动物模型与脾气虚证超微结构研究

为深入探讨中医学的临床及有关机理，发展了中医基础理论的实验研究。通过中医基础理论研究工作实践，动物模型发挥了应有的作用。能被公认的中医证的模型，是证的实验研究关键。以脾气虚证为例，在兄弟单位动物模型的基础上，与中兽医专家共同研究、反复论证，采用马属动物驴作为实验动物，复制脾气虚证获得成功。在此基础又复制了大白鼠脾气虚证模型。这为多学科研究脾气虚证提供了基本条件。在电子显微学领域，对上述动物模型进行了超微结构研究。脾主运化方面观察了十二指肠绒毛及其吸收上皮的微绒毛；脾主肌肉方面作了骨骼肌、心肌、肠平滑肌、血管平滑肌等包括其线粒体在内的超微结构观察、定量计测和图像分析研究。为阐明脾的主要功能是与能量代谢密切有关提供了超微结构水平具有统计学意义的科学数据。     

脾气虚证发生机理研究

选用马属动物驴和大白鼠为实验对象，按中医病因原理用多种方法建立脾气虚证动物模型，从生理学、病理学、细胞学、生物化学、免疫学、电镜学多角度，从宏观到微观，从形态到功能系统地对脾主运化、脾主肌肉、脾统血、脾旺不受邪进行研究。结果表明：（１）脾主肌肉包括了骨骼肌、胃肠平滑肌、心肌和血管平滑肌，以至于血小板那样具有肌球蛋白结构和肌力收缩功能的组织。（２）心肌和血管平滑肌线粒体的改变，以及心肌糖原、脂类物质减少，血小板收缩聚集能力下降，毛细血管脆性增加是脾不统血的主要表现。（３）红细胞膜蛋白变构，小肠微绒毛破坏，组织中糖原和脂类能源物质不足，氧化磷酸化作用下降构成的脾气虚中脾主运化在物质能量代谢方面最基本的内容。（４）脾旺不受邪包括免疫调节和屏障功能。（５）脾病胃亦病。该结果提示脾气虚证的发生机制，首先是在脾主运化的物质能量转化利用这个主要环节上。     

物质代谢的动力学模型及关联的中医脾气虚证

谷气是中医气的重要组成之一,谷气通过脾的运化,营养五脏六腑及各组织器官,以维持人体的正常生命活动.通过对人体物质及能量代谢的分析,建立了动力学模型来描述谷气在体内的运动.模型研究显示,能源物质(蛋白质、糖类和脂肪)的摄入或代谢障碍将引起血液各营养物质组分发生变化,因而引起血液中白蛋白量的降低、组织液体积的增加及机体乳酸生成量增大等脾气虚症状,且与以往临床和动物实验研究结果相一致.     

脾气虚证动物模型规范化的初步研究——部分免疫功能方面

目的　在脾气虚证动物模型规范化的初步研究中 ,探讨其部分免疫功能改变。方法　首先改进、完善脾气虚证模型的诊断标准和造模方法 ,然后观察其部分细胞免疫、非特异性免疫、红细胞免疫功能改变 ;同时与 5种目前有代表性的脾气 (阳 )虚证模型进行比较。动物采用WistarⅡ级大鼠 ,雄性 ,分为对照组、初步规范组、大黄组、耗气破气组、限量营养组、劳倦过度组和利血平组。初步规范组采用体质、苦寒泻下加耗气破气降气法造模 ,其他模型组采用相应常规方法造模。取样检测指标前进行游泳或寒冷负荷。结果　从胸腺湿重和指数 ,胸腺皮质厚度 ,脾脏中央动脉周围淋巴鞘直径 ,脾脏T淋巴细胞增殖功能 ,脾脏NK细胞对YAC 1肿瘤细胞杀伤率 ,脾脏巨噬细胞中性红吞噬活性等指标的改变看 ,初步规范组的造模结果与脾气虚证模型诊断标准有较高的符合率 ,包括自然恢复较慢 ,且与诊断标准的符合率明显优于目前 5种有代表性的脾气 (阳 )虚证模型。结论　本实验达到了初步优化、规范脾气虚证模型的目的。     

裙带菜降血脂及抗氧化活性的研究

对裙带菜降血脂和抗氧化活性进行了研究。动物实验表明：裙带菜可明显降低鼠血中总胆固醇、甘油三酯水平，提高高密度脂蛋白胆固醇含量。实验动物组谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶的活性明显高于对照组，这可有效地清除动物体内代谢所产生的自由基，使超氧负离子发生反应生成水和分子氧；它也可降低过氧化脂质水平，进一步起到延缓衰老的作用。所以，裙带菜等海藻不仅可作为菜肴，而且有良好的保健功能，可制成各种类型的保健品。     

