Biosynthesis of Polyhydroxyalkanoates Consisting of Short-chain-length Monomers and Medium-chain-length Monomers by Pseudomonas YS1

ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎＰｏｌｙｈｙｄｒｏｘｙａｌｋａｎｏａｔｅｓ(ＰＨＡｓ)ａｒｅａｆａｍｉｌｙｏｆｂｉｏｐｏｌｙｅｓｔｅｒｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄｂｙｍａｎｙｂａｃｔｅｒｉａ[1,2 ] .ＡｍｏｎｇＰＨＡｓ ,ｐｏｌｙｈｙｄｒｏｘｙｂｕｔｙｒａｔｅｏｒＰＨＢｉｓｔｈｅｍｏｓｔｃｏｍｍｏｎｍｅｍｂｅｒ[3] .ＡｔｔｅｍｐｔｓｈａｖｅｂｅｅｎｍａｄｅｔｏｄｅｖｅｌｏｐｃｏｍｍｅｒｃｉａｌｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓｅｓｆｏｒｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＰＨＡｓ[4 7] .Ｂｉｏｐｏｌ,ａｃｏｍｍｅｒｃｉ…     

Formation of Polyhydroxyalkanoate Blends by Pseudomonas pseudoalcaligenes M1-2 from Various Carbon Sources

ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎＰｏｌｙｈｙｄｒｏｘｙａｌｋａｎｏａｔｅｓ (ＰＨＡｓ)ａｒｅａｆａｍｉｌｙｏｆｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄｂｙｍａｎｙｂａｃｔｅｒｉａａｓｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｂｏｎａｎｄｅｎｅｒｇｙｓｔｏｒａｇｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓ[1] .ＰＨＡｓｈａｖｅａｗｉｄｅｒａｎｇｅｏｆｐｈｙｓｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｒａｎｇｉｎｇｆｒｏｍｂｒｉｔｔｌｅｔｏｆｌｅｘｉｂｌｅｔｏｅｌａｓｔｉｃ ,ｄｅｐｅｎｄｉｎｇｏｎｔｈｅｉｒｍｏｎｏｍｅｒｓｔｒ…     

重组大肠杆菌利用醋酸及乳酸为碳源合成PHB

以廉价的工业副产物醋酸及乳酸为碳源,对产PHB重组大肠杆菌进行培养,考察醋酸及乳酸的添加对重组大肠杆菌生长及PHB产量的影响。将来自Cupriavidusnecator的PHB合成操纵子phaCAB基因簇克隆至pBAD载体,得到产PHB菌株BL21＿pBAD＿phaCAB,以阿拉伯糖为诱导剂,在大肠杆菌中进行重组表达。分别使用LB及M9培养基,对重组菌株BL21＿pBAD＿phaCAB进行培养,研究其生长速度及PHB产量,探索产PHB重组大肠杆菌最适培养基。以添加0.04 g/L乳酸、1.2 g/L乳酸、0.02 g/L醋酸、0.6 g/L醋酸、0.04 g/L乳酸+0.02g/L醋酸、1.2g/L乳酸+0.4g/L醋酸的M9培养基(均含2 g/L葡萄糖)为实验组,以M9培养基(含2g/L葡萄糖)为对照组,考察醋酸及乳酸的添加对重组大肠杆菌生长及PHB产量的影响。分别取第6,12,24和36小时的培养液,分析其葡萄糖、醋酸及乳酸含量的变化。结果表明,低氮型M9培养基更适合产PHB重组大肠杆菌在低糖培养环境中生长。在葡萄糖消耗殆尽后,大肠杆菌能够以醋酸及乳酸为碳源进行代谢,因此在培养基中...     

