青钱柳愈伤组织不定芽诱导技术

以青钱柳成熟种子培养无菌苗,再用无菌苗叶和茎段为外植体进行组织培养,观察了愈伤组织形成及再分化形成不定芽的过程,分析了不同培养基和生长调节物质对青钱柳愈伤组织及不定芽发生的影响。结果表明:(1)MS、WPM和B5培养基均能诱导出愈伤组织,茎段和叶片的诱导率最高分别达到90.00%和86.70%;(2)激素及其浓度对愈伤组织诱导均有显著影响。当加入TDZ质量浓度为0.5 mg/L时,叶愈伤组织诱导率达95.00%;而加入TDZ质量浓度为0.1 mg/L时,茎段诱导率达92.85%;(3)叶愈伤组织在WPM+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA的培养基上,不定芽的诱导频率最高,达53.85%,这实现了青钱柳由愈伤组织分化形成不定芽和萌发增殖的过程,但萌发率较低。     

青钱柳愈伤组织不定芽诱导技术

以青钱柳成熟种子培养无菌苗,再用无菌苗叶和茎段为外植体进行组织培养,观察了愈伤组织形成及再分化形成不定芽的过程,分析了不同培养基和生长调节物质对青钱柳愈伤组织及不定芽发生的影响。结果表明:(1)MS、WPM和B5培养基均能诱导出愈伤组织,茎段和叶片的诱导率最高分别达到90.00%和86.70%;(2)激素及其浓度对愈伤组织诱导均有显著影响。当加入TDZ质量浓度为0.5 mg/L时,叶愈伤组织诱导率达95.00%;而加入TDZ质量浓度为0.1 mg/L时,茎段诱导率达92.85%;(3)叶愈伤组织在WPM+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA的培养基上,不定芽的诱导频率最高,达53.85%,这实现了青钱柳由愈伤组织分化形成不定芽和萌发增殖的过程,但萌发率较低。     

12个草地早熟禾品种愈伤组织诱导体系的研究

 以生产中常见的12种草地早熟禾(Poa pratensis L.)成熟种子为外植体,对其愈伤组织诱导及愈伤组织增殖生长体系进行了优化试验.结果表明,在愈伤组织诱导试验中,单纯使用2,4-D时,不同品种愈伤组织诱导率在60%~93%之间,2,4-D质量浓度3 mg/L时12个早熟禾品种的愈伤组织诱导率均值最高,达到86%;在2,4-D基础上添加少量6-BA(0.1~0.2 mg/L)后,不同品种愈伤组织诱导率在30%~92%之间,12个品种的愈伤组织诱导率均值有所降低(3.1%~25.4%).在愈伤组织增殖试验中,单纯使用2,4-D时,不同品种愈伤组织增殖率在38%~164%之间,12个早熟禾品种的愈伤组织增殖率均值在3 mg/L 2,4-D时最高,达到81%;在3 mg/L 2,4-D基础上施加少量的6-BA(0.05~0.2 mg/L)后,愈伤组织增殖率均值有所降低,但存在品种的差异性.研究结果还显示,热激处理对部分草地早熟禾愈伤组织诱导及增殖有一定的促进作用.     

两种东方系百合组织培养快繁技术

以东方系百合索邦和西伯利亚的种球鳞片为外植体,以MS为基本培养基,添加NAA、6-BA、TDZ、KT、IBA、2,4-D等不同植物生长调节剂,筛选鳞片愈伤组织诱导、增殖、分化及再生苗生根的最佳培养基,为百合种质保存、组培快繁及脱毒奠定基础.结果表明,索邦百合在MS+IBA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织诱导效果最好,在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织增殖最好,在MS+NAA 0.3 mg/L+TDZ 0.1 mg/L+KT 0.2 mg/L培养基中分化最好;西伯利亚百合在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织的诱导和增殖最好,在MS+IBA 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L培养基中分化效果最好.二者均在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.01 mg/L培养基中生根最好.     

