半滑舌鳎人工催产技术研究

为了提高半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)苗种生产的效率,获得批量合格的受精卵,采取控温控光和营养强化培育等措施,使亲鱼性腺全部发育,进行人工催产和人工授精的研究.结果表明多种激素及其激素组合均能有效的对半滑舌鳎进行催产,其中以LRH-A3+DOM的效果较好.在5种催产方案中23℃的效应时间为35-52h,各方案之间差异不显著.人工催产卵的卵径为1.02±0.13mm,明显低于自然产卵的卵径,但受精率、出卵率和孵化率和对照组差异不明显.统计其中10条鱼的催产情况;总浮卵率89.4%,总受精率65.3%,总孵化率为44.8%.共收孵化前卵1060ml,孵化鱼苗约83万尾.     

半滑舌鳎的育苗效果及生物学特征的观察

在水温为21.0～23.7 ℃,盐度为33.5的条件下,用约7.8×105粒受精卵孵出仔鱼约55万尾,孵化率达70 %左右,再经过79 d的培育,培育出幼鱼2.287×105尾,成活率达到41.5 %.初孵仔鱼平均全长(3.16±0.22)mm;初孵仔鱼至孵化后3日龄为前期仔鱼,冠状幼鳍形成,大部分仔鱼已开口,逐渐建立...     

泥鳅原始生殖细胞的发生,迁移和性腺分化

通过光学显微镜对泥鳅原始生殖细菌的发生,迁移和性腺分化进行初步研究,发现泥鳅 ＰＧＣｓ最初出现在原有肠晚期预定中胚层内,体节中胚层与侧板中胚层分离后而位于侧板中胚层。     

人工注射催产激素对半滑舌鳎卵巢发育的影响

采用形态学测量与组织切片技术,研究了人工注射催产激素对半滑舌鳎卵巢发育的影响.结果表明:注射催产激素之后,半滑舌鳎的卵巢发育速度显著加快,性腺指数(GSI)迅速增大、肝脏指数(HSI)随卵巢发育不断降低、肥满度(CF)最高值出现在实验的48 h;组织切片显示,催产激素能够促进卵巢更快地发育到下个时期,Ⅳ期末的卵巢在激素首次注射后36 h发育到第Ⅴ期的卵子成熟期,60 h开始进入第Ⅵ期.人工注射催产激素有利于缩短亲鱼产卵周期,增加成熟卵子的数量,便于人工繁殖过程中集中大量采卵.本研究结果可为半滑舌鳎人工繁殖生产中高效催产方式的选择提供理论依据.     

稀有鮈鲫性腺分化的组织学观察

以丰年虫为饵料,运用组织学方法,对稀有鮈鲫性腺分化过程进行了观察.结果表明:在水温(25±1)℃条件下,稀有鮈鲫卵巢分化时间明显早于精巢.卵巢解剖学上的分化发生在孵出后21d左右,其主要标志为卵巢腔的形成以及形成成簇发育的卵原细胞群;细胞学上的分化发生在35日龄左右,标志为初级卵母细胞的形成.精巢分化的解剖学标志为输精管原基及精小叶雏形的形成,分别开始于50日龄及60日龄左右;细胞学上的分化发生在60日龄左右,标志为初级精母细胞的形成.     

花背蟾蜍性腺分化的组织学观察

通过组织学方法观察了花背蟾蜍(Bufo raddei)原始生殖细胞(PGCs)的迁移、生殖嵴的形成、初生性腔的形成及性腺的分化。以期待提供更多有关花背蟾蜍的生物学资料。结果表明:花背蟾蜍生殖嵴是由PGCs迁入至腹腔静脉腹侧的背肠系膜后,与此处的体细胞共同形成。当蝌蚪发育至Gosner 23期时生殖嵴出现;Gosner 27期生殖嵴中央部位可观察到小的裂隙,即初生性腔;Gosner 33期在部分个体的原始生殖腺中可观察由初生性腔演化而成的次生性腔,将分化为雌性的标志;Gosner 38期部分个体原始生殖腺中可观察精小囊以及初级精原细胞,即将要分化为雄性的标志。花背蟾蜍生殖腺的分化和发育与中国林蛙、泽蛙等两栖类基本相同,但在生殖嵴和初生性腔的形成均早于它们。     

鸟类胚胎消化道原基细胞分化的研究

本文用不同发育时期鹌鹑胚与鸡胚的种间移植实验结果表明,相当于鸡胚H.＆ H.17—23期的鹌鹑胚后肠原基尚不具备自主分化的潜能,只能并入寄主大肠发育,但不同区域的消化道中胚层间质细胞对内胚层细胞具有不同的诱导能力.相当于鸡胚H.＆ H.28—23期的鹌鹑胚后肠原基已具有自主分化的潜能,在寄主鸡胚体腔内能定向发育成鹌鹑大肠.本文还对移植系统中消化道原基细胞的分化进行了分析.     

