米糠蛋白活性肽的制备工艺研究

初步研究酶法水解米糠蛋白制备米糠活性肽的工艺条件,同时探讨了不同料液比、pH值、温度和提取时间对蛋白水解率的影响.通过正交优化实验得出酶水解米糠蛋白的最佳条件是:酶解温度37℃,加酶量为0.5%,酶解时间是3h,酶解pH值为9.结果表明碱性蛋白酶酶解法和三氯乙酸酸溶法相结合,是一种很理想又有效的制备蛋白肽的方法.     

文蛤蛋白水解制备抗氧化活性肽的研究

以文蛤蛋白为原料,通过蛋白酶水解制备抗氧化活性肽.利用体外清除DPPH活性评价酶解产物的抗氧化活性,采用超滤、葡聚糖凝胶柱层析和HPLC对相应的活性肽进行分离纯化,通过HPLC-MS进行结构鉴定.结果表明:木瓜蛋白酶水解产物的DPPH清除活性明显高于碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和复合蛋白酶,产物质量浓度为1 mg·mL-1时,DPPH清除率为55.74%;以DPPH清除率为筛选指标,对木瓜蛋白酶酶解产物进行逐级分离,得到4个具有抗氧化活性的目的肽段,氨基酸序列分别为LNFNLEKSR(1120.3 u)、SWLRPR(814.4 u)、RIGNIISQY(1063.3 u)和LNFNLEK(877.2 u).     

文冠果降血压肽的制备及其活性研究

以文冠果蛋白为研究对象,采用酶解法制备文冠果蛋白酶解肽,并对其体外抗高血压活性进行研究。以水解度为指标确定酶解条件。蛋白水解物经超滤得到分子量为1k Da,1~5 k Da和5 k Da 3个区段的多肽组分,测定其对血管紧张素转化酶(Angiotensin Converting Enzyme,ACE)的抑制率。最佳酶解条件为:底物质量浓度40g/L,加酶量8%(质量分数)(碱性蛋白酶),酶解时间175 min,酶解温度55℃和酶解p H 9.0,此条件下水解度最高为22.97%;3种多肽组分中1k Da的ACE抑制率最高为83.43%,其半抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50)为0.394 mg/m L。文冠果蛋白酶解多肽具有显著的体外抗ACE活性,可作为降血压肽的开发原料。     

响应面法优化金枪鱼蛋白抗痛风活性肽制备工艺

为制备具有抗痛风活性的金枪鱼蛋白肽,本研究以金枪鱼为研究对象,以蛋白回收率及XOD抑制率为指标,通过单因素实验选择中性蛋白酶和胰蛋白酶为复合酶,经响应面优化得到复合酶最佳酶解条件为:复合酶解温度45.5℃,加酶量935 U·g-1,复合酶解时间6.5 h;对于蛋白回收率,三因素影响顺序为:加酶量复合酶解温度复合酶解时间;对于XOD抑制率,三因素影响顺序为:复合酶解温度复合酶解时间加酶量。此条件下进行酶解,测得蛋白回收率为83.46%,与预测值偏差1.2%,比单一蛋白酶解提高36.1%;XOD抑制率为43.51%,与预测值偏差0.8%,比单一蛋白酶解提高54.4%,表明复合酶解后效果提高显著。此时酶解液主要含小分子肽,(1～3)KDa肽段含量为42.57%,1 KDa肽段含量为35.98%,大分子肽含量相比于未酶解时降低了90.7%。研究结果表明该复合酶法制取的金枪鱼抗痛风活性肽具有高蛋白回收率及良好的XOD抑制率,该技术对金枪鱼抗痛风活性肽的进一步深入研究和应用具有一定的理论指导意义。     

酶水解麦糟蛋白制备可溶性肽工艺研究

对碱性蛋白酶水解麦糟蛋白制备多肽的工艺条件进行了研究。通过单因素实验和正交实验,确定了较佳工艺条件：酶解pH10,加酶量3500u/g,酶解温度50℃,酶解时间20min。在此条件下,麦糟蛋白的水解度（DH）达22.18%,氮溶指数（NSI）达23.68%。     

