人体嗜酸乳杆菌的分离与筛选

从昆明地区初生婴儿粪便中分离到１２株嗜酸乳杆菌,从中筛选出一株生长繁殖快、产酸能力强、凝乳状况及风味较好的优良菌株Ｌ３６,该菌株在牛乳中培养８ｈ活菌数可达１２×１０９个／ｍＬ,并能耐受质量分数为１０％的胆酸盐和０５％的酚．经过二年在牛乳中的连续培养及多次移殖,产酸能力显著提高,在牛乳中培养４８ｈ酸度从初分离时的８７５°Ｔ提高到１１３７°Ｔ,耐氧能力也有提高．     

嗜酸乳杆菌有氧驯化和糖发酵特性的研究

采用逐渐驯化法对Lactobacillus.acidophilus Ind-1、L.acidophilus Bulqaria和L.acidophilus Lak-cid进行了有氧驯化,获得了L.acidophilus La-XH1和L.acidophilus La-XH3两耐氧菌株.形态学观察,两株菌落呈圆形,隆起,乳白色,光滑,直径1~2 mm.显微镜观察,该菌为革兰氏阳性菌,杆状,两端钝圆,以单个、成双和短链出现,不运动,无鞭毛,无分支.可以发酵单糖和双糖,而对多糖、醇类无发酵性.     

嗜酸乳杆菌生长状况及抑菌特性的研究

用MRS培养基培养嗜酸乳杆菌,测定其生长曲线,并以金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌为指示菌株,利用杯碟法检测嗜酸乳杆菌对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌作用。结果发现在37℃的恒温箱中培养24h后,通过测量抑菌圈大小,可得知嗜酸乳杆菌对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌有明显的抑菌作用。     

嗜酸乳杆菌在玉米酶解液中发酵特性的研究

以膨化玉米为原料 ,采用全酶法糖化工艺进行液化、糖化 ,获得了DE值在 6 0 %以上的玉米酶解液 ,测定了嗜酸乳杆菌在玉米酶解液中的生长曲线、产酸曲线 ,温度、pH值、基质糖度、脱脂大豆粉对发酵作用的影响 ,发酵前后基质中氨基酸组成的变化。结果表明 ,在适宜的培养条件下 2 4h后 ,嗜酸乳杆菌的生长达到稳定期 ,其活菌数达到 3 6× 10 8cfu/ml;培养 36h后 ,酸度达到 0 78%以上 ,发酵后的基质中大多数游离氨基酸的含量明显增加。     

对平菇浸汁促进嗜酸乳杆菌生长的研究

就平菇浸计可促进嗜酸乳杆菌的生长进行了初步研究．研究结果表明，平菇浸汁对嗜酸乳杆菌在还原脱脂乳中的生长具有明显的促进作用，添加５％～１０％的平菇浸汁，可大大缩短嗜酸乳杆菌生长的世代时间，提高其产酸速率；在３７℃下１０ｈ的培养，其中的活菌数含量较对照组大大提高，可达１０８个／ｍＬ．     

大蒜油工艺条件优化及其抑制嗜酸乳杆菌体外实验研究

目的：以蒸馏提取法为基础,对大蒜油工艺条件的进行优化;用实验产物大蒜油进行嗜酸乳杆菌体外抑菌试验。方法：进行四因素三水平的正交实验,由此确定提取最佳工艺条件组合;以平板培养法测定大蒜油对嗜酸乳杆菌的最小抑菌浓度。结果：由正交实验确定最佳工艺条件组合为：发酵温度40℃;发酵时间150min;发酵pH值6.0;料液比1：3;经重复性试验证明该工艺条件组合能够稳定地将出油率控制在0.136%,接近相关文献报道结果。大蒜油对嗜酸乳杆菌的最小抑菌浓度为1.36×10^-5mg/ml。结论：蒸馏法可作为提取大蒜油的简便、稳定、可靠的方法。大蒜油对嗜酸乳杆菌有抑制作用。     

CRISPR技术对发酵乳制品中嗜酸乳杆菌的检测应用

借助CRISPR-HOLMES系统,以市售酸奶作为检测对象,检测了其中的嗜酸乳菌含量.结果表明:CRISPR技术可作为一种有效直观的方法实现对发酵乳制品中嗜酸乳杆菌的定性检测.     

