榼藤对牛Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎大鼠的治疗作用研究

研究榼藤提取物对牛Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠模型的治疗作用.通过牛Ⅱ型胶原与弗氏佐剂来诱导大鼠CIA模型,建模期间通过体征观察和足趾肿胀度评分来判定建模是否成功.将造模成功的大鼠随机分为模型组,榼藤提取物低(93.75 mg/kg)、中(187.50...     

Ⅱ型胶原诱导的关节炎大鼠滑膜成纤维细胞的培养、纯化和鉴定

类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)病人滑膜成纤维细胞(Fibroblast-like synoviocytes,FLS)是研究RA发病机制和进行RA药物筛选的最理想的细胞来源.但是对于众多非医疗机构的高校和科研院所而言,由于RA病人滑膜组织不易获取而难以进行细胞水平的操作.因此,建立胶原诱导的关节炎大鼠(Collagen-induced arthritis,CIA)模型,成功分离膝关节滑膜组织并进行滑膜成纤维细胞的原代培养和纯化,将有效解决RA FLS的来源问题,为后续实验奠定基础.本实验通过皮内和皮下两次注射鸡Ⅱ型胶原诱导Wistar大鼠罹患关节炎,通过关节炎指数评分和膝关节HE染色明确CIA模型的建立;分离膝关节滑膜组织,采用Ⅱ型胶原酶和无EDTA胰酶消化法分离细胞并进行传代培养,传至第三代时,细胞免疫荧光检测细胞中VCAM-1蛋白含量以鉴定细胞纯度.结果显示,滑膜组织经过消化和培养后得到大量大鼠滑膜成纤维细胞;在显微镜下观察所得细胞呈梭形树突状,具有成纤维样细胞特征;VCAM-1蛋白阳性细胞达98%以上,确证所分离细胞为滑膜成纤维样细胞,且纯度极高.本研究建立了较简便快捷地获得大量滑膜成纤维细胞的方法,为RA的发病机制研究和药物防治提供了丰富的实验材料.     

中药复方风湿消对大鼠佐剂型关节炎急性炎症的影响

类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一种常见的以慢性多发性关节炎症为主要表现的全身性自身免疫性疾病。本实验将实验动物分为正常组、模型组、低剂量给药组(1.5g/kg)、中剂量给药组(3g/kg)、高剂量给药组(6g/kg)、阳性对照组(地塞米松组),采用足皮垫内注射弗氏完全佐剂造成大鼠佐剂型关节炎模型来模拟类风湿性关节炎,研究中药复方风湿消对大鼠类风湿性关节炎的影响,以期为其治疗类风湿性关节炎提供依据。     

补肾祛寒治尪汤治疗类风湿性关节炎62例临床观察

观察补肾祛寒治尪汤[1]加味配合甲氨蝶呤治疗类风湿性关节炎的临床疗效。采用随机对照的方法将62例患者随机分为对照组和治疗组,治疗组以补肾祛寒治尪汤配合甲氨蝶呤为基础辨证加药治疗,对照组主要口服甲氨蝶呤治疗。治疗组治疗类风湿性关节炎有效率明显高于对照组,且关节肿胀、晨僵时间、关节疼痛指数、ESR、RF、CCP、CPR均明显较对照组降低或减少(P0.05)。补肾祛寒治尪汤配合甲氨蝶呤治疗类风湿性关节炎疗效好,可以明显改善患者的临床症状、体征,降低实验室的各项检查的指标,具有临床治疗意义。     

厚藤提取物对胶原诱导关节炎模型大鼠的治疗作用研究

为探究厚藤(Ipomoea pes-caprae)提取物对胶原诱导关节炎(Collagen-induced Arthritis,CIA)模型大鼠的治疗作用,本研究采用牛Ⅱ型胶原诱导建立CIA大鼠模型,观察厚藤提取物高、中、低剂量组(2.2712,1.1356,0.5678 g/kg)对CIA大鼠踝关节肿胀、足跖肿胀、关...     

