10种常见中草药水提物对嗜水气单胞菌ZHYYZ-1的体外抑菌效果研究

采用琼脂稀释法观察了10种常见中草药水提物对强致病性嗜水气单胞菌ZHYYZ-1的体外抑菌效果,结果表明：（1）五倍子、黄芩、金银花、蒲公英的抑菌效果明显优于连翘、黄连、穿心莲、鱼腥草、板蓝根和大青叶;（2）菌浓度1．0×10^4CFU／mL条件下,五倍子、黄芩、金银花、蒲公英的最小抑菌浓度依次为0．20mg／mL、1．56mg／mL、1．56mg／mL和3．12mg／mL;（3）中草药两两组配,表现抑菌协同效应的组合及条件为：茵浓度1．0×10^7CFU／mL时,蒲公英-黄芩组合,黄芩-金银花组合及蒲公英与五倍子配比为3：2或黄芩与五倍子配比大于等于3：2时的组合;菌浓度1．0）〈106CFU／mL时,蒲公英-黄芩组合,黄芩-金银花组合及蒲公英与金银花的配比小于等于3：2或黄芩与五倍子的配比大于等于3：2时的组合;菌浓度为1．0×10^5CFU／mL时,黄芩一金银花组合及蒲公英与金银花的配比小于等于3：2时的组合。     

中草药对花鲈肝细胞氧化损伤的保护作用

为探究中草药对原代培养花鲈肝细胞氧化损伤的保护作用,选取10种复方（记为M1、M2、M3、M4、M5、M6、M7、M8、M9、M10）和10种单方中草药,煎制成终质量浓度为5 mg/mL的水提物,用这20种水提物处理花鲈原代培养肝细胞4 h,再换用200 μmol/L H2O2处理2 h进行氧化损伤,最后测定培养液中胞内酶活性（AST、ALT和LDH）及肝细胞抗氧化指标（T-AOC、SOD和MDA）。结果显示:肝细胞受损后,其培养液中AST、ALT和LDH的活性显著升高（P<0.05）,肝细胞中T-AOC和SOD活性显著降低（P<0.05）,MDA含量显著上升（P<0.05）;先经中草药处理再用H2O2氧化损伤后,各中草药处理组AST、ALT和LDH活性降低,其中姜黄、五味子单方和M9复方的AST、ALT和LDH活性较其他中草药组显著降低（P<0.05）;姜黄单方和M9复方的T-AOC和SOD活性较其他组明显升高（P<0.05）,MDA含量显著降低（P<0.05）。由此得出:大黄、丹参、银杏、姜黄、甘草、赤芍、猪苓、五味子单方,M1、M4、M6、M7、M9复方均能缓解由H2O2诱导的原代培养花鲈肝细胞损伤,其中姜黄单方和M9复方的保护作用最强。     

齐口裂腹鱼维氏气单胞菌的耐药性分析

采用k-B法检测分离自齐口裂腹鱼的维氏气单胞菌对20种抗菌药物的耐药表型,用PCR法扩增维氏气单胞菌的四环素类tetA、tetC、tetM,氨基糖苷类aph(3')-lia、aac(6')-Ib、ant(3')-Ⅰa、aac(3)-Ⅱa、磺胺类sull、sul2,sul3共10种耐药基因.结果显示:氟哌酸、氟苯尼考、磺胺异恶唑等1 1种药物对维氏气单胞菌有较好的抑菌效果.该菌对磺胺类和部分氨基糖苷类敏感,相关耐药基因也未检出,只有四环素类的tetA基因被检出.药敏试验结果和耐药基因检测结果基本一致,这能为维氏气单胞菌的防治和耐药机理的研究提供参考.     