黄毛草莓愈伤组织诱导条件优化

本研究分别以黄毛草莓叶片和茎尖生长点为外植体进行愈伤组织的诱导,并通过比较茎尖愈伤组织在不同培养基以及不同植物激素组合下的生长情况,为建立黄毛草莓高效快速的繁殖体系,筛选愈伤组织诱导的最适培养基奠定基础.结果表明,与1/2MS培养基相比,MS培养基作为基础培养基(0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L 6-BA条件下)诱导的愈伤组织效果最佳;以MS为基本培养基,通过4因素3水平L9(34)正交实验研究不同浓度组合的4种植物激素对黄毛草莓愈伤组织诱导率的影响.结果表明2,4-D对黄毛草莓叶片愈伤组织的诱导影响最大.黄毛草莓叶片愈伤组织诱导的最优培养基为MS+0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L 6-BA+0.15 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA;NAA对黄毛草莓茎尖愈伤组织的诱导影响最大,黄毛草莓茎尖愈伤组织诱导的最优培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+0.6 mg/L 6-BA+0.15 mg/L 2,4-D+0.6 mg/L NAA.     

曼地亚红豆杉愈伤组织诱导和继代培养研究

以曼地亚红豆杉(Taxusmedia var.hickss)嫩茎和嫩叶为外植体,进行愈伤组织诱导和继代培养研究。愈伤组织诱导以MS为基本培养基,继代培养以MS和B5为基本培养基,分别添加不同浓度和组合的细胞分裂素(6-BA、TDZ、KT、2-ip)、生长素类激素(NAA、2,4-D),和水解乳蛋白、活性碳等抗褐化试剂,考察其对愈伤组织诱导和继代培养的影响。结果表明,曼地亚红豆杉嫩茎有很强的分生能力,比嫩叶更易于诱导愈伤;在培养基MS TDZ0.002mg/L NAA1.0mg/L、MS TDZ0.002mg/L 2,4-D1.0mg/L、MS TDZ0.002mg/L NAA1.0mg/L 2,4-D1.0mg/L和MS KT1.0mg/L 2,4-D1.0mg/L NAA1.0mg/L上,嫩茎愈伤的诱导率达100%,生长迅速,品质良好,利于继代培养;培养基B5 KT1.0mg/L 2,4-D2.0mg/L NAA1.0mg/L适用于愈伤继代,每30d增殖倍数5.2倍;培养基中添加活性碳500mg/L、维生素C 1000mg/L或水解乳蛋白1000mg/L对抑制材料褐化有一定的效果。     

麻疯树花药愈伤组织诱导分化与生根培养

以麻疯树花粉处于单核中晚期的花药作为实验材料,探讨了麻疯树花药培养从愈伤组织诱导,愈伤组织分化芽,壮苗,生根的整个过程.其中愈伤组织诱导的最好培养基为N6+2,4-D 1.0 mg/L+KT 0.4 mg/L+10%蔗糖,避光培养;在愈伤组织分化芽的过程中,TDZ起到了非常明显的效果,最佳的培养基为MS+TDZ 2.0 mg/L+IAA 2.0 mg/L+水解酪蛋白1g/L+3%蔗糖;最合适的壮苗培养基为MS+GA3 1.0mg/L+6-BA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L+3%蔗糖;生根效果     

美洲商陆高频再生体系的建立

美洲商陆为商陆科多年生草本植物,在工业、农业和医药上具有很高的应用价值.本实验拟从外植体选择、激素组合、GA3和AgNO3等物质应用角度进行试验,分析各条件对愈伤组织诱导,不定芽分化、伸长以及不定根诱导等方面的影响,旨在构建美洲商陆稳定高效的再生体系.实验结果表明:愈伤组织诱导和不定芽分化的最适外植体为茎节;将无菌苗的上部经诱导培养基转接、壮苗后,再取茎节进行愈伤组织诱导和不定芽分化,可以显著提早不定芽分化、提高芽增殖系数;不定芽诱导分化最佳培养基为MS+6-BA(3.0 mg/L)+NAA(0.01 mg/L)+TDZ(0.02 mg/L),增殖系数达12.7;不定芽伸长的最佳培养基为MS+TDZ(0.02 mg/L)+6-BA(3.0 mg/L)+NAA(0.01 mg/L)+GA3(2.0 mg/L);生根最佳培养基为1/2MS+NAA(0.4 mg/L),生根率可达91.7%以上.AgNO3处理抑制了美洲商陆不定芽的分化.     

