一株铜绿假单胞菌的分离鉴定及其对VPAHPND拮抗效果的评价

近年来,急性肝胰腺坏死病(Acute hepatopancreatic necrosis disease, AHPND)造成了凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖业巨大的经济损失,其病原为一类含有致病基因PirAB的弧菌(Vibrio),主要为副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP_AHPND).本研究以VP_AHPND为受试菌株,从江苏海域捕获的黄姑鱼(Nibea albiflora)体内分离筛选对VP_AHPND具有抑制作用的拮抗菌株.通过形态学、生理生化及分子生物学方法进行鉴定,研究了其拮抗效果、拮抗活性物质,并对生物安全性和被动保护效果进行评估.结果表明,分离筛选出1株具有良好拮抗效果的菌株JSHY97,经鉴定该菌株为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa).该菌株对3株具有不同分型的VP_AHPND均具有良好的拮抗效果,其抑菌圈直径达19.25 mm～21.80 mm,初步判断其活性物质来源于胞外产物.口服JSHY97的凡纳滨对虾...     

荧光假单胞菌与植物病害生物防治

荧光假单胞菌对多种植物病害具有防治作用,它首先在植物根际定殖,然后靠噬铁素对铁离子(Fe~(3+))的竞争和抗生素的拮抗作用抑制病原菌的生长发育,保护植物体免受病菌危害。荧光菌在根际的定殖能力与它同根系分泌物的凝集能力有关,与它在根表的短期不可逆吸附也有一定关系。荧光菌菌剂研究较多,目前最好的可贮存一年。虽然荧光菌已成功地用于一些病害的生物防治,但仍有许多问题有待解决。     

荧光假单胞菌P32培养基的优选

本文对荧光假单胞菌P32的培养基成分进行了研究,利用正交试验筛选出产菌量较高的培养基,成分如下:(％,W/V)蔗糖6,甘油3,蛋白胨1,NH_4H_2PO_4,0.5.     

荧光假单胞菌产木聚糖酶的纯化和性质

有硫酸铵分级沉淀,葡聚糖凝胶分离技术,对荧光假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕ．）所产的半纤维素酶进行分离纯化,得到单一组分的木聚糖酶。通过凝胶电泳法,测得其摩尔式量为３３０００。研究表明,该酶的最适ｐＨ值为６．０,最适温度６０℃。酶的动力学研究测出米氏常数Ｋｍ值为４．７６ｍｇ／ｍｌ。     

检查假单胞菌荧光色素方法的改良

金氏B培养基中加入蛋黄之后,荧光假单胞杆菌产生荧光色素的能力加强,便于检验,对于产生荧光色素能力弱的菌株也能得到明确的阳性结果,这一方法的使用,消除了(月示)蛋白胨对培养基质量的限制。     

一株产CoQ10的红假单胞菌的研究

从滇池分离到一株革兰氏阴性杆菌，于光照厌氧及黑暗好氧条件下生长良好，活细胞在870、803nm处有吸收峰，具平行片层状的光合内膜系统，可归属于红假单胞菌属（Rhodopseudomonas)；该菌体中提取分主了得到的黄色结晶品，经Craven试验、高效薄层层析、高效液相色谱、紫外光谱、红外光谱、核磁共振及质谱证实，为CoQ10。     

红假单胞菌产类胡萝卜素条件的研究

通过对影响红假单菌类胡萝卜素的因素的全面研究,获得了胡萝卜素产量相对辊主贩培养条件,以乙酸钠为碳源,谷氨酸钠为氮源,酵母亮为生长因子,４ｍｇ／Ｌ,ＭｇＳＯ４,２ｍｇ／ＬｆＥ２（ｓｏ４）３,１５００ｌｘ光照度,３０℃,微好氧培养１２０ｈ。     

荧光假单胞菌噬铁素的性质研究

本文报道了荧光假单胞菌Ｐ３２产生的噬铁素的特性．噬铁素在紫外光下发出黄绿色荧光，与Ｆｅ３＋有高度亲和性，在２３０ｎｍ和４００ｎｍ附近各有一吸收峰，氨基酸组成为苏氨酸：甘氨酸：赖氨酸：胱氨酸：亮氨酸：天冬氨酸＝２：４：４：４：１：１，生物合成需较低浓度Ｆｅ３＋为条件，与Ｆｅ３＋的复合物无荧光，但可用连二亚硫酸钠，８－羟基喹啉和抗坏血酸粉末恢复荧光．     