中华鳖病原维氏气单胞菌的分子鉴定及分子分类学研究

气单胞菌是一类人和水产经济动物的严重致病菌,用分子进化手段鉴定一株分离自红脖子病甲鱼病灶部位的菌HBJY01,同时探讨气单胞菌的进化地位.克隆HBJY01的16S rRNA和gyrB基因,鉴定该菌的属种.用16S rRNA和gyrB基因通过构建系统进化树和计算序列两两间遗传距离的方法,探讨气单胞菌的进化地位.HBJY01的16S rRNA和gyrB基因与维氏气单胞菌的相应基因同源性最高,经分子鉴定为维氏气单胞菌.气单胞菌应独立于弧菌科,单独形成一个科,即气单胞菌科(Aeromonadaceae).     

温和气单胞菌对10种中草药耐药性的初步研究

利用纸片扩散法和二倍稀释法分别测定10种中草药沸水提取物的抗菌活性和最低抑菌浓度。结果表明所选取的10种生药中，五倍子（Rhus chirensis M）、黄柏（Phellodendron anurense R）、大黄（Pheumofficinale B）、野菊（Chrysanthemum morifolium Ramat）的抑菌性强，抑菌效果好，缺点是药力减退快。地榆（Sanguisorba officinalis L）、黄连（Coptis chinensis Franch）、黄芩（Scutellaria baicalensis G）、乌梅（Prunus mune S.et Z.）抑菌性没有以上4种强，但药效持久，稳定。由此可见，利用中草约对温和气单胞菌能够起到抑杀作用。在实际生产中，运用五倍子、黄柏、大黄、乌梅、地榆是治疗气单胞菌引起的疾病是较为理想的选择。     

维氏气单胞菌对草鱼背鳍细胞的毒性及凋亡研究

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)在我国是一种重要的淡水经济鱼类,但是由于近些年的集约化高密度养殖导致各种水产疫病暴发,不仅对养殖行业造成巨大的损失,同时对人类生命安全也存在着巨大威胁,维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)就是其中一种人畜共患的条件致病菌。本研究旨在探索维氏气单胞菌导致宿主细胞死亡的致死机制,为今后进一步针对维氏气单胞菌开发抗菌渔用功能产品提供数据支持和理论依据。本文首先测定维氏气单胞菌胞外分泌物(Extracellular products,ECPs)的蛋白浓度,然后以不同浓度的ECPs为基准,根据细胞光镜观察结果及细胞活力检测结果确定维氏气单胞菌胞外ECPs的细胞毒性;再利用Hoechst 33342及TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling(TUNEL)检测细胞核的变化情况,最终确定草鱼源维氏气单胞菌对宿主细胞的毒性致死机制。从毒性实验中可以看出高浓度的维氏气单胞菌ECPs对草鱼背鳍(Grass carp pectoral fin,GCPF)细胞具有明显的毒性,且从Hoechst 33342结果可以看到凋亡小体的出现,而TUNEL也出现了阳性结果,实验组出现了绿色荧光,而对照组没有出现荧光。说明维氏气单胞菌胞外分泌物对宿主细胞具有明显的毒性,而且会导致宿主细胞发生细胞凋亡。     

饥饿对花鲈生长效果的比较研究

2002年7月24日至8月23日在福建省海水鱼类苗种繁育科研中试基地室内水泥池进行了继饥饿补偿生长和不同日间隔停饵对花鲈生长效果的比较实验研究．实验结果显示,对体重16．2g、体长10．1cm左右的花鲈在一个月的实验期内,与连续每日喂食相比,无论饥饿处理5d或10d再恢复喂食,花鲈均表现出明显的超补偿生长,不仅生长速度高于所有对比组,而且饵料系数有显著降低;而每日增加喂食次数虽能使生长有所加快,但饵料系数显著提高,结果表明：继饥饿补偿生长现象在花鲈养殖生产中具有较高的参考应用价值。     

9种中草药对鳗鲡病原菌体外抑菌活性的影响

对3株染病的日本鳗鲡肾脏中分离的致病菌进行活化,同时采用二倍稀释法以黄连、大黄、穿心莲、大青叶、黄岑、黄柏、鱼腥草、虎杖、苦参9种单味煎剂对3株分离菌和爱德华氏菌及嗜水气单胞菌的标准株进行最小抑菌浓度和最小杀菌浓度的测定。结果显示大黄及虎杖体外抑菌活性最为理想。     

