连翘对酪氨酸酶的抑制活性

本文通过提取、分离、鉴定连翘(Forsythia suspensa)中酪氨酸酶抑制成分,并检测其酪氨酸酶抑制活性.采用的方法是利用蘑菇酪氨酸酶对连翘进行抑制活性筛选,并通过硅胶柱色谱法分离、鉴定酪氨酸酶抑制成分.结果发现,对连翘的乙醇提取物及其二氯甲烷、正丁醇、水萃取物进行酪氨酸酶抑制活性检测结果均有浓度依赖性的抑制活性,尤其是连翘的二氯甲烷萃取物显示最强的活性,并通过硅胶柱色谱法分离得到有效成分,利用核磁共振、质谱等分析手段有效成分被鉴定为白桦脂酸,其酪氨酸酶的半数抑制率IC50值为138.5±1.57μmol/L.结论:连翘具有较强的酪氨酸酶抑制活性,为连翘的有效利用提供实验依据.     

香草醛对酪氨酸酶活性的抑制

在25℃，pH=6．8的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲体系中，采用酶动力学方法研究了香草醛对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性的抑制效应．实验结果表明：香草醛对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有抑制作用，其半数抑制浓度（IC50）约分别为2．7和4．1mmol／L；香草醛能明显延长单酚酶的迟滞时间，4mmol／L香草醛能使迟滞时间由1．1min延长至3min；Lineweaver-Burk图显示香草醛对二酚酶的抑制作用表现为混合性抑制，对游离酶的抑制常数和对酶-底物络合物的抑制常数分别为3．48和15．1mmol／L．     

苯甲醛族化合物抑制蘑菇酪氨酸酶活力的研究

报道几种苯甲醛族化合物对蘑菇酪氨酸酶催化L－多巴氧化反应活力的影响以及抑制作用机理。研究结果表明，苯甲醛族化合物对酶的效应表现为可逆抑制作用，苯甲醛及其m-和p-甲氧基取代物表现为非竞争性抑制，而o-位、m－位和p－位羟基取代物表现为竞争性抑制。通过测定酶活力下降50％的抑制剂浓度（IC50）和抑制常数来比较抑制剂作用的强度，探讨不同取代基团对抑制作用的影响。提出抑制剂与酶分子的作用模型。     

秋茄叶缩合单宁对蘑菇酪氨酸酶的抑制机理

研究了红树植物秋茄叶缩合单宁对蘑菇酪氨酸酶单酚酶活力和二酚酶活力的影响和抑制动力学.结果表明秋茄叶缩合单宁不仅可以降低蘑菇酪氨酸酶单酚酶酶促反应的稳定态活力,也可以延长反应的迟滞时间,并具有浓度依赖关系,随着抑制剂浓度增大,稳定态活力下降,迟滞时间延长.当抑制剂质量浓度达33.00μg/mL时,稳定态活力从100%下降到74%,迟滞时间从32.7s增加到72.9s;秋茄叶缩合单宁对二酚酶的抑制也显示浓度效应,抑制效果显著,引起酶活力下降50%的抑制剂质量浓度(IC50)为30.00μg/mL,其对二酚酶的抑制显示可逆的效应,抑制类型为混合型,对游离酶的抑制常数(KI)为25.05μg/mL和对酶-底物络合物的抑制常数(KIS)为46.69μg/mL.本研究揭示了植物秋茄叶缩合单宁作为一种新型酪氨酸酶抑制剂的可能性.     

叶下珠提取物对酪氨酸酶的抑制和抗氧化作用

叶下珠为传统民间草药,具有平肝清热、利水解毒之功效.以叶下珠为研究对象,经乙醇提取,溶剂极性递增分离法制备获得叶下珠植物成分,测定了叶下珠植物对酪氨酸酶的抑制作用,以及运用1,1-二苯基-2-苦苯肼(DPPH)自由基法检测其清除自由基的能力.结果表明:叶下珠乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对酪氨酸酶二酚酶有较强抑制作用,IC50值分别达到0.26和0.49 mg/mL,动力学研究表明:叶下珠乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对酪氨酸酶抑制作用均是可逆的,其抑制类型为混合型抑制作用;叶下珠乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对DPPH自由基具有一定的清除作用,在较低的浓度下有较高的清除效果,IC50值分别为0.012和0.008 mg/mL,说明叶下珠植物具有开发成天然酪氨酸酶抑制剂和抗氧化剂的潜力.     

