安宁河流域鸭瘟、鸭霍乱综合防治研究Ⅳ．鸭瘟疫苗和霍乱苗的性能测定

对鸭瘟鸡胚化弱毒苗（鸭瘟苗）、鸭瘟、禽霍乱（Ｇ１９０Ｅ４０）二联活苗（二联苗）和巴氏杆菌Ａ群菌苗（Ａ苗）的安全性、免疫力产生时间及对产蛋率的影响作了观测，结果表明：用正常免疫量的５～７倍接种各组试验鸭后，１４天内无一死亡，说明安全性很好，产蛋母鸭分别接种三种苗后，其免疫前后１５天或５天的产蛋率与对照组相比均有所下降，但不很明显，且在１５天后几乎完全恢复正常，免疫Ａ群菌苗后６天开始出现免疫力，二联苗和鸭瘟弱毒苗均在免疫后３天开始出现对强毒攻击的保护作用。     

Gln 对鸭瘟感染鸭十二指肠免疫调节相关基因表达量的影响

摘要: 目的 为谷氨酰胺( Glutamine,Gln) 在正常鸭及鸭瘟( Duck plague,DP) 模型中对肠道功能及作用途径的研究提供依据。方法 280 只无特定病原体( Specific pathogen free,SPF) 7 日龄雏鸭随机分为 8 组,四组梯度剂量每天灌喂 Gln( 0、0. 5、1、2 g / kg 饲 料) 6d,及另四组灌喂同等梯度剂量 Gln 6 d,于 第 一 天 灌 喂 30 min 后 攻 0. 2 mL2000TCID50 鸭瘟病毒,观察 Gln 对正常雏鸭的免疫促进作用及攻毒鸭免疫应激的缓解作用。测定 Toll 样受体 4( Toll-like receptor 4,TLＲ4) 通路基因表达量。结果 Gln 显著提高正常组 TLＲ4 通路 mＲNA 表达量( P ＜ 0. 05) ,显著降低攻毒组表达量( P ＜ 0. 05) 。结论 Gln 通过 TLＲ4 通路提高正常雏鸭肠道的免疫力,降低鸭瘟病毒( Duck plague virus,DPV) 造成的肠道免疫损伤。     

鸭疫里默氏杆菌三价灭活疫苗的免疫保护期研究

选择免疫原性好的血清1,2,4型鸭疫里默氏杆菌（RA）分离株制备三价灭活油乳剂苗,疫苗抗原含量为5×109CFU/ml,分别用0.5,1.0和1.5ml/只剂量接种7日龄樱桃谷肉鸭以检验器其安全性;用0.25ml/只的剂量接种樱桃谷肉雏鸭,分别于免疫后第1、2、3,4、5和9周攻毒,以检验其免疫效果.安全性检验结果显示,肉雏鸭接种后未见局部和全身异常反应;攻毒保护试验结果显示,免疫后2～9周雏鸭对3个血清型的RA的攻毒保护率达70％ ～ 100％.证明该三价灭活疫苗具有良好的安全性免疫保护力,免疫保护期不少于9周.     

实验性鸭瘟的病原动态分布及病理组织学观察

针对30只DPV攻毒试验鸭及30只同居鸭的体内DPV-DNA动态分布及病理组织学变化,采用PCR技术和常规病理学方法进行研究、结果显示：（1）DPV攻毒后6h,用PCR方法在肝、脾、法氏囊、胸腺、血液、直肠粪便可检测到DPV-DNA（2）DPV经不同途径感染成年鸭后,病毒在体内的动态分布有一定的差异．（3）在自然感染的情况下,肝、肺、血液．胸腺、直肠粪便可作为鸭瘟病原DNA早期检测的首选取材样本．（4）DPV感染后,患鸭的肝脏、肾小管上皮细胞．脾脏、法氏囊及胸腺网状细胞可见核内包涵体．（5）组织病变与病原分布的时序性相关,试验组鸭在DPV攻毒后24h,同居感染组鸭在同居后72h,心、肝、肺、肾、大脑、脾脏、法氏囊、胸腺、十二指肠等组织均表现出程度轻微的实质细胞肿胀、变性;继而发展为细胞水肿、坏死,间质严重出血（6）免疫器官胸腺、脾、法氏囊、骨髓的病原检出及组织病变皆发生在DPV感染的早期,病变器官从组织水肿、充血、出血、淋巴细胞数量减少,迅速发展为坏死．上述结果为研究DPV的致病机理、鸭瘟的早期诊断和鸭瘟的防制提供了依据．     

