钩端螺旋体的保存方法

钩端螺旋体引起的钩体病是一种严重人兽共患传染病，在医学微生物学教学与科研中经常使用钩端螺旋体菌种，钩端螺旋体按常规方法保存一般每月传代１次，超过这时间易于死亡，频繁传代，费时费力，也增加钩端螺旋体菌种污染机会。目前在国内多数单位无特殊设备情况下，能否长期保存钩端螺旋体，具有重要意义。我们通过对３种途径保存方法进行比较，经过多年的实践，培养钩端螺旋体传代时间延长至９０ｄ，而安瓶封闭保存至少达到６年以上。１材料与方法 按以下顺序配置无血清的柯氏培养基，其成分为国产蛋白陈 ０．４ ｇ、ＮａＣ１ ０．７ ｇ…     

彭水县2001至2002年钩端螺旋体病血清流行病学监测分析

利用显微凝集试验调查重庆市彭水县2001--2002年495名健康人群血清钩端螺旋体抗体水平．结果显示：健康人群阳性抗体率平均达到61．27％，与性别、年龄、职业有相关性；检测人群中含12群钩体血清抗体，滴度一般在1：20～1；320之间处于较低水平；阳性血清中2001年以56604拜伦型居多占阳性血清的59．8％，而在2002年以56007澳洲型居多占阳性血清的69．9％．以上结果提示彭水县人群存在钩体的隐形感染，但免疫水平低下，且可能有菌群更迭现象存在．     

钩端螺旋体病赫氏反应52例临床分析

对青霉素治疗钩端螺旋体病发生赫氏反应(JHR)52例进行了临床分析。JHR发生率在首次剂量20—80万单位间无明显差异,100万—320万单位显著增高(P<0.01);发生的时间,在首次应用青霉素后0.5—2小时以内,1—1.5小时时为高峰;首次应用青霉素时,确诊钩体病者为81.2％。本组病例,均以早期给以氢化考的松处理,96％的病例氢考用量300mg后,99.3％的病例体温在24小时内降为正常,症缓解。无一例肺弥漫性出血(PDH)发生。应用激素预防JHR及PDH,应视条件而定;JHR早期应用激素可防止PDH发生;激素用量不宜过大;首剂青霉素用量以40—80万单位为宜。     

一种钩端螺旋体标本片染色的改良方法

为使学生在医学微生物学实验教学中观察到形态典型的钩端螺旋体。选择好的标本染色方法是十分重要的。以往实验室常用Fontana镀银染色法,用该法染色后菌体呈棕褐色,形态虽然典型,但镜下沉渣较多,往往达不到理想的教学效果。我室对Fontana镀银染色的染液配制和染色步骤进行改良,效果很好。1材料与方法1.1材料染液配制:①固定液配制:冰醋酸1m l,甲醛2m l,蒸馏水100m l;②媒染液配制:鞣酸5m l,苯酚lm l,蒸馏水100m l;③硝酸银液配制:硝酸银2g,蒸馏水100m l。用时待硝酸银溶解后,滴加10%氢氧化铵液,产生褐色沉淀,继续滴加至沉淀溶解,微现乳白色…     

致病钩端螺旋体特异消减片段的序列测定与分析

对24个已鉴定的赖型致病钩端螺旋体特异消减片段进行DNA序列测定和生物信息学分析.结果显示,片段两端皆含有AluⅠ酶切位点,片段大小为149～1506bp,平均480bp,GC含量平均为36 63%.其中6个序列无任何同源匹配序列,提示可能来自新基因;18个同源序列可分为两类:与外膜蛋白或假想蛋白相关,与生化代谢修饰相关的酶.在Genbank中登记其中20个序列,序列号分别为AF300873-AF300877,AF325807-AF325821.这些基于生物信息学的功能预测,将有助于在此基础上进行相关的基因克隆鉴定、表达分析及功能验证.     

