异形胞发育的蓝细菌Dna A蛋白的表达研究

构建了Anabaena PCC7120的复制起始蛋白Dna A的重组表达质粒,在Escherichia coli中诱导其超量表达,纯化后免疫家兔获得抗体,采用Western blotting检测Dna A在营养细胞和异形胞中的表达情况.结果显示,两种不同类型的细胞中都能够检测到Dna A的表达,而且在不同缺氮诱导时间,异形胞中Dna A的表达存在差异.说明DNA复制起始与异形胞的发育可能存在着一定的关系.     

22种丝状异型胞固氮蓝细菌的16S rDNA的 PCR-RFLP 分析

用1对引物CYA106F及781R（a）从23种蓝细菌的DNA中扩增出一条600bp的16SrDNA－PCR片段，对该片段进行的限制性酶切长度多态性（RFLP）分析表明：可将其中21种自生或共生的丝状异型胞固氮蓝细菌的样品分为2个类群组，基本上对应于形态分类上的Anabaena及Nostoc属，但有1种被认为是Anabaena的蓝细菌以及作为对照的1种聚球藻(Synechococcus)蓝细菌样品被明显区分出来，并发现Anabaena属的蓝细菌也可同被子植物根乃拉草（Gunnera）形成共生固氮作用。     

培养条件对蓝细菌生长及PHB积累的影响

对蓝细菌集胞藻 (Synechocystis) sp. PCC6 80 3的细胞生长及胞内聚 -β-羟基丁酸酯 (PHB)的积累进行了研究 ,以探索提高蓝细菌 PHB积累水平的可能性。野生型集胞藻于 BG- 11培养基中通气培养 ,改变氮源浓度、碳源种类、光照强度 ,测定细胞的生长及胞内 PHB的浓度。结果表明 :只有在氮饥饿培养时 ,胞内 PHB水平才会有明显提高。氮饥饿条件下 ,混养生长时收获的细胞量最多 ,弱光自养时细胞几乎不生长 ,两种条件下 PHB的积累水平相近 ,低于细胞干重的 0 .5 %。异养时细胞生长与混养时相近 ,PHB可积累至细胞干重的 1.0 %。强光自养最有利于 PHB的积累 ,生长 7d后可积累至细胞干重的 4.1%。该研究的结果可为进一步提高蓝细菌中 PHB的积累水平提供参考     

火球菌复制蛋白A的表达纯化和活性研究

将火球菌(Pyrococcus furiosus)的3个复制蛋白A相关基因pfuRPA41(PF2020),pfuRPA32(PF2018),pfuRPA14(PF2019)克隆到pDEST17质粒,并在E.coli Rosetta(DE3)表达菌株中成功表达,最终通过固定化镍离子亲和层析分别得到纯度较高的三个复制蛋白A相关蛋白,对它们的单链DNA结合活性进行了详细测试.其中单独的pfuRPA41能结合单链DNA,而单独的pfuRPA32以及pfuRPA14不能结合单链DNA;然而pfuRPA32能够促进pfuRPA41的单链DNA结合能力.同时单链DNA长度对pfuRPA41结合单链DNA的能力有显著影响;在一定长度范围内,pfuRPA41结合单链DNA能力与单链DNA长度成正比.     

嗜热蓝细菌PKUAC-E542藻蓝蛋白耐热性以及不同光照条件对其含量影响研究

对PKUAC-SCTE542藻蓝蛋白的耐热性进行测试,探究其热稳定性能.同时,在不同光周期和不同光质光源组合条件下培养嗜热蓝细菌PKUAC-SCTE542,研究其生长情况和藻蓝蛋白含量,探索适用于藻蓝蛋白生产的光照条件.选取30°C,40°C,50°C,60°C,65°C,70°C,80°C,90°C为实验组,25°C...     