浅谈筒壁半滑施工及应用

本文主要从筒仓的施工方法和工艺,以及省时省料确保质量进度方面加以阐述。     

大鳞副泥鳅性腺发生和分化的组织学研究

通过人工繁殖技术获得大鳞副泥鳅幼体,采用石蜡显微切片技术对幼体性腺发生、分化的组织学特征进行了系统观察.结果表明大鳞副泥鳅是在出膜后14 d出现了未分化性腺,卵巢分化始于25日龄,到45日龄分化完全;精巢则是分化于30日龄,于75日龄分化为I期精巢.卵巢分化早于精巢.从性腺分化开始,将要发育为卵巢的性腺还表现为体积快速增大,向体腔中间靠拢,横截面变宽,而将要发育为精巢的性腺则呈两端尖中间稍突的梭形,增生并不明显,这些特征可能与雌雄性腺的发育和生殖细胞的分化速度有关,可以作为大鳞副泥鳅性腺早期分化的形态特征.     

实验用五指山小型猪胚胎生殖细胞的分离培养

目的对从猪的原始生殖细胞分离获得胚胎干细胞的方法进行初步研究。方法胎儿取自怀孕26～28d的实验用五指山母猪。分离胎儿生殖嵴获得PGCs,接种于STO饲养层上,以DMEM+2mmol/L谷氨酰胺+0.1mmol/L非必需氨基酸+0.1mmol/Lβ-巯基乙醇+100IU/mL青霉素+100μg/mL链霉素+15%FCS作为培养基,对细胞进行培养传代。结果培养的细胞传至4～5代,形态多样,经AKP染色、SSEA-1免疫荧光染色、Oct-4免疫荧光标记等方法鉴定为阳性,具有胚胎干细胞的特征。     

C-banding pattern and nucleolar organizer regions of Cynoglossus semilaevis Günther, 1873

The C-banding pattern and nucleolar organizer regions of the metaphase chromosomes of Cynoglossus semilaevis are reported. The interstitial regions in all chromosomes including the pair of sex chromosomes had positive C-bands, and the 6th and 12th pairs of chromosomes were entirely stained in most cases. Some chromosomes such as the 1st, 2nd, 7th, 8th, 9th and 10th pairs showed C-bands at centromeric or distal ends. The C-banding heretochromatin occupies 30.03% of the total chromosome surface in C. semilaevis,which is similar to that of amphibians such as Mixophyes fasciolatus (30.2%) and M. schevilli (20.7%), but is rather lower than that of cephalochordate Branchiostoma belcheri (54.3%). Silver staining revealed a single pair of nucleolar organizer regions (NORs) located in the telomeric regions of Chromosome 2. The association of NORs with heterochromatin observed in vertebrates also occurs in C. semilaevis as the telomeric regions of Chromosome 2 are always stained positively with C-banding.     

鸭胚胎血液中PGCs数量及其外源DNA的体内转染

抽取了麻鸭和骡鸭胚胎发育第14－20期的血液，制作血涂片，PAS染色，观察血液中的原生殖细胞的含量，并对各个时期血液中原生殖细胞的含量进行了统计，最高含量都出现在第16期,分别为8．9752％和2．1871％，用In vivo Gene Delivery Systern和pEGFP-N对PGCs进行了外源DNA的体内转染。结果在6只胚胎中的3只中发现GFP报告基因的表达。     

静宁鸡原生殖细胞的分离及形态学观察

原生殖细胞(PGCs)是配子的始祖细胞,它可发育演变生成卵细胞或精子细胞.上世纪90年代发展了体外培养PGCs技术,现在PGCs已能通过体外培养形成多潜能干细胞(ES),对于研究体外分化机制和细胞治疗具有重要意义.文章通过对静宁鸡种蛋进行36~82 h孵化,并对其血涂片经PAS染色后,在显微镜下观察其原生殖细胞(PGCs)的形态结构,以便为鸡的胚胎干细胞分离培养奠定基础.实验结果:原生殖细胞呈圆形或卵圆形,明显较其他细胞大2~4倍,PGCs的细胞核颜色较深,偏向一侧,后期常聚成一团.     