解酚假单胞菌的分离及毒物降解的特点

在假单胞菌中有些株可以降解芳香类有机物,另一些株可以抗重金属.某些芳环化合物如苯酚等,及含汞的化合物都是可以造成环境污染的有毒物质.对假单胞菌降解水杨酸等芳香化合物的途径已有一些了解,但少有涉及代谢的调控问题.本文报道一株从化学工业污染区域新分离到的假单胞菌.这株菌不但可以降解水杨酸、苯甲酸及邻苯二酚,而且还能降解毒性较强的苯酚,并具有耐受一定浓度Hg~(2+)的能力,是一株有前途的去污染工程菌.对该菌降解混合芳香化合物的研究发现,邻苯二酚在这些芳香化合物降解代谢中是一个具有调节作用的物质.     

链霉菌转化阿魏酸生产香草酸

选育一株链霉菌Streptomyces 2036，能将阿魏酸转化为香草酸。通过培养基和发酵条件的优化，确定较适培养条件为：葡萄糖5g/L，酵母粉5g/L；最佳发酵条件为：pH5.0，摇瓶装液量50mL/250mL，转速130r/min，发酵温度30℃。在该条件下，链霉菌可在转接培养16h后添加阿魏酸溶液，经12h可将1g/L的底物阿魏酸转化为0.261g/L的香草酸，摩尔转化率为30.2%。     

嗜蜡菌R的代谢特性及其摄取烷烃的机理研究

利用石蜡为惟一碳源从辽河油田油水样品中驯化筛选出一株强降解固体石蜡的菌R，初步鉴定为脲芽孢八叠球菌（Sporosarcina urea Kluyver and Niel）。该菌发酵液具有较强的排油活性及稳定的乳化能力，可使油水界面张力降低55.9%，其胞外生物表面活性剂被确定为阴离子型的水溶性产物。对其胞外脂肪酸进行了GC/MS的定性分析，确定其主要为十四酸、十六酸和十八酸。对该菌在水溶性不同的底物中培养，发现其细胞表面疏水性具有调适作用，推测该菌摄取烷烃的模式不是单一的。     

Transmembrane structure and function of dctPQM encoding C4－dicarboxylate transport proteins from nitrogen－fixing P. stutzeri A1501

C4-dicarboxylate transport proteins of diazotroph Pseudomonas stutzeri were encoded by dctPQM genes. Nucleotide sequence analysis indicated that dctP, dctQ,and dctM grouped together. Its nucleotide and amino acid sequence shared high homology with that of dctP gene encoding periplasmic C4-dicarboxylate-binding protein and dctQM genes encoding C4-dicarboxylate transport proteins from the free-living nitrogen-fixing Aotobacter vinelandii.Structural analysis showed that DctP of P. stutzeri did not include membrane-spanning regions, and DctQ and DctM contained 5 and 12 transmembrane segments, respectively.The fragment containing the complete dctPQM genes was cloned into the Tn5 transposon region of suicide mobilization plasmid pSZ2L The resultant plasmid was named pSZY6.By triparental mating, Tn5 transposon carrying the dctPQM genes inserted into the genome of the wild type strain A1501,randomly. The recombinant strain A-142 which harboured an extra copy of dctPQM genes was constructed and identified by PCR amplification of npt II gene. When A-142 was grown in minimal medium with different concentrations (20,10 and 5mmol/L) of C4-dicarboxylates succinate, malate, or fumarate as the sole carbon source, the rate of nitrogen fixation assayed by acetylene reduction was significantly higher than that of the wild-type strain A150L This result was established that an extra copy of dctPQM genes could increase the activity of nitrogen fixation of P. stutzeri strain A1501.     

