促睡眠肽及其7-甘氨酸类似物的合成

动物和人的睡眠是一种正常的生理现象。早在本世纪初就有人试图把睡眠这一生理现象与体内产生的某些物质联系起来。但直到六十年代才开始了比较深入的研究。瑞士的M.Monnier等从1963年开始报导了在困倦的兔体中发现一种能促进睡眠的肽类物质,称为Delta—促睡眠肽(简称DSIP),并在1977年报导了该物质的化学结构是-N-端为色氨酸的九肽:     

内吗啡肽-2的合成研究

用液相多肽合成法合成具有镇痛作用的μ阿片受体的内源性配体———内吗啡肽-2.直接使用叔丁氧羰基保护的有关氨基酸,采用DCC/HOB t缩合法和混合酸酐法分别合成N-端二肽片段和C-端二肽片段,然后将N-端二肽片段和C-端二肽片段缩合成四肽,最后用50%的TFA/DCM脱除保护基,成功地合成了内吗啡肽-2.本实验方法与文献相比,步骤减少,后处理简便,收率提高.     

Patellamide A类似物的全合成研究

本文从D-(缬)噻唑氨基酸、L-异亮氨酸、L-丝氨酸、1-苏氨酸出发合成了PatellamideA类似物环肽(1)。D-(缬)噻唑氨基酸由D-缬氨酸和L-半胱氨酸按亚胺酯法合成。丝氨酸噁唑啉(11)由三苯基膦法合成,苏氮酸噁唑啉(17)由亚胺酯法合成。11和17去保护基后经DCC/HOBT法转变为线性肽(19a),19a用五氟苯酯法环化得得1.1和其丝氨酸噁唑啉的开环产物环肽都具有抗肿瘤活性。     

α-氨基酸 α-氨基保护试剂亚磷酸二乙酯的研究

研究了亚磷酸二乙酯作为α-氨基酸的α-氨基保护试剂用于肽合成的可行性。合成了几种N-(O,O＇-二乙基磷酰基)-氨基酸及其甲酯和酰肼,以叠氮法制取了两种二肽。对N-(O,O＇-二乙基磷酰基)-氨基酸衍生物在2mol/L氢氧化钠,10％柠檬酸及85％水合肼中的稳定性作了考察,还探讨了用4mol/L HCl和三氟乙酸(TFA)脱除保护基的条件。     

N-保护氨基酸含氮杂环酯的合成和它们在肽合成中的应用

通过DCC法或混合酸酐法合成了大量N-保护氨基酸的N-羟基吡啶-2、3-二酰亚胺酯,这些化合物是稳定性很好的结晶化合物,可以迅速同氨基酸、肽或它们的酯反应。为对 HONQ作出评价,保护的三肽 Z Pro·Leu·GlyNH_2(MRIH)通过ONQ法以高产率被制备出来。     

钒(V)-锌试剂-TritonX-100体系显色反应的研究

在 pH4. 8及 TritonX-100存在下,钒(V)与锌试剂形成稳定的绿色络合物。锌试剂与钒(V)络合物的最大吸收波长分别位于482nm 和690nm 处。钒(V)络合物至少在4小时内吸光度保持不变,其摩尔吸光系数及桑德尔灵敏度分别为1. 1×10~4摩尔·升~(-1) ·厘米~(-1) 和0. 0046微克/厘米~2。钒(V)浓度在0～100微克/25毫升范围内符合比尔定律。用克分子连续变换法、克分子比法、斜率比法及平衡移动法求得钒(V)与锌试剂的络合比均为1:2。     

有机化合物的微量系统鉴定

1.用氧瓶燃烧法与环炉技术相结合检定了有机化合物中14种重要杂元素,检出限度为0.01—1微克,样品取量50微克至500微克。 2.提出了用三苯基硅甲醇(K=15)及三苯基膦(K=12)作为Rast法测定分子量的溶剂,适合于测定某些元素有机化合物的分子量。 3.用两种灵敏度较高的指示剂于分组试验,并放进了硫氰酸铁试氧法,使分组系统与习用已久的溶解度分组系统相同,而试验方法适合于微量分析。 4.用线炉技术检定了12种重要有机功能团。 5.合成了1,2-二(对溴苄氨基)乙烷作为鉴定醛类的专属性试剂,用它制备了二十余科醛类衍生物,熔点一般分布在75—210℃之间。并摄制了这些衍生物与用1,2-二苯氨基乙烷制得的醛类衍生物共三十余种结晶的显微照片,进行化学显微鉴定。提出了微量非水滴定测定这些衍生物中和当量的方法。     