黄边糙鸟蛤生殖腺的组织学研究

采集黄边糙鸟蛤成年个体,并进行活体解剖和显微镜观察.结果表明:性成熟个体为雌雄两性功能同体存在的同步性雌雄同体.性腺由树枝状分枝的生殖管、输精管和输卵管组成.生殖管反复分枝成生精小管、生卵小管及其末端膨大的生殖泡囊.性腺由外膜及其内生精小管和生卵小管盘绕交错排列构成.外膜含单层上皮及薄层肌肉,生殖小管和泡囊皆由位于基膜上的生殖上皮构成,生殖上皮不断向腔内增殖各阶段生殖细胞.本文详细描述了精原细胞、卵原细胞、精母细胞、卵母细胞以及精子和卵子的形态结构.此外,还报道了极少数黄边糙鸟蛤性腺存在一些雄性滤泡转化为雌性滤泡现象.     

甜菜坏死黄脉病毒不同分离物外壳蛋白的研究

应用SDS-PAGE和PCR—SSCP分析技术，对新疆不同地区的BNYVV分离物进行分析，结果表明：12个分离物蛋白质外壳的蛋白亚基分子量均为20kD；来自库尔勒的K4和K5分离物编码外壳蛋白质的基因不同于其他地区和本地区的分离物，二者彼此间也不相同。     

大鳍鳠消化系统胚后发育的组织学研究

利用组织切片技术首次在显微水平对大鳍消化系统的胚后发育特点作了系统观察研究 .结果表明 :食道内侧纵行肌纤维属于粘膜下层 ,而不是肌层 .胃腺的分化较早 .食道胃衔接处环肌在成鱼为横纹肌 ,仔、稚鱼及幼鱼期发育不完善 ,横纹不典型 .肠上皮的纹状缘出现较早而且发育较快 ,1～ 3日龄时就可见 ,7～ 8日龄时很发达 .5日龄仔鱼肝后部开始贮存脂质 .胰腺为弥散型 ,主要分布于肝脏边缘、胆囊和肠道周围、肠系膜上和脾门部及其周围等处 ,少量随肝门静脉入肝 ,分布于肝叶的边缘实质中     

用HPLC法测定红酵母中β-胡萝卜素的含量

对从红酵母中提取β－胡萝卜素的方法进行了初步探讨，并以高压液相色谱（ＨＰＬＣ）方法测定了红酵母中β－胡萝卜素的含量，采用ＯＤＳ为固定相，以甲醇∶氯仿（７０∶３０）为流动相，检测波长为４５０ｎｍ，该方法准确、快速、可靠．平均回收率为９２．０％．     

Electrospun Nanofibers of Hydroxyapatite/Collagen/Chitosan Promote Osteogenic Differentiation of BMSCs

Bone tissue engineering, aiming at developing bone substitutes for repair and regeneration of bone defects instead of using autologous bone grafts, has attracted wide attention in the field of tissue engineering and regenerative medicine. Developing biomimetic biomaterial scaffolds able to regulate osteogenic differentiation of stem cells could be a promising strategy to improve the therapeutic efficacy. In this study, clectrospun composite nanofibers of hydroxyapatite/collagen/chitosan （ HAp/Col/CTS ） resembling the fibrous nanostructure and constituents of the hierarchically organized natural bone, were prepared to investigate their capacity for promoting bone mesenchymal stem cells （BMSCs） to differentiate into the osteogenic lineage in the absence and presence of the osteogenlc supplementation, respectively. Call morphology, proliferation and quantified specific osteogenic protein expression on the electrospun HAp/Coi/CTS scaffolds were evaluated in comparison with different controls including dectrospun nanofibrous CTS, HAp/CTS and tissue culture plate. Our remits showed that the nanofibrous HAp/Col/CTS scaffolds supported better spreading and proliferation of the BMSCs than other substrates （ P 〈 0.01 ）. Expressions of osteogenesis protein markers, alkaline phosphatase （ALP） and Col, were significantly upregulated on the HAp/Col/CTS than those on the CTS （P 〈0.01） and HAp/ CTS （P 〈 0. 05 ） scaffolds in the absence of the osteogeulc supplementation. Moreover, presence of osteogeulc supplementation also proved to enhance osteogeule differentiation of BMSCs on HAp/ Col/CTS scaffolds, indicative of a synergistic effect. This study highlights the potential of BMSCs/HAp/Col/CTS cell-scaffold system for functional bone repair and regeneration applications.