高效液相色谱法测定苯并三嗪-1,4-二氧化物衍生物SR-H22及其有关物质

建立了测定苯并三嗪-1,4-二氧化物衍生物SR-H22的含量及有关物质的高效液相色谱方法。采用Dikma Diamonsil C_(18)(250 mm×4.6 mm,5.0μm)色谱柱;流动相A为乙腈,流动相B为水;流速:1.0 m L·min~(-1);等度洗脱,A-B(25∶75,V/V),检测波长为243 nm;进样体积:10μL。在上述色谱条件下,各杂质及各降解产物均可与SR-H22主峰良好分离,HPLC测定的线性范围为0.1~1.5μg(r=0.999 8),方法中仪器精密度、日内精密度、日间精密度及重复性的RSD均小于2%。采用HPLC测定SR-H22含量及有关物质,方法简便,结果准确可靠。     

RP-HPLC测定苯磺酸氨氯地平片中的有关物质

目的:建立高效液相色谱法测定苯磺酸氨氯地平片中的有关物质. 方法:色谱柱为 Luna C18, 流动相为0.010mol/L磷酸氢二钾溶液(含0.7%三乙胺, 磷酸调pH4.0±0.1)-乙腈 (70:30), 流速为1.0 ml/min, 检测波长为237 nm, 进样量为10 μl. 结果:原苯磺酸氨氯地平片中总有关物质分别为0.53%、0.58%和0.60%;单个最大杂质的含量分别为0.32%、0.37%和0.38%. 结论:本方法准确、可靠、操作性强, 可用于苯磺酸氨氯地平片中有关物质的检查.     

反相高效液相色谱法测定盐酸左旋米那普仑原料药中多种杂质

建立盐酸左旋米那普仑原料药有关物质测定的反相高效液相色谱法.色谱柱为Waters sunfire C_(18)(5μm,250 mm×4. 6mm);以0. 05%TFA水溶液为流动相A,0. 05%TFA乙腈溶液为流动相B,进行梯度洗脱;检测波长为220 nm;流速为1. 0 m L/min;柱温为30℃;进样体积10μL.盐酸左旋米那普仑与有关物质(含降解产物)分离度良好,且能同时控制极性小的工艺杂质和极性大的降解杂质.方法简便快速、准确灵敏、重复性好,能够用于盐酸左旋米那普仑有关物质测定.     

高效液相色谱法测定盐酸阿罗洛尔有关物质

建立了盐酸阿罗洛尔有关物质测定方法.采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent HC C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相A为甲醇-水(体积比为8∶2),流动相B为磷酸盐缓冲液(pH调节为5.5),梯度洗脱,流速为0.8mL/min,进样量10μL,检测波长312nm,柱温为30℃.结果表明:主药与各有关物质、各有关物质之间分离度良好,各有关物质均能有效检出;盐酸阿罗洛尔及有关物质A,B,C质量浓度分别为0.052~20.006,0.102~22.331,0.061~19.865,0.065~18.308μg/mL时与各自峰面积呈良好线性关系;仪器精密度、中间精密度、稳定性试验的RSD不超过2.0%;各有关物质测定平均回收率为99.32%~101.96%,RSD为0.54%~0.89%(n=9).     

HPLC测定注射用阿奇霉素含量及有关物质

建立高效液相法对注射用阿奇霉素冻干制剂含量和有关物质检测的方法。色谱柱为Xbridge Shield RP18(250mm×4.6mm,5um);流动相为乙腈:磷酸盐缓冲液(0.05mol/L磷酸氢二钾溶液,用0.5mol/L氢氧化钾调节pH值至9.0)(55:45);检测波长210nm;流速1.0mL/min。阿奇霉素浓度与吸收峰面积线性方程为Y=34.205X+3.6504(r=0.9999),在0.5~4.0mg/mL内显良好的线性关系,加样平均回收率为100.3%(RSD=0.34%)、精密度RSD=0.91%。各杂质峰与主峰分离良好,总杂质和最大杂质面积不大于主峰面积5.0%和2.0%。高效液相法可代替微生物效价法测定阿奇霉素含量和薄层法测定有关物质。     

