抗氧化剂调节人内皮细胞粘附分子表达

探讨抗氧化剂能否调节内皮表面的粘附分子表达,以及这种调节是否通过一种ＮＦ－ｋＢ的活性敏感的机制。方法：内皮细胞表面的粘附分子表达用细胞ＥＬＩＳＡ方法测定。内皮细胞ＮＦ－ｋＢ的活性用电泳迁移率分析测定。结果：ＰＤＴＣ和ｃｈｒｙｓｉｎ能明显抑制所有３种粘附分子的表达。ＤＣＩ可抑制Ｅ－ｓｅｃｌｅｃｔｉｎ和ＩＣＡＭ－１的表达,对ＶＣＡＭ－１没有影响。Ｐｒｏｂｕｃｏｌ仅在低浓度时对ＩＣＡＭ－１有轻微抑制作用     

细胞间粘附分子-1测定在肝细胞肝癌诊治中的意义

近年关于细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）与肝细胞肝癌（ＨＣＣ）的研究表明，８０％～９６％ＨＣＣ组织中ＩＣＡＭ－１的表达呈阳性，而血清中ＩＣＡＭ－１与组织ＩＣＡＭ－１的表达吻合率为８７％，体外实验性证实血清ＩＣＡＭ－１来源于肿瘤细胞表面脱落的ＩＣＡＭ１，由于血清ＩＣＡＭ－１来源及结构的特点，可干扰机体免疫系统对肿瘤的监控，使病情迅速发展；临床上观察到血清ＩＣＡＭ－１水平与ＨＣＣ病情的恶化程度成正比     

RT—PCR法检测SMMC—7721人肝癌细胞α5β1整合蛋白 …

整合蛋白α５β１是一类存在于细胞表面的细胞粘附分子，在肝癌的发生发展和演进中起着重要的作用。研究了快速定量检测整合蛋白α５β１ ｍＲＮＡ表达的ＲＴ－ＰＣＲ方法，结果表明：在ＰＣＲ反应体系中加入２５ｎｇ到２００ｎｇ ｍＲＮＡ的逆转录产物呈较好的线性关系，并以此为反应条件测定ｐｃＤＮＡ３－α５，ｐｃＤＮＡ３－β１质粒共转染或单转染的α５β１．６－７７２１，α５．３－７７２１，β１．６－７７２１细胞株ｍ     

抗人肝癌单克隆抗体JHⅢ的制备及其生物学特性

用肝癌细胞株ＢＥＬ－７４０２脾内直接免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合，获得一株分泌肝癌单抗的杂交瘤细胞株ＪＨⅢ，其染色体众数为９０－１１０，单抗ＪＨⅢ系ＩｇＧ２ｂ亚类。杂交瘤细胞培养上清和腹水的效价分别为１：１０＾２～１０＾３和１：１０＾６以上。ＡＢＣ法证实它对肝癌组织有较好的相关性。ＩＦＡ法也证明它对肝癌细胞ＢＥＬ－７４０２有强的阳性反应，而对其他肿瘤细胞株和肿瘤组     

用In－111通过1B4M－DTPA标记单克隆抗体的研究

研究了双功能联接剂１－（４－异硫氰基苄基）－４－甲基二乙三胺五乙酸（１Ｂ４Ｍ－ＤＴＰＡ）与抗体偶联反应以及用Ｉｎ－１１１标记偶联物的条件，得到了体内外稳定的Ｉｎ－１１１标记抗体；用高纯Ｉｎ－１１１通过１Ｂ４Ｍ－ＤＴＰＡ标记了抗胃癌单抗３Ｈ１１，标记抗体免疫活性保持完好，放射性比活度为２．０×１０￣（１１）Ｂｑ／ｇ；荷瘤裸鼠注射标记物２４ｈ后，即得到靶目标的清晰显像，１６８ｈ的瘤／肝放射性比值为２．０。     

