北极海参多糖的分离纯化及抗肿瘤活性研究

采用人肺癌细胞A549、人胃癌细胞SGC-7901、人乳腺癌细胞MCF-7及人胰腺癌细胞PANC-1共4种癌细胞株,通过MTT法研究北极海参多糖组分的体外抗肿瘤活性;利用胃蛋白酶、胰蛋白酶连续水解制备海参粗多糖,用sephadex G-50及DEAE-52分离纯化,得到Ⅱ-ⅠC、Ⅱ-ⅠD和Ⅱ-ⅠE 3种精制多糖;对3种精制多糖的组成及性质进行分析。结果表明:3种精制多糖对4种肿瘤细胞的抑制作用明显强于粗多糖,且与多糖质量浓度正相关;3种精制多糖对MCF-7的抑制作用最强,对A549的抑制作用相对较弱;实验浓度(0.02、0.04、0.06、0.08、0.10 mg/m L)下,Ⅱ-ⅠD和Ⅱ-ⅠE对A549的抑制作用显著强于Ⅱ-ⅠC;Ⅱ-ⅠD对MCF-7、SGC及PANC-1的抑制作用强于Ⅱ-ⅠE和Ⅱ-ⅠC;3种精制多糖的质量分数均大于93%,为不含肽链及核酸的β-吡喃构型,硫酸根的质量分数为31.52%~32.67%。单糖组成分析显示,3种多糖均属于海参硫酸软骨素。     

青龙衣多糖的提取及单糖组分和质量分数测定

提取青龙衣多糖,经纯化后,分析其单糖组分并测定其总糖质量分数.水提醇沉法提取粗多糖,酸性条件下离心脱色,Sevage法除蛋白,H2O2脱结合色素,高效毛细管电泳(HPCE)测定单糖组成,苯酚-硫酸法测定质量分数.青龙衣粗多糖提取率为38.07%,精制多糖为76.08%;主要单糖组分为半乳糖(Gal)、葡萄糖(G lu)、阿拉伯糖(Ara)、鼠李糖(Rha)、果糖(Fru),其百分比分别为42.998%、23.30%、16.03%、10.123%、7.549%.高效毛细管电泳分离度高,可用于单糖组分定量、定性分析;苯酚-硫酸法实验操作简便,准确可靠,可用于青龙衣多糖质量分数的测定.     

树舌、茯苓多糖的提取分离及组成

对树舌(Ganoderma apparatus)、茯苓(poria cocos)多糖的提取、纯化和单糖的组成成分进行了研究.认为树舌子实体和茯苓菌核经热水提取、脱色和乙醇沉淀分别得到相应多糖(树舌多糖Ga,茯苓多糖Pc)粗品,多糖粗品经脱蛋白,乙醇分级沉淀、Sephadex G-15葡聚糖凝胶柱层析纯化得Ga-1、Ga-2、Ga-3和Pc -1、Pc -2、Pc -3 3个级分,并应用薄板层析技术,确定树舌多糖3个级分均由葡萄糖、树胶醛糖、甘露糖、果糖及一种未知单糖组成,茯苓多糖3个级分均由葡萄糖、甘露糖、核糖及一种未知单糖组成.     

TLC与GC法测定红薯叶多糖的单糖组成

去蛋白后的红薯叶多糖,经Sephadex-G100凝胶层析法纯化后,利用薄层色谱法结合酸水解,糖腈乙酰化气相色谱分析法测定红薯叶多糖的单糖组成和各组成的物质的量比.结果表明:红薯叶多糖的单糖组分有木糖(Xyl)、甘露糖(Man)、葡萄糖(Glu),其量的比0.47:0.35:0.18.     

