传染性法氏囊病病毒分子生物学研究的一些进展

对IBDV近年来的分子生物学方面的研究进展进行概况，主要包括IBDv的基因组结构及理化特性、病毒蛋白、不同型IBDV变异的分子基础和分子生物学诊断技术等，以探讨利用病毒重要基因核酸序列的差异进行IBDV分子流行病学研究及病毒各致病型快速鉴别诊断的可能性．     

国内鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定

对国内五个省患呼吸系统和肾脏系统疾病的肉鸡和蛋鸡19份样品进行了IBV分离和鉴定,结果表明RNZ与M41同型.HV、NB-90、TJ株与美国G株和澳大利亚T株血清型相同,证明国内存在不同的IBV血清型株.     

免疫酶技术检测鸡传染性支气管炎病毒的研究

以抗鸡肾型传染性支气管炎病毒（肾型ＩＢＶ）Ｔ株的鼠源免血清为一抗，辣根过氧化酶（ＨＲＰ）标记的羊抗鼠ＩｇＧ为二抗，建立了检测石蜡切片中肾型ＩＢＶ抗原的免疫酶组化技术，经过特异性试验和阻断性试验，表明该方法具有高度的敏感性和特异性，应用该法对人工感染肾型ＩＢＶＲＳ株的鸡气管和肾脏石蜡切片中的病毒抗原进行了检测，结果气管从感染后０．５～１１ｄ，肾脏从感染后１～２０ｄ均检测到病毒抗原，阳性染色体主要集中     

应用二温式多重PCR技术鉴别鸡传染性支气管炎病毒和鸡传染性喉气管炎病毒

为了简化聚链反应（PCR）程序和加快检测速度,将二温式PCR与多重PCR结合起来,建立一种同是检测鸡传染性支气管炎病毒（IBV）和鸡传染性喉气炎病毒（ILTV）的二温式重PCR技术,试验根据IBV和ILTV的基因文库,设计2对分别与IBV和ILTV某段基因序列互补的引物。用这2对引物同一样品中的IBV、ILTV核酸模板进行二温式多重PCR扩增,结果均同时得到2条特异性大小与实验设计相符的1720bp(IBV)和647bp(ILTV）的扩增带,而对其他6种禽病病原的扩增结果均为阴性,敏感性测定结果表明明,该二温式多重PCR技术检出10pg的IBV RNA模板和10pg的ILTV DNA模板。     

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H52疫苗株S1基因的克隆与序列测定

根据国外已发表的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因序列。设计了一对引物并以RT-PCR特异性扩增出IBV H52疫苗株的S1基因，基因产物大小为1．62kb，与设计相符，对其进行序列测定后，与其他标准毒株H120，M4l，BEAU株的S1基因进行同源性比较，结果表明，H52株与H120，M41和BEAU株的核苷酸序列的同源性分别为91．1％，96．9％和96．8％，由此可以看出，IBVH52疫苗株与标准毒株在Sl基因上具有高度的同源性。     

筋骨草对鸡传染性支气管炎病毒的体外抑制作用

通过建立气管环培养模型,以标准IBV-M病毒株感染气管环,以气管环的纤毛运动为评定指标,研究筋骨草对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的体外抑制作用,结果表明当浓度在750-1500mg/mL范围内,筋骨草对体外IBV具有一定的抑制作用.     

表达鸡传染性支气管炎病毒SD/97/01株S1蛋白的重组杆状病毒的构建

采用BAC－TO－BAC杆状病毒表达载体体系构建了表达鸡传染性支管炎病毒（IBV）呼吸型毒株SD／97／01S1蛋白的重组杆病病毒，含SD／97／01株S1基因原重组质粒p MDSD9701S1用BamHI和SalI双酶切后，回收的片段并克琶杆病病毒转座载体pFASTBACHTa中多角体基因启动子的下游，筛选出重组转座质粒pFASTSD9701S1U并转化大肠杆菌DH10BAC后,获得重组穿梭质粒rBacmidSD9701S1，用重组穿俊质粒DNA转染昆虫Sf9细胞，获得了含SD／97／01S1基因的重组杆状病毒rAcSD9701S1，重组病毒感染Sf9细胞后，用SDS－PAGE、Westernblot和IFA对细胞表达产物进行检测和分析。结果表明：构建的重组杆状病毒能够在昆虫细胞中表达SD／97／01的S1蛋白，该蛋白具有天然蛋白的抗原性。     

论鸡传染性法氏囊病病毒细胞苗的制造和应用

目前使用的多种疫苗仍未能有效控制鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）的发生，原因是疫苗质量难以保证和免疫程序或方法不发。解决的办法：病毒培养宜选用无特定病原（ＳＰＦ）鸡胚或非免疫健康鸡群的鸡胚，消化时间控制在１５ｍｉｎ左右，细胞数在１００－１５０万／ｍＬ，接毒量为０．１％－０．２％，小牛血清使用浓度为３－５％；疫苗冻干过程应在不断搅拌病毒培养液的同时控制加入保护剂的速度。免疫程序：无母源抗体或母源抗体不清雏     