华北大黄愈伤组织培养及土大黄苷含量研究

为有效保护和利用华北大黄野生资源,以野生华北大黄为材料,探讨了不同种类、不同质量浓度的植物生长调节剂对其愈伤组织诱导及增殖效应,并采用高效液相色谱对愈伤组织及野生植株中土大黄苷含量进行了分析.结果表明:MS培养基中单独添加不同质量浓度的6-BA,不利于愈伤组织的增殖;培养基中单独添加不同质量浓度的NAA和2,4-D,对...     

硅对南方红豆杉愈伤组织诱导及增殖培养的影响

以南方红豆杉叶片为外植体,进行愈伤组织诱导、增殖试验。在已经筛选出的最适诱导培养基中,添加不同浓度的硅进行诱导及增殖培养试验,以确定培养基中的最佳硅浓度。结果表明:适度增加硅浓度,可明显提高南方红豆杉愈伤组织的诱导和增殖,并能改善愈伤组织的生长状态,增加愈伤组织增殖生长量。     

不同光质对47号山药零余子愈伤组织诱导的影响

以47号山药脱毒试管苗诱导的零余子为材料,研究了光质和培养基组合对愈伤组织诱导形成时间及诱导率的影响,再将其培养在最佳培养基中,研究不同光质对愈伤组织鲜重、干重和生长率的影响.结果表明,从愈伤组织诱导形成的时间和诱导率方面,红光与MS+6-BA 2mg.L-1+2,4-D 2mg.L-1组合最佳,第6d开始形成愈伤组织,30d时愈伤组织诱导率达到100%;从愈伤组织的生长方面,白光和红光有利于愈伤组织鲜重的增加,白光和黄光有利于愈伤组织干物质的积累,红光和黄光有利于愈伤组织生长率的提高;而绿光则起了抑制作用.     

加工番茄的花药培养技术

为确定适宜于加工番茄花药愈伤组织诱导的最佳取材时期和激素组合,以2个加工番茄品种的花药为材料,以醋酸洋红液为染液,压碎法制片,用体视显微镜观察小孢子的发育时期;以MSB培养基为基本培养基,附加不同浓度的植物激素2,4-D、NAA、KT、6-BA、ZT、TDZ进行花药培养,研究不同植物激素组合对加工番茄花药愈伤组织诱导的影响。结果表明:番茄花蕾纵径为5.25-6.19 mm,横径为2.09-3.20 mm,绝大多数的小孢子发育时期处于单核靠边期;不同基因型加工番茄愈伤组织的诱导率不同,品种CK8的诱导率为18.63%,品种CK3的诱导率为14.19%;0.5 mg/L 2,4-D+0.05 mg/L TDZ是最适宜愈伤组织诱导的激素组合,诱导率为56.52%,其次是0.1 mg/L2,4-D+2.0 mg/L 6-BA的组合,诱导率为56.36%;番茄花药愈伤组织在MS+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/LKT培养基上可形成胚性愈伤组织;4℃低温预处理花蕾的适宜时间为2-5 d。     