中医脾胃学说的生化学研究进展

近二十多年来，我国脾胃学说和脾虚证的研究取得了可喜的成绩，国内学者从生化学角度对脾胃学说和脾虚证进行了较为广泛和深入的研究，从蛋白质、糖类和脂肪代谢到调节代谢的酶学和各种激素神经介质，从微量元素到分子生物学等方面都取得了可喜的成绩，这对脾虚证实质的阐明以及指导临床实践都有积极的意义。在动物实验方面，有人报导了脾虚证与Ｄ─木糖吸收率的关系，作者用番泻叶制造Ｗｉｓｔａｒ大白鼠脾虚模型，从动物实验角度证实了脾虚证发生时Ｄ─木糖吸收率降低，香砂六君子汤对脾虚动物模型的治疗，使Ｄ─木糖吸收率恢复正常，旁证了Ｄ─木糖吸收率是诊断脾虚证的可靠指标。首都医学院报导了大黄造型的脾虚动物、脂类的吸收显著低于正常组，与糖类有类似的结果。北京师范大学生物系报导了实验性脾虚动物致虚过程中血浆胃泌素含量的变化，发现脾虚组明显低于对照组。北京市中医研究所报导了利血平化脾虚小鼠脑内单胺介质的变化，结果表明，利血平化动物脑内去甲肾上腺素、多巴胺和５─羟色胺含量较正常动物明显下降，喂服四君子汤后，利血平化小鼠脑内单胺介质的下降有所回升，从而推测四君子汤对利血平化动物脑内单胺介质的合成可能起促进作用。北京师范大学报导了实验性脾虚动物结肠组织中Ｖ     

耐力跑训练对CCO、LDH活性组织化学特性影响

实验采用肌肉活检技术,运用现代组织化学方法,结合扫描显微分光光度计的方法,对6名普通受试者进行8周耐力训练前后右腿股外肌中有关代谢酶的活性的变化进行了对比观察.结果发现,经过8周的耐力跑训练后,股外肌中的细胞色素氧化酶(CCO),经训练活性提高44.2%(P<0.15);而乳酸脱氢酶(LDH)及三磷酸腺苷酶(ATP)的活性,练习前后无显著变化.     

川芎嗪对庆大霉素耳毒性的抗氧化作用研究

为了观察川芎嗪(TMP)对庆大霉素(GM)耳毒性豚鼠氧自由基生成的影响,探讨TMP对GM耳毒性损伤的保护作用。选取豚鼠作为实验动物,将豚鼠随机分为4组:正常对照组、GM组、GM+TMP组和TMP组。检测豚鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮合酶(NOS)活性、一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)含量,并结合听性脑干反应(ABR)测试和耳蜗HE染色技术。结果表明:GM+TMP组血清SOD活性明显高于GM组(P0.05),MDA含量较GM组明显减少(P0.001),NOS活性和NO含量明显低于GM组(P0.05),且听功能明显改善;耳蜗形态学改变与听力变化一致。TMP在一定程度上可以有效防护GM所致的耳蜗损伤,其机制可能与清除活性氧物质、抑制脂质过氧化反应的发生有关。     

昆虫成虫滞育的研究进展

本文综述了近年来有关昆虫成虫滞育的研究概况,阐述了昆虫成虫滞育的特点,滞育的生理生化变化,以及滞育与环境因素的关系。其中滞育的生理生化研究方面主要介绍了能量代谢和代谢物质的变化。     

一次急性运动对血液抗氧化能力和Na+-K+-ATPase的活性的影响

20只小鼠随机分成对照组和运动组。运动组小鼠进行45min游泳后即刻与安静对照组同时从眼眶取血样，测试血清内抗氧化物质超氧化物歧化酶(SOD)和脂质过氧化反应的代谢产物丙二醛(MDA)，同时测试了反映红细胞膜结构完整性的Na^ -K^ -ATPase的活性和反映体内代谢状况的血乳酸。结果显示：一次急性运动后SOD活性有上升趋势，MDA和血乳酸浓度水平明显升高，Na^ -K^ -ATPase的活性变化不大。本研究旨在通过探讨短时问、低强度运动对机体上述指标的影响，为中低强度的健身锻炼提供理论依据。     

