非特异性IgG含量对EIA法检测抗-HCV抗体的干扰现象

用酶免疫分析法(EIA)研究了人血清非特异性IgG 在抗-HCV抗体检测中的干扰作用.结果显示:随着正常健康人血清标本(阴性血清)中I gG量的增加,其OD值随之增高,当标本中的IgG含量增加至一定值时即产生假阳性结果.此结果表明非特异性IgG与支持材料(酶标板)非特异性结合可造成对EIA实验结果的干扰作用.这就解释了一些学者报导类风湿性关节炎、自身免疫性肝病、高血清免疫球蛋白血症等患者用EIA法检测抗-HCV时易出现假阳性的原因.     

HIV抗体蛋白印迹试验对无偿献血者的确认和不足

分析无偿献血者中HIV抗体初筛阳性与蛋白印迹试验(WB)确认结果的关系,评估WB确认方法在HIV抗体检测过程中的必要性和可行性,以及实验中存在的一些问题.对326 568份无偿献血者标本进行HIV抗体初、复检,初筛阳性的标本为全部样本,再用现在市场上较认可的ELISA试剂和WB试验同时进行检测,比较两种方法检测结果之间的关系.ELISA与WB结果一致性71.17%,阳性符合率为48.78%,阴性符合率为83.13%;以确认结果为金标准,得出ELISA检测HIV抗体试剂的敏感性为100%,特异性为84.15%.WB阳性组与阴性组比较,t=15.21,P＜0.00l,显示阳性和阴性组问S/CO值存在显著差异;WB阳性组与不确定组比较,t=13.07,P＜0.001,显示阳性和不确定组间S/CO值存在显著差异;不确定组与ELISA假阳性(WB确认阴性而ELISA阳性)比较,t=2.13,P＞0.05,无统计学差异,提示WB不确定结果可能是假阳性;20份确认阳性的标本的S/CO值全部大干5,确认阴性与不确定的91份标本中,S/CO低于1的占71份,在1～2.999之间19份;6个月后随访WB不确定的供血者,带型无变化,全部被诊断为阴性.较高的S/CO值(＞5)预示HIV抗体阳性的可能性大;而低于2.999时,预示阳性可能性小;WB方法确认HIV抗体阳性和阴性准确,不足之处为存在不确定结果,给工作带来许多不便.     

酶联免疫一步法检测HBeAg假阴性现象初步探讨

本文对154份酶联免疫一步法检测HBeAg结果为阴性的乙肝血清标本重新采用经典二步法测定其HBeAg，结果其中32份标本的HBeAg呈阳性。提示使用一步法检测时，会产生假阴性现象。     

乳腺癌血清中MMP-7自身抗体的检测

目的运用ELISA技术测定乳腺癌血清中MMP-7自身抗体,从而推测血清中MMP-7自身抗体对乳腺癌的诊断价值。方法建立最佳优化条件,用间接ELISA检测39例正常人血清、43例乳腺癌患者血清中MMP-7自身抗体的存在情况,进而对检测方法的诊断价值进行评估。结果乳腺癌患者血清MMP-7自身抗体水平明显高于正常人,P〈0.01;ROC曲线分析表明,当选OD450值=1.344为cutoff值时,MMP-7自身抗体用于诊断乳腺癌的敏感性为76.7%,特异性为82.1%。     

大肠埃希菌ELISA检测条件的优化

目的对ELISA检测大肠埃希菌方法条件进行优化研究.方法以大肠埃希菌为对象,通过Box-Behnken设计星点响应面实验进行优化实验.结果优化后ELISA检测条件:抗原包被浓度为6.25μg/m L,抗原包被最佳时间为7 h,抗体稀释度最佳为1∶625 0,大肠埃希菌ELISA检测OD值为2.12.结论经实验得证,通过星点响应面实验方法进行大肠埃希菌ELISA检测条件优化,结果合理有效,优化效果良好.     