红假单胞菌R18二氧化碳固定基因的序列测定及其表达

在红假单胞菌Ｒ１８质粒的限制性酶切基础上,建立了该质粒的物理图谱;采用ｄｙｅ ｐｒｉｍｅｒ法测定了Ｒ１８ ＲｕｂｉｓＣＯ基因的部分核酸序列;以ＰＢＲ３２２为载体,将Ｒ１８ ＲｕｂｉｓＣＯ基因转入紫色非硫杆菌Ｒｈｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ．ｐａｌｕｓｔｒｉｓ Ｎｏ．７的野生菌及其ＲｕｂｉｓＣＯ ＦｏｒｍＩ缺陷型中,获得的转化子ＭＧ１１和ＭＧ１４的ＲｕｂｉｓＣＯ酶活性分别是其受体菌的１．７７倍和７．１     

海洋蓝细菌(聚球菌属,Synechococcus)的生态学意义及研究方法

综述了海洋蓝细菌(聚球菌属,Synechococcus)的生态学意义和国际上研究海洋蓝细菌的方法和技术, 以及我国研究海洋蓝细菌的现状和我们的一些研究工作。     

不同光质对嗜热蓝细菌Synechococcus sp. PCC6715生长的影响

使用光合有效光量子数密度(PAR)均为100 μmol/(m²·s)的白光(对照)、红光和蓝光, 对对数生长期的嗜热蓝细菌PCC6715进行培养, 以期探明不同光质对不表达藻红素的蓝细菌光适应生长的影响。结果表明, 在不同光质培养对数生长期PCC6715的过程中, 与白光相比, 干重在蓝光下明显增加, 红光下明显减少; 红、蓝光质对光合色素合成产生影响的开始时间和持续时间有所不同; 最大光能转化效率(F_v/F_m)在蓝光下明显提高, 红光下明显降低, 培养6天后, 红、蓝光条件下的F_v/F_m均趋于稳定。蓝光有利于PCC6715的生长, 红光不利于PCC6715的生长; 同时, PCC6715在红、蓝光质中均产生适应性生长, 藻蓝素的减少使PCC6715在红光中发生适应性生长, 蓝光中PCC6715发生适应性生长是由于藻蓝素的增加。     

天然水生物膜胞外多糖和胞外蛋白吸附镉的特性

研究了长春市南湖天然水环境中生物膜优势菌种胞外多糖和胞外蛋白对镉的吸附特征及其影响因素.结果表明,胞外多糖和胞外蛋白对镉的吸附过程符合Langmuir和Freundlich热力学等温方程,胞外多糖和胞外蛋白对镉的动力学吸附特征符合Langmuir-Hinshelwood方程的一级反应模式.而铅的存在会影响对镉的吸附.     

铜绿假单胞菌的LexA蛋白在大肠杆菌中的高效表达与纯化

目的:对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)的阻遏蛋白LexA进行基因克隆、重组表达及蛋白纯化.方法:采用PCR法从PAO1株基因组中扩增出1 086 bp的LexA基因,将此基因片段插入到表达载体pET32a( )上,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.包涵体洗涤后用8 mol/L尿素溶解,以镍离子亲合柱层析作为第1步纯化,Superdex75凝胶过滤层析作为第2步精细纯化,反相高相液相色谱法(HPLC)测定蛋白的浓度.结果:LexA以包涵体形式表达,表达量为45%,经镍离子亲合柱层析纯化后LexA蛋白纯度达到85%以上,回收率大于80%,镍离子亲合柱层析和凝胶过滤层析两步纯化目的蛋白,经HPLC测定,最终目的蛋白的纯度为98.97%.结论:在pET32a( )表达系统中实现了PA的LexA蛋白的高效表达,两步纯化法获得高纯度的目的蛋白,为进一步鉴定LexA靶位点奠定了基础.     

Rearrangement of nitrogen fixation genes during heterocyst differentiation in the cyanobacterium Anabaena

Nitrogen fixation by the cyanobacterium Anabaena is carried out in heterocysts, specialized, non-dividing cells which differentiate under conditions of ammonia or nitrate deprivation. In Anabaena, heterocyst differentiation is accompanied by rearrangement of some nitrogen fixation genes. A site-specific recombination between an 11 base-pair direct repeat sequence flanking the nifK and nifD genes removes 11 kilobases of intervening DNA, resulting in juxtaposition of the two genes and an alteration of the nifD protein-coding sequence.     