东亚钳蝎提取物对致痫小鼠大脑GABAA受体活性的影响

目的:研究东亚钳蝎提取物对戊四氮致痫小鼠发作潜伏期的作用并探讨其机理。方法:采用戊四氮致痫小鼠模型,给予实验动物东亚钳蝎提取物灌胃,并以丙戊酸钠为对照,观察其对致痫小鼠发作潜伏期和大脑GABAA受体结合活性的影响。结果:东亚钳蝎提取物中剂量组(500 mg/kg)的惊厥潜伏期比模型鼠明显延长(p<0.05),大脑皮层GABAA受体的结合活性显著提高(p<0.001)。低剂量(250 mg/kg)和高剂量(1 000 mg/kg)治疗组与阳性对照药的作用相当。结论:东亚钳蝎提取物的抗癫痫作用机理可能与提高大脑皮层GABAA受体的结合活性有关。     

槲芪散对小鼠酒精性肝损伤的干预作用

目的观察高度白酒和红葡萄酒对肝脏的不同作用;分别从能量代谢和氧化应激两个方面阐述高度白酒可引起小鼠的酒精性肝损伤;同时探讨槲芪散治疗酒精性肝损伤的药理学机制。方法将昆明种雄性小鼠随机分为4组,正常组、红葡萄酒组、白酒模型组和槲芪散治疗组。造模14 d后,取血,采用酶标仪比色法测定血清中丙二醛(malondialdehydehyde,MDA)的含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的活性;取肝组织,进行HE染色,过碘酸-雪佛氏染色(schiffperiodicacidshiff,PAS染色);酶组织化学染色法检测葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase,G-6-P)、琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)以及ATP酶(adenosinetriphosphatase,ATPase)的活性。结果白酒模型组MDA含量显著升高(P<0.05),抗氧化酶类SOD和CAT的活性显著减低(P<0.05);能量代谢的相关酶类ATPase、SDH以及G-6-P活性下降;红葡萄酒组HE染色显示红葡萄酒对肝脏无损伤。槲芪散能够显著降低因高度白酒造成的血清MDA含量(P<0.05),提高抗氧化酶SOD(P<0.05)和CAT(P<0.05)的活性;同时能量代谢相关酶的活性提高以及肝糖原储备增加。结论实验表明长期大量酒精摄入能够造成酒精性肝损伤,而红葡萄酒对肝脏无损伤;槲芪散对酒精性肝损伤有明显的干预作用。     

基于气相色谱—质谱联用代谢组学技术研究保元汤对血虚证小鼠的影响

利用基于气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectrometer, GC-MS)的代谢组学方法考察了保元汤治疗血虚证小鼠的作用机制;对昆明种小鼠腹腔注射环磷酰胺(cyclophosphamide, CTX),建立了以白细胞减少为特征的血虚证小鼠模型,设立空白对照组、模型组、阳性对照组以及保元汤低、中、高3个剂量的给药组,连续给药14 d。采用GC-MS技术对各实验组小鼠的血清进行分析,获取差异性代谢物信息;采用主成分分析(principal component analysis, PCA)对空白对照组和模型组的代谢物进行分类,寻找并发现保元汤作用于血虚证模型小鼠后差异性代谢物的含量变化,同时检测各组小鼠血液生化指标,计算脾指数与胸腺指数。结果表明,保元汤能显著提升血虚证小鼠的白细胞数量,修复胸腺和脾脏的损伤,给药组小鼠代谢轮廓趋近空白对照组;血清中有10种差异性代谢物与CTX致免疫低下型血虚证相关,主要涉及亚油酸代谢等三条代谢通路,推测保元汤对血虚证的治疗作用可能通过调控脂肪酸类物质实现。     

高脂饲喂结合力竭游泳的气虚血瘀证动物模型的构建及评价

采用高脂饲喂结合力竭游泳的方法,构建新的气虚血瘀证动物模型,为相关药物研究提供有效载体。对模型大鼠进行表征观察,并检测了26个生化指标,涉及能量代谢、氧化应激、脂质代谢、免疫炎症、内皮功能以及凝血时间等多个方面。结果显示,模型大鼠呈现出精神萎靡,倦怠嗜睡,活性性差,舌质较空白对照组明显绛紫暗等反映气虚血瘀状态的典型表征,此外,与空白对照组相比,模型组上述各项生化指标均发生显著改变,提示该模型大鼠出现能量代谢紊乱,氧化应激失衡,炎症反应、免疫应答功能失调,脂质代谢异常,内皮功能紊乱,血液粘度升高等气虚血瘀发生发展相关变化。研究表明高脂饲喂结合力竭游泳能够成功建立气虚血瘀证动物模型,且该模型稳定性好,可用于心脑血管疾病药物的药效评价。     

