流动注射分光光度法测定蛋白质的含量

在pH2.20的Clark-Lubs缓冲介质中,刚果红与蛋白质作用,在室温下能迅速结合形成复合物,其最大吸收波长为500nm.用流动注射分光光度法研究了该结合反应的最佳条件,并在此基础上建立了测定蛋白质的新方法.检测牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HAS)的线性范围均为2～90μg.mL-1,检测限分别为0.42μg.mL-1和0.44μg.mL-1,测定频率达65次.h-1.本方法具有简便、快速、选择性好、灵敏度高等特点,应用于尿液及人血清中总蛋白的测定,结果与考马斯亮蓝G-250法基本一致.     

分子探针N6-羟基乙基腺苷同步荧光测定人血清中蛋白质

在模拟人体生理条件下,基于N6-羟基乙基腺苷(HEA)与人血清白蛋白(HSA)相互作用生成的复合物,导致血清白蛋白的内源荧光产生特异性变化,研究HEA-HSA体系的同步荧光光谱特征;同步荧光光谱特征及强度与Δλ值、反应温度等因素有关.在此基础上,建立了以HEA为探针测定蛋白质的新方法.在最佳实验条件下,HEA-HSA体系的同步荧光强度分别在0~331.2μg.mL-1和331.2~579.6μg.mL-1的浓度范围内与蛋白质浓度呈良好的线性关系,方法的检测限为4.43 ng.mL-1.实验结果表明:该法具有简单、快速、灵敏度高等优点,可直接用于人血清样品中蛋白质总量的测定,结果令人满意.     

磷锑钼蓝共振瑞利散射法测定蛋白质

在稀H2SO4介质中, 蛋白质与磷锑钼蓝结合而使共振瑞利散射(RRS)增强并产生一个新的RRS光谱. 以磷锑钼蓝(PSbMo heteropoly blue, PSbMo)-牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA)为例, 考察了其相应的光谱特征、影响因素和适宜的反应条件. 结果表明:当BSA的浓度在0～6.0 μg/mL范围内与RRS强度成正比. 方法对于测定蛋白质具有高的灵敏度, 对BSA、人血清白蛋白(human serum albumin, HSA)、α-糜蛋白酶的检测限(3σ)分别为0.021 μg/mL, 0.023 μg/mL和0.030 μg/mL. 实验了共存物质的干扰影响, 方法有较好的选择性, 用于合成样品的分析, 结果满意.     

共振光散射光谱法测定微量蛋白质

利用光吸收和共振光散射(RLS)光谱研究了铝试剂(ATA)与蛋白质在水溶液中的相互作用.在pH2.50时,蛋白质可使弱的ATA光散射信号曾强.基于这种现象,我们运用RLS技术,建立了测定纳克级蛋白质的方法.该方法简单、实用、灵敏.BSA的线性范围为0.010~27.4μg/mL,HSA的线性范围为0.010~30.5μg/mL.BSA的检测限为10.7 ng/mL,HSA的检测限为10.2 ng/mL.对实际人血清样品中的蛋白质进行了测定,其结果与临床方法一致.氨基酸、金属离子或其它共存化合物的干扰很小.     

用比布列西猩红共振光散射技术测定蛋白质

在酸性溶液中，比布列西猩红与蛋白质作用，产生共振光散射(RLS)增强光谱，最大散射峰位于286．0nm，且增强RLS强度在一定范围内与蛋白质浓度呈线性关系．研究了pH、比布列西猩红的浓度及离子强度对RLS强度的影响．人血清白蛋白(HSA)的线性范围为0.02～4．0μg／mL，牛血清白蛋(BSA)0．02-4．5μg／mL，溶菌酶(Lys)为0．02-2．0μg／mL，γ-球蛋白(γ-IgG)为0.0l-7.5μg／mL.测定的检测限(3σ)分别为：16．6ng／mL(HSA)，15．7ng／mL(BSA)，16．7ng／mL(Lys)和7．5ng／mL(γ-IgG)．此方法用于人血清样品测定，结果满意．     

催化动力学荧光法测定铜(Ⅱ)