高效液相色谱法测定龙眼肉多糖的单糖组成

为了研究分析龙眼肉多糖的单糖组成,采用水提醇沉法提取龙眼肉多糖,用三氟乙酸水解多糖成单糖,经衍生化试剂1-苯基-3-甲基-吡唑啉酮(PMP)衍生化后,利用高效液相色谱法(HPLC)分析单糖的PMP衍生物。结果表明,龙眼肉多糖由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖7种单糖组成。龙眼肉多糖是一种酸性杂多糖,其中以葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、半乳糖醛酸为主。     

铁皮石斛多糖的分离纯化及其结构研究

采用DEAE-52阴离子交换柱色谱法以及Sephadex G-100凝胶柱色谱法对铁皮石斛粗多糖进行分离纯化,得到4个不同相对分子质量(Mw)纯多糖组分(DOP1、DOP2、DOP3和DOP4)。运用柱前衍生化高效液相色谱法、凝胶渗透色谱(GPC)法和傅立叶红外光谱对其单糖组成、纯度和相对分子质量以及结构中单糖连接方式进行分析。研究结果表明:分离得到的4种铁皮石斛多糖的GPC色谱图均呈现为单一狭窄的对称峰,表明多糖纯度很高且均一性很好。单糖组成测定结果显示其主要为D-甘露糖和D-葡萄糖组成杂多糖,但D-甘露糖和D-葡萄糖的摩尔比在4种多糖中有一定差异性。红外光谱结果表明这四个多糖均为β-构型为主的酸性吡喃糖。研究结果可为今后铁皮石斛多糖活性和构效关系的研究奠定基础。     

马齿苋多糖的提取与其单糖组成研究

利用苯酚硫酸法对马齿苋多糖含量进行坝测定，设计正交实验确定马齿苋多糖提取的最佳工艺，马齿苋多糖的含量高达9．23％。将其多糖进行分离纯化，分得一种相对分子质量为411KD的多糖，进行理化性质试验测试，并利用纸层析和气相色谱对此马齿苋多糖中的单糖组成作了分析，其单糖组成为葡萄糖和半乳糖，其他单糖没有检出。     

8种多糖的单糖组成、活性及其相关性分析

为探究多糖的结构与其体外抗氧化活性间的相关性,采用水提醇沉法提取了8种中药材中的多糖,用苯酚-硫酸法测定其多糖含量、用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化(PMP)-高效液相色谱法(HPLC)测定各多糖中的单糖组成及含量并对其进行主成分投影分析.以清除1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基为模型测定了8种多糖的体外抗氧化活性.用简单相关分析探究样品中各单糖之间及各单糖与体外抗氧化活性间的相关程度,采用典型相关分析研究单糖组成与体外抗氧化活性的整体相关性.结果表明8个样品在主成分空间分布离散,有较好的代表性;除葡萄糖(Glc)外,各单糖之间、单糖与体外抗氧化活性间的简单相关系数均较高,单糖组成与抗氧化活性的第一典型相关系数为0.844,4;多糖的单糖组成与体外抗氧化活性有较强相关性.     

柘树根多糖的分离纯化及组成初步研究

以柘树（Cudrania tricuspidata （Carr.） Bur.）的根为材料,经热水抽提、木瓜蛋白酶-Sevag法除蛋白、乙醇沉淀和凝胶柱层析分离纯化,得到1种水溶性的柘树根多糖（CTP）并研究了其单糖组成. 采用紫外光谱和红外光谱法对柘树根多糖进行了定性分析,结果表明,柘树根多糖具有多糖特征性的紫外和红外吸收峰,不含糖醛酸;高效凝胶渗透色谱法测定结果表明,柘树根多糖的峰值分子量为18881;采用气相色谱法测定柘树根多糖中单糖的种类和构成比例,结果表明,柘树根多糖主要由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、木糖等4种单糖组成,并计算出4种单糖的摩尔组成比例.     

青钱柳多糖中单糖组分分析

采用水提醇沉法提取粗多糖,采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,采用柱前衍生HPLC法测定多糖中的单糖组成.结果显示:粗多糖的质量分数为4.34%;青钱柳多糖主要由木糖、甘露糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖和核糖等单糖组成,其在粗多糖中的质量分数分别为3.04%、7.35%、8.46%、13.46%、28.72%、24.26%和6.16%.青钱柳中多糖因青钱柳来源不同而存在单糖组成差异,本研究为青钱柳的质量控制与药理药效研究提供了依据.     

