野油菜黄单胞菌X.c—18的选育及发酵条件的研究

通过人工诱变野油菜黄单胞菌，筛选出１株具有良好抗变异性的突变株Ｘ．ｃ－１８。该突变株能很好地利用蔗糖和玉米淀粉为碳源，蛋白胨和黄豆饼粉为氮源。其最佳黄原胶发酵总糖量与总蛋白质量之比为５：０．５，最适ｐＨ值为７．０，温度为２８℃。摇瓶发酵７２ｙ，黄原胶产量每升发酵液一般可在３０ｇ以上，最高产量达３２．６ｇ，对碳源转化率为７１．５４％。     

高温α-淀粉酶产生菌株的选育

从西藏当雄温泉附近的土壤中，分离到一株能在55℃生长并分泌高温α－淀粉酶的菌株，经初步鉴定为凝结芽孢杆菌，命名为Bacillus coagulans LS-1。该菌株用紫外线和亚硝基胍诱变，在55℃摇瓶培养条件下，筛选到一个发酵液酶活达到100U／mL的突变株，较出发菌株的酶活提高了约25倍，发酵液经90℃处理60min，酶活性保持在90％以上。     

嗜麦芽窄食单胞菌产生的几丁质酶的特性

从土壤中筛选出一株产几丁质酶的革兰氏阴性细菌,通过16S rDNA法对酶活力最高的菌株C进行鉴定,确定为嗜麦芽窄食单胞菌(S.maltophilia)菌株.通过单因素优化法和均匀设计法确定S.maltophilia产几丁质酶的最佳条件:在pH值为7.0的基础培养基中添加质量分数为1.0%的酵母膏、质量分数为0.5%的胶体几丁质,于180 r·min-1,30 ℃的摇床中培养60 h.对硫酸铵沉淀获得的粗酶进行酶学性质研究,结果表明,该几丁质酶的最适反应温度为50 ℃,最适反应pH值为7.2,在55 ℃以上的温度条件下容易失活.通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,确定S.maltophilia几丁质酶的相对分子质量为6.8×103;以筛选的S.maltophilia菌株的总DNA为模板,利用聚合酶链式反应(PCR)扩增出几丁质酶DNA测序;应用生物信息学手段推导S.maltophilia几丁质酶为分泌型蛋白酶,预测其等电点pI值为5.42,相对分子质量为6.8×103(与实验纯化的酶蛋白电泳结果一致).预测该酶氨基酸序列具有信号肽区(氨基酸残基1～41)、Ⅲ型几丁质结合区(残基47～92)、多囊肾病域(107～194)、类纤维连接蛋白Ⅲ型区(Fn3,201～278)和18家族糖基水解域等5个结构功能区,5个区域被富含Ala,Gly,Pro,Ser和Thr的短序列连接起来;在第400～500个氨基酸残基间有一个螺旋结构.     

野油菜黄单胞菌NK－01生物合成黄原胶的分子遗传学分析

本文采用甲基磺酸乙酯（ＥＭＳ）诱变野油菜黄单胞菌ＮＫ－０１得到多糖合成缺陷的不产粘突变株。经ＳａｌＩ部分酶切得到ＮＫ－０１染色体ＤＮＡ片段，将其连接到广泛寄主载体ｐＲＫ２９３上，在Ｅ．ｃｏｌｉＨＢ１０１中建立完整的ＮＫ－０１基因文库。在协助质粒ｐＲＫ２０１３存在下，不产多糖突变株分别与含基因文库的Ｅ．ｃｏｌｉ菌落群进行三亲接合转移，筛选具有卡那霉素抗性的产粘接合后体。对接合后体进行重组质粒的酶切分析表明，所克隆的ＤＮＡ具有片段重叠。上述重组质粒对另外９株不产多糖突变株互补检测及遗传学分析表明，１３．４ｋｂ的ＤＮＡ片段含有合成黄原胶所必需的基因。     

积累聚β－羟基丁酸的菌种选育及发酵条件

苜蓿根瘤菌ＡＳ１．１５９经亚硝基胍和Ｃｏ￣（６０）γ射线诱变，获得一株高积累聚β－羟基丁酸（ＰＨ８）突变株Ｊ５１７７，积累的ＰＨＢ可达细胞干重的３０％，约为原出发菌株的１０倍。采用分批补料发酵法，积累的ＰＨＢ可达细胞干重的７１％。菌体生长最适Ｃ／Ｎ比值为２．５，菌体积累ＰＨＢ最适Ｃ／Ｎ比值为１５；ＣａＳＯ＿４，Ｎａ＿２ＭｏＯ＿４对菌体积累ＰＨＢ有促进作用。     

