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相似文献
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1.
研究三株人癌细胞和两株对照细胞对细小病毒H-1杀伤作用敏感性的分子机制.表明了在感染复数moi(multipicityofinfection)为5pfu(plaqueformingunit)/细胞的情况下,作为H—1病毒复制受纳细胞的人肝癌细胞株OGY-7703和人胃癌细胞株SGC—7901,能够支持病毒DNA扩增和非结构蛋白NS—1基因的表达,这和作为阳性对照的由SV40转化的新生儿肾细胞株NB—K一样,但对H—1病毒感染有抗性的人肾癌细胞株OUR—10和它的对照人胎肾细胞株HuK—1,并不支持病毒DNA扩增和NS—1蛋白的表达.本文结果指出,细小病毒H—1的杀伤作用与细胞中的病毒DNA扩增及NS—1基因表达的程度相关.  相似文献   

2.
在scu-PA32K的cDNA分子基础上经定点突变,在N端紧接Leu^1以前引入编码GHRP四肽的寡核苷酸序列(GGTCATAGGCCT),构建了GHRP-scu-PA-32K的突变体cDNA。将它克隆到表达载体pCM-β-dhfr共转染CHO/DHFR^-细胞。筛选到的稳定表达株在无 清培养基的表达量为580IR/(10^6细胞.24h)。经锌离子螯合亲和柱纯化的产物,SDS-PAGE显示为一蛋  相似文献   

3.
一种新型的阿片受体ORL1(opioid-receptor-like1receptor)及最近发现的ORL1的内源性激动剂(nociceptin)在痛觉的调制机制中扮演着某种重要角色.通过Northern杂交技术在人的神经母细胞SK-N-SH中检测到ORL1受体mRNA的天然高量表达;cAMP放射免疫测定技术发现,在经nociceptin处理的SK-N-SH细胞中,由环甘酸环化酶激活剂(Forskolin)引起的细胞内cAMP水平的升高受到抑制,其IC50为60±15nmol/L,最大抑制率为70%.同时,用delta阿片受体DOR激动剂(DPDPE)、Mu阿片受体MOR激动剂(DAGO)分别处理SK-N-SH细胞,也产生了不同程度的抑制,但抑制率均不如nociceptin.发现阿片受体的广谱拮抗剂(naloxone),可使nociceptin及DPDPE的抑制作用反转;用DOR的特异性拮抗剂(naltrindole)只能使DPDPE的抑制反转,而不能影响nociceptin的抑制作用.用5μmol/L的nociceptin对SK-N-SH细胞进行20min(37℃)的预处理,可引起细胞对nocicepti  相似文献   

4.
带HSV—tk基因的重组腺病毒杀伤离体肺癌细胞的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
带有单纯疱疹病毒脱氧苷激酶基因的泉病毒结合ganciclovir(GCV)对分很强的杀伤作用。在感染复数(M。O。IMultiplicityof Infection)达到1000时对人体肺腺癌细胞A549的杀伤几乎达到100%。四种人体肺癌细胞株(A549,LAX,SPC,SKY)对带HSV-tk的泉病毒(ADV/RS-tk)的杀伤作用表现出不同的敏感性。但杀伤效果有很大差别;就A549而言,GC  相似文献   

5.
以北京鸭红细胞提取的HMGs(HMG_1,HMG_(2a),HMG_(2b),HMG_(14),HMG_(17))免疫Balb/c小鼠,取其脏压细胞与Sp2/0(小鼠骨髓瘤细胞)融合,经选择培养,阳性筛选,克隆化以及冻存复苏,获得了三株稳定分泌抗HMG_(14)的杂交瘤细胞株(1C_(12),1O_3和2F_2),经WesternBlot鉴定,与其它几种HMG无反应,抗体为IgG_1亚型。腹水HMG_(14)单克隆抗体经SephadaxCL-4B亲和柱得到了纯化。  相似文献   

6.
人生长激素诱导体外培养的大肠癌细胞株细胞周期动?…   总被引:2,自引:0,他引:2  
研究人生长激素(hGH)对大肠癌细胞增殖和分化的影响,收集人大肠癌细胞株Lovo和LS-174-T(简称174),以顺铂和/或不同浓度的hGH体外培养细胞,24h后以流式细胞仪测定细胞增殖周期等指标。结果显示hGH能诱导174细胞S期数率非常显著地增高(P〈0.01);Lovo细胞100ng/mL组G0-G1期参数下降(P〈0.05),S期参数增加(P〈0.01),200ng/mL组G2-M期百分  相似文献   

