水稻花发育相关MADS-box基因的克隆

以水稻幼穗总ＲＮＡ为模板,利用３′－ＲＡＣＥ克隆了８个接近于全长的水稻ＭＡＤＳ－ｂｏｘ 基因的ｃＤＮＡ．在ＧｅｎＢａｎｋ 的数据库中查询表明,其中２个ＦＤＲＭＡＤＳ１,ＦＤＲＭＡＤＳ２分别与已报道的水稻ＭＡＤＳ－ｂｏｘ 基因Ｏｓ－ＭＡＤＳ５和ＯｓＭＡＤＳ４５有极高的同源性,另外６个为新的尚未见报道的水稻ＭＡＤＳ－ｂｏｘ 基因．系统进化树分析表明ＦＤＲＭＡＤＳ１,ＦＤＲＭＡＤＳ２和ＦＤＲＭＡＤＳ４可能与Ｃ组基因的功能相关;ＦＤＲＭＡＤＳ３,ＦＤＲＭＡＤＳ６和ＦＤＲ－ＭＡＤＳ７可能与Ａ 组基因的功能相关     

水稻花发育相关MADS—box基因的克隆

以水稻幼穗总ＲＮＡ为模板,利用３’－ＲＡＣＥ克隆了８个接近于全长的水稻ＭＡＤＳ－ｂｏｘ基因ｃＤＮＡ。在ＧｅｎＢａｎｋ的数据库中查询表明,其中２个ＦＤＲＭＡＤＳ１,ＦＤＲＭＡＤ＃２分别与已报道的水稻ＭＡＤＳ－ｂｏｘ基因ＯＳＭＡＤＳ５和ＯｓＭＡＤ４５有极高的同源性。另外６个为新的未见报道的的水稻ＭＡＤＳ－ｂｏｘ基因。     

河南西峡恐龙18srDNA片段质颖

按照ｒＤＮＡ的结构特点，将ＤＡ１８Ｓ１，７与其他８种生物的ｒＤＮＡ序列进行排列比较，结果表明这２上序列不是恐龙ｒＤＮＡ片段ＤＡ１８Ｓ７看来更接近一种植物ｒＤＮＡ片段，而ＤＡ１８Ｓ１与２种参与比较的真菌ｒＤＮＡ序列有很高的同源性，它们与脊椎动物ｒＤＮＡ的同源性分别只在６７．８％－７４．１％之间。     

河南西峡恐龙18srDNA片段质疑

按照ｒＤＮＡ的结构特点，将ＤＡ１８Ｓ１，７与其他８种生物的ｒＤＮＡ序列进行排列比较，结果表明这２个序列不是恐龙ｒＤＮＡ片段，ＤＡ１８Ｓ７看来更接近一种植物ｒＤＮＡ片段（与金虎尾的同源性达９４％以上），而ＤＡ１８Ｓ１与２种参与比较的真菌ｒＤＮＡ序列有很高的同源性（８８．３％和８９％），它们与脊椎动物ｒＤＮＡ的同源性分别只在６７．８％～７４．１％之间。     

水稻广陆矮4号基因文库的构建及U2snRNA基因的筛选

水稻广陆矮４号黄化苗总ＤＮＡ经Ｓａｕ３Ａ部分酶切，回收１２－２３ｋｂ片段，经ＣＩＰ脱磷后克隆于ＥＭＢＬ３载体，建立了水稻基因文库。以拟南芥的Ｕ２．２ｓｎＲＮＡ基因为探针，从基因文库中筛选到１３个阳性克隆，经不同酶切鉴定，初步判断有８种不同的克隆，对其中一个克隆ＦＤＲＧＵ２－３的重组ＤＮＡ构建了物理图谱，Ｕ２ｓｎＲＮＡ的一个基因已经定位在该克隆中１．５ｋｇ的Ｓａｌ－Ｉ－ＢａｍＨＩ酶片段上。     

利用RAPD标记鉴定芥菜(Brasica juncea Cos.)品种(英文)

从６０种１０ｂｐ随机引物中筛选出７种引物,对８个芥菜变种的１６个品种（每个变种有２个品种）进行了随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）鉴定,能快速、灵敏、较为简便获得了１６个芥菜品种的基因组ＤＮＡ指纹图谱．结果表明,不同引物在１６个品种上都有其特征ＤＮＡ带,一般只有１条,少数有２条．在同１个变种的２个品种之间存在着丰富的ＲＡＰＤ标记,通过比较２个品种各自独具的ＲＡＰＤ标记,就可明确地将２个品种区分．在所用的７种引物中,没有１种能同时将８对芥菜品种全部区分开,但用２种或２种以上的引物就完全可以将８对芥菜品种全部区分开．     