固定化假单胞菌产L—多巴

选择海藻酸钙和聚乙烯醇凝胶为固定化载体包埋假单胸菌,以提高该菌以Ｌ－酷氨酸为底物生产Ｌ－多巴的效率。     

经驯化的假单胞杆菌DMI对CH_2Cl_2和CH_3OH的竞争性利用

用分批培养的方法研究了经ＣＨ２Ｃｌ２或ＣＨ３ＯＨ驯化的假单胞杆菌ＤＭＩ对ＣＨ３ＯＨ和 ＣＨ２Ｃｌ２竞争性利用的动力学．ＣＨ２Ｃｌ２的降解过程是严重底物抑制过程，ＣＨ２Ｃｌ２和ＣＨ３ＯＨ 的同时利用有助于提高菌体的生长速率．两种底物共存时，甲醇的消耗占优势、同种底物比 的消耗速率均低于在单一碳源时的数值．高浓度甲醇的竞争作用不但抑制了ＣＨ２Ｃｌ２驯化的 ＤＭＩ对ＣＨ２Ｃｌ２的降解能力，而且抑制了ＣＨ３ＯＨ驯化菌脱卤活性的诱导过程．两种底物消 耗的相对速率取决于接种物的生物活性和底物的相互作用．     

具有ACC脱氨酶活性及抗枯萎病菌的假单胞菌株B*8

运用新的快速筛选程序,获得了具有１－氨基环丙烷－１－羧酸（１－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－１ｃａｒ－ｂｏｘｙｌａｔｅ,ＡＣＣ）脱氨酶活性和拮抗瓜类枯萎病菌双重功能的根际假单胞菌株Ｂ８．利用ＡＣＣ为唯一氮源,从不同的土样中,快速筛选出８０个具有ＡＣＣ脱氨酶活性的菌落．在马铃薯葡萄糖培养基和西瓜培养基上,经异步培养法进一步筛选并纯化出３株对西瓜枯萎病菌具有较强拮抗作用的拮抗菌Ａ９、Ｂ８和Ｃ１７．对拮抗作用最强的Ｂ８进行分析表明,它属于假单孢菌属,能分泌较多的铁载体,对瓜类枯萎病以及其他植物病原菌具有广谱抗性．结果显示,此程序可替代通常采用的低效而耗时的筛选和生物测定过程,加快新的促进植物生长根际细菌的筛选和应用．     

一株耐酸硫酸盐还原菌的分离筛选及生理特性研究

从四川化工集团硫酸厂废水污泥中分离到一株耐酸硫酸盐还原菌.分离菌属于中温菌,最佳生长温度为36℃;轻度耐盐,浓度在1%左右.分离菌具有较宽的pH生长范围(5.0~8.5),且在pH 5.0时的细胞生长量达到最高,与pH7.0时的生长水平相同.相对于已报道的硫酸盐还原菌,具有很强的耐酸性能.分离菌的另一显著特点是碳源利用范围广,能分别利用甲酸钠、乙酸钠、乙醇、丙酸钠、乳酸钠、葡萄糖作为电子供体,进行硫酸盐异化还原.菌体呈杆状或弧状,大小为(0.5~0.6)×(1.7~2.0)μm,革兰氏染色阴性,芽孢染色阴     

2010年南方水稻黑条矮缩病应急防控试验探究

南方水稻黑条矮缩病是一种严重为害水稻生产的病毒病,目前没有十分有效的防控措施,特别是对已经大面积暴发成灾的本田期水稻。本研究在江西省萍乡市芦溪县麻田乡,针对整个田块已经发生病毒病的二晚移栽稻田,进行应急防控实验,探究不同药剂组合对南方水稻黑条矮缩病的防治效果。试验以杀虫剂、抗病毒剂、生长调节剂、免疫激活剂和生物肥料为材料,通过不同的组合和不同的施药次数,探讨不同处理的防治效果,试验发现不同的药剂组合对防治南方水稻黑条矮缩病的确存在不同的防治效果,最高防治效果可达46.75%。这些研究为下一步研究防治水稻病毒病应急防控措施奠定基础。     

转溶菌酶基因籼稻在湖南地区的抗稻瘟病研究

以转溶菌酶基因粳稻中花9号[ZH9(R)]与几个湖南地区目前生产上有广泛应用价值但感病的籼型杂交稻亲本9311、MH63、288、E32和PA64s进行一次杂交和多次回交转育,从各转育世代中选育出优良的抗病株系,进而配制新的杂交稻组合,以期获得优良杂交稻亲本新品系。试验结果表明,各转育后代发病情况均明显轻于对应籼稻亲本;在这5个品种中,MH63要优于其它几个亲本,其转育后代抗性和农艺性状也相对优良,且已基本趋于稳定;田间筛选到的353份优良单株的DNA样中检测到269个阳性样,阳性检出率达76.20%,对应田间的抗性表现,吻合率达94.05%。     