金针菇菌丝体静置培养的研究

在碳源为２％,氮源含量为０．１％,采用液本静置培养方法,研究了金针菇Ｆq-19菌株对碳源、氮源、矿质元素和生长因子的利用。试验表明,金针菇Fq-19菌丝营养对有机氮的利用比对无机氮强,有机氮中,其对复合氮素如酵母粉、蛋白胨、黄豆粉的比单一氮素如尿素、谷胺酰胺强,在无机氮中,其对铵态氮的利用较强硝态氨基本上不被利用。金针菇Ｆq-19菌株对碳素营养的利用较很广泛,在多糖中,对玉米粉的利用最好。其次是可溶性淀粉,对纤维素的利用较差;单糖 的葡萄糖,双糖中的红糖、白糖、蔗糖、麦芽糖是理想的碳源,在缺碳素营养、氮素营养的培养基上菌丝不生长。添加生长因子可促进菌丝的生长,以葡萄为碳源,硫酸铵为氮源,金针菇Ｆq－１９菌株适宜Ｃ／Ｎ为１７－２４：１,最适宜Ｃ／Ｎ为２０：１。当Ｃ／Ｎ比为２０：１时,菌丝生长旺盛,对营养利用较为合理。除碳、氮源外,维生素Ｂ１,Ｋ,Ｐ,Ｍ是金针菇菌丝生长的必须因子。     

以乙酸钠、丙酸钠为碳源的活性污泥合成聚羟基脂肪酸酯的结构分析

聚羟基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoates, PHAs)是临时储藏于活性污泥的微生物体内的能量和碳源聚合物,是完全可生物降解的热塑性塑料.为了研究碳源对PHAs结构的影响,本文采用乙酸钠、丙酸钠为碳源在厌氧条件下培养活性污泥得到2种不同的PHAs样品,通过1H NMR、13C NMR和GC-MS谱图确定其组成和比例以乙酸钠培养活性污泥得到PHAs样品的单体组成以3-羟基丁酸酯(3-hydroxybutyrate,3HB)为主,x(3HB)/x(3HV)(3-hydroxyvalerate,3-羟基戊酸酯)为93.91∶6.09;以丙酸钠培养活性污泥得到PHAs样品的单体组成主要以3HV为主,除3HB、3HV外,另外还有2-甲基-3-羟基丁酸酯(2-methyl-3-hydroxybutyrate,2M3HB)和2-甲基-3-羟基戊酸酯(2-methyl-3-hydroxyvalerate,2M3HV), 3HB/3HV/2M3HB/2M3HV的摩尔比为28.66∶63.13∶2.55∶5.66.由此可见采用不同碳源培养活性污泥所得到的PHAs的单体组成是不同的.     

类胡萝卜素产生菌SCLI营养条件研究

研究了适合于红酵母SCLI生长的营养条件。结果表明 :蔗糖是最好的碳源 ,其浓度为糖浓度为 35g/L ,适宜的氮源是硫酸铵。红酵母SCLI为生物素相对需要型 ,在以糖蜜为碳源时 ,培养基中即使不添加生物素或酵母膏其生长仍良好。摇瓶培养时 ,C/N为 2 .8时细胞产量较高 ,C/N为 4 .0时类胡萝卜素产量较高。     

谷氨酸生产菌的诱变育种

经化学诱变,通过改变谷氨酸棒杆菌B1的代谢途径,筛选出以琥珀酰CoA和乙醛酸为碳源的营养缺陷型,该突变菌株B4的产酸率和转化率分别比出发菌株高11.1%和8.7%.     

碳源和盐度对好氧反硝化细菌脱氮特性的影响

采用16S rDNA序列分析对菌株LZX301进行了初步鉴定,在150 r/m摇瓶好氧培养,探讨了碳源及盐度对菌株好氧反硝化特性的影响. 结果表明,该菌株16S rDNA序列与Pseudomonas stutzeri ATTC 17594（AY905607.1）等3株施氏假单胞菌序列相似度为99%,系统发育树分析显示菌株LZX301与P.stutzeri 的关系比同属的P.aeruginosa 和P.putida更近,因此初步确定菌株LZX301为Pseudomonas stutzeri. 培养液初始含7 mg/L亚硝酸盐和28 mg/L硝酸盐、C/N比为10:1条件下,以葡萄糖、乙酸钠和蔗糖为碳源时无机氮去除率分别为79.1%、67.9%和38.8%,氨氮积累量分别为1.978、1.224、0.727 mg/L. 以葡萄糖为唯一碳源时,在5、15、25等3个盐度下无机氮总去除率分别为73.2%、85.8%和78.7%,其中硝酸盐去除率分别为89.8%、86.1%和76.5%,亚硝酸盐去除率分别为36.2%、94.7%和96.4%,氨氮质量浓度分别为2.117、0.691、0.595 mg/L. 研究结果表明菌株LZX301在盐度5~25 范围内具有较强的好氧反硝化能力,以葡萄糖为碳源脱氮效果最好,对该菌株的应用具有指导意义.     