在硫酸介质中,在溴酸钾氧化罗丹明B的反应体系中,加入Cu(Ⅱ),能加速反应的进行,Cu(Ⅱ)对此褪色反应有催化作用,据此建立了测定微量铜的催化动力学荧光法.研究了影响催化褪色反应速度的最佳条件,在最优化条件下,Cu(Ⅱ)浓度在8×10~(-8)μg/mL～2×10~(-6)μg/mL范围内与荧光强度呈良好的线性关系,其相关系数为0.998 0,方法的检出限为2×10~(-8)μg/mL.对浓度为1×10~(-7)μg/mL的Cu(Ⅱ)标准溶液进行11次平行测定,得相对标准偏差(RSD)为1.2%,该法简单、快速、灵敏度高,已应用于自来水、茶叶中Cu(Ⅱ)含量的测定,回收率为96.3%～104.3%,结果令人满意.     

酸性铬深蓝共振光散射光谱法测定蛋白质的研究

基于人血清白蛋白 (HSA)对酸性铬深蓝共振光散射的增强效应 ,拟定了一种新的测定HSA的共振光散射法 .在pH =3.78的B R缓冲溶液中 ,酸性铬深蓝与蛋白质结合 ,产生强烈的共振光散射 ,在λ =36 5nm处 ,共振光散射强度较大 ,且共振光散射强度与蛋白质的浓度成线性关系 ,线性范围为 0 .0～ 12 .0 μg mL ,检测限可达 0 .13μg mL .该法简便、快速 ,用于人体血清样品蛋白质的测定 ,结果令人满意 .     

分光光度法测定敦煌壁画颜料胶结材料中的蛋白质

在pH=4.16,0.5%NaCl的Britton Robinson缓冲溶液中,以溴甲酚绿(BCG)为蛋白质染色剂,在波长λ= 613nm处,用牛血清白蛋白(BSA)为标准样品绘制工作曲线,测定出含不同颜料的敦煌壁画胶结材料中的蛋白质结 果分别为:黑色颜料34.548μg/mg、红色颜料24.962μg/mg、白色颜料24.724μg/mg、绿色颜料23.216μg/mg和蓝色颜料2.590μg/mg.平行测定的相对标准偏差(RSD)为4.3%,蛋白质的加标回收率为96.4%～105.9%.同时考 察了实验条件对染色反应的影响和金属离子、氨基酸的干扰,发现用溴甲酚绿分光光度法测定敦煌壁画不同颜料胶结 材料中蛋白质含量的方法简单、快速、灵敏度高.     

二碘荧光黄共振光散射光谱法测定蛋白质

在pH4.41 Britton-Robinson缓冲介质中,白蛋白（BSA）与二碘荧光黄（DIIF）作用形成复合物,使最大波长377 nm的共振光散射光谱得到加强,根据其共振光散射的增强效应,可用于蛋白质的定量测定.研究了复合物反应的适宜条件,结果表明：在优化的条件下,蛋白质浓度在0.0-5.0μg/mL范围内与共振光散射强度呈良好的线性关系,方法的检出限为0.027μg/mL.用于合成样品中蛋白质的测定,获得满意结果.     

铝(Ⅲ)-加替沙星体系的紫外特性及其应用研究

在弱酸性条件下,A l3 能与加替沙星反应形成络合物.利用这一反应建立了简单、快速、灵敏的测定加替沙星的紫外分光光度法,并且详细讨论了测定条件.测定的最佳波长为λ=291 nm,线性范围为0.80~23.00μg/mL,回归方程为A=0.04288 0.08717C(μg/mL)(r=0.9994).本方法用于加替沙星胶囊及注射液含量的测定,结果令人满意.     

偶氮胭脂红G分光光度法测定蛋白质的研究

 偶氮胭脂红G在酸性介质中与蛋白质迅速结合,生成一紫红色复合物,该复合物在570nm处有最大吸收,且其吸光强度与牛血清蛋白(BSA)、人血清蛋白(HSA)、免疫球蛋白(IgG)的质量浓度至少在15.0μg/mL范围内有线性关系.依此建立的测定蛋白质的光度分析新方法不受蛋白酶和大部分其它共存物质的影响,具有较好的选择性和较宽的线性范围,同时方法快速、稳定,用于人血清样品中总蛋白含量的测定,所得结果与测定蛋白质的经典方法考马斯亮蓝G-250法基本一致.     