水稻基因组中U2snRNA基因连锁的分析

根据Ｕ２ｎＲＮＡ基因的保守性和结构特点设计引物,通过ＰＣＲ法扩增Ｕ２ｓｎＲＮＡ连锁基因间区的ＤＮＡ片段并进行顺序分析,证实在水稻中至少存在一组Ｕ２ｓｎＲＮＡ连锁基因。对水稻总ＤＮＡ的ＰＣＲ分析结果表明,水稻中可能还存在其他形式的连锁基因。ＰＣＲ方法可以有效地应用于结构保守基因的连锁分析中。     

中国人P型铜转运ATP酶基因突变的初步研究

应用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）及测序等方法分析了１４１便ＷＤ患者ＡＴＰ７Ｂ基因第７、９及１４外显子的部分ＤＮＡ序列改变，通过对患者ＤＮＡＴ下沉人ＤＮＡＲＰＣＲ－ＳＳＣＰ电泳带迁移作对比分析，发现在１４１例患者中第７、９及１４外显子ＰＣＲ扩增产物迁移异常才分别为４例、６例和４０例，依据ＤＮＡ物单链构聚与分子电泳迁移的关系，提示该组病人中ＡＴＰ７Ｂ基因第７、９和１４外显子的突变率     

具有自主复制功能的水稻高度重复序列ARS2的结构和功能分析

对一个水稻珍汕９７Ａ不育系核ＤＮＡ来源的具有自主复制功能的高度重复顺序片段ＡＲＳ２（全长４７２０ｂｐ）进行了亚克隆构建和测序,获得了它的全顺序。     

利用RAPD标记鉴定芥菜（Brassica juncea Coss.）品种

从６０种１０ｂｐ随机引物中筛选出７种引物,对８个芥菜变种的１６个品种进行了随机扩增多态性ＤＮＡ鉴定,能快速,灵敏,较为简便获得了１６个芥菜品种的基因组ＤＮＡ的指纹图谱。结果表明,不同引物在１６个品种上都有其特征ＤＮＡ带,一般只有１条,少数有２条。在同１人变种的２个品种之间存在着丰富的ＲＡＰＤ标记,通过比较２个品种各自独具的ＲＡＰＤ标记,就可明确地将２个品种区分。     

水稻悬浮系细胞的建立及植株再生

水稻（辽盐9）种子在LS＋2,4－D（2,4-二氯苯氧乙酸）2．0～3．0mg/L的培养基上进行诱导培养,经3～4次继代后,即可得到淡黄色颗粒性愈伤组织;将该种愈伤组织在LS＋2,4－D2．0～3．0mg／L＋LH（水解乳蛋白）300mg/L的液体培养基上进行振荡培养,经4～5次继代后,即可建立起良好的细胞悬浮系;培养基中附加2．0～2．5mg／LKT,使愈伤组织和悬浮细胞均可再生,其再生率分别为15．9％～17．9％和18．1％～20．8％。     

通过遗传转化获得含多基因的水稻转基因纯合植株

利用基因枪法将含有4个不同基因的3个质粒共转化由粳稻品种鄂宜105号和鄂晚5号种子胚诱导的愈伤组织（5－10d龄）。从轰击的986块愈合组织中共再生出169株独立的转基因水稻植株（转化率为17％）。PCR／Southern blot分析显示70％以上的转基因植株含有所有4个基因。GUS组织化学分析、Western blot和或RT－PCR分析表明所有4个基因的共表达率为70％。未观察到任何质粒在整合中存在优势,转基因拷贝数也与基因表达量无关。遗传分析证实外源基因在后代植株中大多以孟德尔方式遗传。从其R1代为3：1孟德尔方式遗传的后代R2代植株中,鉴定含有3个或4个不同基因的转基因纯合植株系。PCR／Southern blot分析证实了这些转基因纯合植株系。这些系的植株具有相似的外源基因表达量。我们证实通过基因枪介导的共转化,结合常规育种方法筛选可以获得含多基因的转基因水稻纯合植株。这项技术为利用基因同时改良作用多个性状提供了一种途径。     

农杆菌介导GNA基因对水稻的遗传转化

在ｐＣＡＭＢＩＡ３３００质粒中插入带有ＲＳｓ－１启动子的ＧＮＡ基因,并利用农杆菌介导的遗传转化将其导入水稻的微不定芽受体,得到了再生植株。ＰＣＲ,Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ的检测结果初步证明ＧＮＡ基因已经整合到水稻的基因组中并得到表达。     