对甲氧基肉桂酸对酪氨酸酶的抑制机理

以L-酪氨酸和L-多巴为底物研究了对甲氧基肉桂酸对酪氨酸酶的抑制能力,结果表明,对甲氧基肉桂酸对酪氨酸酶催化单酚底物L-酪氨酸有较强的抑制作用,但对酪氨酸酶催化二酚底物L-多巴没有抑制作用.文中采用荧光光谱以及分子对接手段探讨了对甲氧基肉桂酸对酪氨酸酶的抑制机理,认为对甲氧基肉桂酸对酪氨酸酶的荧光光谱属于静态猝灭,在酪氨酸酶活性中心与酪氨酸酶结合形成复合物,以氢键和疏水作用力稳定结构;在酪氨酸酶活性中心,对甲氧基肉桂酸占据了单酚底物的空间位置,对酪氨酸酶的抑制应该是一种竞争性抑制.     

苯丙酸对蘑菇酪氨酸酶活力的抑制作用

酪氨酸酶(EC 1.14. 18.1)是生物黑色索形成的关键酶.该酶抑制剂在果蔬防褐变保鲜中具有重要的应用前景.在筛选酪氨酸酶活力抑制剂过程中,发现苯丙酸对蘑菇酪氨酸酶活力有明显的抑制作用,对蘑菇防止褐变具有较好的保鲜效果.报道了苯丙酸对蘑菇酪氨酸酶单酚酶活力和二酚酶活力的影响和抑制作用.结果表明,苯丙酸对蘑菇酪氨酸酶的单酚酶的效应不仅降低了酶促反应的稳定态活性,也延长了酶促反应的迟滞时间,并具有浓度依赖关系.当苯丙酸浓度达10.0 mmol/L时,稳定态活力下降2/3,迟滞时间从100 s延长到140 s;苯丙酸对二酚酶活力的抑制也显爪浓度效应,抑制效果更为显著,引起酶活力下降50％的抑制剂浓度(IC50)为2.05 mmol/L,苯丙酸对二酚酶活力的抑制显示可逆的效应,抑制类型为混合型,抑制常数(KI和KIS)分别为1.570和3.070 mmol/L.     

对醛基苯甲酸对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用

酪氨酸酶是一种同时具有单酚酶和二酚酶活力的酶．对醛基苯甲酸(ABA)对蘑菇酪氨酸酶活力的影响研究结果表明：ABA只对蘑菇酪氨酸酶的二酚酶活性有抑制作用．而对单酚酶没抑制作用．ABA对二酚酶的抑制作用显示浓度关系，测定导致酶活力下降50％的抑制剂浓度(IC50)为0．98mmol／L．ABA对二酚酶的效应为可逆的非竞争性的抑制．抑制常数K1为0．94mmol／L．本得到的结果与苯甲酸和苯甲醛的效应进行了比较．     

银杏叶和银杏外种皮乙醇提取物对酪氨酸酶的抑制作用比较

报道银杏叶和银杏外种皮乙醇提取物对酪氨酸酶活力的影响．结果表明：银杏叶和银杏外种皮乙醇提取物对酪氨酸酶活力均有显的抑制作用，测定导致酶活力下降50％的银杏叶和银杏外种皮提取物含量(IC50)分别为：6．59mg／mL和2．73mg／mL．对酪氨酸酶的抑制作用均表现为可逆抑制．抑制类型均为混合型．分别测定银杏叶和外种皮提取物对游离酶抑制常数(K1)和酶-底物络合物抑制常数(KIS)，并加以比较．     

谷胱甘肽、甘露醇对酪氨酸酶的抑制和对O_2~自由基的清除作用

研究酪氨酸酶促反应的抑制对探讨皮肤色素沉着的消失具有临床意义。我们采用光度法和Stemartand Bewley报道的氮兰四唑光还原反应分别对谷胱甘肽、甘露醇对该酶的抑制类型以及对O_2~自由基清除作用进行了研究。试验结果表明:谷胱甘肽、甘露醇对酪氨酸酶的抑制动力学上均属不可逆抑制类型。两种药物对O_2~自由基均有明显地清除作用。这对探讨酪氨酸酶的抑制机理提供了信息。     