普通油茶体胚再生体系研究

为构建农杆菌介导的油茶遗传转化受体系统,选择普通油茶‘长林'4号、53号和166号的幼胚为外植体材料,进行多因素多水平的组织培养试验。结果表明:培养基的pH对愈伤组织诱导率影响不显著,愈伤组织的诱导率受油茶品种影响极显著; ‘长林'53号的幼胚极易实现胚性愈伤组织诱导和完整植株再生,MS培养基是最佳培养基,2,4-D和TDZ为幼胚较敏感的植物激素,对愈伤组织诱导影响最大; 当MS+2 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L TDZ处理时,‘长林'53号体胚诱导率为98%; MS+1 mg/L 2,4-D+2 mg/L KT+500 mg/L CH处理时,‘长林'53号体胚诱导率为89.6%。在不同2,4-D、KT、TDZ和添加物水平的L₉(3⁴)正交试验中,除3个处理外,其他处理组合的‘长林'53号体胚诱导率都达到100%。已分化的胚性愈伤组织在不含任何激素的MS培养基上,可以实现胚状体的萌发、生长及完整植株再生。     

抗松材线虫病赤松胚性愈伤组织的诱导及增殖

以抗松材线虫病赤松未成熟合子胚为外植体,研究了合子胚发育阶段、激素种类及浓度以及碳源等对胚性愈伤组织诱导的影响。结果表明:发育至2~4阶段的合子胚为胚性愈伤组织诱导的适宜外植体,2,4-D和6-BA是最优激素组合,麦芽糖比蔗糖、葡萄糖更有利于胚性愈伤组织的诱导。抗松材线虫病赤松胚性愈伤组织诱导率总体较低,以DCR为基本培养基,添加2 mg/L 2,4-D和1 mg/L 6-BA时诱导率最高为5.0%,诱导的胚性愈伤组织在增殖培养基上能够稳定增殖。     

铁线莲'Multi-Blue'体细胞胚诱导和植株再生

以铁线莲品种'Multi-Blue'的茎尖为外植体,1/2MS为基本培养基,进行胚性愈伤组织和体细胞胚的诱导及植株再生条件的选择.结果表明:茎尖外植体在1/2MS+TDZ(1.0mg/L)+NAA(0.5mg/L)+2%蔗糖+0.7%琼脂的固体培养基中培养时可形成淡黄色块状至颗粒状愈伤组织,经继代培养后可逐渐形成胚性愈伤组织;体细胞胚诱导以1/2MS+TDZ(0.2mg/L)+IBA(0.1mg/L)+ABA(0.3mg/L)+CH(0.5g/L)为佳,诱导率可达96%;而适宜的体细胞胚萌发培养基为1/2MS+6-BA(0.2mg/L)+IBA(0.05mg/L).体胚再生植株经驯化后,移栽成活率可达80%以上.     

‘鲁枣2号’和‘鲁枣6号’花药愈伤组织诱导及不定芽分化

为建立枣高效花药培养体系,获得再生植株,以‘鲁枣2号’及‘鲁枣6号’花药为外植体,利用L9(34)正交设计筛选适宜枣愈伤组织诱导的培养基;并以MS和WPM培养基添加不同浓度的TDZ,2,4-D,IAA,GA3试验了花药愈伤组织的分化能力。结果表明,适宜‘鲁枣2号’和‘鲁枣6号’花药愈伤组织诱导的培养基为1/4 MS,NAA的质量浓度0.3 mg·L~(-1),2,4-D的质量浓度1.5 mg·L~(-1),麦芽糖的质量浓度30.0 g·L-1;诱导得到3种类型的愈伤组织,其中黄白色致密愈伤组织分化能力强。在分化培养基MS,TDZ的质量浓度0.1 mg·L~(-1),IAA的质量浓度0.1 mg·L~(-1),GA3的质量浓度1.0 mg·L~(-1)和培养基WPM,KT的质量浓度0.2mg·L~(-1),IAA的质量浓度0.5 mg·L~(-1),GA3的质量浓度1.0 mg·L~(-1)上均能分化得到正常不定芽,分化率分别达80.0%~100.0%(‘鲁枣2号’)和41.7%~50.0%(‘鲁枣6号’)。建立了‘鲁枣2号’及‘鲁枣6号’花药培养体系,获得再生植株。     