苗药石楠藤、黑骨藤不同萃取部位抗RA作用研究

为探究苗药石楠藤与黑骨藤不同萃取部位对完全弗氏佐剂(CFA)所致SD大鼠类风湿性关节炎模型的治疗效果,本实验将黑骨藤、石楠藤70%乙醇提取物分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取;构建SD大鼠RA模型,通过大鼠足肿胀程度,脾脏与胸腺指数,IL-1β、IL-6及TNF-α炎症因子含量等指标,评价两种苗药不同萃取部位对治疗RA的效果.结果表明,石楠藤与黑骨藤各萃取部位均能降低RA模型大鼠的足肿胀程度,改善大鼠滑膜增生现象,降低胸腺和脾脏指数,降低血清中IL-1β、IL-6及TNF-α含量;且两者治疗效果相当,均有较好的抗RA作用,其中黑骨藤以正丁醇萃取部位疗效最好,石楠藤以正丁醇萃取部位疗效最好.研究结果为石楠藤与黑骨藤治疗类风湿性关节炎疾病的研究奠定了理论和实验基础.     

心理护理联合健康教育对类风湿性关节炎患者的作用研究

研究心理护理联合健康教育对类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)患者的作用。将定西市中医院2018年4月～2019年2月接收的112例RA患者按照随机数字表法划分成对照组与护理组,每组各56例。对照组采取常规护理,护理组在对照组基础上应用个体化心理护理联合健康教育。对比两组心理状况、RA知识掌握情况、遵医行为达标率。两组护理后焦虑、抑郁自评量表(SAS、SDS)评分与护理前相比均下降(P0.05),且护理组均低于对照组(P0.05);护理组RA知识掌握优良率83.93%较对照组的51.79%高(P0.05);护理组各项遵医行为达标率均较对照组高(P0.05)。对RA患者采取心理护理联合健康教育,可明显改善患者心理状况,有效提高其RA知识掌握度及遵医行为达标率。     

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白生物仿制药对大鼠类风湿性关节炎的治疗作用

目的:评价重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(TNFR-Fc)生物仿制药对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用.方法:将大鼠随机分成6组:阴性对照组(生理盐水)、阳性药物组(Enbrel)和TNFR-Fc高、中、低质量分数组,空白组(无炎症),每组6只,弗氏完全佐剂(CFA)建立类风湿性关节炎模型.给药13 d后,分别测量大鼠体重、后足足垫厚度,关节炎指数评分,ELISA法测量细胞因子水平.结果:与阴性对照组相比,Enbrel组和TNFR-Fc大、中、小质量分数组的大鼠体质量明显增加(P0.05)、继发性足肿胀减弱(P0.05)、关节炎评分分值、IL-1β、TNF-α、IL-6含量均减小(P0.05),IL-10含量升高(P0.05).结论:TNFR-Fc通过降低炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平以及升高IL-10水平来发挥治疗类风湿性关节炎的作用.     

利用微透析技术测定火针对类风湿性关节炎大鼠病变组织中5-羟色胺、组胺和前列腺素E2的影响

目的:观察不同干预方法对风湿性关节炎模型大鼠病变组织中5-羟色胺(5-HT)、组胺(HA)和前列腺素E2(PGE_2)含量影响与镇痛效应,探讨火针缓解类风湿性关节炎慢性疼痛的作用机制.方法:将健康雄性SD大鼠50只,随机分为正常对照组、模型组、针刺组、穴位埋线组和火针组,各10只,以完全弗氏佐剂(CFA)注入大鼠右后足垫皮肤内制作类风湿性关节炎模型,3组均取右侧"昆仑"、"阳陵泉"作为治疗穴位,分别行火针、普通针刺、穴位埋线治疗,利用微透析采样技术(MD)在线提取大鼠局部组织液,结合HPLC-UV检测技术,监测类风湿性关节炎模型大鼠不同时段内局部病变组织5-HT、HA和PGE_2含量的变化.结果:造模后大鼠肌肉组织中5-HT、HA和PGE_2含量较正常组明显增高,热刺痛爪退缩阈值降低(P0.01).治疗后,各组大鼠TWL阈值升高,病变肌肉组织内5-HT、HA、PGE_2含量较治疗前均有不同程度下降,火针组5-HT、HA、PGE_2含量分别在2、4、8 h处于低水平状态,与模型组比较有显著性差异(P0.01);普通针刺组5-HT、HA、PGE_2含量分别在1、2 h处于低水平状态;穴位埋线在治疗前期与模型组无统计学差异(P0.05),该组下降时间点分别于治疗后2、4 h,与模型组有统计学差异(P0.05).结论:火针、普通针刺、穴位埋线均可以降低局部肌肉组织内5-HT、HA和PGE_2含量;火针镇痛效应优于普通针刺组和穴位埋线组,且火针首次即时镇痛维持时间长于普通针刺组和穴位埋线组,穴位埋线则至少需要2 h以上才能发挥镇痛效应.     

