酵母细胞表达金属硫蛋白对铅离子的吸附研究

根据人肝金属硫蛋白的基因序列,结合酿酒酵母菌密码子使用规律,改造并合成了可在酵母细胞内高效表达的金属硫蛋白基因,并将该基因转入酵母细胞内进行了表达.以野生型菌株为对照,初步测定了酿酒酵母INVSC1-mt菌株对pb2+的吸附作用.研究结果表明,金属硫蛋白基因的表达有助于提高酿酒酵母细胞对pb2的吸附作用,其最大吸附量比野生型菌株提高了11％.同时,酿酒酵母INVSC1-mt菌株吸附pb2+的速度较快,在30 min时,其吸附率就达到了96.03％,吸附量为5.76 mg/g湿重细胞.而野生型菌株至120 min时,其吸附率才达到90.44％.     

鸭肝金属硫蛋白的分离纯化及鉴定

以信阳华英鸭为材料,用ZnSO4诱导其肝脏合成金属硫蛋白(MT),将鸭肝材料经Sephadex G-50柱层析和DEAE-Sepharose CL-6B阴离子交换柱层析2次分离纯化,得到Zn-MT,该MT由61个氨基酸组成,其中半胱氨酸含量约为28%,分子量6.5 KD.鸭肝Zn-MT产率为0.57 mg/kg鲜肝重,在220 nm有吸收峰.     

铜、锌、镉胁迫下玉米幼苗金属硫蛋白的响应

为研究Zn2+、Cu2+、Cd2+金属离子诱导玉米产生金属硫蛋白,采用实验室溶液培养的方式,通过不同浓度Zn2+、Cu2+、Cd2+(0.05、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mmol/L)胁迫下,采用电感耦合等离子体(ICP-MS)测定玉米叶金属硫蛋白(MT)的诱导合成量。随着金属离子浓度的升高,MT的含量呈现先升高后下降的趋势。锌、铜、镉胁迫浓度分别为8.0、0.05和0.5 mmol/L时,玉米叶片中MT含量最高,当铜、镉离子浓度大于2 mmol/L浓度时,玉米出现了一定程度的死亡。研究结果表明玉米可作为锌、铜、镉污染的标志物。     

酿酒酵母金属硫蛋白的表达、纯化及活性检测

通过PCR从酿酒酵母基因组DNA上扩增得到酿酒酵母基因CUP1编码的金属硫蛋白序列.将其编码序列克隆到质粒pTWIN1构建重组表达质粒pTWIN1-MT,转化大肠杆菌感受态细胞ER2566.重组融合蛋白CBD-intein1-MT在IPTG的诱导下得到表达,经SDS-PAGE和蛋白质印迹鉴定.用重组菌分别进行铜离子耐受...     

小鼠金属硫蛋白基因—I在CHO细胞中稳定表达及其在医疗…

将小鼠的ＭＴ－Ｉ基因插入ｐＳＶ２－ｄｈｆｒ质粒的ＥｃｏＲＩ位点，构建了具有ＳＶ４０和ＭＴ双启动子并正向插入ＭＴ－Ｉ基因的表达载体。用改良的磷酸钙／ＤＮＡ沉淀法将表达载体导入ＣＨＯ－ｄｈｆｒ＾－细胞内，用不含次黄嘌呤（Ｈ）和胸腺嘧啶（Ｔ）的选择培养基筛选出稳定表达ＭＴ阳性克隆Ｄ－２２，经检测１０＾６细胞的ＭＴ表达量约为１．８μｇ，Ｄ－２２细胞对Ｃｄ＾２＋浓度抗性较之ＣＨＯ－ｄｈｆｒ＾－细胞高１４倍。     

中华补血草金属硫蛋白基因的克隆及高盐处理下的表达模式分析

以中华补血草叶片为材料,提取其总RNA并反转录cDNA,并以cDNA为模板,克隆得到包含该基因完整开放阅读框的cDNA序列,序列分析表明,该基因开放阅读框长249 bp,编码82个氨基酸;该蛋白含有14个半胱氨酸,主要分布在蛋白质的N端和C端,呈CC,CX,CXXC形式排列.预测该蛋白分子质量为8 133.1 D;等电...     

金属硫蛋白对小鼠大脑皮层细胞的保护作用

用MT-Ⅲ重组腺病毒感染原代培养的小鼠大脑皮层神经细胞,研究MT-Ⅲ是否对谷氨酸和Aβ引起的神经毒性有保护作用.MTT法和PI-Hochest(33342)双染色法分析细胞成活显示,MT-Ⅲ的表达能有效地提高谷氨酸和Aβ处理后的神经细胞相对成活率,并在由谷氨酸诱导的细胞凋亡通路中阻碍CDK5/P35中的P35向P25裂解而保护神经元.     

金属硫蛋白的研究进展

本对近年来金属硫蛋白的结构,特性和功能及其分子生物学的国内外研究进展作一综述,讨论了金属硫蛋白与医学的关系,提出了有待研究解决的问题,展望了其应用前景。     

锌-金属硫蛋白对力竭运动大鼠肝脏和股四头肌线粒体ATPase损伤的保护作用

通过锌-金属硫蛋白(Zn-MT)的补充干预观察对大鼠肝脏和股四头肌线粒体ATPase的影响,探讨Zn-MT对线粒体ATPase保护作用的机制.用雄性SD大鼠30只,随机分为安静对照组、运动对照组、补充Zn-MT+运动组.按Bedford运动模型运动至力竭后即刻处死,取肝脏和股四头肌制备线粒体备测.测定肝脏和股四头肌线粒体Na+,K+-ATPase、Ca2+-ATPase,Mg2+-ATPase活性,并进行有关统计学检验.结果表明,Zn-MT可以抑制由于力竭运动造成的肝脏和股四头肌中Na+,K+-ATPase、Ca2+-ATPase,Mg2+-ATPase活性的下降.     