7.
一种新型的阿片受体ORL1及最近发现的ORL1的内源性激动剂在痛觉的调制机制中扮演着某种重要角色。通过Norythern杂交技术在人的神经母细胞SK-N-SH中检测到ORL1受体mRNA的天然高量表达;cAMP放射免疫测定技术发现,在经nociceptin处理的SK-N-SH细胞中,由环苷酸环化酶活剂剂引起的细胞内cAMP水平的升高到抑制,其IC50为6015nmol/L最大抑制率为70%。同时,  相似文献   

8.
OA能诱发人神经母细胞瘤SK细胞进行编程死亡.死亡细胞缩小变圆,细胞质凝聚,DNA有控降解成约200bp左右的片段,且这一过程可由蛋白质合成抑制剂亚胺环己酮(CHX)抑制.将编码Bc1-2全长蛋白质的cDNA植入pXJ41neo载体中,使其表达由HCMV病毒启动子控制.形成的顺义(pBcl-2-S)及反义(pBcl-2-AS)表达质粒经转染导入SK细胞中获得稳定转染子,West-ern印迹表明顺义转染子表达较大量的26kdBc1-2蛋白,而反义转染子则不表达.增强表达的Bc1-2基因产物对OA引SK细胞编程死亡无抑制效应.  相似文献   

9.
以北京鸭红细胞提取的HMGs免疫Balb/c小鼠,取其脏压细胞与Sp2/0(小鼠骨髓瘤细胞)融合,经选择培养,阳性筛选,克隆化以及冻存复苏,获得了三株稳定分泌抗HMG14的杂交瘤细胞株,经WwsternBlot鉴定,与其它几种HMG无反应,抗体为IgG1亚型。腹水HMG14单隆抗体经SephadxCL-4B亲和柱得到了纯化。  相似文献   

10.
啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)M—05变株合成光胱甘肽…   总被引:3,自引:1,他引:3  
从12种55株酵母菌株中筛选出1株相对富含谷胱甘肽(GSH)的菌株-啤酒酵母S-12,经紫外线及硫酸二乙酯等复合诱变处理,以甲 氨酸缺陷型(Met)为筛选模型,获得1株高产谷胱甘肽变株M-05,其干细胞每g含有GSH14.43mg,较了发菌株提高了68.4%。  相似文献   

11.
探讨大鼠谷胱甘肽S-转移酶P1基因上游增强子元件及作用于其上特异性结合蛋白与该基因在癌细胞中高表达的关系,用荧光素酶的报告系统在HeLa及CBRH7919细胞中增强子元件I(GPE I)及增强子元件Ⅱ(GPEⅡ)的活性,并将GPEⅡ的增强子活性部位定位于其上游84bp的GPEⅡ-1区域内。分析对比不同细胞中结合于GPEⅠ核心序列(cGPEⅠ)、GPEⅡ-1上特异性核合蛋白,发现HeLaCBRH79  相似文献   

12.
王向东  梁Xi廷 《河南科学》1996,14(2):111-117
Acerbi-Fusco利用Sobolev空间WP(G,E^N)中函数的逼定理得到了拟凸泛函I(u,G)=∫Gf(u)dx,U∈WP(G,E^N),P≥2,N〉1极小的部分正则性,Evans-Gariepy利用Radon测度的性质重新证明了Acerbi-Fusco定量,本文我们给出一个较为简捷的证明,既不用W(G,E^N)中的逼近定理,也不用Radon测度的任何性质。  相似文献   

13.
用 作为氢原子1S轨道的近似波函数,φ中的参数用最优化方法的变尺度法进行了优选,得(H)=-0.49991343a.u.,此结果(STO-2MG)优于STO-5G.这表明STO-NMG可能是比STO-NG更有效的基组而用于abinitio方法。  相似文献   

14.
肿瘤转移是引起恶性肿瘤患者死亡的主要因素[1]。对肿瘤抑制基因的研究在临床上具有重要意义。nm23基因是目前研究得较多和认为最有前途的肿瘤抑制基因,它已从小鼠黑色素瘤细胞系K-1735中克隆得到。有证据表明,来源于人的nm23-H1和nm23-H2基因的氨基酸序列分别与人红细胞NDPK的两个亚基A、B等同,且与果绳awd基因高度同源。本实验利用pET表达系统在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中高效表达了重组nm23-1(鼠源),SDS-PAGE扫描结果显示,表达量高达43.2%。并对其表达产物进行了分离纯化和活力测定,证实nm23-1蛋白确实具有NDPK的功能,从而为进一步探讨nm23基因家族在抑制癌细胞转移方面的功能打下了良好的基础。  相似文献   