中草药提取工艺优化及其体外抑菌的研究

对大黄、山楂、苦参、薄荷、黄芩和黄柏采用水煮法和乙醇回流法进行提取,用两倍稀释法测定金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的体外最小抑菌浓度(MIC),研究不同中草药提取物的抑菌能力.结果表明:6种中草药对金黄色葡萄球菌呈现不同程度的抑菌作用,MIC值在1.56～50 mg/mL之间,其中大黄和黄芩的提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌效果...     

富硒中草药复方对猪大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌试验

采用平皿二倍稀释法研究了三种富硒中草药复方煎剂对仔猪腹泻主要致病菌株——大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌作用.试验结果表明,复方Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ对大肠杆菌的最低抑菌浓度(M IC)分别的为0.04、0.02和0.04g/mL,说明复方Ⅱ对大肠杆菌的体外抑菌作用优于复方Ⅰ和复方Ⅲ;复方Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ对沙门氏菌的最小抑菌浓度分别为0.04、0.02和0.02 g/mL,说明复方Ⅱ、复方Ⅲ对沙门氏菌的体外抑菌作用相近,并且优于复方Ⅰ;复方Ⅲ对沙门氏菌的抑菌效果优于大肠杆菌,复方Ⅰ和复方Ⅱ对这两种菌抑菌效果相近.     

5种甘肃道地中药对衰老小鼠免疫功能影响的比较研究

目的:研究5种甘肃道地中药对衰老小鼠免疫功能影响的差异.方法:将70只健康小鼠随机分成正常组、模型组、纹党组、红芪组、当归组、大黄组和半夏组,采用D-半乳糖建立亚急性衰老小鼠模型,检测每组小鼠的脾脏和胸腺指数,血IL-1、IL-2、IL-4含量及T淋巴细胞亚群,T淋巴细胞增殖能力,脾胸腺超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量.结果:与正常组相比,模型组小鼠脾脏和胸腺指数,血IL-1、IL-2、IL-4、CD4+T细胞和CD4+/CD8 +T细胞比值,脾T淋巴细胞增殖能力,脾和胸腺SOD、GSH-Px活性均显著降低,MDA含量显著升高(p＜0.05,p＜0.01).与模型组比较,各中药组小鼠脾脏和胸腺指数,血IL-1、IL-2、IL-4、CD4+T细胞和CD4+/CD8+T细胞比值,脾T淋巴细胞增殖能力,脾和胸腺SOD、GSH-Px活性均呈增高趋势,MDA含量均呈降低趋势,纹党组和红芪组上述指标改变更为明显.结论:纹党和红芪水提物对衰老小鼠某些免疫功能的调节作用优于当归、大黄和半夏.     

白扁豆等4种中药多糖的体外抗氧化活性研究

利用Fenton反应检测石斛、益母草、沙苑子和白扁豆4种中药中的成分——多糖对羟基自由基和邻苯三酚自氧化体系产生的超氧阴离子自由基的清除作用,并对多糖抗氧化活性进行研究.结果表明,石斛、益母草和白扁豆中的多糖对超氧阴离子自由基和羟基自由基有不同程度的清除作用,而沙苑子中的多糖则具有促氧化活性.     