传染性支气管炎病毒血凝抗原的制备

目的利用磷脂酶C处理，制备传染性支气管炎病毒（IBV）血凝抗原。方法将IBV接种9日龄SPF鸡胚，48h后收获尿囊液，经过高速离心浓缩，利用胰酶、产气荚膜梭状芽孢杆菌培养液（含磷脂酶C）处理后，进行常规血凝和血凝抑制试验。结果经过胰酶处理的IBV具有非常强的非特异性。而经过磷脂酶C处理的IBV，该凝集作用可被特异的IBV抗血清所抑制，而不能被ILTV、NDV、Adeno-1和Adeno-3，APIV、AIV、IBDV、HP、MS和MG等抗血清所抑制。结论磷脂酶C处理的IBV，可以用于血凝抑制试验。     

猪瘟病毒分子生物学诊断的研究进展

猪瘟是由猪瘟病毒引起的猪的急性、热性、高度接触性传染病，严重危害我国养猪业。尽管中国很早就研制成功了猪瘟兔化弱毒疫苗。但近年来猪瘟的流行和发病特点发生了很大的变化，很多地区和猪场不断出现非典型猪瘟、温和型猪瘟，给该病的诊断带来了困难。近年来，猪瘟病毒分子生物学诊断方法的研究进展迅速，为猪瘟的快速、准确诊断起到了重要的作用。从聚合酶链式反应技术、核酸探针技术、DNA芯片技术等方面对猪瘟病毒的分子生物学诊断方法进行了综述。     

鸡传染性支气管炎病毒抗体胶体金免疫层析试纸条的研制

[目的]建立一种快速、灵敏的胶体金免疫层析法(Colloidal-gold immunochromatography assay),用以检测禽类早期感染鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)和监测IBV疫苗接种免疫水平.[方法]将重组IBV核衣壳(Nucleocapsid,N)蛋白包被在在试纸条检测线,羊抗兔IgG包被在试纸条控制线,用胶体金-兔抗鸡IgG偶联物作为示踪剂,检测血清中IBV抗体.[结果]制备所得的胶体金免疫层析试纸条与IBV抗体阳性血清反应呈阳性,与鸡新城疫病毒抗体阳性血清、鸡传染性法氏囊病毒抗体阳性血清、鸡毒霉形体抗体阳性血清和SPF标准鸡血清未发生交叉反应;当IBV抗体阳性血清以1:35比例稀释后,依然可以用该试纸条检出;该试纸条在60 d的保存期内重复性良好;以从不同养殖场采集到的鸡血清样本作为测试对象,比较该试纸条和进口 ELISA试剂盒的检测结果,两者符合率为97.44％.[结论]成功制备了检测耗时短、检测限低、特异性强、稳定性好的IBV抗体检测胶体金免疫层析试纸条,为鸡传染性支气管炎的早期诊断以及免疫监测提供了简便高效的技术方法.     

新城疫病毒分子生物学研究进展

新城疫是由新城疫病毒引起的极易传染的毁灭性疾病.由于该病发病急、致死率高,对养禽业的发展构成了严重威胁,所以被世界动物卫生组织（OIE）定为A类烈性传染病.本文概述了新城疫病毒的基因结构与功能及基因分型等问题.     

鸡传染性支气管炎HA抗原的制备及HI试验方法的建立

用１０％Ａ型魏氏梭菌滤液处理１００倍浓缩ＩＢＶ Ｍ４１株病毒液,成功地制备了ＩＢＶ ＨＡ抗原,效价为１：６４￣１：１０２４。用该抗原建立了ＩＢＶ ＨＩ试验方法。抗原在４℃保存,５个月效价不变;加入０．１％的甲醛及１／万的硫柳汞使抗原效价下降１￣２个滴度。对ＳＰＦ鸡血清、Ｍ４１阳性血清、其它鸡病标准阳性血清以及疫苗免疫试验鸡只血清的ＩＢＶ ＨＩ抗体监测结果证明,该方法操作简便、快速、敏感性高、特异性     

香蕉束顶病毒的分子生物学

香蕉束顶病毒为直径１８－２０ｎｍ的球形粒子,其,基因组至少含有六个约１．０ｋｂ的单链环状ＤＮＡ分子。     

禽流感病毒概述

禽流感(Avian Ifluenza，AI)是由禽流感病毒(Avian Influenza Virus，AIV)引起的一种烈性传染病，也是严重危害畜牧业和人类健康的一种传染性疾病．从禽流感病毒的分类、形态结构、核酸特点、抵抗力、毒力及其变异等角度对其进行综述，以便为防治禽流感提供一定的参考．