花生根瘤菌吸氢培养基的改进

花生根瘤菌吸氢培养基的改进许良树，吕荣富，张凤章，曾定，龙敏南（生物学系）１９７８年Ｍａｉｅｒ等￣［１］首次在实验室条件下从大豆根瘤菌诱导氢酶活性、其中一个重要的步骤就是将原来富碳的ＬＮＢ５培养基中的碳源浓度降低。当碳源浓度降低１０倍时其活性最高，并...     

AM/AA/AMPS/DMAM的反相微乳液共聚合研究

以丙烯酰胺(AM)和丙烯酸(AA)为主单体,以2-丙烯酰胺基-2-甲基丙磺酸(AMPS)、N,N-二甲基丙烯酰胺(DMAM)作为功能性单体,以庚烷为分散介质,表面活性剂SF2810为乳化剂,采用反相微乳液聚合的方法合成了四元共聚物AM/AA/AMPS/DMAM.研究所得的最佳合成工艺条件为:水相中单体浓度为45%,引发剂过硫酸铵加量为单体质量的0.3%,乳化剂加量为油相质量的10%,反应温度为40℃,反应时间为5 h,单体的摩尔比为AM:AA:AMPS:DMAM=52:25:15:8.红外光谱分析证实了四元共聚物的结构.     

裂殖壶菌Schizochytrium sp.FJU-512细胞油脂的研究

裂殖壶菌Schizochytrium sp.FJU-512是高产二十二碳六烯酸(DHA)的一株海洋真菌,其细胞内油脂占细胞干质量的18.3%.细胞油脂的总脂肪酸组成为45.7%DHA,12.5%DPA和41.8%棕榈酸.总油脂由26.4%极性脂和73.6%中性脂组成.薄层色谱、高效液相色谱及质谱分析表明该菌株还能合成强抗氧化剂虾青素.采用均匀设计获得高产DHA的最优培养基(g/L):葡萄糖109.7,蛋白胨19.2,酵母膏20.0,海水晶10.4,DHA产量高达2.10 g/L.     

一株黄蓝状菌(Talaromyces flavus)SH16解磷特性的测定

【目的】研究一株黄蓝状菌(Talaromyces flavus)解磷能力和解磷条件的优化,为解磷菌肥的开发提供优良菌株和培养技术。【方法】实验选取一株从杨树根部分离的促生真菌菌株SH16,分别采用钼锑抗比色法和钒钼酸铵法测定其解磷能力,以磷酸钙为磷源,测定不同培养因素对解磷效果的影响。【结果】菌株SH16对磷酸钙、过磷酸钙、磷酸铝、植酸钙等4种磷源均具有一定的溶解作用,对磷酸钙溶解效果最好,7 d后可溶性磷浓度达660.9 mg/L,解磷效果可达45 U/L; 初始pH、碳源、温度及NaCl质量分数对菌株SH16的解磷效果影响最大。设定初始pH为8,以葡萄糖为碳源,培养温度为30 ℃,培养基中添加50 mg/L的水溶性磷时,该菌株的解磷效果最好。菌株对NaCl具有较强的耐受性,随着NaCl质量分数升高,解磷量逐渐下降,当NaCl质量分数达到5%时,解磷量仍可达173.1 mg/L。【结论】菌株SH16对磷酸钙表现出较高的溶解活性,可以进一步开发为生物菌肥。     