锌缺乏对海马锌离子及锌转运蛋白ZnT4表达的影响

目的探讨锌缺乏对小鼠大脑海马锌离子和锌转运蛋白4（Zinc Transporter 4,ZnT4）表达的影响.方法建立锌缺乏动物模型,给断乳后的CD-1小鼠分别喂养缺锌饲料和正常饲料,5周后取大脑海马组织,应用锌金属自显影技术、免疫组织化学技术和Western blotting技术分别进行两组海马锌离子含量和ZnT4表...     

金属硫蛋白研究进展

介绍了金属硫蛋白的结构、理化性质和主要功能,金属硫蛋白转录与表达,并对国内外金属硫蛋白与锌、铅、镉、钙的代谢研究,金属硫蛋白与辐射关系,肿瘤的发生、治疗及预后的一些进展进行了介绍,说明了金属硫蛋白有着广阔的应用前景。     

水稻金属硫蛋白ricMT的一级结构特征分析

为了获得水稻金属硫蛋白 ric MT的一级结构特征 ,通过等电点和蛋白稳定性预测 ,初步判断 ric MT蛋白是一个不稳定的酸性蛋白 ;并用 ric MT氨基酸序列对 EMBL 蛋白数据库进行检索 ,得到 5 0余个同源性较高的来自动植物的 MT蛋白 ,用二重序列对排分析和氨基酸组成模式分析与已知的蛋白进行比较 ,将 ric MT归属于植物类金属硫蛋白类型。采用多重序列比较法总结出植物类金属硫蛋白的一级结构的三点特征 :相对分子量比动物 MT大 ,平均为 71个氨基酸残基 ;与哺乳动物 MT不同的独特氨基酸组成模式 ;一级结构典型的三段式分布 ,间隔区多数达 3 0～ 40个氨基酸残基     

金属硫蛋白的功能及应用前景

阐述了金属硫蛋白的结构特点及理化性质，介绍了金属硫蛋白的功能和应用前景．     

人金属硫蛋白-3的α结构域的表达及其性质研究

参考E.coli偏爱密码子,设计并合成人MT-3α结构域(α-MT-3)的DNA片段,克隆到表达载体pGEX-4T-1中。经IPTG诱导,在E.coli中高效表达出谷胱甘肽-S-转移酶(GST)-α融合蛋白。凝血酶酶切融合蛋白(用CdCl₂或ZnSO₄辅助)后,得到纯化的结合镉或锌的α-MT-3蛋白。质谱分子量检测及氨基酸组成分析证明得到了目的蛋白。紫外吸收光谱及圆二色性光谱研究重组α-MT-3的结构。MT-3的与其余MT的α结构域不同,α-MT-3的圆二色性光谱在220nm左右为负峰,说明α-MT-3可能包含一个α-螺旋的二级结构。     

金属硫蛋白的研究进展

 金属硫蛋白是一类广泛存在于生物体内的多功能诱导性蛋白.作者对近年来在金属硫蛋白的结构、分类、功能及测定方法等方面研究取得的进展做了简要的介绍,同时提出了一些金属硫蛋白研究中存在的问题,并对金属硫蛋白将来可能的应用前景进行了展望.     

镉诱导扁藻（Platymonas cardiformis）类金属硫蛋白的初步研究

以CdCl2作为诱导剂，用不同浓度的CdCl2对扁藻进行诱导培养，随着CdCl2浓度的升高，扁藻的生长率逐渐降低。扁藻不能耐受1mmol／L以上的CdCl2．对MTL提取液进行紫外吸收、原子吸收等测定，结果表明扁藻类金属硫蛋白的合成随着CdCl2浓度的升高而增大，至0．25mmol／L达到最大值，每克湿藻能获得1．98mgMTI，诱导效果显著。     

单扫极谱法在金属硫蛋白研究中的应用

本文将络合物吸附波测锌和镉用于金属硫蛋白(MT)的研究。在含α、α′-联吡啶介质中对经硝酸酸化后的MT样品中的锌含量进行测定,并将此法用于具有药用价值的Zn-MT的分离纯化及鉴定。在pH2的HCl-KI介质中,将单扫极谱法测镉用于镉-血红蛋白饱和法测定正常或金属诱导动物组织中的MT含量,检测量可达5μgMT/g组织,回收率为90～110％。     

假丝酵母类金属硫蛋白的分离、纯化及功能研究

假丝酵母Cu-12(Candida sp．Cu-12)经Cu^2 诱导产生的蛋白进行Sephadex G-100和纤维素DE-52分离纯化及理化性质测定，获得的蛋白具有四个亚型，其主理化性质均与MT的定义相符，因此确定得到了假丝酵母的类金属硫蛋白，同时测定了该Cu—MT清除羟自由基和氧自由基的能力．     

元江普通野生稻金属硫蛋白基因的获得和序列分析

对SMARTTM技术构建的元江普通野生稻叶片cDNA文库进行随机测序,获得了元江普通野生稻的金属硫蛋白基因cDNA序列.该序列全长525 bp,开放阅读框长186 bp,编码62个氨基酸,10个半胱氨酸集中分布在肽链的N端和C端,该蛋白的分子量为6.42 kD,理论等电点为5.21.氨基酸序列(Blastp)同源性分析表明该基因属于金属硫蛋白家族.