Gene expression divergence recapitulates the developmental hourglass model

The observation that animal morphology tends to be conserved during the embryonic phylotypic period (a period of maximal similarity between the species within each animal phylum) led to the proposition that embryogenesis diverges more extensively early and late than in the middle, known as the hourglass model. This pattern of conservation is thought to reflect a major constraint on the evolution of animal body plans. Despite a wealth of morphological data confirming that there is often remarkable divergence in the early and late embryos of species from the same phylum, it is not yet known to what extent gene expression evolution, which has a central role in the elaboration of different animal forms, underpins the morphological hourglass pattern. Here we address this question using species-specific microarrays designed from six sequenced Drosophila species separated by up to 40 million years. We quantify divergence at different times during embryogenesis, and show that expression is maximally conserved during the arthropod phylotypic period. By fitting different evolutionary models to each gene, we show that at each time point more than 80% of genes fit best to models incorporating stabilizing selection, and that for genes whose evolutionarily optimal expression level is the same across all species, selective constraint is maximized during the phylotypic period. The genes that conform most to the hourglass pattern are involved in key developmental processes. These results indicate that natural selection acts to conserve patterns of gene expression during mid-embryogenesis, and provide a genome-wide insight into the molecular basis of the hourglass pattern of developmental evolution.     

探寻钧窑之路——2001年神垕钧窑发掘追忆

钧窑是宋元时期非常重要的一个制瓷传统,同时也是中国古陶瓷研究中疑问较多、争议较大的一个窑口。为此作者主持进行了2001年对禹州神垕镇钧窑遗址的考古发掘。经过严格认真的考古发掘工作和初步的整理,使我们对钧窑的烧造时间、发展阶段和工艺技术等诸多问题有了新的认识,收获颇丰。通过发掘大体可以确认在禹州市神垕镇西南部的古窑场中,钧釉瓷器的生产大体始于北宋末期（12世纪前半叶）;经过对刘家门窑址发掘资料的初步整理,可将钧窑的发展历史分为三个时期,即北宋晚期到金代前期,金代后期到元代初年,元代时期;发掘中清理出一批遗迹;在下白峪窑址发现了中晚唐时期的遗存,清理了一座窑炉,出土了大量瓷片和窑具。     

Intraweb开发框架体系结构剖析

本文阐述了WEB应用的形式,并讨论了当前WEB应用开发存在的一些问题。Intraweb开发框架是解决上述问题较好的一个方案。首先深入分析了Intraweb开发框架基本结构和原理,然后主要阐述了动态网页控制技术。以及如何在常规应用程序开发环境中实现可视化组件式WEB应用开发的原理。最后对该开发框架从技术角度进行了特性分析。     

初中生学习判断的发展研究

采用单因素3水平组间设计,对初中3个年级的学生的学习判断准确性的发展趋势和差异进行了研究。结果表明:初中生的学习判断准确性随着年龄的增长而提高;初中生学习判断准确性的发展在不同的年级上存在差异性。     

The developmental genetics of congenital heart disease

Congenital heart disease is the leading cause of infant morbidity in the Western world, but only in the past ten years has its aetiology been understood. Recent studies have uncovered the genetic basis for some common forms of the disease and provide new insight into how the heart develops and how dysregulation of heart development leads to disease.     

斑马鱼Cyclin C的cDNA克隆及其在发育过程中的表达

细胞周期蛋白C(cyclin C)与细胞周期依赖性蛋白激酶cdk8结合,通过磷酸化RNA 聚合酶 II 和 TFIIH调控转录.在脊椎动物胚胎发育过程中有关细胞周期蛋白C合子型转录激活机制尚知甚少.本研究克隆了斑马鱼细胞周期蛋白C基因,并用Northern杂交和整体原位杂交技术检测其在胚胎发育过程中的表达状态.结果显示,斑马鱼细胞周期蛋白C高度保守,与人细胞周期蛋白C有88％的蛋白序列同源;斑马鱼细胞周期蛋白C在母型期开始表达,其表达伴随中囊胚转换时期的合子型转录激活以及整个胚胎发育过程.     

The emerging conceptual framework of evolutionary developmental biology

Over the last twenty years, there has been rapid growth of a new approach to understanding the evolution of organismic form. This evolutionary developmental biology, or 'evo-devo', is focused on the developmental genetic machinery that lies behind embryological phenotypes, which were all that could be studied in the past. Are there any general concepts emerging from this new approach, and if so, how do they impact on the conceptual structure of traditional evolutionary biology? In providing answers to these questions, this review assesses whether evo-devo is merely filling in some missing details, or whether it will cause a large-scale change in our thinking about the evolutionary process.