暴发性鸭瘟的诊断

通过对四川德阳地区某养殖场的发病种鸭的流行病学调查，临床观察。病理剖检。病原分离及聚合酶链式反应确诊该养殖场鸭群暴发鸭瘟：并针对其场地的具体情况提出了相应的防疫建议。     

鸭乙肝病毒表面抗原特异性单抗的研制及应用

以纯化的鸭乙型肝炎病毒表面抗原（ＤＨＢｓＡｇ）免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,取免疫鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤ＳＰ２／Ｏ－Ａｇ１４融合,应用ＥＬＩＳＡ筛选出５Ｂ８和８Ｇ１１ ２株抗体分泌滴度较高的杂交瘤细胞,二者所分泌的单抗仅与ＤＨＢｓＡｇ发生反应,而与其它９种禽类常见的病毒均不发生反应,其亚类鉴定分别属于ＩｇＭ和ＩｇＧ２ａ。用鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）阳性鸭血清中粗提的病毒悬液进行５Ｂ８株单抗介导的ＳＰＡ胶体金     

鸭不同MHC单倍型对禽流感重组疫苗免疫效果的影响

目的不同品系的鸭对禽流感(AI)疫苗诱导的效价有差异,分析这种差异是否与主要组织相容性复合体(MHC)有关。方法用表达H5亚型禽流感HA基因重组鸭瘟活载体疫苗免疫抗原提呈相关转运体TAP基因等位基因型不同的4种SPF鸭,比较其血清HI动态变化。结果免疫后连续观察的9周中,B3群SPF鸭HI抗体效价始终显著高于另外3个群。结论鸭的不同MHC单倍型可能与AI疫苗的不同免疫效力相关。     

鸭疫里氏杆菌疫苗在雏鸭体内诱导细胞免疫的动态研究

本试验选用1日龄仙湖鸭48只,随机均分为6组,其中1～5组为试验组,第6组为对照组.各试验组按不同的免疫次数、首免龄期、接种剂量,用鸭疫里氏杆菌油乳剂灭活疫苗分别作免疫接种,对照组不作接种.各试验组（包括对照组）在免疫前及免疫后每周采血一次,涂片,用酸性α-醋酸荼酯酶（ANAE）反应方法进行染色,用油镜检测计算T、B淋巴细胞百分比值.研究结果表明：无论是2日龄、7日龄或14日龄首免,首次免疫1周后,雏鸭体内都能产生相应的免疫应答,但2日龄免疫应答能力弱,7日龄较强,14日龄最强.两次免疫的细胞免疫效果比一次免疫效果明显.     

水飞蓟素对雏鸭人工感染鸭肝炎病毒疗效的观察

目的为了探索水飞蓟素对鸭病毒性肝炎的治疗效果。方法100只雏鸭分为5组,于11日龄接种鸭肝炎病毒。第1、2、3组腿肌接种5×104倍稀释的病毒尿囊液,并分别每天口服0、30、10 mg·kg^-1的水飞蓟素;第4组仅每天口服10 mg·kg^-1的水飞蓟素;第5组为空白对照组。试验期内正常喂食及饮水,于攻毒后的第5天足背静脉采血,分离血浆,比色法测定血浆谷-草转氨酶和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性水平。结果雏鸭人工感染病毒后,在96 h内死亡严重,适当剂量的水飞蓟素具有良好的保护作用。雏鸭感染病毒后血浆GOT活性增强、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性下降,口服水飞蓟素可明显改善这些效应。结论适当剂量的水飞蓟素可有效防止人工感染型鸭肝炎病毒导致的死亡,其机制可能与水飞蓟素的护肝作用和免疫调节作用有关。     

复肝灵抗鸭体内乙型肝炎病毒的实验研究

目的：观察复肝灵抗鸭乙型肝炎病毒（DHBV）的作用,为复肝灵的临床应用提供实验依据。方法：采用一日龄北京鸭30只,静脉注射雏鸭乙型肝炎病毒阳性血清建立鸭乙型肝炎病毒模型,然后随机分为复肝灵组、病毒对照组和拉米夫定组。复肝灵组分为0．5、1．0、2．0g／kg三个剂量组。给鸭口服复肝灵,1天2次,给药10天。然后分别在给药前、给药后5天、10天及停药3天后取血,测定鸭血清中DHBV—DNA水平并计算每组鸭用药后不同时间（T5、T10）和停药第3天（P3）血清DHBV-DNA的抑制率（％）,观察鸭血清鸭乙型肝炎病毒DNA（DHBV—DNA）的影响。病毒对照组以生理盐水代替药物;拉米夫定组给予口服拉米夫定。结果：复肝灵2．0g／kg组,给药后第5天,第10天鸭血清DHBV—DNA显著下降（P〈0．01）,停药后3天鸭血清DHBV—DNA下降明显（P〈0．05）,鸭血清DHBV—DNA水平抑制率则有显著升高;1．0g／kg组,给药后第10天和停药后3天鸭血清DHBV—DNA明显下降,鸭血清DHBV—DNA水平抑制率则有显著升高,与对照组差异显著（P〈0．01）,与拉米夫定组则无明显区别：0．5g／kg组则无明显变化。结论：大剂量组、中等剂量的复肝灵组在鸭体内有抗鸭乙型肝炎病毒作用。     