亲水作用色谱法测定左卡尼汀注射液含量及杂质A

通过考察流动相中有机相的比例、缓冲液浓度、pH值、柱温以及流速等因素的影响,建立亲水作用色谱法测定左卡尼汀注射液含量及杂质A的方法.最终确定的色谱条件为采用XBridgeAmide色谱柱(4.6mm×250mm,3.5μm),以缓冲液(10mmol/L乙酸铵,用冰醋酸调节pH值5.0)-乙腈(20∶80)为流动相,柱温40℃,检测波长205nm.经方法学验证,左卡尼汀与杂质A分离度良好(R>1.5),左卡尼汀与杂质A浓度分别在0.530~3.21mg/mL、2.06~82.4μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率(n=9)分别为100.4%和101.2%.杂质A检测限(S/N=3)为29.0ng/mL、定量限(S/N=10)为68.7ng/mL.结果表明该法可用于左卡尼汀注射液质量的控制.     

高效液相色谱法测定帕布昔利布含量

为建立帕布昔利布(PD)含量测定方法,采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent HC C_(18)(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(二者体积比为300∶700,含0.1%(体积分数)三氟乙酸),流速为1.0 mL/min,按照等度洗脱,进样量为10μL,检测波长为234nm,柱温为40℃。结果表明:主药与各杂质之间分离度良好;帕布昔利布质量浓度在50~150μg/mL范围内与峰面积线性关系良好,r为0.999 5;仪器精密度、中间精密度、稳定性试验的RSD值小于2.0%;帕布昔利布回收率为100.0%,RSD值为0.8%(n=9)。本方法可以准确快速测定PD含量,有效排除其他外界因素的影响,为帕布昔利布原料药含量测定提供新的参考。     

高效液相色谱-电化学检测法测定水红花子中花旗松素和槲皮素的含量

建立高效液相色谱-电化学法测定水红花子中花旗松素和槲皮素的含量.高效液相色谱采用VP-ODS柱,以体积比为18∶3∶29的甲醇、乙腈和pH=2.5的0.04mol·L~(-1)磷酸氢二钾溶液的混合溶液为流动相,设定流速为0.8mL·min~(-1),检测电位为+0.75V(vs.Ag/AgCl),采用内标法定量处理.在选定色谱条件下,花旗松素和槲皮素的线性范围分别为0.040~50.0mg·L~(-1)和0.010~50.0mg·L~(-1),最低检测限分别为15.0μg·L~(-1)和3.0μg·L~(-1).该方法简便,准确率高,重现性好,能获得满意的实验结果.     

2,2-二羟甲基丁醛氧化液的高效液相色谱分析

建立了2,2-二羟甲基丁醛氧化液中反应物以及产物的高效液相色谱(HPLC)分析方法.选用Shim-pack VP-ODS (150×4.6mm ID) 色谱柱,以乙腈与磷酸二氢钾(0.01mol/L)体积比为1∶9的混合溶剂作流动相,调节流动相的pH值为4.00,紫外检测器波长为206nm.反应物和产物具有良好的分离效果,同时得出了2,2-二羟甲基丁酸的定量分析曲线.     

高效液相色谱法测定酚酞片中的7个杂质

建立高效液相色谱法测定酚酞片中的7个杂质.色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以含0.01mol/L磷酸二氢钾的0.1%醋酸水溶液—乙腈(90∶10)为流动相A,0.01mol/L磷酸二氢钾溶液的0.1%醋酸水溶液—乙腈(30∶70)为流动相B,进行梯度洗脱;检测波长为270nm,柱温40℃,流速1.0mL/min.实验结果显示,方法简便、准确、重复性好,可为酚酞片质量标准的制定提供参考.     