一株菲降解菌的生长特性及其对荧蒽和芘的降解能力

 研究了一株固氮螺菌属(Azospirillum)的菲降解菌PE1501 1在不同培养条件（温度、初始pH值、菲初始浓度、共基质）下的生长特性,并初步考察了该菌株在液体培养基和土壤中对4环PAHs—荧蒽和芘的潜在降解能力。结果表明,在含菲50 mg/L的无机盐液体培养基中,该菌株的最适生长温度为30℃;偏酸性环境更有利于菌株生长,液体培养基初始pH 5.0时菌株生长最好;该菌株能耐受菲的初始浓度超过200 mg/L,但菲初始浓度较高时菌株生长出现较明显的延迟期;添加乙酸、溶解性富里酸或溶解性胡敏酸作为菲的共基质对菌株生长有短暂的促进作用;在液体培养基中菌株能以菲或荧蒽为唯一碳源和能源充分生长,并对荧蒽有一定程度的去除能力,但对芘的降解能力很低;将该菌株接种到灭菌污染土壤中,可有效提高菲、荧蒽或芘的去除效果。     

Production of Poly(3-Hydroxybutyrate-co-3-Hydroxyhexanoate) Using Aeromonas hydrophila 4AK4 Grown in Mixed Carbon Source

IntroductionPolyhydroxyalkanoates (PHAs) are intracellularenergy storage materials and/or reduction agentsthat are synthesized by many microorganisms[1 ] .Because these bacterial PHAs are trulybiodegradable thermoplastics or elastomers,theyhave attracted much attention in industry[2 ,3 ] .Poly(3 -hydroxybutyrate) (PHB) wasthefirst PHA to beproduced on a large scale and poly (3 -hydroxybutyrate-co-3 -hydroxyvalerate) (PHBV)was laterused in commercial applications.Recently,novel PHA copo…     

共缩聚型可溶性耐高温聚芳酰胺合成及表征

采用1,2－二氢－2－（4-氨基苯基）－4－[4－（4－氨基苯氧基）－苯基]－二氮杂萘－1－酮（A）、4,4′－二氨基二苯醚（B）、4,4′－二氨基二苯甲烷（C）为共缩聚二胺单体与对苯二甲酸进行共缩聚反应,制备共缩聚型聚酰胺。当A与B或C的物质的量比为10：0－5：5时,所得聚酰胺溶于强极性溶剂,在NMP中的特性粘度为0．91－1．43dL/g。它们的玻璃化转变温度均高于300℃,具有优异的耐热性能,在氮气中5％的热失重温度为450℃左右,并且在研究范围内与共聚二胺的结构及比例无关。     

Microst ructure andflexural properties of carbon/ca rbon composite with in-situ grown carbon nanotube as secondary reinforcement

Carbon nanotubes (CNTs) were in-situ grown in carbon felts using ferric chloride as catalyst and natural gas as carbon precursor via thermal gradient chemical vapor infiltration (TGCVI). Subsequently, the carbon felts were densified to obtain CNT reinforced carbon/carbon (C/C) composites in the same furnace. Effects of CNTs on the microstructure and flexural property of C/C composites were investigated by polarized light microscopy, Raman spectroscopy, scanning electron microscopy and universal mechanical testing machine. The results of PLM observation and Raman analysis showed that CNTs have two-sided effects on the microstructure of pyrocarbon: the pyrocarbons in the region without CNTs show medium texture; while, in the region full of CNTs, the microstructure was low-textured or even isotropic though the TGCVD conditions would lead to the deposition of pure low texture pyrocarbons. Analysis based on stress-strain curves demonstrated that the flexural strength increased first and then decreased with the CNT content increasing. When the CNT content was 5.23 wt%, the flexural strength was maximum and had a nearly 35% improvement compared with pure C/C composite. Besides, after adding CNTs, the flexural modulus of the composites decreased and the ductility increased obviously, indicating CNTs can toughen C/C composites.