快速测定生物样品中蛋白含量的同步荧光法研究

基于胞苷酸(CMP)与人血清白蛋白(HSA)相互作用,体系的同步荧光强度和溶液中白蛋白的浓度呈良好的线性关系,建立了以胞苷酸为分子探针,运用同步荧光光谱法测定生物样品中蛋白质含量的新方法.考察了Δλ值、介质、试剂用量、离子强度、加入顺序、反应时间等因素对体系同步荧光光谱的影响,在最佳实验条件下,体系的同步荧光强度与白蛋白在2.76～552.0μg·mL-1范围内的线性相关系数为0.9984,方法的检测限可达0.13μg·mL-1.用本方法对人血清、唾液和尿液等样品进行测定并做了加标回收实验,回收率在97.8%～103.6%之间.对11份空白溶液进行平行测定,相对标准差为1.16%.并用CBB法做了对照实验,取得了令人满意的结果.     

八角莲不同部位鬼臼毒素和4'-去甲鬼臼毒素含量的测定

利用反相高效液相色谱法建立了同时分离和测定4'-去甲鬼臼毒素和鬼臼毒素的方法.所选用的色谱柱为Waters Spherisorb ODS2(5μm,4.6 mm i.d×250 mm),流动相组成为甲醇-水(体积比为65∶35),检测波长为207 nm.在该色谱条件下,4'-去甲鬼臼毒素质量浓度在0.222 4⁵56μg/mL、鬼臼毒素质量浓度在0.596 8556μg/mL、鬼臼毒素质量浓度在0.596 8¹ 492μg/mL范围内线性关系良好,相关系数分别为0.999 8和0.999 9.该方法应用于中药八角莲的叶、茎、须和根中这2个组分的含量分析.     

聚丙烯酰胺催化蛋白质--耐尔蓝荧光反应阻抑法测定痕量铋

在加热条件下,基于Bi( )对聚丙烯酰胺(PAM)催化蛋白质-耐尔蓝(NB)的荧光反应有强的抑制作用,建立了动力学光度测定铋的新方法。ΔF与CBi( )呈线性关系的范围为0.07～0.52μg/L;检出限为0.005μg/L;对0.10和0.40μgBi( )/L测定的RSD分别为6.4%和2.6%。该方法已用于某些谷物、人发和水样中Bi( )的测定,结果满意。     

氟喹诺酮类药物与蛋白质相互作用的研究

运用荧光淬灭机理研究了氟喹诺酮类药物洛美沙星，氧氟沙星，衣诺沙星与3种蛋白质(牛血清蛋白，免疫球蛋白，胰蛋白酶)之间的相互作用，计算了两者之间的结合常数和结合位点数，根据实验当中所得的热力学参数确定了它们之间的作用类型，氟喹诺酮类药物的含量与其荧光强度呈现良好的线性关系，在此实验条件下测定了胶囊及人工合成样中洛美沙星和衣诺沙星的含量，其浓度范围分别为0．018～0．878和0．030～3．171μg／mL。     

紫外-可见光度法测定茶碱缓释片中茶碱的研究

在H2BO3-Na2B4O7缓冲溶液中,甲酚红同茶碱会发生诱导荷移反应,使其吸收光谱发生变化.以十二烷基磺酸钠作增敏剂,常温下显色20 min,茶碱与甲酚红形成2︰1型络合物,其λmax=570 nm,摩尔吸光系数κ=5.56×105L/(mol.cm),茶碱浓度在0.10~8.00μg/mL范围内符合比尔定律,线性回归方程为A=0.064 36C 0.058 50,相关系数R=0.999 1,根据信噪比确定的检测限(S/N=3,n=3)为0.172μg/mL.该方法简单易行,准确度、灵敏度高,适用于快速、大批量地分析茶碱缓释片中的茶碱.     

Fe（Ⅲ）—H2O2—酸性铬蓝K体系催化光度法测定痕量铁

在pH=9.35的硼砂-HCl体系缓冲溶液中,Fe(Ⅲ)能催化酸性铬蓝K的氧化褪色反应,据此建立了一个测定痕量铁的新催化动力学分光光度法.该方法在所选条件下,lg(A