阿奇霉素抗弓形虫速殖子作用的体外实验和超微研究

为了解阿奇霉素在体外杀灭弓形虫速殖子的效果及其机制 ,故将阿奇霉素 (0 .5～ 1.5mg/mL)加入小鼠腹水中 (含虫 1× 10 5个 /mL) ,用光镜和透射电镜观察 .并将药物作用 4h的速殖子接种于小鼠以观察虫体是否复苏 .结果发现经 1.5mg/mL阿奇霉素作用 30min ,即可见速殖子的棒状体后段中央部分被溶解 ,速殖子细胞膜相结构和子虫细胞膜断裂 .经 1.5mg/mL阿奇霉素作用 4h的虫体在小鼠体内未能复苏 .可见阿奇霉素在体外对弓形虫速殖子具有杀灭作用 ,可以抑制速殖子的侵袭力和繁殖 .该药的杀虫力与药物的浓度和作用时间呈正相关趋势 .     

弓形虫pcDNA3-ROP1 DNA疫苗免疫小鼠诱导体液免疫应答及保护性的初步观察

目的 观察弓形虫pcDNA3-ROP1 DNA疫苗免疫BALB/C小鼠诱导其体内产生的体液免疫应答及抗虫感染的免疫保护作用.方法 重组质粒用生理盐水稀释后,肌注免疫BALB/C小鼠.分别于免疫后5周和10周用ELISA法测定IgG抗体滴度;免疫鼠腹腔注射弓形虫速殖子攻击感染.结果 经两次检测,均可测到特异性IgG抗体,且抗体的滴度随免疫时间的延长而增高;弓形虫速殖子腹腔攻击感染免疫组小鼠的平均存活时间较对照组延长,统计学有显著性差异(P<0.01).结论 弓形虫pcDNA3-ROP1质粒 DNA疫苗能诱导BALB/C小鼠产生特异性体液免疫应答及部分抗虫免疫保护作用.     

弓形虫SAG1,ROP1基因及其复合抗原基因的核酸免疫研究

目的 检测混合SAG1和ROP1编码基因真核表达质粒疫苗诱导小鼠的免疫应答,评价其抗弓形虫感染的保护性免疫效果.方法 将SAG1和编码基因片段克隆入pEGFP-N3表达载体,构建重组质粒;RT-PCR体外验证重组质粒在NH3T3细胞中的表达;通过检测抗体、抗体分型及细胞因子来评价体液免疫和细胞免疫;腹腔内注射毒性株弓形虫速殖子攻击免疫小鼠.结果 RT-PCR结果显示重组质粒能在哺乳动物细胞内表达;SAG1和ROP1混合重组质粒疫苗诱导小鼠产生很强的体液免疫和细胞免疫,对于毒性株弓形虫感染攻击具有保护作用.结论 不同候选抗原编码基因重组质粒能够诱导小鼠产生抗弓形虫感染保护性免疫,提示含有多种成分的混合DNA疫苗的研制可作为核酸免疫研究的策略之一.     

RH株弓形虫抗原及高效价多克隆抗体的制备

通过制备和分析弓形虫抗原蛋白，并以此抗原制备高效价的兔抗弓形虫多克隆抗体，为弓形虫的免疫检测和诊断提供有效的方法和途径，同时也为基因工程产物的鉴定提供方便有效的检测手段．速殖子主要来源于感染后72～74h获得的腹水，通过常规方法制备和提纯弓形虫可溶性抗原，采用SDS-AGE方法分析抗原蛋白的分子量．以抗原和福氏佐剂制备成完全和不完全福氏佐剂通过脊柱两旁皮下多点免疫的途径免疫新西兰大白兔，制备兔抗弓形体多克隆抗体，间接ELISA法检测血清中抗体的效价．经过观察所获得的虫体阶段主要处在宿主细胞巨噬细胞内而尚未逸出阶段，通过对结果的分析，所制备的弓形体抗原的分子量主要集中在17～156ku之间，与文献报道有差异，兔抗弓形体抗体效价在60000以上．该研究结果将为弓形体的蛋白质研究，免疫诊断、预防及有效治疗奠定基础．     

