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1.
用免疫微球技术来检测抗原抗体是目前免疫诊断试剂研究的一个新方向。本文介绍了兔抗人血清IgG的制备和利用彩色微球检测该抗体的检测方法;同时,探讨了影响实验敏感性的温度、浓度和pH值等主要因素。 相似文献
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一步法免疫亲和层析纯化重组人肿瘤坏死因子 总被引:1,自引:0,他引:1
提出一种简便的免疫亲和层析方法,有效地分离纯化重组人肿瘤坏死因子(rHTNF),此法不需预先分离纯化单克隆抗体.用交联刘dimethylsuberimidate使抗TNF的单克隆重抗体和proteinA—SepharoseCL-4B共价结合,成为稳定的免疫基质,制备免疫亲和层析柱,将重组TNF粗制品一步纯化为均一组份. 相似文献
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用抗基因工程人γ-干扰素单克隆抗体(2A12)细胞株亲和层析从表达人γ-干扰素的大肠杆菌抽提液中纯化经稀释复性后的γ-干扰素。一步纯化后的γ-干扰素含量达95%以上,蛋白质的比活性达 1.2×10u/g,收率为78%。洗脱液用 0.5mol/LNaCI的 PBS溶液,洗脱率达92.8%。 相似文献
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植物血球凝集素-Sepharose 4B亲和层析纯化人绒毛膜促性腺激素 总被引:1,自引:0,他引:1
本文报道一种新的制备和纯化HCG的方法.人工流产物经45%乙醇抽提、调pH5.2~5.4后40~60%乙醇分级、植物血球凝集素-Sepharose4B柱层析纯化后,低温酒精沉淀干燥,可得到比效价3777.8IU/mg的hCG精品. 相似文献
5.
报道一种较为简易的免疫亲和层析技术,从兔杂交瘤培养上清中分离纯化单克隆抗体。先用过碘酸钠活化层析柱填料Sepharose4B,然后加入碱性碳酸钠缓冲液与羊抗兔IgG于4℃偶联过夜,冲洗后加硼氢化钠使偶联稳定,经1%BSA-PBS溶液封闭,冲洗后即得到免疫亲和层析柱。将兔抗烟草花叶病毒(TMV)杂交瘤细胞2E2和3C6的培养上清加入亲和柱中,37℃下吸附1h,冲洗后用pH3稀盐酸溶液洗脱,洗脱液用Tris溶液调至pH中性,供SDS-PAGE分析和Westernblot实验。洗脱液中存在分子量约为60000与52000的二条蛋白条带。Westernblot结果显示,纯化抗体对纯化TMV样品,以及TMV侵染的烟草病叶中的TMV都具有非常好的识别能力。利用所报道的免疫亲和层析技术,从兔杂交瘤培养上清中成功分离纯化到兔抗TMV的单克隆抗体。 相似文献
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南美白对虾血蓝蛋白与抗人IgG相互作用的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以采自汕头的南美白对虾血清为研究对象, 运用Sephdex_75 柱层析、PAGE、Dot_ELISA、SDS_PAGE和Western_blotting等方法, 探索血蓝蛋白与抗人IgG之间的相互作用. 结果表明, 血蓝蛋白不仅可与兔抗虾血蓝蛋白抗血清发生特异性的结合, 也可与抗人IgG发生明显的交叉反应. 进一步研究显示, 血蓝蛋白表现为相对分子质量分别为75 kDa和73kDa的两个亚基, 其中75 kDa亚基与抗人IgG呈显著阳性, 表明, 血蓝蛋白75 kDa亚基与人Ig存在相似的抗原决定簇或高度同源的同源区域. 相似文献
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比较免疫磁珠法与A蛋白亲和层析法纯化兔抗血清中的IgG 总被引:1,自引:0,他引:1
优化了免疫磁珠分离法纯化抗血清的实验条件,并与A蛋白亲和层析法比较纯化效果,以求得到一种简便、快速、高效的纯化IgG方法.结果表明:从5只新西兰兔获得210 mL试管凝集效价高达1∶5 120的兔抗鳗弧菌抗血清,磁珠与IgG结合10 min达到平衡,其最大结合量为0.227 mg/mL;免疫磁珠分离法与A蛋白亲和层析法... 相似文献
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目的探索并建立胶体金免疫层析(GICA)同步检测血清中的甲、戊型肝炎病毒的IgG抗体的方法.方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记鼠抗人IgG单克隆抗体,制成免疫层析测试条.血清中甲、戊型肝炎的特异性IgG抗体与测试条上金标抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动与膜上固相包被的抗原(HAAg,HEAg)、抗体(羊抗鼠lgG)结合形成肉眼可见的红色线条.结果自制的GICA试条与EIA对比检测血清标本188份,各单项指标抗-HAV IgG,抗-HEV IgG两法总符合率分别为98.9%,98.9%,检测灵敏度可达1μg/L.结论用于同步检测血清中的甲、戊型肝炎病毒特异性IgG抗体的GICA试条的制备条件已基本建立,其检测结果特异性强、灵敏度高、操作方法简便快捷且无需特殊仪器设备,有广泛的应用价值. 相似文献
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人血清IgG分离纯化方法探讨 总被引:1,自引:0,他引:1
免疫球蛋白的主要功能在于抵抗各种病原微生物对人体的感染.使用人源免疫球蛋白,因其是同种蛋白,在预防和治疗上比动物血清有很大的优越性.本文综述了硫酸铵沉淀法、辛酸法、Protein A亲合膜色谱法、聚乙二醇(PEG)置换法等从人血清中提取IgG的方法,比较了各方法在研究应用中的优缺点,为制备提供参考. 相似文献
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体外实验,对家兔全血或血浆用8%(0.72M)CaCl_2溶液9∶1做抗凝剂,用常规实验测定了8%CaCl_2抗凝血的可逆性,样本放置不同时间后,37℃,用生理盐水1∶1、1∶1.5、1∶2稀释,测血样凝固时间;凝血酶原时间(PT一期法)实验测外源性凝血系统在样本中的凝血活性;白陶土非特异粘附实验测接触因子或血小板生理活性。结果证明:8%CaCl_2溶液可逆性抑制内源性和外源性凝血系统,对抗凝血系统无显著影响。 相似文献
12.