程氏蠲痹汤治疗佐剂性关节炎大鼠的实验研究

文章研究了经典名方程氏蠲痹汤(Cheng Shi Juan Bi Tang,CSJBT)对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠的治疗作用。实验选取SD大鼠,采用弗氏完全佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)建立AA大鼠模型,实验设立正常组、模型组、雷公藤多苷(glycosides of tripterygium wilfordii,GTW)组(0.01g/kg)、CSJBT 3个剂量组(分别为2.55、5.10、10.20g/kg)共6个组,考察CSJBT给药治疗14d后,其对AA大鼠足肿胀度、脏器指数和血清免疫球蛋白水平的影响,并采用HE染色法观察AA大鼠踝关节组织的形态学变化。结果显示CSJBT可缓解AA大鼠关节肿胀,降低血清Ig G水平,改善其关节组织的病理学变化,表明CSJBT对AA大鼠具有较好的治疗作用。     

基于网络药理学及动物实验探讨瑞香狼毒治疗RA作用机制

为探讨瑞香狼毒(Stellera chamaejasme L.)治疗类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的潜在机制,利用TCMSP、PubMed及TCMID数据库和文献挖掘获得瑞香狼毒主要化学成分,利用Swiss Target Prediction、Uniprot数据库获得瑞香狼毒治疗疾病靶点,运用OMIM、GeneCards及PharmGKB数据库获取RA主要作用靶点,通过对化学成分靶点与疾病基因进行交集整合,筛选瑞香狼毒治疗RA的潜在治疗靶点.使用Cytoscape 3.6.1 软件构建“药物-活性成分-靶点-疾病”相互作用网络图,将潜在治疗靶点用DAVID软件分析预测相关的生物学过程,并通过动物实验对主要生物学过程进行验证.采用ELISA检测瑞香狼毒对RA模型大鼠血清炎症因子的影响,该研究共筛选出瑞香狼毒60个活性成分,5 017个与RA潜在治疗靶点及380个交集靶点;动物实验结果表明,瑞香狼毒可以通过抑制炎症因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)表达以发挥抗RA作用.该研究揭示了网络药理学预测并指导实验设计的合理性,证实瑞香狼毒可以通过抑制炎症因子以发挥抗RA作用,为瑞香狼毒治疗RA的机制研究提供依据.     

大鼠胶原诱导性关节炎早期外周血TNF-α与性激素水平的动态观察及相关性研究

同步观察大鼠胶原诱导性关节炎早期血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与性激素水平的变化,探讨TNF-α和性激素在类风湿关节炎(RA)发病中的作用及其相关性。用Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂诱导SD大鼠胶原性关节炎(CIA),检测CIA大鼠不同时间点的血浆TNF-α、雌二醇和睾酮,同时观察其发病时间、滑膜新生血管形成、关节炎指数评分。随着CIA免疫时间的延长,滑膜轻度增厚,滑膜新生血管开始增多,关节炎指数评分渐增加,TNF-α含量也升高,睾酮水平下降,雌二醇水平无明显变化;TNF-α含量与睾酮水平呈负相关关系(r=-0.364,P<0.05),血浆TNF-α含量与雌二醇水平无明显相关关系(r=-0.209,P>0.05)。TNF-α在RA炎症反应的细胞因子网络中起重要作用,性激素与RA的发病也有密切关系,雄激素是天然的抗炎激素,雌激素的作用可能与其浓度有关。     

豫南地区汉族人群类风湿关节炎患者IL-18基因启动子-607C/A多态性检测

采用序列特异性引物的聚合酶链反应技术(PCR-SSP)分析110例类风湿关节炎(RA)患者和100例健康体检者的IL-18基因启动子在-607位点的单个核苷酸多态性,检测豫南地区汉族人群白细胞介素18(interleukin-18,IL-18)基因启动子单个核苷酸多态性与类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的发生是否存在关联.结果表明,RA患者组与健康对照组在IL-18基因-607位点的等位基因频率的分布及基因型频率的分布比较差异均有统计学意义(χ2=8.668、4.225,P<0.05),抗CCP抗体阳性组和阴性组在IL-18基因-607位点的基因型频率分布差异没有统计意义(χ2=0.941,P>0.05),说明IL-18基因启动子-607位点的多态性与RA患者类风湿因子存在关联.     