芴烯-哌啶加合物的紫外光谱研究及其应用

研究了芴烯-哌啶加合物的紫外光谱特性并将其应用于定量测定Fmoc锁定的树酯容量(capacity)和Fmoc保护的树酯肽含量.该法的灵敏度为0.000 1 mmol/g树酯.利用该法可在不损失树酯肽的情况下定量测定基于Fmoc的多肽固相合成法中各步反应的偶合产率.     

兔骨髓基质细胞的分离培养研究

目的分离培养兔骨髓基质细胞,观察其体外生长特性.方法用密度梯度离心结合贴壁培养法分离兔骨髓基质细胞,进行体外培养,传代扩增,测定其生长曲线,用相差显微镜、细胞化学染色观察细胞生物学性状及功能特点.结果密度梯度离心结合贴壁培养法可有效分离并且纯化兔的骨髓基质细胞.传代细胞均一性较好,呈纺锤形,细胞增殖快,加入地塞米松(Dxm 10-5 mmol/L),β-甘油磷酸钠(β-GP 2 mmol/L)、L-抗坏血酸(AA 50 mg/L)可诱导BMSCs分化为成骨细胞,von kossa法检测骨钙素阳性.结论体外培养的骨髓基质细胞生长稳定,增殖力强,可诱导分化.     

荞麦花粉肽及其类似物的合成、结构和免疫活性研究

用Merrifield固相法合成了荞麦花粉肽BPP-1及其类似物BPP-1-3,BPP-1-4和BPP-2。通过FT-IR和CD谱初步讨论了BPP-1的二级结构,结果表明其水溶液构象属于无规卷曲和 β-折叠,但在三氟乙醇中,CD谱在206nm和222nm附近呈双负峰形,分子形成了α-螺旋构象。研究了BPP-1,BPP-1-3和BPP-2对动物和人淋巴细胞的增殖应答功能和抑制释放sIL-2R的作用,结果显示它们具有较强的促免疫活性。     

抗猪促卵泡激素小鼠源单克隆抗体的研究

用猪促卵泡激素(PESH)作为抗原免疫BALB/C小鼠。通过将免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠骨髓瘤细胞(SP2/O—Ag14)进行融合,建立了九株能稳定分泌抗PFSH单克隆抗体的杂交瘤细胞。其中三株杂交瘤细胞分泌的抗体被证实是对PFSH特异结合的,它们和另一种非常相近的垂体激素——猪促黄体激素(PLH)不结合。用有限稀释法对全部九株杂交瘤进行了三次亚克隆。有几种单克隆抗体被羟基磷灰石柱层析一步法从小鼠腹水所纯化。以聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测经纯化单克隆抗体制品的纯度。     

酰化纤溶酶原-链激酶 (APSAC)的制备和生物学性质

建立在Lys-Sepharose4B柱上用人纤溶酶原(HPg),链激酶(SK)和对氨基苯甲酸对脒基苯酚酯合成新型溶栓药物酰化纤溶酶原-链激酶(APSAC)的一种新方法,该法使APSAC的纯度和收率大为提高,分子量为130000,体外有明显溶栓效果,在兔体内半衰期8.8h.用同方法制备的未经修饰的纤溶酶原-链激酶复合物(PSAC)在兔血浆内半衰期仅为12min.     

反应动力学拆分法合成(2S,4R)和(2S,4S)-6-庚烯-2,4-二醇

本研究以手性(S)-3-羟基-丁酸甲酯为原料,经TBSCl保护羟基、DIBAL-H还原及烯丙基锌试剂反应后合成(2S,4R/S)-6-庚烯-2,4-二醇中间体,利用anti/syn-1,3-二醇在进行丙酮叉保护以及脱丙酮叉保护时反应动力学性能上的差异,并通过高立体选择性的动力学拆分法合成出目标产物(2S,4S)和(2S,4R)-6-庚烯-2,4-二醇.     