弓形虫RH株感染比格犬动物模型的建立

目的 建立实验用犬人工感染人源强毒力型弓形虫的发病模型。方法 将3只76日龄人工哺乳、正压隔离器内生长的实验用比格犬腹腔注射1.5×10⁷个RH株速殖子,每日2次检测直肠体温、采集口腔拭子、直肠拭子,感染8 d后(8 dpi)安乐死所有动物。利用PCR检测拭子和血液中的弓形虫B1基因,利用荧光定量法检测8 dpi犬主要组织脏器中弓形虫529 bp重复片段的拷贝数,并对主要脏器进行组织病理学检测。结果 结果表明3只实验犬在4～5 dpi均出现了一过性体温升高,轻微腹泻;2～6 dpi的咽拭子或肛拭子中能检测到弓形虫B1基因的核酸,且肛拭子阳性率高于咽拭子;8 dpi剖检后,均产生较多腹水;肝组织均出现明显的炎性变化;盲肠和肝中的弓形虫529 bp片段的核酸拷贝数最高。结论 利用SPF级比格犬腹腔接种弓形虫RH株,主要引起一过性体温升高和短时腹泻,可导致肝组织变性和坏死,发病模型较温和。     

福建水牛肉孢子虫形态学的考察

用光镜和电镜观察了福建水牛的肉孢子虫形态,证明有两型的孢囊。大型包囊的原级囊壁有菜花状突起,顶端呈树枝状分支,内有环纹小纤丝、微管和电子致密颗粒,经鉴定是梭状肉孢子虫(Sarcocystis fusiformis)。小型包囊有两种,其中一种的囊壁外侧有倾斜的放射状突起条纹,其原级囊壁具有斜状突起的绒毛,鉴定为李氏肉孢子虫(S.Levinei),另一小型包囊的囊壁光滑,无放射状条纹,囊内隔板不明显,所含的慢殖子较少,与李氏肉孢子虫有明显差异,故暂不定种名。     

弓形虫快速鉴定及国内实验动物感染调查

目的 建立弓形虫快速鉴定方法,进行国内实验动物感染调查,为国家标准的修订提供参考依据。方法 选择2012年12月至2016年12月期间全国60个不同厂家的12 394只实验动物（包括：猴290只、小型猪425只、犬579只、兔1 234只、地鼠372只、豚鼠1 363只、大鼠987只、小鼠7 144只）作为调查对象。采用ELISA方法检测动物血清中弓形虫抗体IgG和循环抗原CAg。利用PCR技术鉴定弓形虫p30基因。应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术识别弓形虫虫体。结果 用ELISA从12 394份动物血清中检出4份弓形虫抗体IgG阳性。在这4份抗体IgG阳性样本中都发现了弓形虫虫体和DNA。通过PCR扩增p30基因的分子特性证明了样本中弓形虫病原体的存在。通过直接镜检实时动态显微视屏摄录技术,在这些样本中发现了弓形虫速殖子。2012年12月至2016年12月期间,对12 394只实验动物调查结果显示,弓形虫感染率为0.03%（4/12 394）。结论 ELISA、PCR、直接镜检实时动态显微视屏摄录技术相结合可完成实验动物的弓形虫检验工作。国内实验动物中存在弓形虫感染。因此,建议设计合理的筛查程序用于防止动物传播的弓形虫病。有必要开发新的诊断工具,特别是快检技术用于这一重要人兽共患病的未来研究。     

猪和绵羊肉孢子虫的形态学

报道福建家猪和宁夏绵羊肉孢子虫(Sarcocystis)的形态,以光镜观察表明福建家猪肉孢子虫的包囊壁具有厚的放射状条纹,电镜证明包囊仅有一层原级囊壁,该壁具有许多倾斜状突起的微毛和其微毛内含15～80对的微丝,经鉴定是猪米氏肉孢子虫Sarcocystis miescheriana Kuhn,1865.宁夏绵羊肉孢子虫的大型包囊证明有原级和次级两层囊壁,其原级囊壁具有菜花状分瓣突起的微毛,鉴定为柔嫩内孢子虫.S.tenella Railljet,1866。     