天花粉蛋白诱发人体免疫抑制中DQA1和DQB1等位基因的顺式互补受邻近

人类白细胞抗原ＨＬＡ－ＤＱ等位基因ＤＱＡ１＊０５０１和ＤＱＢ１＊０２０１以顺式和反式两种互补格局决定中药提物天花粉蛋白诱发人体免疫抑制中ＣＤ８介导型性状的表达。     

分泌抗弓形虫单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用弓形虫可溶性抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠,取脾细胞,与Ｓｐ２／０ 细胞融合,获得３ 株能稳定分泌抗弓形虫单克隆抗体的细胞。细胞培养上清液和腹水中的单克隆抗体效价分别为１∶１６ ～２５６ 和１０ － ６ ～１０ － ７ 。单抗类型均为ＩｇＭ。杂交瘤细胞经液氮冻存１２ 个月后,复苏生长良好,分泌活性稳定。在ＭｃＡｂ－ Ｄｏｔ－ ＥＬＩＳＡ 实验中,所能测出可溶性抗原的最小浓度为１０ ｎｇ／ ｍＬ     

白细胞介素1受体拮抗剂基因多态性与IgA肾病预…

目的：探讨白细胞介素－１受体拮抗剂（ＩＬ－ｌｒａ）基因多态民生与ＩｇＡ肾病（ＩｇＡＮ）远期预后的联系。方法：７１例原发性ＩｇＡＮ，随方过程中肾功能变化分为两组：Ａ组病例随方１０年以上肾功能保持正常：Ｂ组病例则在阴访过程中出现肾功能不全。ＩＬ＿１ｒａ基因类型用ＰＣＲ方法测定。结果：Ｂ组平均携带ＩＬ－１ｒａ基因ＩＬ１ＲＮ２等位基因的频率（１７．６％）高于Ａ组（１０％），但统计学差异不显。Ｂ组中反复肉     

珍珠花丛生芽的诱导及生根条件的研究

诱导珍珠花（Ｓｔａｐｈｙｌｅａ ｂｕｍａｌｄａ ＤＣ）丛生芽的最佳培养基为ＭＳ基本培养基附加ＮＡＡ０．２ｍｇ．Ｌ＾－１和ＢＡ５ＭＧ．ｌ＾－１,无菌苗在１／２ＭＳ培养基中附加ＮＡＡ１ｍｇ．Ｌ＾－１、活性碳０．４５ｇ．Ｌ＾－１、硫胺素１ｍｇ．Ｌ＾－１、蔗糖２０ｇ．Ｌ＾－１能长根形成完整植株。     

部分乌骨鸡血浆酯酶(Es-1)多态性研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对我国７０－８０日龄的泰和、南城、同安白绒、莆田白绒、雪峰、黑羽以及保群泰和７个乌骨鸡类群共３９３羽乌骨鸡的血浆酯酶多态性进行了测定分析,结果表明,所测乌骨鸡类群麦,Ｅｓ－１位点由复等位基因Ｅｓ－１＾Ａ、Ｅｓ－１＾Ｂ和Ｅｓ－１＾Ｃ所支配,其中Ｅｓ－１＾Ｂ基因控制的条带可进一步划分为Ｅｓ－１＾Ｂ１,Ｅｓ－１＾Ｂ和Ｅｓ－１＾Ｂ２。各乌骨鸡类群Ｅｓ－１位点主要基因型为ＡＢ和ＢＢ型,ＡＡ,ＢＣ和ＡＣ型频率较低,各鸡群Ｅｓ－１＾Ｂ频率均有高于Ｅｓ－１＾Ａ的趋势,此外,保种群泰和乌骨鸡的Ｅｓ－１＾Ｂ频率（０．７５４９）明显高于江西省泰和县原种场的泰和乌骨鸡（０．６２５０）。     

葛根素对家兔肠系膜微循环的影响

目的：观察葛根素（Puerarin）对家兔动脉血压、心率及其肠系膜微循环的影响。方法：采用微循环研究技术,随机分为正常对照组、微循环障碍组（NE）、微循环障碍改善组（生理盐水组、葛根素组）,观察各组给药前,给药后1、5、10、20、30、60min对微动脉、微静脉的管径、血流速度和血流量变化及动脉血压、心率的变化。结果：葛根素各组给药后均表现出家兔肠系膜微动脉和微静脉血管扩张,血液流速加快,血流量增加（P〈0.05或P〈0.01）,葛根素对家兔动脉血压、心率无显著性影响（P〉0.05）。结论：葛根素能使肠系膜微动脉和微静脉血管扩张、血液流速加快、血流量增加,但对家兔的动脉血压、心率无显著影响。     