影响嗜酸乳杆菌在牛奶中生长因素的研究

对嗜酸乳杆菌（Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）在脱脂乳中生长促进剂和脱脂乳中的产酸及总菌数的影响因素进行了研究．结果表明，５％葫萝卜汁、啤酒对嗜酸乳杆菌在脱脂牛乳中的生长有明显作用；另采用嗜热性球菌与嗜酸乳杆菌单独培养，混菌发酵工艺时，增加Ｌ．ａ的比例，发酵产酸加快Ｓ．ｔ与Ｌ．ａ的菌种比例关系发生交化。当Ｌ．ａ：Ｓ．ｔ＝２：１时，Ｌ．ａ的菌数水平起过Ｓ．ｔ。     

嗜酸乳杆菌对宫颈上皮细胞SiHa细胞的黏附性研究

目的:通过对嗜酸乳杆菌与SiHa细胞(宫颈癌鳞状上皮细胞癌)黏附性能的研究,为开发嗜酸乳杆菌相关微生态制剂提供实验室数据.方法:运用光镜分析嗜酸乳杆菌对传代培养的宫颈上皮细胞SiHa细胞的黏附指数.结果:嗜酸乳杆菌在黏附1 h和2 h后进行效果观察,随着黏附时间的延长,黏附效果在2 h较佳.结论:嗜酸乳杆菌对SiHa细胞的黏附能力强.     

嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶基因的克隆与表达

利用分子生物学方法对嗜酸乳杆菌AS1.1854菌株的亚油酸异构酶基因进行克隆与表达.培养菌体后提取总DNA,用PCR法扩增其亚油酸异构酶基因,再将其克隆到pET30a载体上,转入到大肠杆菌BL21株中表达,在低温下诱导表达出重组蛋白,并用Ni2 金属鳌合层析对重组蛋白进行分离和纯化.通过实验,得到了亚油酸异构酶的基因,成功转入到载体中,表达出了可溶性的重组蛋白,并对其进行了纯化.实验表明,在原核细胞中可以表达出可溶性重组亚油酸异构酶,以200 mmol/L的咪唑洗脱液进行洗脱可以获得目标蛋白.     

嗜酸乳酸杆菌生物学特性研究及其发酵参数优化

采用均匀设计法优化嗜酸乳酸杆菌的发酵培养基,研究一株可作为益生素使用的嗜酸乳酸杆菌CGMCC0842的生物学特性,包括菌体生长曲线、耐热存活率、耐酸存活率、贮藏存活率等．结果表明,嗜酸乳酸杆菌的活菌浓度在开始时缓慢上升,3h后从10^5CFU／mL迅速上升,第18h超过10^11CFU／mL,到第32h,细菌数量则缓慢下降,菌体的适宜收获期宜在发酵后18～23h．嗜酸乳酸杆菌的75℃处理15min耐热存活率为62．5％,贮藏1个月的存活率为59％,pH2．0处理6h的存活率69．5％．优化的发酵参数为：时间,20h;葡萄糖,110g／L;蔗糖,10g／L;胰蛋白胨,5g／L;酵母浸粉,30g／L;柠檬酸盐,12g／L．研究表明该乳酸杆菌CGMCC0842是一株优良的饲用益生素菌种．     

一株耐酸L-乳酸生产菌的Co60诱变选育

对嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)CICC 6005菌株进行Co60诱变,从突变体中选育得到1株生长快速的耐酸突变菌株LS-8.该菌株在pH值3.6的条件下发酵72h、在pH值3.8的条件下发酵104h,L-乳酸产量分别达9.2 g/L和16.5g/L.     