多房棘球蚴不同方法接种灰仓鼠感染效果观察*

摘要: 目的观察将多房棘球蚴( Echinococcus muhilocularis 简称Em) 接种灰仓鼠腹腔、前肢腋下、心脏和肝脏组织 的感染效果,为探索建立多组织或器官包虫病动物模型提供依据。方法按1000 个头节/只剂量经腹腔和前肢腋 下接种灰仓鼠,经腹膜穿刺肝脏和经胸腔穿刺心脏接种灰仓鼠,按计划解剖检查包囊发育状况和包囊寄生部位,计 算包囊系数( 包囊质量/ 体质量× 100% ) 和感染率。结果100 d 处理腹腔接种29 只,腹腔100% 感染,包囊系数 7. 1%,300 d 处理7 只,除腹腔都有包囊寄生外,包囊浸润肝脏3 只,浸润脾脏和肾脏各2 只,总包囊系数51. 7% 。 前肢腋下接种的分别于116 d 和290 d 处理19 只和5 只,腋下均有包囊寄生,包囊系数分别为3. 27% 和22. 95% 。 100d 处理肝脏接种的17 只,共10 只有包囊,包囊系数7. 1% ,包囊寄生部位为腹腔8 只,肝脏5 只,心脏1 只,肺部 3 只。115 d 处理心脏接种26 只,包囊寄生部位为心脏6 只,肺部9 只,胸腔1 只,其中有两只同时心脏和肺脏寄生 包囊,共13 只寄生包囊,包囊系数2. 91% 。结论腹腔环境适宜Em 生长发育,适合做周期短的动物模型,接种 300 d 包囊有向实体器官浸润的现象。Em 在前肢腋下发育缓慢,适合做Em 保种。由于动物模型中的心脏和肝脏 接种感染率低,接种技术和方法需改进,以便提高感染率． 关键词: 多房棘球蚴( Em) ; 灰仓鼠; 动物模型; 包囊系数; 器官     

原生殖细胞的迁移、增殖及其与细胞因子的关系

原生殖细胞(PGCs)是配子的始祖细胞,它发育演变生成卵细胞或精子细胞．PGCs在其发育过程中不断地增殖并迁移,最终到达生殖嵴．本文综述了原生殖细胞的发生,迁移及其机制,原生殖细胞与细胞因子,如干细胞因子(SCF)、白血病抑制因子(LIF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和骨形态发生蛋白(BMPs)等的关系．     

玫瑰茄花萼对铅(Ⅱ)盐的促排作用

本文采用小鼠作实验探讨玫瑰茄花萼对对铅(Ⅱ)盐的促排效应,三组小鼠,每组12只,1组间日交替喂乙酸铅与玫瑰茄花萼,2组同法喂乙酸铅与净水,3组为对照组,经81天,采用分光法检其血、骨、毛及粪灰中铅蓄积量,结果表明1组比2组呈较低铅量蓄积与较高铅量排出,说明玫瑰茄花萼似乎可供防铅毒。     

D.S.规划的uv-分解

主要利用uv-分解理论分析D.S.规划。先将D.S.函数uv-分解,再给出D.S.规划算法和最优性条件。     

关于肿瘤移植模型病理学方面的探讨

应用小鼠S1 80 肉瘤 ,小鼠EAC腹水瘤实体型两种瘤株 ,进行BALB c小鼠移植瘤模型的研究。试验设S1 80 对照组 ,S1 80 给药组 ,EAC对照组 ,EAC给药组 ,比较给药 10d后实体瘤大小及其病理学变化特征。病理学观察对照组和给药组间、瘤体切面积和瘤细胞坏死率差异均有极显著性 ,两对照组的小鼠肝脏内均发现有瘤细胞转移。由此说明病理学观察具有重要的参考价值     

旱莲草提取物对运动小鼠机体部分能源物质及激素代谢的影响研究

通过实验探讨旱莲草提取物对大强度耐力训练大鼠血清生化指标影响的机理,为旱莲草提取物作为运动补剂提供实验依据.结果表明,旱莲草提取物使小鼠血糖和肝、肌糖原含量升高,BUN含量降低,小鼠体内胰岛激素、生长激素、睾酮及醛固酮浓度高于其对照组,而皮质醇水平较其对照组有降低趋势.     