沙棘叶水溶性多糖SJ21的分离纯化及组成分析

本文的目的是研究沙棘叶中的多糖组分.采用热水提取乙醇沉淀获得沙棘叶水溶性粗多糖的方法,用酸性乙醇和DEAE_SephdexA_25进行分离纯化,红外光谱鉴定多糖,纸层析及气相色谱分析其单糖组成.结果证明:纯度鉴定表明SJ21为纯多糖,分子量约为70KD.SJ21红外光谱中有典型的多糖和β型糖苷键吸收峰.纸层析及气相色谱分析其单糖组成为Xyl、Ara、Man、Glc、Gal,摩尔比为1.0∶2.1∶2.9∶5.3∶3.7.SJ21为首次从沙棘叶中提取获得.     

拟康氏木霉产胞外多糖的分离纯化及组成初步研究

以拟康氏木霉（Trichoderma pseudokoningii SDTP1）产胞外多糖粗品为材料,经木瓜蛋白酶-Sevag法除蛋白、凝胶柱层析分离纯化,得到一种水溶性的拟康氏木霉产胞外多糖纯品（TPP-0）,并研究了其单糖组成.采用紫外光谱和红外光谱法对拟康氏木霉产胞外多糖进行了定性分析.结果表明,拟康氏木霉产胞外多糖具有多糖特征性的紫外和红外吸收峰 高效凝胶渗透色谱法测定结果表明,拟康氏木霉产胞外多糖的峰值分子量为1.8×104 采用气相色谱法测定拟康氏木霉产胞外多糖中单糖的种类和构成比例,结果表明,拟康氏木霉产胞外多糖主要由鼠李糖、葡萄糖、半乳糖等3种单糖组成,含有葡萄糖醛酸,并计算出3种单糖的摩尔组成比例.     

桂花多糖的提取及含量测定方法研究

目的：利用溶剂法从桂花中提取出多糖,并对其含量进行测定。方法：使用乙醇对桂花进行脱脂处理,继用热水提取,醇析后得粗多糖,使用三氯乙酸除去蛋白质得精制多糖。利用多糖类化学成分在硫酸作用下先水解成单糖,并迅速脱水生成糠醛衍生物,后者和苯酚缩合成有色化合物的特性,以葡萄糖作为标准品,采用苯酚-硫酸法,在紫外分光光度计490 nm处其测定吸光度,绘制标准曲线。取适量精制多糖,按测定标准曲线同样方法测其吸光度值,根据公式计算出桂花的多糖含量。结果：采用苯酚-硫酸法对多糖的含量进行了测定,测得平均结果为34%。结论：水提醇沉法制得桂花粗多糖;TLA法除去蛋白质得精制多糖。苯酚-硫酸法对其多糖含量进行测定,结果令人满意。     

天麻醇提物对灰树花胞外多糖单糖组成和生物活性的影响

天麻醇提物参与灰树花液体发酵体系,检测所得胞外多糖的单糖组成变化,研究天麻醇提物对灰树花胞外多糖生物活性的影响。利用高效液相色谱对4种胞外多糖样品进行单糖组成分析,采用小鼠巨噬细胞(RAW264.7)活化模型、人肝癌细胞(HepG 2)模型对灰树花胞外多糖生物活性进行检测。实验结果表明灰树花粗多糖样品主要由葡萄糖、甘露糖及少量的半乳糖等单糖构成;经纯化的胞外精多糖由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、岩藻糖等单糖构成,单糖物质的量比依次为13.8∶3.9∶5∶3.7:1∶1.7,而添加天麻醇提物的胞外精多糖单糖组分物质的量比为12.7∶3.2∶5.6∶3.5∶1∶1.6。通过灰树花胞外多糖对小鼠巨噬细胞活化实验的结果可知,添加天麻醇提物的胞外精多糖对巨噬细胞有明显的活化作用,胞外精多糖、添加天麻醇提物制备的胞外粗多糖对巨噬细胞有一定的活化作用,胞外粗多糖对巨噬细胞无明确的活化作用。通过体外实验检测,4种多糖样品对人肝癌细胞HepG 2无抑制作用。添加天麻醇提物对灰树花胞外多糖单糖组分含量产生明显变化,但并未使灰树花多糖产生新单糖;添加天麻醇提物能提高灰树花胞外多糖对巨噬细胞的活化作用。     