葡萄酒野生酿酒酵母的筛选及其生物特性的研究

从蓬莱葡萄酒产区君顶酒庄霞多丽葡萄果实表皮和葡萄园土壤中分离纯化得到200个单菌落,经初筛和复筛,获得性能较好的菌株11株,对其进行26SrDNA D1/D2区序列分析、形态学观察和生理生化测定,将编号为PJ16的菌株鉴定为酵母属酿酒酵母种（ Saccharomyces cerevisiae）。通过耐受性及发酵性能测试,表明菌株PJ16适合用于酿造葡萄酒。所酿葡萄酒的香气成分,如正己醇、1-壬醇、2-壬醇、壬醛、苯甲醛、乙酸乙酯、乙酸异戊酯、异戊酸乙酯、乳酸乙酯、乙酰苯、苯并噻唑、2-乙酰基呋喃、2-甲基四氢噻吩-3-酮和β-突厥酮,浓度远高于对照组商品酵母所酿葡萄酒,体现出酿酒酵母PJ16的优良特性。     

2-酮基-L-古龙酸高产菌株的选育

实验采用离子注入技术对"二步发酵法"生产维生素C中的伴生菌-苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)进行处理,筛选维生素C的前体2 酮基 L 古龙酸的高产伴生菌菌株,以提高发酵生产水平。经过初筛、复筛,获得了使产酸活性提高的突变株,在筛选的646株菌中,有3株菌使收率提高了1-4%。     

弱化H+-ATPase的德氏乳杆菌乳酸亚种的生理特性研究

以德氏乳杆菌乳酸亚种（L5）为出发菌株,以新霉素为选择 "压力",获得了弱化H+-ATPase变异菌株5M1、5M6和5B1。与出发菌株L5（对照）相比,各变异株的H+-ATPase活力分别下降51.3%、27.7%和34.3％。对变异株5M1、5M6和5B1的形态及其生理特性研究表明,变异株的细胞较菌株L5细长。L5的ATP含量为0.63×10-18mol/个,明显低于变异菌株;变异株5M6和5B1的ATP含量分别为1.18×10-18mol/个和1.38×10-18mol/个;变异株5M1的ATP含量最高,约为1.60×10-18mol/个。当各菌株在MRS培养基中37℃培养12h后,变异株表现出较高的谷氨酸到γ-氨基丁酸的转化率,其中变异株5M6最高,为16.73%,变异株5M1和5B1谷氨酸转化率居中,分别为15.6%和15.4%,出发菌株L5的谷氨酸转化率最低,为13.91%。与出发菌株L5相比,变异株5M6、5M1和5B1的H+-ATPase活性下降导致其耐酸性和耐盐性降低。     

保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌在羊奶中的发酵特性研究

对从商业乳酸菌发酵剂分离纯化的8株乳酸菌在羊奶中的发酵特性进行了研究,结果表明:L.b-300和L.b-800菌株的产酸能力较强,S.t-499菌株的产黏能力较强,L.b-300和S.t-800菌株的产香能力较强,8株乳酸菌的后酸化能力均较弱.L.b-300和S.t-499菌株是适合发酵羊奶酸奶的乳酸菌.     

脂肪酶高产菌株的筛选及酶学特性研究

从富油土壤中分离筛选到40株脂肪酶产生茵,其中060805茵株产脂肪酶的能力较强,根据其形态特征、生理生化鉴定及16s rDNA鉴定,初步鉴定为短波单胞茵.060805茵株发酵产酶需油脂的诱导,同时也依赖Mg2 ,培养基中不添加Mg2 时产酶量很少,微量的Mg2 就能激活茵体产酶.蔗糖等糖类物质不利于060805菌株产脂肪酶.该酶的最适作用温度为35℃,最适pH为6.0;而且在60℃保温60 min酶活基本不损失,在pH 5.0～8.0范围内稳定.     

纤维素降解菌的筛选与诱变育种

采用羧甲基纤维素(CMC)平板初筛和50℃培养,筛选到一株纤维素酶活力较高的耐高温霉菌MY菌株,其CMC培养基最适pH为6.0,培养温度为40℃,最佳产酶时间为5d.以MY菌株为出发菌株,分别采用紫外线和硫酸二乙酯诱变,以透明圈直径与菌落直径的比值(HC值)提高30%以上或菌落形态发生明显变异为筛选指标,共筛选到97株突变株;通过测定粗酶液CMC酶活力,从中筛选出29株CMC酶活力提高30%以上的菌株;结合突变菌株的传代稳定性实验,最后筛选得到1株性能优良的霉菌MY004突变株,其CMC酶活力比原始菌株MY提高了80.6%.