中草药添加剂对烟气相自由基的影响

采用五味子、藿香、甘草、降香的乙醇提取液作为卷烟添加剂,讨论它们对卷烟烟气中有害健康的烟气相自由基的降低情况,为生产低毒卷烟提供了一种可行方法     

XapR蛋白在嗜水气单胞菌抗生素耐药性的功能

研究嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila） LysR型转录调节因子中XapR蛋白抗生素耐药的调控机制。通过测定嗜水气单胞菌ATCC 7966（野生型菌株）与嗜水气单胞菌ATCC 7966 xapR基因缺失株（ΔxapR）对34种抗生素的最低抑菌浓度,系统地评价xapR基因抗生素耐药性;进一步利用定量蛋白质组学技术,探讨xapR参与嗜水气单胞菌调控的生物过程。结果表明：xapR基因缺失后细菌对头孢孟多的耐药性减弱;xapR基因可调控细菌碳代谢、TCA循环等多种代谢途径,此外还与外膜蛋白、TonB、ABC转运系统等抗性基因的表达密切相关。综上,XapR蛋白可通过调节细菌中心代谢途径以及多个抗性基因改变嗜水气单胞菌的耐药性。     

中草药饲料添加剂研究的历史与现状

本文从中草药饲料添加剂研究兴起的背景、中草药饲料添加剂的起源、目前研制应用的特点及存在的问题和今后研究的方向等几方面较详细地进行了综述。     

铜绿体外抗菌作用的实验研究

目的 探讨中药铜绿对11种细菌的体外抑菌作用．方法 应用平板稀释法测定最低抑菌质量浓度(MIC)。结果铜绿对金葡菌、表皮葡萄球菌、乙型溶血铁球菌、白假丝酵母菌的MIC为0．00258g/L，，对大肠埃希菌、流感嗜血杆菌、乙型副伤寒杆菌、肺炎克雷伯杆菌、福氏志贺菌、铜绿假单胞菌的MIC为0．0125g/L。结论 铜绿在体外对G^ 球菌有较强的抑菌作用，对G^-杆菌抑菌作用较弱，对变形杆菌无抑制作用。     

SRAP和SCAR分子标记应用于中药材研究进展

 分子标记技术是基于生物体基因组的遗传分析方法,在动植物的品种鉴定、亲缘关系分析、遗传多样性分析、遗传图谱构建和分子辅助育种等研究中有着广泛的应用。其中相关序列扩增的态性（Sequence-Related Amplified Polymorphism,SRAP）是开发较晚、应用较广的分子标记技术,以其简单、高效、重复性良好的优点,在药用植物的遗传学研究中表现出很大的优势。利用分子标记技术构建药材系统发生树,明晰遗传背景和药材品质的关系,辅助中药材品种选育,研究药材道地性成因是近几年的研究热点。本文介绍了SRAP和序列特征性扩增区域（Sequence Characterined Amplified Regions,SCAR）的技术基础,并总结了SRAP常用引物,比较分析了一些中药材的优化反应体系;综述SRAP在中药材的遗传多样性研究、道地性分析、遗传图谱构建等方面的应用情况;SCAR技术的应用特点和在中药材鉴定中的作用;阐述二者结合在中药材研究中的现状及其应用前景。     

广西斑点叉尾鮰源嗜水气单胞菌灭活疫苗的制备

本研究针对广西地区分离到的致病性嗜水气单胞菌,开发区域定制化的灭活疫苗,以实现鱼病的有效预防和控制。首先,对斑点叉尾鮰源嗜水气单胞菌在LB培养基中的生长曲线,培养基的最适pH值,以及培养基中添加蔗糖对嗜水气单胞菌生长影响进行研究;随后探索嗜水气单胞菌灭活疫苗的制备方法,并在细胞水平和斑点叉尾鮰活体水平上研究疫苗的安全性,开展疫苗对斑点叉尾鮰的免疫保护实验。结果表明嗜水气单胞菌浓度与菌液OD值间具有较好的线性关系,其回归方程为y=2E-10x+0.1399,R2=0.975 4。用于培养嗜水气单胞菌的LB培养基最适pH值为7.0～7.5,且在培养基中添加蔗糖能显著促进嗜水气单胞菌的生长。研究制备的嗜水气单胞菌灭活疫苗在细胞水平和鱼活体水平均安全无毒,且对斑点叉尾鮰的免疫保护率可达到75%。据此,本研究初步建立起广西斑点叉尾鮰源嗜水气单胞菌灭活疫苗的制备工艺。