肺出血型钩端螺旋体病的X线诊断34例报告

目的：提高对钩体病X线表现的认识。方法：回顾性分析总结34例确诊的肺出血型钩体病（其中普通肺出血型21例，弥漫肺出血型13例）的X线表现特点。结果：肺出血型钩体病的主要X线改变为两肺纹理增粗，肺纹理模糊，两肺多发点状，小片及大片状影，其分布特点是外带多，右肺多，右上肺多，即“三多”为其特征性X线征象。结论：根据上述X线表现特征，结合临床资料及实验室检查结果，可以早期确诊肺出血型钩体病。     

钩端螺旋体LAg42膜蛋白基因的克隆及原核表达

分别以问号状赖型钩体017株,56601株及双曲钩体PatocI株基因组为模板,PCR扩增目的基因lag42与质粒pET32a(＋)构建重组原核表达质粒,在大肠杆菌BL21中诱导表达.结果显示不同毒力赖型钩体均能扩增出约1100 bp的片段,而PatocI株则未能扩增出目的片段;不同赖型钩体的lag42基因的同源性很高.融合表达质粒pET-lag42转化大肠杆菌BL21后,经IPTG诱导,表达出约62kDa的重组融合蛋白,用Western blotting证实其有良好的抗原性,纯化蛋白免疫新西兰大白兔,获     

江西地区鼠源致病性钩端螺旋体菌的分离纯化与鉴定

目的对江西地区钩端螺旋体菌进行分离纯化与鉴定,为后期建立江西地区钩端螺旋体菌的发病模型提供菌源。方法通过捕捉钩端螺旋体疫源地的储存宿主——褐家鼠,无菌操作摘取肾脏,将肾脏接种到EMJH培养基中培养、纯化菌株。对纯化后的钩端螺旋体用钩体外膜脂蛋白LipL32基因引物进行PCR检测以鉴定菌株,并对分离菌对金黄地鼠的致病性进行了研究。结果分离纯化到一株钩端螺旋体菌,PCR扩增为阳性,经核苷酸序列测定分析证实上述序列与钩端螺旋体菌FDAARGOS 2 03基因序列（Gen Bank登录号:CP020414. 2）同源性为100%。分离菌对金黄地鼠具有一定的致病性。结论我们成功从江西地区储存宿主褐家鼠肾脏中分离到一株具有致病性的钩端螺旋体菌株。本次研究为以后分离纯化钩端螺旋体菌累积了宝贵的经验,通过收集江西省内流行的钩端螺旋体菌型,为钩端螺旋体菌的发病模型提供菌源,并以此为基础,研发出可靠的临床早期诊断产品,以期达到有效控制江西省地区钩端螺旋体病的目的,降低公共卫生隐患。     

Prediction and systematic study of protein-protein interaction networks of Leptospira interrogans

Leptospirosis, a serious and contagious zoonotic bacterial disease that havocs livers and kidneys in hu-mans and some animals, occurs in both urban and rural environments worldwide. It is caused by the genus lep- tospira, a corkscrew-shaped bacterium[1]. Though the genomes of Leptospira interrogans serovars Lai strain lai[2] and Leptospira interrogans serovars Copenhageni strain L1-130[3] were recently sequenced and many molecular and cellular studies on leptospires have been conducted, the …     

拟南芥基因倍增及基因流失分析

基因倍增指基因组中含有基因的DNA片段复制出一个或更多拷贝的过程，是进化出新物种的主要原因。采用新的数据和方法研究拟南芥基因组的基因倍增过程，通过分析串联基因倍增和大规模基因倍增的存在比例和同义置换率分布，并估计大规模倍增后基因流失的比例，揭示了拟南芥基因组一次非常明显的全基因组倍增，采用科学的方法估计这次倍增发生在约8000万年前。比较该结果与之前的研究，提出了一种解释拟南芥基因倍增过程更合理的模型。     

蛋白质分子进化过程中氨基酸替代数估计和距离测度的统计方法

氨基酸替代数的估计是测定蛋白质分子间进化距离的基本统计方法，是研究蛋白质分子进化的基础．估计氨基酸替代数和测定两个氨基酸序列间进化距离的统计方法分别是P距离、PC距离和Г距离的计算模型．同时，本文还对各个模型的特点作了比较．     