丙型肝炎病毒抗体免疫酶快速检测试剂的评价

对丙型肝炎病毒抗体免疫酶快速检测试剂(IEA)检测丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)的性能、结果等技术参数进行评价,为实验室的选用提供参考.采用IEA法、ELISA法和胶体金法对中国生物制品检定所“第三代ELISAHCV-Ab诊断试剂国家参考品”和3297份血清或血浆标本同时测定,对IEA的敏感性、特异性、重复性和检测时间等结果进行评价.结果表明:IEA可通过中国生物制品检定所“第三代ELISAHCV-Ab诊断试剂国家参考品”检验;与ELISA法比较,IEA的检出率为99.06%,灵敏度与ELISA相当,胶体金的检出率为86.01%,灵敏度比ELISA低;IEA检测所需时间15～25min.IEA既有ELISA的敏感性、特异性,又有胶体金简便、快速的特点.适用于献血员及高危人群中HCV抗体的筛查和临床诊断HCV感染,以及门诊、急诊和基层医疗单位的现场检测.     

不同程度溶血对ELISA两步法检测HBsAg的影响观察

使用ELISA两步法对系列阴性溶血标本、阳性和弱阳性溶血标本及相应正常血浆标本进行HBsAg检测,观察标本不同程度溶血对ELISA两步法检测HBsAg结果的影响。溶血易致弱阳性标本产生假阴性,当Hb≤5g/L时可用于HBsAg的检测,Hb>5g/L应重新留取标本。但为保证检测质量,确保血液安全,应尽量避免使用溶血标本进行HBsAg检测。     

动物及人军团菌病血清抗体调查

应用微量凝集试验对1463份人和动物血清中1型和6型军团菌抗体进行了检测。人和动物血清抗体滴度分别以1:16和1:64出现“++”以上判为阳性。结果人血清标本(183份)全部为阴性,牛血清标本(100份)也全部为阴性,马血清标本(1180份)阳性数47份(1型18份,6型29份),阳性率3.98%(1型1.53%,6型2.45%),最高凝集滴度达1:128者10份(占0.84%),全部为6型抗体。     

唾液特异性抗体检测在旋毛虫病免疫诊断中的应用研究

目的:研究唾液特异性抗体检测在旋毛虫病诊断中的应用价值。方法:旋毛虫感染后1～6周日本大耳兔唾液和血清各120份,采用ELISA,同步检测旋毛虫感染不同时间段内,唾液和血清中特异性抗体并进行比较。结果:感染后1～6周,唾液抗体阳性率分别为0%～70.0%,血清抗体阳性率分别为5.0%～95.0%,经χ2检验两者间无显著性差异(P>0.05)(感染后第1～2周除外)。结论:采集简便、无创伤性的唾液可作为旋毛虫病免疫诊断的检测标本。     

滤纸片微量末梢全血ELISA法检测HBsAg的评价

为了提高HBsAg检测的敏感性和免去小儿(尤其新生儿)静脉采血的困难与分离血清的麻烦,本文研究了用指尖血滴滤纸片检出HBsAg的方法,并对其实用价值进行评价。应用第三代检测方法——ELISA(酶标双抗体夹心法),将吸附在滤纸片上约20μl的指尖全血检出HBsAg,共检测标本205份,结果发现:全血滤纸片ELISA法虽较静脉血分离血清所得阳性率(61.46％)为低,但其阳性率(28.29％)仍明显高于用对流免疫电泳法静脉血分离血清(ClEP)的阳性率(12.68％),P<0.005。作者认为滤纸片法还有下列优点:(1)无需静脉抽血及分离血清,老幼咸宜,对新生儿更好。(2)一次可采大量检测对象,用品简单。(3)便于保存及携带,有利于大规模调查。(4)不需复杂仪器,如果将血滴量适当加大,操作细节加以改进,定能提高其检出阳性率,因而值得推广。