Chronic stress induced proliferation and activation of mast cells of gastric antrum in rats

To explore chronic eration and activation of mast heterotypic stressors induced prolifcells in gastric antrum mucosa by ultrastructure alterations of mast cells, chronic unpredictable heterotypic stressors were used as a study model. The mean immunofluorescence magnitude of mast cell protease 1 （MCP-1） taken from chronic stress rats were 37.4±7.7, significantly higher （p〈0.05） than the value of normal control group （24.8±5.6）. Chronic unpredictable haterotypic stressors appeared also to induce ultrastructure alterations of mast cells. It indicated that mast cells were proliferated and activated, while mast cell granules were hyperplasiaed. Most granules had obvious intragranular changes with loss of electron-dense material. The morphologic evidence showed that macrophages and leukocytes infiltrated in chronic stress rats. Some granules of leukocytes adhered to the surface of mast cell, and formed a bridge. Macrophages phagocytized the mast cell granules.     

改进双抗夹心ELISA用于筛选单抗杂交瘤细胞株

本文利用改进双抗夹心ELISA筛选一种可测定血清样品中与血浆蛋白结合的蛋白质药物的单抗。用兔抗K102多抗经亲和层析纯化并包被后,加入用10%猴血浆PBS还原后的抗原K102,再加入杂交瘤细胞株上清液和HRP-羊抗鼠IgG、底物反应液筛选阳性单抗杂交瘤细胞株。结果用改进后的双抗夹心ELISA筛成功地选出6株能稳定分泌针对K102的单抗杂交瘤细胞株,分别命名为1C9、2D7、3E2、5F4、5F6、6B9;细胞株产生的单抗用ELISA法能检测出血清样品中的K102的浓度。提示改进的双抗夹心ELISA可用于针对与血浆蛋白结合的蛋白质药物的单抗杂交瘤细胞株的筛选。     

Optical dynamic imaging of the regional blood flow in the rat mesentery under the effect of noradrenalin

The regional blood flow in the rat mesentery under the effect of noradrenalin is monitored using the laser speckle imaging method. The results show that at the third minute of application of noradrenalin, the blood flow begins to decrease, and the venule blood flow decreases more rapidly than that in the arteriole. Five minutes later blood flow in part of blood vessels begins to resume and the blood flow in the arteriole recovers more quickly than that in the venule. These suggest that laser speckle imaging can obtain the temporal-spatial characteristic of blood flow in mesentery without the need of scanning. It provides a new approach for investigating the change of regional blood flow in the mesentery in microcirculation studies.     

Smurf2单克隆抗体的制备与鉴定

Smad泛素调节因子家族的两个E3泛素连接酶成员Smurf1和Smurf2 (Smad ubiquitin regulatory factor 1 and 2)具有至少80％的同源性.为了更好地研究它们的功能,需要获得一个能区分Smurf1和Smurf2的单克隆抗体.选取Smurf2与Smurf1蛋白序列中仅有的非同源区域序列作为抗原免疫Bal b/C小鼠,成功制备若干株能稳定分泌抗Smurf2抗体的杂交瘤细胞株.对所获得的单克隆抗体的效价和特异性等进行一系列检测,结果表明该抗体能特异性地识别过表达及细胞内源Smurf2蛋白.此外该抗体能被应用于Western blot和免疫荧光实验,从而为深入研究Smurf2的细胞生物学功能提供了良好的实验基础.     

