清热解毒药对血管平滑肌细胞增殖、细胞周期的影响

目的 :观察清热解毒药双花、公英、虎杖、连翘对血管平滑肌细胞生长、贴壁和增殖抑制作用 ,并从对细胞周期的影响角度分析它们的作用机制。方法 :采用细胞计数、MTT法和流式细胞技术。结果 :双花、公英、虎杖、连翘对h PDGF B/B刺激下的平滑肌细胞生长和贴壁均有抑制作用。对平滑肌细胞增殖抑制率分别达 9.2 6%～ 77.35% ,7.78%～ 62 .65% ,5.88%～ 47.81 % ,3.98%～ 33.35% ,其增殖抑制作用呈量效时效关系。通过对细胞周期分析知道 ,双花、公英、虎杖均可以减少 S期 ,增加 G0 /G1期细胞数目。结论 :清热解毒药双花、公英、虎杖、连翘对平滑肌细胞生长及增殖有抑制作用 ,其作用机制可能是通过抑制 DNA合成 ,减少进入 S期细胞数目 ,使细胞增殖停留在 G0 /G1期来实现的     

雌二醇对血管平滑肌细胞增殖的影响

1材料和方法1．1体外培养小牛胸主动脉SMC[4]1．2SMC48小时增殖率的测定[5]加药情况如下：0．1ng／mlE2组,lng／mlE2组,10ng／mlE2组,100ng／mlE2组,E2溶剂（DMSO,终浓度＜0．05％）对照和培养液对照;每组两种血清浓度2％,15％,各8孔,继续培养48小时;MTT法检测增殖率。1．3SMC集落形成率的测定[6]分组：0．1ng／mlE2,1ng／mlE2,10ng／mlE2,培养液对照和溶剂对照,12天后计算集落形成率。2结果2．1体外培养SMC形态特征贴决后3－4天SMC自组织块边缘萌出（图版a,b）,原代细胞形状多样,有星形、带状三角形、梭形等…     

水溶性壳聚糖对血管平滑肌细胞增殖的影响

通过化学方法测定了水溶性壳聚糖(water-solubility chitosan,WSC)的部分理化性质;通过原代分离培养大鼠腹主动脉平滑肌细胞和MTT实验,研究了1,10,100和1000μg/mL的WSC对血管平滑肌细胞的增殖作用.实验结果表明,WSC溶解度为125,含水量13.19%,脱乙酰度54.73%,重均相对分子质量1.17×105.在24h和48h时,大于10μg/mL的WSC可抑制原代培养的血管平滑肌细胞的增殖.其中,100和1000μg/mL的WSC在48h时对细胞的增殖的抑制作用最明显,表明在一定条件下,WSC可抑制血管平滑肌细胞增殖,减轻由血管平滑肌细胞增殖所引起的血管狭窄问题.     

尾加压素Ⅱ对大鼠平滑肌细胞生存率的影响

目的:观察尾加压素II(UII)对培养大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)生存率及活性氧产生的影响,进一步研究UII促VSMC的增殖作用及其机制.方法:培养大鼠VSMC,以不同浓度UII(10-10,10-9,10-8,10-7,10-6)分别刺激VSMC(0h,24 h,48 h,72 h),噻唑蓝(MTT)法检测VSMC吸光度(生存活力);荧光探针(DCFH-DA)法,检测不同浓度UII刺激后,VSMC中活性氧含量.各项检测均重复3次.结果:随着UII刺激浓度的增高及作用时间的延长,VSMC吸光度呈上升趋势,10-9 mol/L UII刺激48 h,72 h及(10-8,10-7,10-6 mol/L)UII刺激24 h,48 h,72 h,VSMC吸光度较对照组明显升高,差异有显著性(P0.05,P0.01);随着UII刺激浓度增高,VSMC中活性氧的生成也呈升高趋势.结论:UII可促进VSMC生长、增殖,其机制可能与活性氧通路激活有关.     

QKI对血管平滑肌细胞增殖的抑制功能

观察QKI蛋白对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响,进一步完善血管平滑肌细胞增殖的相关机制.以大鼠的原代主动脉平滑肌细胞为研究对象,观察分别过表达QKI5、QKI6对血清促增殖作用的影响.细胞增殖采用MTT法和Western blot测定.结果血清可促进大鼠的原代主动脉平滑肌细胞增殖,过表达QKI可抑制血清刺激的血管平滑肌细胞的增殖.说明过表达QKI对血清刺激的血管平滑肌细胞增殖具有抑制作用,该作用有可能在一定程度上能够抑制高血压等病伴发的血管平滑肌增殖.     

白介素-10对TNF-α介导血管平滑肌细胞增殖的影响

观察重组人白介素 10 (rhIL_10 )对肿瘤坏死因子 (TNF_α)刺激的离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响。体外培养SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞 ,采用MTS PES法确定血管平滑肌细胞的增殖状态。结果显示 ,TNF_α对血管平滑肌细胞增殖具有明显的刺激作用。rhIL_10单独应用对血管平滑肌细胞生长没有影响。在TNF_α刺激下 ,低至 10ng mL的rhIL_10可明显抑制血管平滑肌细胞的生长 (P <0 0 5 )。     

超声对体外培养大鼠血管平滑肌细胞增殖影响

探讨影响大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的超声辐照强度和时间,分别用30、60、100、150、200W等辐照强度和10、30、60、100 s等辐照时间处理VSMCs.MTT法和细胞上清液NO含量测定法检测细胞的增殖状态.研究结果表明:超声辐照强度为30、60 W和时间为100 s时抑制细胞的增殖显著,且时间与强度之间无互作效应.     