大米低聚肽的制备和结构表征及体外抗氧化作用

以大米蛋白粉为原料,通过二步酶解法制备大米低聚肽,在对其基础理化成分分析的基础上,利用氨基酸组成、相对分子质量分布、扫描电镜、紫外光谱和圆二色光谱分析进行结构表征,采用羟基自由基清除能力、铁离子还原能力（FRAP）、氧自由基吸收能力（ORAC）和还原能力4种体外抗氧化评价体系考察其体外抗氧化作用。结果表明：大米低聚肽中蛋白质和肽含量分别为95.75%±0.53%和89.11%±0.94%;大米低聚肽富含亮氨酸、丙氨酸、缬氨酸等抗氧化性氨基酸,相对分子质量在1000以下的组分占91.84%;大米低聚肽为明显的球体颗粒状,表面有不规则褶皱和气孔,在270nm波长处有最大吸收峰;二级结构以多种构象并存,α-螺旋、平行式β-折叠、反平行式β-折叠、β-转角和无规则卷曲含量分别为6.0%±0.3%、3.3%±0.2%、40.2%±1.9%、19.5%±1.0%和32.1%±2.5%;大米低聚肽对羟基自由基的半抑制浓度（IC50值）约为11.1g/L,ORAC值为（498.88±18.29）μmol/g（以Trolox为标准品计）,质量浓度为15.0g/L时的FRAP值与0.04g/L的阳性对照Vc相当,质量浓度为15.0g/L时的还原能力与0.05g/L的Vc相当。     

酶解制备牦牛乳酪蛋白降血压肽的初步研究

目的:牦牛乳富含酪蛋白,其经酶解制备的降血压肽以安全性高、无副作用等优点已成为乳品开发和高血压防治药物研究的新热点.方法:本实验对从牦牛乳中提取的酪蛋白,依据复合蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶及胰蛋白酶各自的最适pH及温度采用酶解方法制备降血压肽,并且以ACE抑制活性为指标初步筛选最佳水解酶.结果:五种酶ACE抑制肽抑制率分别为:复合蛋白酶为39.02%,中性蛋白酶为67.48%,碱性蛋白酶为56.10%,木瓜蛋白酶为71.54%,胰蛋白酶为8.94%.结论:说明,在最适pH及温度条件下,木瓜蛋白酶和中性蛋白酶为制备降血压肽的最佳酶选,这为后续进一步的制备降血压肽实验提供依据.     

水产胶原蛋白肽功能活性及其制备工艺研究进展

概述了水产胶原蛋白及其肽的特点和制备技术,并阐述了水产胶原蛋白肽的多种功能特性,包括抑制血管紧张素转化酶、抗氧化、免疫调节、抑制酪氨酸酶及其它活性,揭示了其在食品、化妆品及医药制备等领域的广阔应用前景.     

鲍鱼性腺小肽的制备及抗氧化活性的初步研究

以雄性皱纹盘鲍性腺为原料,建立了蛋白酶酶解制备抗氧化活性蛋白肽的工艺条件.分别对木瓜蛋白酶和中性蛋白酶进行单因素研究,并以二者的复合酶为工具酶进行响应面分析.结果显示,雄性鲍鱼性腺的最优酶解条件为木瓜蛋白酶与中性蛋白酶的比例为1∶4、pH=6.6、酶解温度为53.7℃、酶解时间为70.4 min.高效液相色谱(HPLC)分析结果表明,酶解液中多肽的分子质量主要分布在1 ku以下.制备的酶解液具有较强的清除自由基效果,清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)的EC50值为6.8 mg/mL,还原力的AC0.5值为12.87 mg/mL.     

酶解法制备鱿鱼蛋白抗氧化肽工艺优化

以酶解液的还原力为抗氧化性指标,测定木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶7种蛋白酶的鱿鱼蛋白酶解液抗氧化性.实验结果表明7种蛋白酶在相同加入酶量(酶活力U/底物g)条件下,中性蛋白酶在酶解1 h、3 h、5 h所得的酶解液还原力均最高.以中性蛋白酶为实验用酶,进行三因素二次正交旋转组合实验优化出酶解法制备鱿鱼蛋白抗氧化肽的最佳酶解条件为酶加入量4 841 U/g、pH 5.3、酶解时间1.3 h.所得酶解液定性检测结果为具有抗氧化性的肽类混合物,有进一步开发应用价值.     