广东气候因素对种鸭繁殖力的影响

调查1997－1998年的1万多套经产种鸭的产 蛋率,受精率,以及对应的自然环境气候因子气温,湿度,光照等数据,采用SAS软件程序统计气候因素对种鸭产蛋繁殖力的影响,结果显示：相对湿度和气温对产蛋率影响力为显著（相对湿度呈正相关,P＜0．05）,平均气温呈负相关,P＜0．05）。     

1 型鸭肝炎病毒强毒株在雏鸭体内分布情况研究

摘要: 目的 利用建立的 Taq 荧光定量 ＲT-PCＲ 检测方法研究鸭肝炎病毒( DHV-1) 强毒株在感染雏鸭体内早期的动态分布规律。方法 本研究采用鸭肝炎病毒强毒株人工感染 3 日龄雏鸭,利用已建立的 Taq 荧光定量 ＲT-PCＲ方法,对接种 24 h 内 DHV-1 强毒株感染雏鸭的组织脏器进行了定量检测。结果 接种后 4 h 即可在雏鸭心、肝、脑、肺、胰腺、回肠、盲肠、直肠、法氏囊和脾脏组织中检测到一定水平的病毒 ＲNA,随着病程发展,ＲNA 拷贝数持续升高,接种 24 h 后,肝脏中的病毒 ＲNA 拷贝数为最高,达到 108. 81 copies/g,心、肺、肾、脾次之,约 107copies /g。结论DHV-1 强毒在雏鸭的早期感染雏鸭的实质器官、免疫器官和消化系统等均具有广泛的嗜性。     

美国野水鸭I型副黏病毒病HI免疫抗体消长规律试验

试验采用鸭副黏病毒GSFY株（A苗）、GSBY株（E苗）油乳剂灭活疫苗和鸡新城疫NH株（N苗）油乳剂灭活疫苗对7d、14d和21d的美国野水鸭分别进行不同剂量和不同次数的免疫,检测各实验组鸭的HI抗体变化情况。结果显示,美国野水鸭分别免疫后,HI抗体A苗21d和E苗14d时分别达4．55log和5．27log以上,维持时间为35～42d以上。N苗除3次免疫组21d时达到4．0log以上维持时间21～28d外,1次和2次免疫组均不能达到4．0log的抗体水平。结果表明,对美国野水鸭作I型副黏病毒病灭活疫苗免疫具有良好的免疫效果,尤以3次免疫为佳．3个不同来源毒株的灭活疫苗以GSBY株油乳剂灭活疫苗的免疫效果最好。     

腺病毒载体介导GFP基因在鸭胚和雏鸭体内的表达

本试验旨在探讨腺病毒在鸭胚和雏鸭体内的感染情况,为腺病毒作为外源基因载体在活体上进行RNA干涉奠定基础．将GFP基因重组腺病毒（Adv-GFP）静脉注射15日龄鸭胚和10日龄雏鸭,在感染后不同时间采集组织器官,制作冰冻切片,荧光显微镜观察GFP基因在鸭胚和雏鸭组织器官中的表达．结果发现,GFP基因在Adv．GFP感染后24-72h能在鸭胚肝脏及心肌细胞中表达,在感染后1-5d,GFP基因可在雏鸭肝脏、脾脏、腔上囊中稳定表达．本试验首次证明腺病毒作为安全的外源载体,可介导外源基因在鸭胚和雏鸭体内的靶器官中持续稳定表达,为在鸭上进行病毒病的基因治疗提供了基础数据．     