在恒温箱中测定了粉尘试样添加CaCl2或MgCl2和水玻璃后的含水率与环境温度、湿度、有效抑尘时间等因素之间的关系.研究结果表明:(1)当环境温度低于31℃,相对湿度高于60%,粉尘试样中CaCl2和水玻璃含量的质量分数分别达到20%和10%(MgCl2和水玻璃含量的质量分数为23%和11.5%)时,试样的含水率就能保持大于5%(质量分数);(2)当环境温度低于40℃,相对湿度高于50%,粉尘试样中CaCl2和水玻璃含量的质量分数分别达到26%和13%(MgCl2和水玻璃含量的质量分数为30%和15%)时,试样的含水率就能保持大于5%(质量分数);(3)CaCl2或MgCl2与水玻璃复合后,其粘尘功能进一步增强,而且其溶液的弱酸性得到进一步降低。 相似文献
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从自然发生的2月龄幼兔肺脏中分离到3种类型的细菌(记作:a,b,c),经对所做的纯培养30株分离菌的形态特征、理化特性等检验,结果表明a菌(17株)为支气管炎博德特氏菌(Bordetellabronchiseptica);b菌(8株)为铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa);c菌(6株)为大肠埃希氏菌(Escherichiacoli)。通过人工感染试验,表明其为相应的致病菌。 相似文献
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作者使用超薄切片,冷冻断裂和剥离技术在分析电镜中以透射(TEM)、扫描透射(STEM)和扫描(SEM)成象模式研究了兔毛纤维的微观结构。兔毛纤维是一种带有间隔层的中空纤维,中心部分是蜂巢状结构。主要结构成份是角质、皮质和间隔层物质。没有多孔的髓质。从组织学结构考虑,皮质包含正、副和仲皮质成分。一般在兔毛纤维横截面上正副皮质不呈双边分布。基于所作的观察,提出了兔毛纤维的结构模型。 相似文献
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由慢性肺脓肿的兔病例中分离的D型多杀性巴氏杆菌进行了人工感染20~4O日龄、60~90日龄家兔的实验,结果表明,两组家兔经胸腔、鼻腔感染造成的病变与自然病例相似,即纤维素性化脓性胸膜肺炎;经皮下感染引起弥漫性蜂窝织炎;经静脉、肌肉感染可产生败血症。D型多杀性巴氏杆菌引起的病变和A型所引起的病变相似。 相似文献
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曾泳春 《东华大学学报(自然科学版)》1995,(4)
本文讨论了起球对兔羊毛针织物损伤的影响。通过实验我们发现掉毛和掉球从兔羊毛针织物表面移去了大量纤维,造成织物损伤。用球的增长机理解释了起球大大超过初始绒毛量的现象,从而说明起球不只是影响兔羊毛针织物的美观,更是一种磨损机理。 相似文献
18.
刘青 《宁夏大学学报(自然科学版)》1997,18(1):68-70
讨论了免疫系统中免疫,球蛋白G和免疫球蛋白M的性能和作用,提出了一个包含IgM和IgG以及免疫响应中多种细胞生长的数学模型,说明了在首次免疫响应和二次免疫响应中各种细胞的产生及其相互作用。 相似文献
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牛初乳中IgG1、IgG2的制备色谱分离与纯化 总被引:4,自引:0,他引:4
以二甲基十二烷基苄基溴化胺为预处理物质,采用DEAE Sepharose F.F离子交换色谱和Sephacryl S-200HR凝胶过滤色谱分离纯化了牛初乳中的IgG1和IgG2用亲和高效液相色谱法测定了IgG1、IgG2的含量。 相似文献
20.
新型pH敏感相分离高分子在荧光免疫分析兔IgG中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
合成了一种新型的pH敏感相分离高分子,将它用作免疫分析的载体有以下优点:该高分子37℃下相转变pH值在7.4左右,分离时对抗原抗体复合物造成的损坏程度最低;这种含有碱性基团的pH敏感高分子可与我们以前合成的含酸性基团的高分子[1]互为补充,适用于酸性条件下不稳定物质的测定. 相似文献