马蹄香组织培养研究初报

通过对马蹄香叶片的组织培养,研究了MS附加不同种类、浓度激素的培养基对马蹄香愈伤组织诱导和增殖的影响.结果表明,马蹄香愈伤组织诱导过程中,激素浓度的作用范围很窄,只有在附加BA5.0mg/L,2,4 D0.5mg/L的MS培养基上有愈伤组织的产生,愈伤组织诱导率为50%.高浓度的BA和ZT有利于马蹄香愈伤组织的继代增殖,并且少数上有芽点的分化.为马蹄香再生系统的建立和快速繁殖打下基础,对保护我国这一特有的珍稀濒危物种,保护生物的多样性有着重要的意义.     

外源激素对牡丹胚性愈伤组织诱导的影响

为了探讨外源激素的添加对牡丹胚性愈伤组织诱导过程中生理生化特性的影响.以牡丹品种‘凤丹白’叶柄诱导的愈伤组织为材料,研究不同浓度NAA和TDZ对胚性愈伤组织诱导过程中POD(过氧化物酶)、SOD(超氧化物歧化酶)、CAT(过氧化氢酶)和可溶性蛋白的影响.结果表明,抗氧化酶类活性和蛋白质含量与胚性细胞早期发育发生密切相关,在胚性愈伤组织形成时期,POD和CAT活性变化趋势基本一致,而SOD活性变化则相反;SOD活性经过短暂下降后回升,于第15天达到第二个峰值后稳步下降,表明SOD在胚性愈伤组织诱导初期起主导作用;POD与CAT活性出现峰值时间较SOD滞后,推测POD和CAT活性的升高能够促进胚性愈伤组织的形成和早期发育;可溶性蛋白含量于胚性细胞形成前一直保持较高水平,在第15天达到峰值后下降,说明其含量的升高有利于胚性细胞的形成和发育,其累积对形成胚性愈伤组织有促进作用.添加NAA 0.2 mg/L和TDZ 0.5 mg/L对牡丹胚性愈伤组织的诱导效果最好.     

高乌头愈伤组织诱导及增殖研究

以高乌头(Aconitum Smomontanum Nakai.)植株为材料,研究了不同外植体(芽、叶片、叶柄)、基本培养基、植物生长调节剂和培养条件对高乌头愈伤组织诱导和增殖的影响.结果表明:以MS或B5为基本培养基,附加不同组合的2,4-D、NAA、KT、BA,均可诱导产生愈伤组织,但不同外植体、不同生长调节剂组合对愈伤组织发生均有一定影响;作为外植体,高乌头的芽、叶柄和叶片都可顺利诱导出愈伤组织,生长素2,4-D对高乌头外植体的脱分化起促进作用,但 NAA却抑制愈伤组织的形成,细胞分裂素KT和 BA均能与2,4-D组合促进愈伤组织的诱导.在B5 2,4-D 2.0 mg·L-1 BA 1.0 mg·L-1培养基上,光照14 h·d-1, 温度(22±1)℃,最有利于高乌头愈伤组织的诱导.在此条件下,30 d后,芽的诱导率达95%,叶片的诱导率达70%,叶柄的诱导率达87.5%.愈伤组织最佳增殖条件为B5 2,4-D 2.0 mg·L-1 KT 0.5 mg·L-1,光照14 h·d-1,温度(22±1)℃.继代培养 14 d后 ,平均增殖率达197.5%.     

阔叶缬草叶愈伤组织诱导初步研究

本试验以阔叶缬草( Valeriana fauriei Briq. ) 为材料,就激素对叶外植体愈伤组织诱导和增殖的影响作了初步研究.结果表明, 培养基中添加 2, 4- D能诱导愈伤组织产生, BA 能促进愈伤组织增殖. MS+ 2, 4- D 5 mol•L^{- 1}+ BA 2. 5μmol•L^{- 1}为诱导叶块愈伤组织的最佳组合.