15.
构建了含pgk启动子驱动的HSV-tk基因的反转录病毒载体pLNTK,将HSV-tk基因转移至人脑胶质瘤SHG44细胞(命名为SHGLNTK)及小鼠黑色素瘤细胞B16(命名为B16LNTK).体外实验证实核着类似物ACV对SHGLNTK细胞和B16LNTK细胞的杀伤敏感性分别高于亲本细胞1000和400倍.转HSV-tk基因细胞与亲本细胞按不同比例共培养时,亲本细胞对ACV的敏感性明显增高,存在旁观者效应.首次应用人脑胶质瘤细胞株进行裸鼠体内实验,结果表明:ACV能完全抑制SHGLNTK细胞在裸小鼠体内肿瘤的形成,对裸小鼠体内已形成的SHGLNTK肿瘤的治疗效果与对照SHG44肿瘤相比,肿瘤体积缩小80%;用B16LNTK细胞接种同系C57/BL小鼠,经ACV治疗后,B16LNTK组小鼠的肿瘤较对照组B16肿瘤小95%.HSV-TK/ACV系统原位基因转移治疗SHG荷瘤裸小鼠、B16荷瘤小鼠,原位注射病毒悬液/ACV治疗组的SHG肿瘤、B16肿瘤分别较对照组肿瘤小50%,43%,原位注射PA317/LNTK细胞,ACV治疗的SHG肿瘤较对照组肿瘤小90%,以上实验结果,统计学上差异极显著,P<0.01.实验  相似文献   

16.
EFFECTOFGeFRACTIONONAl/p-Si1-xGexSCHOTTKYBARRIERHEIGHTSJiangRuolianLiJianLiuJianlinShiYiZhengYoudou(DepartmentofphysicsandIn...  相似文献   

17.
抗人肝癌单克隆抗体JHⅢ的制备及其生物学特性   总被引:1,自引:0,他引:1  
用肝癌细胞株BEL-7402脾内直接免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,获得一株分泌肝癌单抗的杂交瘤细胞株JHⅢ,其染色体众数为90-110,单抗JHⅢ系IgG2b亚类。杂交瘤细胞培养上清和腹水的效价分别为1:10^2~10^3和1:10^6以上。ABC法证实它对肝癌组织有较好的相关性。IFA法也证明它对肝癌细胞BEL-7402有强的阳性反应,而对其他肿瘤细胞株和肿瘤组  相似文献   

18.
采用放射免疫测定法对不同病期荷人鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)裸鼠(nudcmice,NM)血清β_2微球蛋白(serumbeta-2-microglobulin,Sβ_2-MG)含量进行检测。结果表明潜伏、早、中和晚期荷瘤鼠Sβ_2-MG含量分别为0.32,0.29,0.75和1.79μg/ml,均明显高于正常NM(0.09μg/ml)(P<0.01或P<0.05),同时发现荷瘤鼠Sβ2-MG含量在潜伏期就明显升高,早期后随病情发展不断升高,晚期达高峰,相当于正常NM的2O倍左右。本实验提示荷瘤鼠Sβ_2-MG含量升高与NPC的病情呈明显的相关性,Sβ2-MG的测定可作为NPC早期诊断及估价病情的血清学指标之一。  相似文献   

19.
报道了对称的八齿(N6O2型)双核配体N,N,N′,N′-四(2′-苯并咪唑甲基)-1,4-二乙氨基乙二醚(EGTB)及两种含锰(Ⅱ)双核配合物:(Mn2EGTB(OAc)2)(BPh2).3H2O(I),(Mn2EGTB(OAc)Cl)Cl2.2CH3OH.H2O(Ⅱ),对(I),(Ⅱ)进行了^1HNMR,UV-Vis,摩尔电导,中远红外,EST和循环伏安研究,初步推测配合物(I)和(Ⅱ)分别具  相似文献   

20.
本文将论文(1)中所采用的估算金属溶剂萃取体系中三组分有机相活度系数的热力学方法成功地推广应用于四组分有机相。实验及计算结果表明,Sctachard-Hildebrand模型和Guggenheim似晶格模型(不考虑熵修正)两者均可用于(C_7H_15)_2SO—C_6H_4(CH_3)_2-UO_2(NO_3)_2·2(C_7H_15)_2SO—H_2O萃取体系中有机相活度系数的计算。  相似文献   

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