腺病毒载体介导GFP基因在鸭胚和雏鸭体内的表达

本试验旨在探讨腺病毒在鸭胚和雏鸭体内的感染情况,为腺病毒作为外源基因载体在活体上进行RNA干涉奠定基础．将GFP基因重组腺病毒（Adv-GFP）静脉注射15日龄鸭胚和10日龄雏鸭,在感染后不N时间采集组织器官,制作冰冻切片,荧光显微镜观察GFP基因在鸭胚和雏鸭组织器官中的表达,结果发现,GFP基因在Adv-GFP感染后24-72h能在鸭胚肝脏及心肌细胞中表达,在感染后1-5d,GFP基因可在雏鸭肝脏、脾脏、腔上囊中稳定表达,本试验首次证明腺病毒作为安全的外源载体,可介导外源基因在鸭胚和雏鸭体内的靶器官中持续稳定表达,为在鸭上进行病毒病的基因治疗提供了基础数据．     

必解癌Ⅱ号协同5Fu抗肠癌实验研究

用我所研制的必解癌Ⅱ号（ＢＪＡ－２）在人肠癌裸鼠皮下移植瘤模型上进行抗肿瘤治疗（ＢＪＡ－２组），并与５Ｆｕ治疗（５Ｆｕ组）、ＢＪＡ－２和５Ｆｕ治疗（联合用药组）及空白对照组（对照组）比较。治疗裸鼠接种移植瘤当天开始，将ＢＪＡ－２按每天每只裸鼠１６ｍｇ的剂量混入饲料内经口投入，治疗４２天，平均每只裸鼠服药总量为６７２ｍｇ，５Ｆｕ以每只裸鼠每日剂量为０．８ｍｇ配制饮水，用药二个疗程，每一疗程５天，平均总量为８ｍｇ。结果显示：联合用药组抑瘤率最高达５３．９％，明显高于５Ｆｕ治疗组（４４．８％），说明ＢＪＡ－２有协同抗肿瘤作用。ＢＪＡ－２组治疗后脾重／体重比值、淋巴结实质组织细胞增生、末体重／初体重比值等指标均优于其它组，表明ＢＪＡ－２具有提高宿主免疫功能作用。     

辣椒（Capsicum annuum L.）下胚轴离体培养的研究

将辣椒无菌苗下胚轴切段接种在ＭＳ培养基（附加不同的植物激素）上，诱导产生愈伤组织。最适的诱导培养基为ＭＳ＋２ｍｇ／Ｌ ＢＡ，０．５ｍｇ／Ｌ ＩＡＡ，在此培养基上产生的愈伤组织具有较强的分化能力。将愈伤组织转移到分化培养基，光照培养，芽分化率可达２５．０％。不定芽在含１ｍｇ／Ｌ ＧＡ３和２ｍｇ／Ｌ ＢＡ的ＭＳ培养基上伸长成苗，再移入生根培养基上诱导生根，长成完整植株。     

卡介苗接种后异常反应1例报告

卡介苗接种后异常反应１例报告刘建萍，严洲（兰医二院保健科７３００３０）卡介苗是由牛型结核杆菌，经人工培养传种接代而制成的一种无致病性的活菌苗，经接种后可使机体产生一种特异性免疫力，可以起到预防结核的作用，有力的保护了儿童的身体健康。但接种过量或误做皮...     

水貂肠炎病毒疫苗免疫效力指标及动物模型研究

按正交及配对实验设计，将水貂病毒性肠炎（ＭＶＥ）细胞培养灭活矿油苗和铝胶苗接种于４８只水貂、１２只豚鼠、１２只家兔，检测三种动物免疫后６￣４０天的血清ＨＩ抗体水平和水貂免疫后１１￣３１天的ＳＮＩ，结果表明：（１）该两苗对水貂的体液免疫效力相同；（２）豚鼠、家兔、水貂接种疫苗后６￣４０天的ＨＩ抗体水平差异不显著，故豚鼠或家兔可作为水貂免后产生抗体水平的模型；（３）水貂免疫后１１￣３１天的ＨＩ抗体水平     

免疫与未免疫鸡感染IBDV后血浆TNF-α和NO变化

为探讨肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）和自由基在鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）发病过程中的作用机制．研究了经ＩＢＤ弱毒苗免疫和未免疫的３０～５９ 日龄ＡＡ 鸡在感染传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）后血浆ＴＮＦ－α和一氧化氮自由基（ＮＯ）水平动态变化．结果表明：攻毒后第１ 天,未免疫攻毒鸡（Ａ组）血浆ＴＮＦ－α即表现较大的变化,至第３ 天,Ａ组和免疫攻毒鸡（Ｂ组）ＴＮＦ－α显著高于未免疫未攻毒鸡（Ｃ组）;血浆ＮＯ则表现为在攻毒后第３ 天,Ａ 组明显上升,显著高于Ｂ和Ｃ组,至第５ 天３组ＴＮＦ－α和ＮＯ虽均下降但Ａ组仍高于或明显高于Ｂ和Ｃ组,以后３ 组间无明显差异．