快速发酵法大米面包的制备研究

以大米粉和小麦粉为主要原料,采用快速发酵法,并辅以谷朊粉制作大米面包.研究确定了谷朊粉的添加对快速发酵法大米面包成品品质的影响规律,通过单因素和正交实验方法探讨了各因素对大米面包感官评分及比容的影响,并确定了大米面包制作的最佳配方及工艺参数为,谷朊粉10%,米面粉比例5∶5,CMC4%,绵白糖12%,酵母1. 5%,醒发时间2 h.以此方法制作的面包硬度较小,回复性较大,弹性、咀嚼性和内聚性略高,横截面气孔较大,内部组织疏松.     

酶解牦牛乳清蛋白制备ACE抑制肽的工艺研究

目的:乳清蛋白是牦牛乳中的重要成分,其经酶解制备的乳源性ACE抑制肽以安全性高和无副作用等优点在高血压的防治中具有重要的研究和应用价值.本实验研究利用乳清蛋白制备ACE抑制肽的工艺技术.方法:本实验对从耗牛乳中提取的乳清蛋白,分别根据碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶及胃蛋白酶各自的最适pH及温度,采用酶解法制备ACE抑制肽,以ACE抑制活性为指标初步筛选出最佳水解酶,并探究最佳酶水解乳清蛋白制备ACE抑制肽的最佳反应条件.结果:碱性蛋白酶为制备ACE抑制肽的最佳水解酶,英最佳反应条件为:pH8.5、温度60℃、E/S为5.5％、水解6h.制备的ACE抑制肽抑制率可达到85.2％.结论:碱性蛋白酶为最佳酶选,用碱性蛋白酶制备的ACE抑制肽体外抑制率较高,符合工业生产要求.这为进一步优化乳清蛋白降血压肽的制备工艺提供依据.     

海洋生物胶原肽的制备及其皮肤保护活性研究进展

海洋生物胶原肽具有分子质量小、易吸收、生物利用率高以及功能活性良好等特点,已广泛应用于功能食品、生物医药和化妆品等领域.从抗氧化、美白、抗老化、抗炎以及促进伤口愈合能力和组织修复等方面阐述了海洋生物胶原肽的皮肤保护功效,并对其在生物体内的吸收代谢规律及安全性特征进行了介绍,以期为海洋胶原肽在海洋功能化妆品的开发和应用提供理论支撑.     

蚕蛹抗氧化肽的制备及其体外抗氧化活性评价

为更客观地评价蚕蛹抗氧化肽的抗氧化能力, 以人工胃肠模拟液对不同蛋白酶酶解物的抗氧化能力进行评价, 优选获得最佳的制备用酶——碱性蛋白酶. 在此基础上,以蚕蛹抗氧化肽总还原能力为指标, 利用响应曲面法(response surface method, RSM)优化碱性蛋白酶制备蚕蛹抗氧化肽的最佳酶解工艺. 结果表明: 碱性蛋白酶的最佳酶解条件为pH=8.30, 加酶量为15.34 μL(1 902 U), 温度为50.47 ℃, 时间为2.45 h; 在此条件下优化预测得到的2 mg 蚕蛹蛋白/mL 酶解液的总还原能力为0.434, 蚕蛹抗氧化肽对·OH 和DPPH· 自由基的半数清除率IC50 分别为4.51 与4.24 mg/mL.     

酶切牛乳酪蛋白制备生物活性肽获成功

在先天性免疫研究中,科学家逐渐发现动物都有一种快速的反应机制,即在病原体入侵或机体损伤后的几分钟内身体即可以做出反应,产生抗菌肽(或抗病毒,抗肿瘤肽)和促进免疫的生物活性肽。到目前为止共有800种以上抗菌肽(有的同时具有抗病毒、抗肿瘤等多种功能)从动、植物或昆虫、微     

枯草芽孢杆菌KJ发酵豆粕制备新型蛋白肽饲料的研究

以脱脂豆粕粉为原料,具有分泌丰富酶系能力的菌株枯草芽孢杆菌KJ为发酵菌株,通过单因素试验,确定最优发酵降解条件.得出最佳发酵工艺:豆粕粉6％,葡萄糖2％,接种量9％,菌龄12 h,经发酵48 h后,豆粕粉蛋白中小分子肽含量达58.86％,比发酵前提高了37.99％.     