基因进化过程中核苷酸替代模型的比较分析

DNA序列中核苷酸替代数的估计是测定基因间进化距离的数学统计方法,是研究基因进化的基础.由于DNA分子包含多种序列区域等原因,核苷酸序列的替代模式比较复杂.最基本的核苷酸序列替代模型是p-距离模型J、ukes-Cantor模型、Kimura两参数模型.在此基础上衍生出其它一系列模型,如Tajima-Nei模型、Tamura模型、Tamura-Nei模型等.这些数学模型在拟合DNA序列进化的真实度时各有特点.这些模型中都假定各个位点的核苷酸替代速率一致,但实际情况并非完全如此,而是核苷酸的替代速率近似地遵循Г分布.     

Markov Model Applied to Gene Evolution

IntroductionWith the development of molecular biology,thetheory of evolution is being developed andchanged,especially at the molecular level.Theobjective of this research was to try to understandthe force behind sequence evolution and the rulesof evolution.The development of bioinformaticshas made itpossible to study the sequences directlyinstead of relying on complicated experiments.In the end of the1 96 0 s,Kimura and Ohta,and King and Jukes proposed the neutral theory ofmolecular evolutio…     

Duplication and divergent evolution of the CHS and CHS-like genes in the chalcone synthase （CHS） superfamily

CHALCONE SYNTHASE (CHS) IS A KEY ENZYME OF FLA- VONOID BIOSYNTHESIS. IT CATALYSES THE CONDENSATION OF THREE MOLECULES OF MALONYL-COA WITH ONE MOLECULE OF 4-COUMAROYL-COA TO FORM NARINGENIN CHALCONE, THE PRECURSOR FOR A LARGE NUMBER OF FLAVONOIDS WHICH ARE WIDELY DISTRIBUTED IN THE PLANT KINGDOM AND HAVE IM- PORTANT ROLES IN FLOWER PIGMENTATION, PROTECTION AGAINST UV LIGHT A…     

灵长类酪氨酸酶基因外显子1序列进化研究

酪氨酸酶是黑色素合成当中的关键酶,酪氨酸酶基因的突变将导致白化病,测定了黑猩猩,倭黑猩猩,大猩猩、猩猩、长臂猿、食蟹猴、猴猴９个灵长类中代表物种的酪氨酸酶基因外显子１的ＤＮＡ序列。     

细菌水平基因转移所面临的现实与挑战

水平基因转移对细菌遗传物质进化的影响是存在争议的.本文着重从水平基因转移的进化思想和水平基因转移在进化方面的重要性,特别是在原核细胞进化方面作一综述.首先,阐述水平基因转移在细菌物种进化中的进程;其次,阐述水平基因在不同的进化阶段的范围或广度,此外,讨论重建（或改造）旧的系统发育树关系在面临水平基因转移的可行性;最后,讨论水平基因转移是如何适应新的达尔文进化论学说的,而且需要一种新的进化论去诠释细菌物种的进化机制,水平基因转移就是其中一个很重要的原因.     

Cloning and sequence analysis of Sox genes in a tetraploid cyprinid fish,Tor douronensis

A PCR survey for Sox genes in a young tetraploid fish Tor douronensis (Teleostei:Cyprinidae) was per-formed to access the evolutionary fates of important functional genes after genome duplication caused by polyploidization event. Totally 13 Sox genes were obtained in Tor douronensis,which represent SoxB,SoxC and SoxE groups. Phylogenetic analysis of Sox genes in Tor douronensis provided evidence for fish-specific genome duplication,and suggested that Sox19 might be a teleost specific Sox gene member. Sequence analysis revealed most of the nucleotide substitutions between duplicated copies of Sox genes caused by tetraploidization event or their orthologues in other species are silent substitutions. It would appear that the sequences are under purifying selective pressure,strongly suggesting that they repre-sent functional genes and supporting selection against all null allele at either of two duplicated loci of Sox4a,Sox9a and Sox9b. Surprising variations of the intron length and similarities of two duplicated copies of Sox9a and Sox9b,suggest that Tor douronensis might be an allotetraploidy.