伸筋草提取物对AA大鼠RF及Ig影响的实验研究

研究伸筋草提取物对佐剂性关节炎（AA）大鼠血清类风湿因子（RF）及免疫球蛋白（Ig）的影响,探讨其治疗类风湿性关节炎（RA）的作用及免疫学机制.采用弗氏完全佐剂（CFA）诱导大鼠AA模型,于造模后第7 d分别灌胃给药伸筋草乙醇、正丁醇提取物,连续给药21 d.ELISA法检测RF,免疫透射比浊法检测IgG、IgM、IgA的OD值.模型组大鼠血清RF和IgA、IgM水平均高于正常对照组（P〈0.01）.各治疗组RF、IgM、IgA水平均有不同程度的降低,IgG未见有意义的改变.伸筋草乙醇、正丁醇提取物可通过免疫调节机制对佐剂性关节炎发挥治疗作用.     

黑果枸杞花青素提取物对大鼠急性痛风性关节炎的作用

为研究黑果枸杞花青素提取物(anthocyanin extract of Lycium ruthenicum Murr., AEL)对急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis, AGA)大鼠的作用,将60只雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组、AEL高剂量组(238.0mg/kg)和AEL低剂量组(59.5mg/kg),每组12只,分为2批,每批6只。第一批动物灌胃2周,第二批动物灌胃4周后,采用50mg/mL微晶型尿酸钠(microcrystalline sodium urate, MSU) 0.2mL注射到大鼠右踝关节诱导大鼠急性痛风性关节炎模型,评价AEL对AGA大鼠踝关节肿胀和跛行步态的改善效果。所有动物继续灌胃至5周,采用质量分数2.5%的氧嗪酸钾饲料喂食诱导高尿酸血症模型,测定造模2h、3h后大鼠的血清尿酸水平。研究发现,与模型对照组比较,灌胃2周,AEL高剂量能明显缓解大鼠造模6h后踝关节肿胀,改善跛行步态;灌胃4周,AEL高、低剂量均能明显缓解大鼠造模后6h、24h踝关节肿胀和改善造模6h后跛行步态,AEL高剂量还能明显改善造模24h后跛行步态;灌胃5周后,AEL高、低剂量均能明显抑制氧嗪酸钾导致的大鼠血清尿酸升高。结果表明,AEL能从抗炎和降尿酸两个方面对大鼠急性痛风性关节炎表现出明显改善作用。     

甲氨喋呤联合来氟米特治疗活动性类风湿关节炎疗效观察

目的评价甲氨喋呤(MTX)联合来氟米特(LEF)及单用MTX治疗类风湿关节炎(RA)的疗效和安全性。方法90例患者随机分为两组:甲氨蝶呤联合来氟米特组(45例),甲氨蝶呤每周定量口服7.5 mg～10 mg 1次,来氟米特20 mg每日1次;单用甲氨蝶呤组(45例),甲氨蝶呤每周10 mg～15 mg 1次,疗程分别为12周及24周。以ACR20为主要评价指标,ACR50、关节疼痛指数、关节肿胀数目、晨僵时间、患者对疼痛的评价(VAS)、患者对疾病活动性的总体评价(VAS)、医生对疾病活动的总体评价(VAS)、健康评估问卷(HAQ)、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)具体观察指标为次要评价指标。结果联合用药组ACR20及各具体观察指标与单药组比较差异有显著性(P<0.05);ACR50联合用药组高于单药组,但无统计学差异(P>0.05)。两组之间不良反应发生率差异无统计学意义。结论MTX联合LEF治疗能显著改善RA症状、体征和实验室炎性指标,疗效优于单用MTX;两者联合治疗安全性耐受性好,与单用MTX相比并不增加不良反应的发生率。     

黄芪桂枝五物汤在类风湿性关节炎治疗中的作用探究

探讨黄芪桂枝五物汤在治疗类风湿性关节炎治疗中的疗效。选取自2018年12月-2019年12月在康乐县人民医院收治的90例类风湿性关节炎(RA)患者作为研究对象,按照进组的先后顺序,将其分成2组,对照组和研究组各45例,对照组给予纯西药治疗,研究组给予黄芪桂枝五物汤治疗,观察2组患者的临床治疗效果、治疗前后关节疼痛数、晨僵时间、血清C反应蛋白(CRP)水平、类风湿因子(RF)水平。研究组RA患者的临床医治结果显著高于对照组(P0.05);治疗前,2租RA患者的关节疼痛数、晨僵时间、CRP水平、RF水平差异均无统计学意义(P0.05),治疗后,2组RA患者的关节疼痛数、晨僵时间、CRP水平、RF水平均显著低于治疗前(P0.05),且研究组RA患者的关节疼痛数、晨僵时间、CRP水平、RF水平均显著低于对照组(P0.05)。黄芪桂枝五物汤在类风性关节炎患者的治疗中疗效显著,可有效缓解患者的疼痛,促进患者身体机能的恢复。     