不同还原性巯基氨基酸对人血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:观察三种还原性巯基氨基酸对人血管平滑肌细胞增殖的影响.方法:采用组织贴块法体外培养人脐静脉血管平滑肌细胞(VSMCs),在培养液中分别加入三种不同浓度的还原性巯基氨基酸(Hcy,Cys,GSH)对VSMCs进行刺激,24h后同MTT比色法测定细胞的活力,<'3>H-TdR测定细胞的增殖率.结果:随浓度增加.Hcy和Cys明显促进VSMCs增殖,Hcy的作用略强于Cys;GSH只有在极高浓度时(1000umol/L)才显著促进VSMCs增殖.结论:极高浓度的Hcy、Cys、GSH均可促进VSMCs增殖.     

ERK信号转导通路在PDGF诱导的人动脉平滑肌细胞增殖中的作用

了解ERK信号转导通路在PDGF诱导的人动脉平滑肌细胞增殖中的作用.原代培养人脐动脉平滑肌细胞（hUASMC）,取生长正常的细胞分4组：对照组,PDGF（platelet derived growth factor）组,ERK阻断剂组和PDGF＋ERK阻断剂组.继续培养24h后,用免疫细胞化学技术测细胞核内核增殖抗原（PCNA）的表达;用MTT法测细胞的增殖活性.结果显示：1）与对照组相比,PDGF组细胞内PCNA 的表达明显增强,MTT法测得A值也升高（P〈0.01）.2）ERK阻断剂可完全抑制PDGF诱导的PCNA 的表达增多和A值的升高.结论：ERK信号转导通路参与了PDGF诱导的人动脉平滑肌细胞的增殖.     

大黄酸抑制气道平滑肌收缩机制研究

目的研究大黄酸是否抑制气道平滑肌收缩及其机制。方法取SPF级BALB/c♂小鼠气管环,将气管环置于恒温灌流系统中,通过JH-2型张力换能器记录气管环张力值。使用80 mmol/L钾(K+)收缩气管环,待气管环张力达到稳定后,分别加入终浓度为1. 00、3. 16、10.00、31. 60、100.00、177. 80、200. 00μmol/L的大黄酸,加入等量的溶剂作为对照。用膜片钳记录L-型电压依赖性钙通道(L-type voltage-dependent calcium channel,LVDCC)电流,大黄酸可以抑制LVDCC电流。用TILL钙成像系统测量平滑肌细胞内钙浓度变化。结果当加入177. 80μmol/L大黄酸时,气管环舒张比率达到最大,为(92. 7±8. 0)%,抑制LVDCC介导的电流、LVDCC介导的钙内流,以及钙内流引起的收缩。结论大黄酸可通过抑制LVDCC抑制气道平滑肌收缩。     

胶束电动毛细管色谱法测定何首乌中的二苯乙烯苷、大黄素和大黄酚

采用胶束电动毛细管色谱法,建立测定何首乌中二苯乙烯苷、大黄素、大黄酚的新方法,对影响分离的诸因素进行了优化.缓冲液组成为25 mmol/L硼砂-40 mmol/L十二烷基硫酸钠-10％(体积分数)乙醇,pH值为9.5.在优化的条件下,二苯乙烯苷、大黄素和大黄酚可于20 min内分离;线性范围分别为10～1000,5.2...     

Parthenolide inhibits proliferation of vascular smooth muscle cells through induction of G0/G1 phase cell cycle arrest

Objective: This study is to determine the effect of the natural product parthenolide, a sesquiterpene lactone isolated from extracts of the herb Tanacetum parthenium, on the proliferation of vascular smooth muscle cells (VSMCs). Methods: Rat aortic VSMCs were isolated and cultured in vitro, and treated with different concentrations of parthenolide (10, 20 and 30 μmol/L). [³H]thymidine incorporation was used as an index of cell proliferation. Cell cycle progression and distribution were determined by flow cytometric analysis. Furthermore, the expression of several regulatory proteins relevant to VSMC proliferation including IκBα, cyclooxygenase-2 (Cox-2), p21, and p27 was examined to investigate the potential molecular mechanism. Results: Treatment with parthenolide significantly decreased the [³H]thymidine incorporation into DNA by 30%~56% relative to control values in a dose-dependent manner (P<0.05). Addition of parthenolide also increased cell population at G₀/G₁ phase by 19.2%~65.7% (P<0.05) and decreased cell population at S phase by 50.7%~84.8% (P<0.05), which is consistent with its stimulatory effects on p21 and p27. In addition, parthenolide also increased IκBα expression and reduced Cox-2 expression in a time-dependent manner. Conclusion: Our results show that parthenolide significantly inhibits the VSMC proliferation by inducing G₀/G₁ cell cycle arrest. IκBα and Cox-2 are likely involved in such inhibitory effect of parthenolide on VSMC proliferation. These findings warrant further investigation on potential therapeutic implications of parthenolide on VSMC proliferation in vivo.