出染噬情况,这就克服了长期以来对噬菌体不能早期检定而不易采取补救措施的困难;同时对常规噬菌体平皿检查也进行了改进,提出了交叉划线法;在实验基础上设想了对单独染噬发酵添加草酸、补加种子不返消继续发酵的可能性。     

北京棒状杆菌AS1.299噬菌体Zp的研究

从味精厂的发酵废液中,分离到一株无尾噬菌体,编号为 Zp。通过血清学研究、寄主范围、一级生长曲线、pH 稳定性、热失活测定、形态的电镜观察、以及对其核酸的分析,发现该噬菌体与已报导过的北京棒状杆菌 As1.299有尾噬菌体都有明显区别。是一种新类型的噬菌体。1981年,我们从辽源味精厂用北京棒杆菌 As1.299发酵的污染液中分离、纯化四种噬菌体。经电镜观察,有三株是有尾的,它们的形态及生物学特征与已报导过的相似,其中一株(Zp)是无尾的。通过血清学等一系列研究分析,这株噬菌体与其他有尾噬菌体在生物学特性上存在明显差别。通过核酸的分离和分析,这种噬菌体为双股DNA,含四种硷基,核酸含量稍高于有尾噬菌体,DNA 上联结葡萄糖基。     

谷氨酸产生菌噬菌体φCC-1-9-80对发酵影响的动态观察

自谷氨酸发酵不正常的罐中,分离一株与松井等的三种溶菌类型不同的噬菌体。这噬菌体在营养肉汤中不能传代,它的增殖需Mg~(++)或Mn~(++)离子;模拟发酵实验,在发酵初期,以低感染量,影响发酵产酸不显著,高感染量,使发酵延迟12小时左右,以后又可恢复到近乎正常;发酵中溶菌强度与Mg~(++)离子浓度有关。 实验证明,受噬茵体感染的寄主菌,可形成较高频率的抗性菌。推测是噬菌体在细胞内形成暂时性的整合或成自主性的质粒。这些抗性菌在传代中又可恢复为敏感菌。     

螺旋霉素产生菌抗噬菌体菌株的选育

用Ｃｏ＾６０处理螺旋霉素产生菌ＰＳ，获得了一株抗噬菌体且摇瓶发酵单位比原菌株稍高的突变株Ｒ１０，继而对Ｒ１０进行理性化筛选，在加有２－脱氧葡萄糖的分离培养基上分离到一株抗噬菌体稳定、摇瓶发酵单位又比Ｒ１０高２０％的新突变株，且其摇瓶发酵周期缩短１２ｈ、能耐受更高浓度的自身代谢产物－螺旋霉素。     

谷氨酸生产菌株T_(6—13)的噬菌体及其生物学特性

从山东鄄城味精厂周围环境和发酵裂解液中分离得到三株噬菌体(Tp—1、Tp—2、Tp—3).电镜观察表明三株噬菌体在形态上是相似的,头部呈多面体,尾部细长,无鞘,属于长尾噬菌体类.DNA 的 EcoR Ⅰ和 Pst Ⅰ酶切分析结果表明在噬菌体 Tp—1和 Tp—2之间有一定差异.同时对噬菌体的寄主范围,感染特性,热稳定性和 pH 稳定性作了分析.     

谷氨酸产生菌A.S.1.542(Corynebacterium sp.)噬菌体的研究

本文对谷氨酸产生菌A.S.1.542噬菌体的形态学和血清学特性以及一步生长曲线进行了研究。这种噬菌体的噬菌斑园形透明,培养24小时噬菌斑大小为0.3—0.7mm。噬菌体呈蝌蚪状,多角形头部,尾较长,无尾鞘,尾不收缩。头部大小为545.9×642.9,尾部为2219.8×105.5(?)。将大小不同的噬菌斑单株分离纯化,得到P—_A 和P—_B 两株,进行血清中和反应实验的结果表明,这两株噬菌体不但能够起交义中和反应,而且中和速度常数K 值非常接近,分别为K_A=359;K_B=370。因此,P—_A 和P—_B 是属于同一血清型。通过一步生长实验,定量地测定了该噬菌体的潜伏期、上升期和裂解量。噬菌体的吸附此例为12.9%;单独感染的感染复数为0.088;潜伏期为61分钟;上升期为30分钟;每个被感染细胞的平均裂解量为66.3个噬菌体。     

苏云金杆菌噬菌体的形态及感染特性

从苏云金杆菌厂发酵裂解液中分离得到一株苏云金杆菌噬菌体ＫＰ－１．电镜观察表明，该噬菌体结构较为复杂，善呈多面体，衣壳呈六角形，直尾并具有收缩性尾鞘，尾部末端呈扁平膨大基片。其寄主范围与其它“ＢＴ”噬菌体不同，具有非常广泛的寄主，专一性不明显，同时对噬菌体ＫＰ－１感染敏感菌株１８７的特性作了具体分析。     

假丝酵母Candida sp.木糖发酵生产乙醇

研究了供氧水平、培养基初始pH值、木糖质量浓度等条件对假丝酵母1779A木糖发酵生产乙醇的影响．结果表明：在温度（30℃）、转速（150r／min）恒定的条件下,假丝酵母木糖发酵生产乙醇适宜在半好氧务件下进行,乙醇产生的最适初始pH值为5．0,最适木糖质量浓度为60g／L,最大乙醇转化率为62．1％．假丝酵母木糖发酵生产乙醇存在葡萄糖效应,以葡萄糖与木糖的质量比3：1混合发酵生产乙醇时的产量比单独木糖发酵生产时的高57．6％．     

D-核糖产生菌抗噬菌体菌株的选育

从D-核糖异常发酵液中分离纯化出一种噬菌体,将其命名为P001。以枯草芽孢杆菌转酮醇酶变异株为出发菌株,经紫外线诱变法选育出1株具有抗性的与出发菌株相当的突变株。对该突变株进行多次传代和D-核糖发酵试验,结果表明,该菌株对噬菌体P001抗性稳定,其发酵产D-核糖能力也没有改变。     

透明颤菌血红蛋白基因在产PHB重组大肠杆菌中的克隆表达

为解决高密度发酵培养过程中的供氧矛盾,在已经成功构建了λ噬菌体裂解基因（S     

发酵乳制品质量安全问题及控制技术

概述了我国发酵乳制品行业质量安全问题现状,结合原辅料质量、常见微生物污染、噬菌体污染和包装材料迁移四个方面分析了目前常见的安全危害来源,针对性提出了相应的解决方案,并对发酵乳制品安全的进一步研究方向进行前瞻性展望,为提高发酵乳的质量提供借鉴。     

L—山梨糖发酵中的芽孢杆菌噬菌体及抗噬菌体菌株的选育

从济南制药厂L—山梨糖混合发酵液中分离得到四株芽孢杆菌噬菌体,其中一株来自寄主巨大芽孢杆菌,三株来自腊状芽孢杆菌,这些噬菌体都是有尾的,根据形态可分为二类。通过选育获得了几株抗噬菌体菌株,经摇瓶混合发酵试验,表明抗株不但具有稳定的抗性而且保持了原种的性能。