含编码类铁氧还双亲性蛋白ap1基因的转基因水稻植株的获得

利用基因枪法将含有潮霉素抗性基因（hpt),gusA报告基因和ap1基因的2个质粒（pJIMB15和pBiSAP1)共同转化同转化由粳稻品种鄂宜105号种 子在胚诱导的愈伤组织（2－3周龄）。ap1基因编码一种双亲性的蛋白。该蛋白能延缓因假单孢菌感染所引起的非寄主植物中的过敏反应。经过2轮潮霉素（30mg/L)筛选,抗性愈伤组织被转入含30mg/L潮霉素的再生培养基中再生植株。从轰击的186块愈伤组织中共再生出32株独立的转基因水稻植株（转化率为17．2％）,PCR／Southern blot分析显示84％的转基因植株含有所有3个基因。     

GUS和HPT基因的基因枪法转化水稻

以水稻（丹粳－５号）愈伤组织为受体材料，采用基因枪法将含有ＧＵＳ和ＨＰＴ基因的ＣＭ２质粒导入水稻细胞．经过５０ｍｇ／Ｌ的潮霉素筛选，获得抗性愈伤组织，并在同样筛选压力下诱导分化成苗，获得抗性苗．共获得１７个抗性克隆．ＧＵＳ组织化学检测表明，有１２个克隆为ＧＵＳ阳性，ＧＵＳ和ＨＰＴ基因共表达率为７０％左右．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分子检测证明ＨＰＴ基因已整合到水稻基因组中．     

Identification and analysis of ARS function of six plant MARs

Six plant MARs isolated from tobacco and Arabdiposis were investigated for their ARS activity in yeast. The results showed that among the six plant MARs, only TM1 and AM4 had strong ARS activity which was almost the same as that of ARS from yeast chromosome. In order to further identify the core region of the two MARs for the ARS activity, a series of subclones were created by PCR strategy, and the corresponding subclones were designated as TM1-1, TM1-2, TM1-3, AM4-1, AM4-2 and AM4-3, respectively. Our studies revealed that TMI-3 and AM4-3 not only had higher ARS activity, but also displayed higher transformation frequency, plasmid stability and growth rate compared to their intact MARs, TM1 and AM4. These data present an important clue for further elucidating the relationship between MAR and ARS.     

Cloning and sequencing of Gtx-2 homeobox sequence

Murine genomic DNA was surveyed by polymerase chain reaction (PCR) to detect homeobox sequence of mammal. The PCR product (413 bp) was cloned and sequenced. The nucleotide sequence and the deduced amino acid sequence of a homeobox, which was isolated in this study, designated Gtx-2 were obtained. The result of sequence analysis showed that there is an intron between the nucleotides at position 138 and 139 in the Gtx-2 homeobox. Southern blot analysis revealed that Gtx-2 is likely to exist as a single copy in the murine genome. Comparison of the encoded polypeptide sequence with other homeodomains reveals that Gtx-2 has 96% and 58% identity to that of Gtx-1 and Tcl-3, respectively. Ma Xiaojun: born in 1941, Associate professor.     

褐飞虱喂养试验显示表达GNA的转基因水稻纯系抗褐飞虱

利用基因枪法将含有3个不同基因（hpt,gus和gna）的质粒pWRG1515和pRSSGNA1共同转化粳稻品种鄂晚5号成熟胚诱导的愈伤组织。共再生出35株独立转基因植株。PCR／Southern印迹法分析发现,83％的转基因植株含有所有3个外源基因。Western印迹法分析发现79％的含gna基因的转基因植株以不同水平表达GNA。遗传分析证实外源基因在转基因植株后代中以孟德尔方式遗传。从其R1代亲本为孟德尔3：1方式遗传的R2代中,鉴定出2个含有所有3个外源基因的独立转基因植株纯系。这些纯系具有相似的外源基因表达量。褐飞虱喂养试验表明,这些纯系对褐飞虱具有显著的抑制作用。这些褐飞虱抗性提高的转基因纯系将应用于水稻抗虫育种中。实验证明,通过遗传转化和筛选可获得含在农业上有应用价值基因的转基因水稻纯系。     

杂交早稻新组合马协118—2应用价值的研究

马协１１８－２经２年省 区试的结果表明,比对照组合汕优７０２３（ＣＫ１）全生育期早２．４ｄ比鄂早６号（ＣＫ２）迟１．７ｄ,产量比ＣＫ１与ＣＫ２分别增产８．６％和７．４％,呈极显著水平;多点试种比鄂早６号增产１０．０％以上,稻米品质为二级食用优质籼米。对白叶枯病,稻瘟病的抗性以及对纹枯病的耐性明显地优于对照。该组合是一个综合性状优良的杂交早稻组合,可在我省及长江中下游地区作迟熟早稻种植。