黄红麻微生物脱胶影响因素及机理研究

利用微生物学和生物化学原理对黄红麻微生物脱胶的影响因素进行了研究，同时从微生物能量代谢和物质代谢的角度分析了微生物脱胶的机理。     

小鼠非酒精性脂肪性肝炎中线粒体功能的障碍

[目的]研究非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)中线粒体功能的变化.[方法] C57BL/6小鼠采用胆碱蛋氨酸缺乏(methionine choline deficient, MCD)饮食诱导小鼠NASH模型,喂食胆碱蛋氨酸充足(methionine choline sufficient, MCS)组作为对照; 4周后,处死小鼠同时取血清和肝组织.生化指标检测血清丙氨酸氨基转酶(alanineaminotransferase, ALT)活性、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)活性、肝组织甘油三酯(triglyceride, TG)、总胆固醇(total cholesterol, TC)水平;观察肝组织病理学变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantificational real-time polymerase chainreaction, qRT-PCR)检测小鼠肝脏组织中mtDNA/nDNA和nDNA,以及由线粒体DNA编码的的基因、线粒体DNA复制相关的基因、与小鼠肝脏中能量代谢相关的基因的表达变化.[结果]与MCS模型组相比, MCD组ALT, AST, TG水平明显升高,但TC水平降低;肝组织变性严重,产生大量脂肪空泡,小叶结构破坏严重,炎细胞浸润明显; MCD模型组线粒体生成能力、能量代谢水平和DNA修复能力显著降低.[结论]小鼠非酒精性脂肪性肝炎中线粒体功能发生障碍.     

山羊脾虚模型的研究

山羊脾虚模型的研究郑继方，翟自明中国农业科学院中兽医研究所脾为后天之本，气血生化之源，而家畜脾虚又是中兽医临证中极为常见的证型之一。为了深化“脾虚”本质的研究，探索脾虚机能变化的特异性指标，我们对山羊的脾虚模型进行了研究。材料和方法一、实验动物：实验...     

TBBPA对美洲鳗鲡谷胱甘肽代谢相关指标的影响

在实验生态条件下,研究了TBBPA对美洲鳗鲡(Anguilla rostrata)幼鳗体内谷胱甘肽代谢相关指标的影响.在本实验暴露剂量和时间范围内,GST活性高浓度组被显著诱导;GPx活性高浓度组首先在暴露第三天被显著诱导,其后暴露第七天降低至对照组水平,中浓度组则在暴露第七天被显著诱导;GR活性仅低浓度组表现为显著抑制作用;GSH含量仅中浓度组显著增加.这些相关指标的变化间接反映了生物体受到不同程度的氧化胁迫时表现出的应激效应,有可能作为水环境中TBBPA污染的生物监测指标.对照组中除GPx活性外,其余三个指标均随时间的变化显著升高或降低.表明这些指标易受环境非污染因素扰动的影响,因此作为生物标记时应充分考虑到各种可能的影响因素.     

低氧胁迫对日本沼虾能量代谢和抗氧化代谢的影响

本实验对日本沼虾进行低氧(2±0.5mg/L,8h)胁迫和常氧恢复(7±0.5mg/L,2.5h)处理,通过测定能量代谢及抗氧化体系的相关酶活及其中间代谢产物的浓度,讨论低氧胁迫对日本沼虾能量代谢的影响机理及其抗氧化响应机制。结果显示:随着低氧胁迫时间的延长,肌肉乳酸含量显著高于对照组(7±0.2mg/L);肝胰腺和肌肉中糖原含量及精氨酸激酶(AK)活力则显著低于对照组(P0.05);肝胰腺和肌肉组织谷胱甘肽S-转移酶(GST)活力显著升高(P0.05)。恢复常氧阶段,肌肉中乳酸含量逐渐降低至常氧水平;肝胰腺和肌肉组织糖原含量及精氨酸激酶活力与对照组相比仍显著降低(P0.05);肝胰腺和肌肉组织GST活力逐渐下降,接近正常水平。结果表明:除进行氧代谢外,低氧胁迫和常氧恢复状态的机体也需要进行无氧酵解和磷酸精氨酸代谢为自身供能。日本沼虾抗氧化系统受到低氧胁迫的影响,机体脂质过氧化程度升高,说明机体受到氧化损伤。     

TDI对小鼠睾丸组织能量代谢的影响

研究甲苯二异氰酸酯(TDI)对雄性小鼠生殖细胞能量代谢的影响,探讨甲苯二异氰酸酯对雄性小鼠生殖损伤的机制.用分光光度法检测睾丸组织匀浆中琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)和ATPase的活性.TDI染毒两周后SDH、LDH及ATPase的活性均受到了抑制.在本实验染毒时间和染毒剂量范围内,TDI不仅干扰睾丸组织的有氧代谢及无氧代谢的供能过程,还干扰细胞对能量的利用.提示能量代谢障碍可能是TDI对雄性生殖细胞毒作用的机理之一.