重组人组织激肽释放酶结合蛋白抗氧化活性及抗凝活性分析

探究Kallistatin蛋白在体外3种细胞模型中的抗氧化活性及其体外抗凝、溶栓活性.首先,在体外构建HBZY-1,HaCaT,HTR8-s/Vneo细胞的H2O2,Fe-HQ氧化应激模型,并将Kallistatin蛋白应用于构建的氧化应激模型中.然后,采用多浓度梯度法筛选最佳氧化剂浓度,利用细胞活性实验检测以上3种细胞的活性,并进行体外抗凝、溶栓实验考察.结果表明:在H2O2模型中,当Kallistatin蛋白浓度为0.6μmol·L-1时,3种细胞活力与对照组(LD-Hanks缓冲液)相近,低剂量蛋白组(0.06μmol·L-1)的细胞活力明显低于高剂量蛋白组细胞;在Fe-HQ模型中,不同细胞中Kallistatin蛋白剂量的作用不同,Kallistatin蛋白具有体外抗氧化活性,不同应激条件下不同细胞对蛋白剂量的依赖性不同;体外抗凝、溶栓实验表明此蛋白具有相关活性.     

碱性蛋白酶水解螺旋藻制备抗氧化活性肽的工艺优化

为了提高螺旋藻肽的抗氧化能力与收率,采用单因素实验和响应面法对碱性蛋白酶水解螺旋藻粉制备抗氧化活性肽的工艺条件进行优化。实验结果表明,与木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶相比,碱性蛋白酶对螺旋藻粉的水解能力最强,其最适水解条件为55.46℃、pH值为 6.71、固(g)液(mL)比为1∶10.83。在此条件下,酶解240min,螺旋藻肽的收率为58.50%,与优化前相比,提高了15.61%。所制备的螺旋藻肽具有较强的抗氧化能力,在质量浓度为0.86g/L时,其DPPH·清除能力为77.60%,与优化前相比,提高了7.62%。     

紫菜降血压肽制备技术研究

江苏大学开发的“紫菜降血压肽制备技术研究”日前通过省科技厅组织的鉴定．该成果建立了超声渡与酶水解耦合技术制备条斑紫菜降血压肽的方法，进行了条斑紫菜降血压肽的纯化与结构鉴定，从条斑紫菜酶解液中获得了Cys—Ser—Asn—Arg和Pro—Cys—His—Trp两条新的高活性降血压肽。其抑制ACE活性的IC50值分别为24．71和5．38μg／ml，具有良好的耐高温性和酸稳定性．条斑紫菜降血压肽对原发性高血压大鼠具有降血压作用，呈量效关系．该研究成果将与南通、连云港等我省重要的紫菜产地企业、我省乃至全国的功能食品、医药等高新技术企业密切联系、合作。加速产业化进程．     

超声波辅助酶解制备东海海参胶原蛋白低聚肽及其活性的研究

以东海海参胶原蛋白为原料,采用超声波辅助酶解制备低聚肽(分子量小于1 kDa),并对其抗氧化性进行了研究。研究结果表明,超声波辅助对胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解东海海参胶原蛋白均有显著促进效果,低聚肽含量和收率均有大幅提高。当超声波功率为100 W时,中性蛋白酶酶解的低聚肽含量最高,达70.5%。采用单因素试验,对超声波辅助下中性蛋白酶酶解工艺进行优化,确定最佳酶解工艺为:超声波功率100 W,酶解温度60℃,酶解pH 7.0,酶添加量5%(w/w),酶解时间20 min。在最佳工艺条件下,低聚肽含量和收率最大达75.4%和52.9%。抗氧化试验表明,该低聚肽对DPPH和ABTS清除的效果均随低聚肽浓度的增加而增强。该低聚肽对ABTS的清除快速高效,对DPPH的清除则随着处理时间的延长而缓慢增加。当低聚肽浓度为8 mg/mL,处理时间为30 min时,DPPH和ABTS的清除率分别为19.0%和87.2%。