B19 单倍型鸡 BNK 蛋白单克隆抗体的制备

摘要: 目的 体外构建稳定表达鸡自然杀伤细胞( Natural killer,NK) BNK 蛋白的细胞系,制备 BNK 蛋白的单克隆抗体,为鸡 BNK 蛋白及 NK 细胞的研究提供便利。方法 利用 BNK19 原核表达产物免疫 BALB/c 小鼠,体外稳定表达疫病敏感性 B19 单倍型鸡 BNK 蛋白( BNK19) 的真核细胞系筛选单克隆抗体。结果 用稳定表达 BNK 蛋白的真核细胞系筛选到 2 株 BNK19 特异性单克隆抗体。结论 获得的单克隆抗体经鉴定具有免疫学活性,为鸡 BNK 蛋白及 NK 细胞的作用机制研究提供了条件。     

散花紫金牛(Ardisia conspersa)醇提物对大鼠肠系膜微循环的影响

目的探讨散花紫金牛醇提物对微循环的影响.方法采用肠系膜滴加盐酸肾上腺素建立大鼠微循环急性障碍模型,检测肠系膜微动脉管径、毛细血管网交点数、血液流态、血液流速的改变和血流恢复时间等指标.结果散花紫金牛醇提物能显著拮抗微循环急性障碍模型大鼠肠系膜微动脉的收缩作用,改善血液流态,提高肠系膜毛细血管网交点开放率,缩短微循环障碍的恢复时间.其中以高剂量组作用最强,呈现明显的量效关系.结论散花紫金牛具有明显改善微循环的作用.     

抗人骨桥蛋白单克隆抗体制备及其特异性研究

利用RT-PCR技术克隆人骨桥蛋白(hOPN)基因,构建OPN原核表达质粒pET-32a(+)-hOPN,转化BL21菌株,经IPTG诱导表达重组人骨桥蛋白(rhOPN).以纯化的rhOPN为免疫原,免疫BABL/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞NS1融合.通过有限稀释法进行克隆和间接ELISA筛选,获得抗人OPN蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株,以ELISA、Western blot对抗体特异性进行鉴定.通过竞争抑制试验对单克隆抗体识别抗原位点进行分析.结果共获得2株抗人OPN单克隆抗体,分别命名为8F1和2B5,亚型测定皆为IgG1.通过细胞侵袭抑制试验检测,2株抗人OPN mAb皆能很好地抑制细胞迁移.本研究成功获得了抗人骨桥蛋白的特异性单克隆抗体,为进一步研究OPN蛋白在自身免疫病和肿瘤中的功能提供了重要的工具.     

Nogo-A is a myelin-associated neurite outgrowth inhibitor and an antigen for monoclonal antibody IN-1

The capacity of the adult brain and spinal cord to repair lesions by axonal regeneration or compensatory fibre growth is extremely limited. A monoclonal antibody (IN-1) raised against NI-220/250, a myelin protein that is a potent inhibitor of neurite growth, promoted axonal regeneration and compensatory plasticity following lesions of the central nervous system (CNS) in adult rats. Here we report the cloning of nogo A, the rat complementary DNA encoding NI-220/250. The nogo gene encodes at least three major protein products (Nogo-A, -B and -C). Recombinant Nogo-A is recognized by monoclonal antibody IN-1, and it inhibits neurite outgrowth from dorsal root ganglia and spreading of 3T3 fibroblasts in an IN-1-sensitive manner. Antibodies against Nogo-A stain CNS myelin and oligodendrocytes and allow dorsal root ganglion neurites to grow on CNS myelin and into optic nerve explants. These data show that Nogo-A is a potent inhibitor of neurite growth and an IN-1 antigen produced by oligodendrocytes, and may allow the generation of new reagents to enhance CNS regeneration and plasticity.     

黄曲霉素M1间接竞争ELISA的建立及其在牛奶中的应用

利用高特异性单克隆抗体,建立黄曲霉素M1的间接竞争ELISA检测方法。棋盘法优化了包被抗原及酶标抗体的最佳稀释倍数。包被抗原和酶标抗体的最佳工作浓度分别为1∶15000和1∶2000。该方法的线性范围为(0.1—8.1)ng·mL-1。除了与黄曲霉素B1的交叉反应为35%外,与黄曲霉素B2、黄曲霉素G1及黄曲霉素G2的交叉反应均小于1%。在牛奶实际样品检测的回收率均大于70%,而且检测过程在10min以内即可完成。该方法灵敏度高,特异性强,而且操作简单,适合多样本的快速筛查,为黄曲霉素M1的高效检测提供了一个良好的选择。