光甘草定的制备及其对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用

分别选用单酚酶与二酚酶为底物,评价硅胶柱层析(CHCl3/MeOH梯度洗脱)分离得到的光甘草定对蘑菇酪氨酸酶活性的影响。结果表明:实验室所分离得到的光甘草定纯度为85%以上,其对蘑菇酪氨酸酶单酚酶和二酚酶的活性均有抑制作用,导致酶活力下降50%的抑制剂浓度(IC50)分别为1.28μmol/L和1.56μmol/L,且Lin-eweaver-Burk图显示,光甘草定对酪氨酸酶二酚酶活性的抑制作用表现为竞争型抑制。光甘草定发挥着显著的抑制酪氨酸酶活性,说明光甘草定可以通过抑制黑色素生成的限速酶-酪氨酸酶达到美白肌肤之功效。     

红景天水提液对酪氨酸酶抑制效果的初步研究

高山红景天（Rhodiola sachalinensis A．Bor．）,又名库叶红景天,是一种生长在世界高山高纬度地区的珍贵药用植物,在我国主要分布在东北的长白山区．由于其生长环境极其恶劣,如缺氧、低温干燥、狂风、受紫外线照射,昼夜温差大等,具有很强的生命力和特殊的适应性．民间主要以其根茎人药,具有滋补强壮,抗疲劳,抗衰老,抗寒冷等药效;80年代又发现其具有镇静,提高脑力和体力等功效．但它对酪氨酸酶的抑制作用迄今未见报道．美国加州Berkeley大学的Kubo教授对酪氨酸酶抑制剂的研究最为前沿,他们已从天然植物中提取了几种酪氨酸酶抑制剂,测定了它们对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用．为进一步阐明高山红景天的药理作用,我们对高山红景天的水提液的抑制酪氨酸酶活性作用进行了研究,旨在对高山红景天植物的开发和利用提供实验数据．     

过氧化氢酶对超氧化物歧化酶清除O2^.作用的影响

采用ＮＢＴ（氮兰四唑）光还原法测定过氧化氢酶（ＣＡＴ）存在下对超氧化物歧化酶清除Ｏ２＾．自由基的影响。     

槐花米提取物对尿素酶的抑制活性

采用靛酚法研究了槐花米的乙醇、乙酸乙酯、二氯甲烷提取物对尿素酶的抑制作用,证实3种提取物均对尿素酶有明显抑制作用,IC₅₀分别是2.63,1.90,0.53 g/L.通过动力学研究阐明了提取物对尿素酶的抑制行为是可逆的混合型抑制,动力学常数K_i分别为0.32,0.22,0.084 g/L.首次阐明了槐花米中含有尿素酶抑制成分,为槐花米具有健胃、养胃的功效提供了一种理论解释.     

体外消化对大豆多肽性质和ACE抑制活性的影响

为了验证大豆多肽血管紧张素转换酶(ACE)抑制活性的生物可获得性,采用Alcalase蛋白酶催化大豆蛋白水解获得了3种水解程度不同的大豆多肽,再应用摸拟体外消化方法处理大豆蛋白及其水解产物,并进一步分析了摸拟消化前后大豆多肽结构、性质和ACE抑制活性的变化.结果显示:3个大豆多肽的相对分子质量均小于16000,且水解度越高,TCA可溶性蛋白含量就越高;经过摸拟体外消化,大豆蛋白出现降解,其分子大小和性质与大豆多肽趋于一致,大豆多肽则进一步降解;3种大豆多肽的ACE抑制活性在经过摸拟体外消化后显著下降,大豆蛋白的ACE抑制活性则显著上升,两者之间没有显著差异,表明虽然Alcalase对大豆蛋白的酶促处理能够释放降血压肽,但经过模拟体外消化后其ACE抑制活性又会下降,而直接口服大豆蛋白有可能获得同样的降血压效果.     

甘醇酸对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用

在蘑菇酪氨酸酶抑制剂的筛选实验中,发现甘醇酸对蘑菇酪氨酸酶有明显的抑制作用,可以导致酪氨酸酶的单酚酶活力和二酚酶活力下降,实验结果表明,甘醇酸抑制蘑菇酪氨酸酶的单酚酶和二酚酶活力下降50%的抑制剂浓度(IC50)分别为29.74和1.80 mmol/L.对单酚酶活力的迟滞时间也有明显的延迟效应,30 mmol/L的甘醇酸可以使迟滞时间延长了250%.甘醇酸对二酚酶的抑制作用是可逆过程,抑制类型为混合型.通过动力学分析,测得甘醇酸对游离酶(E)和酶-底物络合物(ES)的抑制常数分别为0.72和5.05 mmol/L,通过研究甘醇酸对酪氨酸酶的抑制作用机理,为进一步研究设计新型酪氨酸酶抑制剂奠定基础.