半枝莲多糖对小鼠S180肉瘤抑制作用的研究

探讨半枝莲多糖对体内S180肉瘤肿瘤抑制作用及相关机制.采用动物移植性肿瘤实验观察半枝莲多糖对小鼠体内肿瘤细胞生长的影响,ELISA法检测对荷瘤小鼠外周血血清中白细胞介素-2和干扰素-α质量浓度的影响.结果显示,半枝莲多糖对S180肉瘤生长的抑制率以中剂量为佳;各剂量组均对脾脏指数有显著性差异,能够提高S180荷瘤小鼠外周血血清中白细胞介素-2及干扰素-α的质量浓度,但中剂量最为显著,表明半枝莲多糖在小鼠体内具有抑制S180肉瘤的作用.     

继代时间对南方红豆杉细胞生长和产生紫杉醇的影响

通过激素组合正交实验及继代时间的选择对南方红豆杉细胞增殖培养条件进行了优化研究。结果表明在细胞生长对数期继代比静止期继代细胞增长率提高 1.6倍 ,而紫杉醇产量差异不大。同时在对 75个激素处理的筛选实验中证实NAA与 6 BA的组合优于 2 ,4 D与 6 BA的组合 ,其中NAA 1mg/L +6 BA 1mg/L的处理可获得最大增长率     

太白山地区常夏石竹愈伤组织增殖培养的研究

以太白山地区常夏石竹幼茎为外植体,采用正交设计实验,添加不同种类及不同浓度的植物生长调节物质,组成9种不同的增殖配方,对常夏石竹愈伤组织诱导、增殖试验。结果表明,6-BA是影响常夏石竹诱导率的最主要因素,最有利于常夏石竹愈伤组织增殖的植物生长调节剂组合为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L,可促进常夏石竹愈伤组织的增殖,并能改善愈伤组织的生长状态,增加愈伤组织增殖生长量。     

南、北五味子抑菌活性差异比较研究

用牛津杯法和平板二倍稀释法检测了2种五味子水提取物对8种细菌和1种真菌的抑菌活性差异.结果表明2种五味子提取物对8种供试细菌大肠杆菌ATCC25922和ATCC35218、普通变形杆菌CMCC49027、沙门氏菌CMCC50094、铜绿假单胞菌ATCC27853、枯草芽孢杆菌CMCC63501、粪肠球菌CMCC32219和金黄色葡萄球菌ATCC25923都有明显的抑制作用,对真菌白色念珠菌ATCC10231不具有抑制作用,对同一种供试细菌北五味子的抑菌圈直径显著大于南五味子,最小抑菌浓度比南五味子至少高1个稀释倍数.     

酸性介质中Ti基MnO_xD.S.A.稳定性探讨

对所研制的一种新型节能阳极:Ti|SnO_2-MnO_x-RuO_2|MnO_z电极,在150g/L H_2SO_4溶液中,析氧过程活性层的溶解稳定性、机械稳定性进行了测定,结果表明在如此强酸介质中该电极很稳定。同时,用强化寿命实验估算了在锌电积条件下的使用寿命为1700d,优于其他MnO_x类D.S.A.对电极的失活原因亦进行了探讨。     

羧甲基壳糖对口腔变形链球菌和口腔乳酸杆菌的抑制作用

从人的口腔中取少量牙垢，经过口腔变形链球菌和口腔乳酸杆菌普通培养培养，再经过专性选择培养基分离及进一步纯化，得到口腔形变链球菌和口腔乳酸杆菌，并进行纯种鉴定，用此浊法测定羧甲基壳聚糖对两种菌的抑制作用。结果表明：ＣＭＣＴＳ对这两种菌都有一定的抑制作用。