UPLC-MS/MS测定腐竹和米粉中的乌洛托品

建立了腐竹和米粉中非食用物质乌洛托品的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法.实验优化了提取溶剂和净化条件,考察了乌洛托品在不同流动相体系和不同小颗粒色谱柱(粒径1.7 μm)上的色谱行为,优选以乙腈超声提取样品,正己烷(乙腈饱和)液液萃取净化,乙腈-乙酸铵(浓度为10 mmol/L、pH3.5)为流动相体系等度洗脱,HILIC色谱柱分离,正离子电喷雾多反应监测(MRM)模式检测.实验结果表明:质量浓度在0～ 50μg/L范围内,线性方程为y=12 617x - 359,相关系数为0.999 8,方法定量限为1μg/kg(S/N＞10),阴性样本添加水平在1～5μg/kg时,平均回收率为91.0％ ～ 96.6％,相对标准偏差(n=6)为2.6％ ～ 5.2％.本方法操作简单,灵敏度高,重复性好,可为打击食品生产中违法添加非食用物质乌洛托品的行为提供检测方法.     

紫杉醇注射液杂质检查方法建立

目的对有关物质检查方法筛选,建立紫杉醇注射液有关物质检查方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Ultimate柱(250mm*4.6mm,5μm),以乙腈:水为流动相,进行梯度洗脱,柱温40℃,流速为1.0m L/min,检测波长为230nm。结果辅料对有关物质测定无干扰,耐用性试验表明色谱条件微小变化杂质检出基本一致,溶液稳定性研究结果表明溶液在8h内稳定,该品检测限溶液溶度为97ng/m L,专属性试验结果表明各条件下降解产物与主峰可有效分离。结论梯度洗脱检查杂质更准确,方法学试验各项指标符合规定,可用于该品有关物质检查。     

HPLC法测定盐酸左西替利嗪有关物质

建立盐酸左西替利嗪中有关物质的HPLC测定方法。方法:采用Agilent SB-C18色谱柱(4.6 mm×25 cm,5μm)对降解杂质和工艺杂质进行定量分析,以乙腈和0.7%磷酸溶液为流动相低压梯度洗脱,流速1.2 m L/min,检测波长为230 nm。结果:该色谱方法可检测到盐酸左西替利嗪的9种有关物质,主峰与各杂质峰间能达到良好分离;3批样品有关物质测定结果显示,总杂质含量低于0.4%。结论:方法学验证表明,本法可作为盐酸左西替利嗪有关物质质量控制的方法。     

色谱法分离卵磷脂

对以硅胶为吸附剂的1. 5 cm×40 cm色谱柱分离卵磷脂的操作条件进行了研究.利用薄层层析法确定了洗脱剂的组成为甲醇/ 氯仿混合液( pH 值3~ 4) .通过洗脱方式及梯度差实验,得出梯度差为V( CH₃OH)∶V( CHCl₃) = ( 1∶2) ~ ( 2∶1)的凹形梯度洗脱为最佳洗脱方式的结论,其洗脱剂用量仅为柱体积的5~ 6倍,洗脱时间为6 h 左右.     

在不同介质中金属铁离子对非洛地平片溶出度影响

考察在不同介质中金属铁离子对非洛地平片溶出度影响。采用HPLC法,色谱柱为ODS Hypersil C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-水(50:15:35),流速为1.0m L·min-1,检测波长为238nm。测定非洛地平片在四种介质(pH1.2盐酸溶液、pH4.0醋酸盐缓冲液、pH6.8磷酸盐缓冲液及水)中(均含0.3%十二烷基硫酸钠),金属铁离子对其溶出度影响。在pH1.2盐酸溶液介质中产生降解杂质高达13%、在pH4.0醋酸盐缓冲液介质中产生降解杂质1%,pH6.8磷酸盐缓冲液及水未产生降解杂质,三价铁离子在酸性条件,可将非洛地平氧化,导致非洛地平片体外溶出度相关性较差。     