青钱柳叶多糖中单糖组分分析

采用水提醇沉法提取青钱柳叶中粗多糖,用苯酚-硫酸法测定多糖含量,进一步采用柱前衍生HPLC法测定多糖中的单糖组成,并对3个不同来源的青钱柳叶中多糖和单糖的含量与构成进行比较分析。研究结果显示,青钱柳叶中粗多糖的平均质量分数为4.34%,青钱柳叶中多糖主要由木糖、甘露糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖和核糖等单糖组成,其在粗多糖中的质量分数分别为3.04%、7.35%、8.46%、13.46%、24.32%、24.26%和6.16%。青钱柳叶中多糖因青钱柳叶来源不同而存在单糖组成差异。本研究为青钱柳叶质量控制与药理药效研究提供了依据。     

春砂仁多糖的提取及组分分析

报道春砂仁多糖的分离纯化及结构分析的研究.以凝胶过滤色谱法测定春砂仁多糖的数量及分子量,结果显示:春砂仁主要含两种多糖,其数均分子量分别为56 421及1 743;多糖经酸解成为单糖并衍生为乙酰化的糖肟,对照标样采用气相色谱法测定其单糖组分为阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖,4种单糖含量的相对比例:1.00∶0.68∶0.97∶0.86.     

草苁蓉根、茎水溶性多糖BRT的分离与鉴定

从长白山区野生植物草苁蓉的根、茎中分离水溶性多糖。粗多糖经乙醇分级、Sevage法脱蛋白、H2O2脱色、反复冻融、高速离心等方法分离纯化得级分BRT。经Sepharose CL-4B柱层析、DEAE－Sephadex A-25柱层析等方法证明BRT为均一组分。气相色谱分析多糖的组成表明，粗多糖的单糖组成为Ara，Xyl,Gal,Man,Glc，摩尔比依次为0.98:1.00:2.38:1.28:10.00。BRT的单糖组成为Xyl,Gal,Man和Glc，摩尔比依次为0.61:3.12:1.00:3.97。以上结果说明，多糖BRT是以葡萄糖、半乳糖为主，兼有木糖和甘露糖的中性杂多糖。     

海洋微藻多糖组成的气相色谱分析

采用超声破碎协同蒸馏水提取海水小球藻(Chlorella)中的多糖,多糖经除蛋白、柱纯化、水解和乙酰化等一系列步骤后进行气相色谱分析,得到该多糖的单糖组成为:鼠李糖、核糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其含量分别为3.0％、1.9％、1.3％、1.3％、1.5％、82.8％和8.2％。结果表明该法精密度高,相对标准偏差为2.1％～6.4％,回收率为96.2％～102.1％,检测限为0.002 38μg。     

山楂多糖的成分测定及其单糖组分分析研究

目的:研究山楂多糖的总多糖含量及单糖组分构成.方法:用苯酚-硫酸法测定山楂多糖中的中性多糖含量,用间羟基联苯法测山楂多糖中糖醛酸含量,用红外光谱法初步探究山楂多糖官能团,用气相色谱法分析山楂多糖中单糖组分.结果:山楂多糖中中性多糖的含量为72.00%;糖醛酸的含量为14.98%;红外光谱分析表明山楂多糖可能为一种氨基多糖;气相色谱法分析得山楂多糖的单糖组成为木糖、核糖、阿拉伯糖、鼠李糖、果糖、葡萄糖、半乳糖,其质量分数分别为5.53%、13.85%、14.26%、9.29%、8.37%、19.91%、21.93%.结论:该方法比较便捷,重复性好,可用于山楂多糖中单糖的组成成分分析.     

GC-MS法分析茶叶中提取物TGP的单糖组成及机理探讨

用水提取茶叶并采用凝胶纯化，从茶叶中分离得到一种多糖蛋白复合物TGP．TGP被硫酸完全水解，单糖产物用盐酸—羟胺和乙酸酐进行衍生化处理，GC—MS进行分析．研究结果表明，TGP的单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖．同时探讨了单糖的糖腈乙酰酯衍生化及衍生产物在质谱中的电离机理．