Acclimation and Characterization of a Pseudomonas Strain for Improved Phosphorus Removal

A Pseudomonas strain(named as P.PAO-1) with phosphorous removal function was isolated and characterized.A new method of two-stage cultivation was applied to the strain to induce the synthesis of intracellular polyhydroxylbutyrate(PHB) in the cells.In the first stage,bacterial cells were enriched under a high carbon source condition;in the second stage,the bacteria cells were cultivated under the nutrient-imbalanced conditions with the carbon source-regulated medium.As a result,the PHB content of strain P.PAO-1 reached 22.8% compared with the normal 7.41% in the non-acclimated strain.This change had led to the rising of P uptake from 1 to 25 mg·L~(-1).When added the strain P.PAO-1into the activated sludge(with the addition proportion of 1:1),the ratio of biological phosphorus removal increased by 14.9%under the normal alternating anaerobic/aerobic conditions with low-carbon consumption.The results demonstrated that the isolated pure culture strain P.PAO-1 belonged to the functional group of poly-P accumulating microorganism.When cultured by the two-stage cultivation method,the initial accumulation of PHB in the strain cells could be achieved and the phosphorous removal capacity of strain P.PAO-1 could be induced subsequently.When applied to the wastewater,strain P.PAO-1 performed phosphorus removal from the wastewater with or without the addition of activated sludge.     

抗稻瘟病水稻BAC文库的构建与鉴定

水稻是一种重要的粮食作物,同时也是一种重要的单子叶植物模式.稻瘟病是水稻生长中的一种严重病害,因此分离和克隆新的稻瘟病抗病基因具有重要的应用价值.以一个抗稻瘟病农家种水稻为材料,以plndigoBAC5为载体,构建了细菌人工染色体（BAC）文库.该文库共有90 000个转化子,插入频率99％,插入片段平均长度为105 kb,由此推测这个文库覆盖水稻基因组约20倍.利用其中的45 000个转化子建立了4维PCR筛选体系,并且通过4维PCR筛选体系,筛选获得了7个含水稻分蘖基因（MOC1）的阳性克隆.因此该文库是一个高质量、高覆盖率的水稻BAC文库,能有效用于目的基因的分离.     

一株拮抗稻瘟病内生霉菌OsiSh-10的筛选与鉴定

从湖南浏阳大围山种植的湘矮早7号水稻中,筛选到一株对水稻稻瘟病菌有显著抑制效果的水稻内生放线菌OsiSh-10菌株.由拮抗菌包覆种子和喷晒水稻叶面的实验表明将该菌喷晒于水稻叶面可以对叶瘟起到明显的控制效果,且喷一次的效果比喷两次的效果好,包覆种子反而使病情指数升高.根据形态特征、培养特征、生理生化、16s rRNA序列比对及进化树构建鉴定OsiSh-10菌株属于白色链霉菌(Streptomyces albus).OsiSh-10是一株具有稻瘟病生防潜力的菌株.     

一株抗马铃薯晚疫病菌的粘细菌鉴定及其活性分析

本文采用大肠杆菌诱导的方法,从内蒙古呼和浩特市采集的土壤中分离到一株细菌(Xt-2)。通过子实体和菌落形态学的初步观察、生理生化特征和16S rDNA分子鉴定,该菌株具有与橙色粘球菌相似的形态及生理生化特征,且其16S rDNA序列与橙色粘球菌的16S rDNA序列具有99%的同源性,说明该菌株为橙色粘球菌。抗菌活性表明菌株Xt-2具有明显的抗马铃薯晚疫病菌活性,且活性物质主要存在于菌株的胞外代谢产物中。活性物质不是蛋白质,对紫外的耐受性比较好,但对高温、过酸或过碱的环境比较敏感。本研究为菌株Xt-2抗马铃薯晚疫病活性物质的提取、分离及鉴定奠定了基础,也为内蒙古地区粘细菌的深入研究及抗马铃薯晚疫病新药研发奠定了一定的基础。     

假单胞杆菌BC001对吡啶和喹啉的生物去除

从首钢焦化厂废水处理系统的活性污泥中分离出1株能在高浓度的吡啶(约400mg/L)和喹啉(约500mg/L)双基质条件下良好生长的细菌,经16SrDNA及生理形态特征鉴定为假单胞杆菌(Pseudomonassp.BC001),它对吡啶的去除主要通过生物吸附,而对喹啉的去除包括生物吸附和降解两个阶段。该菌能利用喹啉作为唯一的碳源和氮源代谢生长,适量的外加碳源对喹啉降解具有促进作用,经检测喹啉降解的中间产物主要为2-羟基喹啉和8-羟基香豆素,氮的主要代谢终产物为NH4 。