反相离子对高效液相色谱法同时测定药物中维生素B_1,B_2,B_6,B_(12)和PP

采用反相离子对高效液相色谱法同时测定药物中的维生素B_1,B_2,B_6,B_(12),和PP;叶酸在相同条件下也能分离完全。所用的分离柱为μBondapak C_(18);流动相为乙腈,0.01 mol/L磷酸二氢钾和三乙胺(14∶85.5∶0.5(体积比)),内含5 mmol/L十二烷基磺酸钠离子对试剂(简称PIC B_(12))和1.5％氯化钾并以磷酸调pH至2.78～2.82;组分以UV 254 nm检测。回收率为91％～104％,变异系数为1.0％～4.6％。     

HPLC法测定西洛他唑分散片有关物质

建立西洛他唑分散片有关物质的检测方法.采用C_8柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相A为乙腈-水(25∶75),流动相B为乙腈-水(50∶50);梯度洗脱:0―6 min―10 min―40 min,流动相A∶B的比例为100∶0―50∶50―0∶100―0∶100;检测波长254 nm.结果表明,西洛他唑与各已知杂质及降解产物均良好分离,最低检测限与最低定量限分别为0.1 ng与0.2 ng,精密度良好.本方法操作简单,对西洛他唑分散片有关物质检测快速,准确,专属性强,灵敏度高.     

HPLC法同时测定雷贝拉唑钠原料药中8个有机杂质的含量

利用高效液相色谱(HPLC)技术建立了一种同时测定雷贝拉唑钠原料药中8个有机杂质的新方法。该方法采用二元高压梯度洗脱方式,以pH=6.0的磷酸盐缓冲溶液(A)-乙腈(B)为流动相,进行梯度洗脱(0~10min,85%A→65%A;10~35min,60%A;35~35.01min,60%A→85%A;35.01~40min,85%A),流速为1mL/min,以YMC Triart C18柱为分离柱,柱温为30℃;采用紫外检测器,检测波长为285nm。研究结果表明,各已知杂质、主成分之间均能彼此分离,空白溶剂对各杂质的测定无干扰,各已知杂质的峰面积与浓度呈良好的线性关系,相关系数均大于0.990,各已知杂质的平均回收率均在83.2%~115.9%范围内,RSD为1.1%~4.3%。该方法简便有效,适用于雷贝拉唑钠原料药的质量控制,具有很高的灵敏度和准确度。     

基于大肠杆菌蛋白质质谱鉴定的阳离子交换色谱优化研究

以大肠杆菌蛋白质的胰蛋白酶切产物为研究对象,对蛋白质的提取效率进行初步探讨,重点是对多维色谱分离中常用的强阳离子交换色谱的分离条件,包括缓冲液的种类、pH值,洗脱盐的种类、有机溶剂的比例以及上样量进行了考察和比较.结果表明:功率为400W,超声时间为15min,蛋白质的提取效率达到最高.在强阳离子交换色谱分离线性上样量范围内,10mmol/L磷酸二氢钾(pH=3.0)作为缓冲体系,在氯化钾溶液作为洗脱盐、流动相中乙腈的体积分数为30%的条件下进行梯度洗脱时,可获得最佳的分离结果.     

高效液相色谱串联质谱检测尿液3种硫酸化胆汁酸

尿液样本经过OASIS HLB固相萃取,Luna C18色谱柱分离,流动相A为0.1%甲酸和2mmol/L乙酸铵水溶液,流动相B为0.1%甲酸和2mmol/L乙酸铵乙腈溶液,梯度洗脱,质谱采用负离子多反应监测检测模式.硫酸化石胆酸(3S-LCA)、硫酸化牛磺石胆酸(3S-TLCA)和硫酸化甘氨石胆酸(3S-GLCA)3种硫酸化胆汁酸得到完全分离,线性范围分别为9.7~998.0,9.0~1 080.0,9.3~1 123.3ng/mL,检测限均为5ng/mL,日内精密度均小于4.0%,日间精密度均小于5.0%,回收率在89.4%~100.7%范围内.本方法准确、灵敏,适用于尿液中硫酸化胆汁酸水平的实验室研究和临床检测.