α－淀粉酶水解液发酵生产麦角隐亭的研究

用５％麦粉的α－淀粉酶水解液培养麦角菌ＡＴＣＣ２００１９，结果其发酵液能产生麦角隐亭（５０．１６±２．４０）μｇ／ｍＬ，与３０％蔗糖的发酵培养基的产碱量（２０．７４±３．５３）μｇ／ｍＬ相比，两者有差异（ｐ＜０．０５）．在１０％蔗糖的培养基中，发酵第４天后补加５％麦粉的α－淀粉酶水解液，麦角隐亭的产量为（４７．１２±６．３４）μｇ／ｍＬ，也高于碳源为３０％蔗糖的产碱量（１９．８９±２．４０）μｇ／ｍＬ，两者差异显著，ｐ＜０．０１．而两种方法的菌丝体生长量均相差无几，ｐ＞０．０５．     

L－谷氨酰胺生产菌定向选育的初步研究

以天津短杆菌ＴＧ－８６６为出发菌株，利用亚硝基胍、硫酸二乙酯等常规诱变方法以及原生质体融合法最终筛选出一株谷氨酰胺生产菌ＧＭＮ－１８［ＭＳＯ~Ｒ＋８－ＡＧ~Ｒ＋ＳＧ~Ｒ＋（ＮＨ_４）_２ＳＯ_４~Ｒ］，在适宜条件下平均积累谷氨酰胺２７．３ｇ／Ｌ。     

DM·MC共聚物对α－酮基－L－古龙酸发酵液的除蛋白性能

在研究由二步发酵法制维生素Ｃ的α－酮基－Ｌ－古龙酸发酵液除蛋白工艺过程中，重，人考察甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵（ＤＭ·ＭＱ与丙烯腈共聚物的除蛋白效率。证明此结构的凝聚剂对于微生物发酵液中的蛋白质具有优良的凝聚能力，去除可溶性蛋白质达９４％～９５％，超过一般有机高分子阳离子凝聚剂，并确定了此共聚物结构中阳离子度７０％～８０％的共聚物具有最佳效果。     

L－乳酸发酵的研究──（Ⅱ）－L－乳酸生产菌的选育

利用淀粉－酸性培养基富集培养法和ＫＭｎＯ４－ＫＢｒ平板检出法从土壤中分离得到根霉菌株Ｒ－２，以其为出发菌经紫外诱变，在琥珀酸平板上筛得了变异株Ｒ－２－９１，其乳酸产率为１０．３％，对糖的转化率为６８．９％。     

离子交换树脂的表面结构及其催化－α－取代脂肪酸酯化反应动力学的研究

研究利用离子交换树脂催化α－甲基丁酸酯化反应的动力学和反应机理。研究了树脂的表面结构特点及其与催化性能的关系，并从树脂催化作用的模式解释在α－位阻脂肪酸酯化中的活性显著大于硫酸的活性。     

聚钛氨烷－钯配合物催化卤代苯双羰基化合成α－酮酰胺的研究

报道了以二氧化硅为担载的聚钛氨烷－钯配合物（Ｔｉ－Ｎ－Ｐｄ）的合成和其对卤代苯双羰基化合成α－酮酰胺反应的催化作用。在一氧化碳压力为３．０ＭＰａ，１００℃下反应６ｈ，碘苯转化率达１００％，双羰化产物（ＰｈＣＯＣＯＮＥｔ２）选择性高于９０％。且催化剂易与反应产物分离和重复使用，经回收使用１０次，催化剂的活性和选择性基本保持不变。     

α-乙酰基二硫缩烯酮在TiCl4催化下的酰化反应机理研究

在B3LYP/6-311G(p)理论水平上研究α-乙酰基二硫缩烯酮在TiCl4催化下的酰化反应的微观反应机理.优化反应过程中的反应物、中间体、过渡态和产物的结构,同时采用了极化连续介质模型(PCM)对各个驻点进行了单点能计算以模拟在CH2Cl2溶剂中的反应过程,并且应用了自然轨道理论(NBO)和分子中的原子理论(AIM)分析了这些物质的成键特征和轨道间的相互作用.计算结果得到此反应在TiCl4催化情况下的活化能小于没有催化剂情况下的活化能,证明了在TiCl4催化剂参加的情况下有利于此反应的进行,溶剂效应也较大程度地降低了此反应的活化能.