细胞粘附肽Arg-Gly-Asp的合成与生物活性检测

采用固相多肽合成法合成Ag-G ly-Asp(RGD)三肽,以天门冬氨酸计RGD三肽收率为75%,采用MTT法进行合成肽RGD抑制人纤维肉瘤细胞HT1080转移机理方面的研究,证实了人工合成的RGD肽能抑制人纤维肉瘤细胞HT1080与纤维连接蛋白(FN)的粘附。     

细胞粘附肽Arg-Gly-Asp的合成与生物活性检测

采用固相多肽合成法合成Ag-Gly-Asp(RGD)三肽,以天门冬氨酸计RGD三肽收率为75%,采用MTT法进行合成肽RGD抑制人纤维肉瘤细胞HT1080转移机理方面的研究,证实了人工合成的RGD肽能抑制人纤维肉瘤细胞HT1080与纤维连接蛋白(FN)的粘附.     

清除血浆中LDL用生物活性短肽SDE的合成研究

高脂血症是引起心脑血管疾病的主要原因之一。Ser-Asp-Glu 三肽(SDE)在对血浆中低密度脂蛋白(LDL)的识别及特异性吸附起关键性作用。本实验采用 DCC/HOBt 液相法,合成三肽(SDE)。重点研究反应温度、反应时间和原料配比对 SDE 产率的影响。结果表明本实验成功合成出SDE 三肽。     

催产素的合成

自从1954年du Vigneaud等合成了催产素后,Boissonnas等(1955)、Rudinger等(1956)、Velluz等(1956)相继报导了催产素的合成方法。在合成肽链时,前三者主要采用了迭氮化合物、混合酸酐和亚磷衍生物等方法而后者则应用了较新的二环己基碳二亚酰胺方法。在合成步骤上,du Vigneaud等由三肽异亮氨酰谷氨酰胺酰门冬酰胺、四肽半胱氨酰脯氨酰亮氨酰甘氨酰胺、和二肽半胱氨酰酪氨酸依次缩合成七肽、九肽,再经金属钠在液态氨中处理和进一步氧化而成具有生理活性的八肽——催产素。     

5-Br-PPFF的合成及其与镉(Ⅱ)显色反应的研究

本文研究了1-(5-溴-a-啶吡基)-5-苯基-3-(a一呋喃基)甲(月朁)(5一Br—PPFF)的合成及其与镉(Ⅱ)的显色反应条件.在曲拉通X-100存在下,PH10.7的硼砂-氢氧化纳缓冲溶液内,试剂与镉(Ⅱ)形成兰绿色络合物,其最大吸收峰在658nm处,表观摩尔吸光系数为6.60×10~4升·摩尔~(-1)·厘米_(-1).在0-25微克镉/25毫升浓度范围内服从比尔定律.     

大豆肽对果蝇睡眠的影响

研究大豆肽(soybean peptides, SBP)对果蝇睡眠的影响。通过大豆分离蛋白酶解,制得SBP,选择20日的雄性果蝇,分为4组,无添加的培养基作为空白组,SBP分为2、4、8mg/mL额外添加到培养基作为3个实验模型组,通过VideoTrack动物行为分析系统监测果蝇睡眠时长,并检测SBP对果蝇脑部生物钟基因(per、tim、clk、cyc)与参与调控睡眠神经递质合成限速酶的基因(gad、tph、gdh、hdc)以及五羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)的影响。研究发现,在监测睡眠的第2日晚上,SBP对果蝇睡眠延长效果最好,并呈现剂量依赖性,又通过剥离取头,分析其生物钟基因(per、tim、clk、cyc)和神经递质合成限速酶基因(gad、tph、gdh、hdc),得到SBP是通过调节tim和tph的基因表达并提高5-HT在脑部的含量来延长果蝇的睡眠时长的结论。     

羧基保护基团琥珀酰亚胺烷基酯(Ⅰ)

Nefkens曾用酞酰亚胺甲酯作α-氨基酸的羧基保护基团。琥珀酰亚胺基结构与酞酰亚胺基类似,为了寻找新的羧基保护基团,我们考虑了用琥珀酰亚胺甲基和琥珀酰亚胺乙基作α-氨基酸的羧基保护基团的可能性。为简便计,文中把琥珀酰亚胺基记作Su。 在DCC存在下,N-羟甲基琥珀酰亚胺、N-(β-羟乙基)琥珀酰亚胺与N-保护的α-氨基酸缩合成酯。我们测定了各酯基在(1)4.2 mol/L HCl/二氧六环;(2)55％三氟乙酸(TFA)/二氯甲