重用西河柳治疗类风湿性关节炎阴虚湿热证疗效观察

观察重用西河柳组方(滋阴清热利湿法)治疗类风湿性关节炎阴虚湿热证的临床疗效和安全性。符合纳入标准的70例RA患者随机分为2组:对照组采用甲氨蝶呤(MTX)治疗;治疗组在对照组的基础上加用西河柳组方治疗,疗程均为3个月。观察治疗前后疼痛视觉模拟评分法(VAS)评分、关节压痛指数、关节肿胀指数及晨僵时间,并检查红细胞沉降率(ESR)、C-反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)水平、血常规、肝肾功能。随时观察治疗过程中的不良反应。2组治疗后晨僵时间比较,ESR、CRP、RF实验室检查指标比较,差异均有显著性意义(P0.05)。总有效率治疗组为85.71%,对照组为60%,差异有显著性意义(P0.05)。药物不良反应治疗组出现1例,对照组7例。重用西河柳组方(滋阴清热利湿法)治疗RA阴虚湿热证疗效、安全性较好,与MTX联合应用有协同作用。     

乳岩内消霜外用对大鼠乳腺癌癌前病变组织VEGF、FGF2表达的影响

目的:观察乳岩内消霜外用对大鼠乳腺癌癌前病变模型乳腺组织中血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)表达的影响,探寻乳岩内消霜治疗乳腺癌癌前病变的机制.方法:36只雌性未孕SD大鼠,随机分为空白对照组、疾病模型组、三苯氧胺组及乳岩内消霜质量分数分别为4 000、2 000、1 000 mg/g组.采用二甲基苯并蔥(DMBA)联合雌、孕激素诱导癌前病变大鼠模型,对乳房外用药物干预,第10周处死动物,进行组织病理学检测,Western blotting及免疫组化法检测乳腺组织中VEGF、FGF2的表达.结果:各药物干预组乳腺组织VEGF、FGF2的表达均明显低于疾病模型组(P0.05);Western blotting检测乳岩内消霜质量分数4 000 mg/g组VEGF表达低于乳岩内消霜质量分数2 000和1 000 mg/g组(P0.05);免疫组化检测乳岩内消霜质量分数4 000mg/g组FGF2表达低于乳岩内消霜质量分数1 000 mg/g组(P0.05).结论:乳岩内消霜外用能够有效下调VEGF、FGF2在乳腺癌癌前病变大鼠乳腺组织中的表达,可能通过抑制血管生成因子表达而防治乳腺癌的有效机制,具有量效关系.     

基于Nrf2/HO-1信号通路研究黛玉膏对肛瘘大鼠血管生成的影响

目的 观察黛玉膏对肛瘘大鼠血管生成和Nrf2/HO-1信号通路的影响。方法 将20只SPF级SD大鼠进行综合法构建肛瘘术后创面模型，建模成功后随机分为模型组和黛玉膏组，每组10只。黛玉膏组大鼠使用药物涂抹伤口，模型组以0.9%氯化钠溶液擦洗。另选取10只仅造成创口的大鼠作为对照组，也以0.9%氯化钠溶液擦洗，各组大鼠每天处理2次，均连续干预14 d。观察创面愈合情况及局部血流。ELISA法检测肛瘘创面组织血管内皮生长因子(VEGF)、VEGF受体(VEGFR)、内皮生长因子(EGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、白细胞介素IL-1β、IL-6、IL-10、大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平；Western blot法检测创面组织Nrf2及HO-1蛋白水平。结果 与对照组相比，模型组创面愈合率及血流量显著下降(P<0.05),与模型组相比黛玉膏组大鼠创面愈合率和血流量显著升高(P<0.05);CD31染色结果比较，模型组较对照组显著降低(P<0.05),黛玉膏组较模型组显著升高(P<0.05);肉芽组织IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α比较，模型组较...